补救ICSI的妊娠结局分析(附补救后冷冻胚胎复苏妊娠一例)

目的对体外受精(IVF)完全失败的周期及时补行卵细胞浆内单精子显微注射(rescue ICSI)后的临床妊娠结局的探讨和分析。方法IVF受精失败后及时将MⅡ卵母细胞进行补救ICSI。结果补行ICSI后10周期中移植9个周期19个胚胎,妊娠1例双胎,种植为10.5%;有2个周期有冷冻胚胎并行复苏胚胎移植,单胎妊娠1例。补救ICSI累计移植胚胎25个,种植3个累计种植率为12.0%,但2例均以流产告终。结论补救ICSI妊娠率低、流产率高与卵子过度老化有关,冷冻复苏补救ICSI的胚胎,可以消除胚胎发育与子宫内膜发育不同步的因素。在IVF受精率低的周期中可以将未受精的卵母细胞补行ICSI后行胚胎冷冻-复苏移植,可以增加取卵周期的妊娠率。     

非优质胚胎继续囊胚培养与冻融囊胚移植的临床应用价值

目的探讨将非优质胚胎继续囊胚培养与冻融囊胚移植的临床应用价值。方法收集生殖中心235个体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)治疗周期中受精后第3天(D3)移植、冷冻保存后剩余的1026枚非优质胚胎继续囊胚培养,观察优质囊胚的形成情况,并玻璃化冷冻保存,若患者在新鲜移植周期妊娠失败,则在下一周期把囊胚解冻移植,比较冻融囊胚与同时期冻融卵裂胚的种植率和临床妊娠率。结果 D3非优质胚胎的优质囊胚形成率为36.6%,其中有43名患者的77枚优质囊胚在下一周期解冻移植,胚胎种植率(41.6%)和临床妊娠率(65.1%)显著高于同时期100名患者的202枚卵裂胚解冻后移植的胚胎种植率(25.3%)和临床妊娠率(43.6%)(P0.05),流产率无显著性差异(P0.05)。结论 1继续囊胚培养能有效筛选出非优质胚胎中具有发育潜能的胚胎,提高其利用率;2冻融囊胚移植能提高胚胎种植率和临床妊娠率。     

人成熟卵母细胞玻璃化冷冻技术的临床应用

目的探讨玻璃化冷冻技术应用于人成熟卵母细胞冷冻保存的临床效果。方法使用开放式载体cryotop进行人成熟卵母细胞的玻璃化冻存,对10例患者的冷冻卵子复苏后进行卵母细胞浆内单精子（ICSI）注射后行胚胎移植,观察复苏卵母细胞受精、卵裂、胚胎发育及临床妊娠情况。结果 10例患者共86枚玻璃化冻存的成熟卵母细胞复苏后77枚存活,69枚正常受精,获得65枚胚胎,共移植17枚胚胎,3例患者获临床妊娠,其中2例双胎妊娠。结论玻璃化冷冻技术是有效地保存人成熟卵母细胞的方法,有一定的临床应用价值。     

早补救ICSI新鲜周期与复苏周期卵裂期胚胎移植临床结局分析

目的探讨行早补救ICSI助孕治疗患者新鲜周期与复苏周期卵裂期胚胎移植的临床妊娠结局。方法回顾性分析2014年01月至2017年06月期间在我院生殖中心接受治疗的患者,在短时受精失败行早补救ICSI助孕、并行冷冻卵裂期胚胎移植的患者共29个周期,为复苏周期组;与同期行早补救ICSI助孕而移植新鲜卵裂期胚胎的患者共16个周期,为新鲜周期组,比较两组的临床妊娠结局。结果复苏周期的临床妊娠率为41.38%(12/29),胚胎种植率为33.33%(18/54),流产率为16.67%(2/12);新鲜周期的临床妊娠率为43.75%(7/16),胚胎种植率为34.48%(10/29),流产率为14.28%(1/7),两组之间临床妊娠率、种植率及流产率差异均无统计学意义(P0.05)。结论早补救ICSI助孕治疗患者行新鲜周期与复苏周期的卵裂期胚胎均可获得较好的临床妊娠结局,早补救ICSI不失为一种有效的辅助生殖补救措施,改善了部分患者临床治疗结局。     

75例常规IVF失败后补救ICSI临床结局分析

目的 对常规IVF周期受精完全失败,行补卵母细胞浆内单精子显微注射(rescue ICSI)的结局分析.方法 回顾分析2005.03-2006.06在我院生殖医学中心接受常规IVF治疗,对卵母细胞完全未受精行ICSI再授精的患者,共75例.在随后治疗中,解冻复苏补救ICSI受精卵的胚胎,共移植10个周期.结果 在75例常规未受精补救ICSI周期中,共有759个未受精卵,其中可注射MⅡ卵有626个,正常受精数332个(受精率53.03%),290个卵裂,形成可移植胚胎199个.在75例补救IcsI周期中,有70例新鲜胚胎移植周期,结果4例临床妊娠(妊娠率为5.71%),均为单胎,分娩4例健康婴儿,2男,2女.解冻复苏补救ICSI受精卵胚胎10周期,结果1例临床,为双活胎(妊娠率为10%),分娩2例健康男婴.结论 ICSI可作为常规IVF失败后所采取的补救措施.     

非优质卵裂胚胎继续培养至囊胚的临床应用研究

目的探讨新鲜IVF/ICSI周期中移植或冷冻后剩余的非优质卵裂期胚胎在体外继续培养至囊胚的临床应用价值。方法将第3天移植或冷冻后剩余的非优质卵裂期胚胎在体外继续培养至第5、6天,选择优质的囊胚进行玻璃化冷冻。冷冻3个月后,当需要时将其解冻后进行胚胎移植,观察统计第5、6天囊胚移植后的妊娠结局。结果 67个解冻周期中共解冻102枚囊胚,复苏率、妊娠率及种植率为99.02%、22.39%和15.84%;其中第5、6天囊胚复苏率、妊娠率和种植率分别为(100%vs98.36%)、(32%vs16.67%)和(21.95%vs11.67%),两者间无统计学差异。结论部分第3天非优质卵裂期胚胎可在体外继续培养至囊胚,从中选择优质囊胚进行冻融胚胎移植,从而提高胚胎的利用率。     

D3卵裂期优质胚胎与非优质胚胎培养形成囊胚率及临床应用价值

目的探讨D3卵裂期非优质胚胎与优质胚胎继续培养形成囊胚率及临床应用价值。方法收集本中心486个体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)治疗周期中受精后第3天(D3)移植、冷冻保存后剩余的404枚优质胚胎,528枚非优质胚胎继续囊胚培养,比较两种胚胎的囊胚形成率。玻璃化冷冻已形成的囊胚,如果患者新鲜周期移植妊娠失败,则在下一周期把囊胚解冻移植,比较两种冻融囊胚的种植率和临床妊娠率。结果 D3卵裂期优质胚胎囊胚形成率为88.37%,非优质胚胎囊胚形成率为42.42%(P0.01);其中优质胚胎的78枚囊胚在下一周期解冻移植,其种植率为42.37%,妊娠率为63.53%;非优质胚胎的64枚囊胚在下一周期解冻移植,其种植率为39.65%,妊娠率为58.78%,两组比较差异没有统计学意义(P0.05)。结论⑴D3优质胚胎继续囊胚培养形成率明显高于非优质胚胎。⑵卵裂期优质胚胎培养形成的囊胚与非优质胚胎形成的囊胚冻融后移植的种植率及临床妊娠率没有明显差异。     

早期补救卵胞浆内单精子注射在常规体外受精中的临床应用价值探讨

目的探讨早期补救卵泡浆内单精子注射(ICSI)在常规体外受精(IVF)中完全不受精或低受精的临床应用价值。方法回顾性分析2013年3月~2015年5月在本院生殖中心常规IVF治疗受精6h后判断为完全不受精或低受精而行早期补救ICSI的52周期患者,统计其实验室培养指标及临床结局,并与同期因男方因素而直接进行ICSI的127周期进行比较。结果早补救ICSI组的受精率、卵裂率、临床妊娠率及种植率和直接ICSI组比较差异无统计学意义(P0.05),而优胚率、胚胎利用率及囊胚形成率显著低于直接ICSI组,两组差异有统计学意义(P0.05)。结论早补救ICSI可作为常规IVF受精失败的补救措施具有较高的临床应用价值,但由于卵母细胞在体外的培养时间延长导致卵子老化,甚至会影响胚胎的发育潜能。建议对高度怀疑受精障碍尤其高龄(≥37岁)、获卵数≥8患者采用Half-ICSI以提高胚胎利用率和累积妊娠率。     

早期或晚期补救ICSI对IVF-ET早期胚胎发育和临床妊娠结局的影响

目的研究早期或晚期卵胞浆内单精子注射(ICSI)对体外受精(IVF)后移植前胚胎发育情况和移植后临床妊娠结局的影响,探讨补救ICSI的可行性和优化优化补救ICSI方案,改善体外授精-胚胎移植(IVF-ET)的临床妊娠结局。方法回顾性分析本中心2014年1月1日至2016年1月1日接受IVF-ET的患者的胚胎发育情况和临床妊娠结局,根据授精方式的不同分为ICSI组(A组)、早期补救ICSI组(B组,授精后6-8小时行ICSI)和晚期补救ICSI组(C组,授精18-20小时行ICSI)。对三组患者的基本情况、早期胚胎发育情况和临床妊娠情况分别进行统计分析;根据移植时胚胎发育阶段的不同,将卵裂期胚胎和囊胚分别进行讨论分析。结果 (1)对卵裂期胚胎来说:三组患者的年龄、不孕年限、Gn用量、基础FSH、移植日内膜厚度、获卵数、移植胚胎数、卵裂率和冷冻胚胎率均无统计学差异(P0.05),但三组的受精率、D3优质胚胎率、D3可用胚胎率有非常显著的统计学差异(P≤0.001),而且三组的临床妊娠率有显著统计学差异(P=0.003);(2)对囊胚移植来说:三组组患者的年龄、不孕年限、Gn用量、基础FSH、移植日内膜厚度、获卵数、移植胚胎数和卵裂率没有统计学差异(P0.05),但三组的受精率、D3优质胚胎率、D3可用胚胎率和可用囊胚率存在非常显著的统计学差异(P≤0.001),且三组的临床妊娠率存在统计学差异(P=0.046)。结论早期补救ICSI相比较于晚期补救ICSI,可以获得较好的胚胎发育和临床妊娠结局,但都逊色于普通ICSI。补救ICSI能获得相当的可用胚胎和临床妊娠,可以作为常规IVF受精失败或受精较差的补充,而且早期补救ICSI要优于晚期补救ICSI。     

常规体外受精失败后行补救性卵胞质内单精子注射的临床总结

目的回顾分析常规IVF受精完全失败在临床中的发生情况及受精失败后应用补救性卵母细胞内单精子注射（ICSI）的临床结局。方法总结1999年5月-2009年5月,在我中心行常规IVF患者中,受精完全失败的发生情况。回顾性分析了2004年1月-2009年5月,因受精完全失败行补救性ICSI后的临床结局。结果1999年至2009年5月,我中心共行常规IVF8359个周期,其中,受精完全失败232个周期,发生率为2．78％。2004年1月至2009年5月,共184个周期受精完全失败,资料完整,对其中115个周期共838个MII期卵子行补救性ICSI,其受精率、卵裂率与优质胚胎率分别为71.0％、93．78％和51．79％;临床妊娠率为11％,获得活产儿5个。结论补救性ICSI能获得较高的受精率和卵裂率,降低周期取消率,但并没有明显增加活产儿出生数,改善妊娠结局。     

辅助生殖技术中未受精卵母细胞经人工激活剂作用的激活效果观察

目的观察辅助生殖技术中未受精成熟卵母细胞经钙离子载体A23187联合6-甲基嘌呤(6-DMAP)处理后的激活效果,以及激活后的胚胎发育情况。方法收集常规体外受精(IVF)及卵浆内单精子注射(ICSI)后48h仍未受精的成熟卵母细胞,经5μmol/L钙离子载体A23187处理5min,然后在2mmol/L6-DMAP中处理3h,观察原核形成情况;将激活后的卵母细胞继续体外培养3～5d,观察胚胎发育情况。结果 IVF及ICSI后未受精卵母细胞共36个,激活29个,激活率80.5%,1PN形成率31.0%,2PN形成率51.7%,多原核形成率17.2%;继续培养,卵裂率为48.3%(14/29)。15个2PN中有10个发生卵裂,2个发育至2-4细胞阶段,5个发育至5-8细胞阶段,3个发育至8细胞阶段,最终获得2个桑葚胚。结论辅助生殖技术中未受精卵母细胞可在体外被钙离子载体A23187联合6-DMAP激活,并继续发育形成胚胎。     

部分卵胞浆内单精子显微注射112例分析

目的分析本中心行部分卵胞浆内单精子显微注射的病例,探讨half-ICSI的指征的可行性。方法选择2004年1月至2008年12月在本中心行half-ICSI的112个周期,按适应症分三组,A组为男方中度少弱畸精子症,B组为前次IVF受精失败或低下(30%),C组为不明原因不孕,以同期常规IVF治疗的1377个周期为对照,分别比较三组中发生受精失败或低下发生率(受精率30%)情况的比例,以及half-ICSI的效果。结果 half-ICSI的112个周期共获卵1633个,行IVF766个卵,受精率为54.7%,其中完全不受精27个周期,受精低下(30%)11个周期,行ICSI部分867个卵,MII765个,受精645个,受精率84.3%,移植周期临床妊娠率为39.4%(其中IVF完全不受精者临床妊娠率为32.0%)。112个周期有38个周期发生受精失败或低下,发生率为33.9%(38/112),其中A组发生率31.8%,B组50.0%,C组30.8%。对照组发生受精失败或低下率为7.0%(96/1377),结果有显著性差异(P0.05)。结论对存在高危因素的病人在同一治疗周期中行half-ICSI可明显减少因不受精无胚胎移植的情况出现,从而提高妊娠率,又因有IVF胚胎移植,可减少ICSI子代遗传和先天缺陷的风险。     

Rescue ICSI of unfertilized oocytes after IVF

BACKGROUND: Failed fertilization after IVF occurs in 10-20% of cycles. Conflicting results of rescue fertilization by ICSI have been reported. We therefore compared the success rate in terms of fertilization and pregnancy of cycles in which rescue ICSI was performed with those from a matched control group of primarily ICSI cycles. METHODS: Unfertilized oocytes from IVF cycles with total fertilization failure where at least four metaphase II oocytes were available were treated by ICSI (group I; n = 120). A matched control group was established with patients undergoing ICSI during the same period (group II; n = 280). RESULTS: Both fertilization rate and the proportion of embryos with four blastomeres on day 2 after ICSI were significantly higher in the control group (P < 0.05). Embryo quality, however, was comparable in both groups. The pregnancy rate in the control group was 25.3% whereas in group I with rescue ICSI, no pregnancy was obtained. CONCLUSIONS: Although unfertilized oocytes after IVF can be fertilized by ICSI, the developmental potential of the ensuing embryos is very poor. Therefore, rescue ICSI after total failure of fertilization is not recommended.     

短时体外受精后原核形成观察的相关研究

目的通过追踪观察卵子短时体外受精后原核（pronucleus,PN）的出现情况,评价PN出现的时间在预测IVF周期受精情况的价值,并探讨其与胚胎质量的关系。方法2009年1月～5月在本中心接受IVF-ET助孕治疗的62个周期,对IVF卵数≥5的助孕周期进行观察。授精后4h脱颗粒并观察原核出现情况,6h、7h、8h、9h、10h分别观察一次并记录。D1（21h）换液并观察记录受精情况,D3天移植,对胚胎进行评分。结果共观察721枚行常规IVF的卵子,受精504枚,受精率为69.9%;4、6、7、8、9、10、21h的原核出现率分别为0%、2.91%、14.84%、29.68%、46.74%、56.59%、71.15%（相关系数为：r=0.768,P〈0.01）。共获胚胎495枚,其中可用胚317枚,优质胚119枚,以上不同时间段出现原核的可用胚胎率分别为66.67%、64.29%、65.38%、64.71%、62.32%、62.24%（P〉0.05）,优质胚胎率为28.57%、26.19%、24.04%、23.53%、22.45%（P〉0.05）。受精率≥65%的周期共41例,在授精后8h至少有一个原核出现,原核出现率为12.5～80%;受精率〈65%的周期共21例,授精后8h原核出现率为0%,其中,完全未受精2例;0〈受精率≤30%的周期有7例。结论IVF周期原核开始出现的时间为4～6h,原核出现时间与最终受精率之间存在相关性,原核出现越早受精失败或低受精的风险性越低;8h仍未出现原核的周期,受精失败或低受精率的风险较大;较受精后6h或更早,我们认为8h采取补救ICSI确定受精情况更方便、准确。原核出现时间与胚胎质量无明显关系。     

体外受精过程中胚胎污染的临床结局分析（附精液反复污染改行ICSI妊娠一例）

目的对体外受精过程中发生胚胎污染后的临床结局的探讨和分析。方法回顾性分析1997年3月至2007年12月,在本中心接受体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗1634个周期中,体外受精过程中发生胚胎污染10个周期的临床结局。结果10例胚胎污染周期中移植8个周期18个胚胎,均未妊娠。其中1例精液反复污染,改行卵胞浆内单精子注射（ICSI）,移植3个胚胎,双胎妊娠。结论体外受精过程中发生胚胎污染会造成IVF-ET失败,胚胎污染的病人下一周期可改行ICSI治疗。     

IVF获卵数、全胚冷冻与体外受精胚胎移植妊娠结局的关系

目的探讨控制超排卵（COH）中获卵数对体外受精一胚胎移植（IVF—ET）妊娠结局的影响,及为避免重度OHSS全胚冷冻的效果。方法接受常规IVF助孕治疗的不孕症患者358例（除外ICSI,Half—ICSI,Re—ICSI）。根据获卵数不同分为3组,其中获卵数1～10者122例（I组）,获卵数11～20者183例（II组）,获卵数〉20者53例（Ⅲ组）;358例中发生OHSS48例全胚冷冻,其中I组无全胚冷冻,Ⅱ组全胚冷冻28例,Ⅲ组全胚冷冻20例。结果全胚冷冻组与新鲜移植组比较：年龄及优胚率无明显差异,着床率及临床妊娠率无明显差异;新鲜移植第Ⅲ组着床率及临床妊娠率低于全胚冷冻第Ⅲ组,差异有显著性。结论OHSS时全胚冷冻保证了妊娠结局,尤其对获卵数〉20的患者有利。     

低氧环境对人类胚胎体外受精发育潜能和临床结局的影响

目的探讨不同氧分压环境下（20％02＆5％O2）体外受精一胚胎移植中胚胎发育潜能与临床结局关系。方法选择2012年9月至2012年11月年在郑大三附院生殖医学中心行助孕治疗的280个周期,分别为IVF（n=200）,ICSI（n=80）。随机分组：研究组（5％氧分压）和对照组（20％氧分压）,对比两组间正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率和着床率。结果实验组与对照组正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率和着床率无统计学差异。结论人类早期胚胎在低氧环境下进行体外培养是有利的,可以获得更好结局。     

Dizygotic twin pregnancy after intracytoplasmic sperm injection of 1 day old unfertilized oocytes

We report on a case where late intracytoplasmic sperm injection (ICSI) on unfertilized oocytes after standard in-vitro fertilization (IVF) cycles resulted in a dizygotic twin pregnancy. Fifteen oocytes were harvested from a patient with a history of salpingotomy. After a single cycle of IVF, only one oocyte showed two pronuclei. Subsequently ICSI was performed on six unfertilized metaphase II oocytes, and three of these oocytes showed two pronuclei. Three fertilized embryos were transferred (two derived from ICSI and one from IVF). A normal twin pregnancy resulted, and after delivery of two healthy boys the twins were confirmed to be dizygotic by DNA analysis of several loci. We conclude that at least one of the embryos was derived from the reinsemination by 'second day ICSI'.      

Andrology: Successful treatment of severe male factor infertility in 100 consecutive cycles using intracytoplasmic sperm injection

In this report, we present the results of our first 100 consecutivecycles of intracytoplasmic sperm injection (ICSI). Overall,fertilization occurred in 98% of cycles and embryos were transferredin 94% (2.6 embryos per cycle). About 50% of patients had embryosfrozen. The overall fertilization rate was 71%, of which 4%were abnormally fertilized (three pronuclei). A total of 30clinical pregnancies were established (32% per transfer), resultingin 18 singleton, six twin and one triplet ongoing pregnancies.The implantation rate per embryo was 15%. There were no significantdifferences in the fertilization or pregnancy rates betweenpatients Who had only occasional motile spermatozoa in the ejaculate,semen that was too poor for routine in-vitro fertilization (IVF),or who had failed routine IVF and/or subzonal sperm injection(SUZI). A group of 18 patients were treated with both ICSI androutine IVF on their first cycle because of the high likelihoodof failed fertilization due to poor sperm morphology (<20%normal). In this group, ICSI oocytes had a fertilization rateof 76% compared to only 15% for the routine IVF (control) oocytes,and six patients conceived after transfer of ICSI embryos (33%),indicating that ICSI can be used successfully on 50% of theoocytes if fertilization failure is expected. Similarly, patientswho had failed to become pregnant with SUZI achieved excellentresults after ICSI. There were no significant differences betweenICSI and routine IVF in the proportions of grade 1, 2 or 3 embryoson day 3 post-oocyte recovery. In conclusion, we have achievedresults comparable to those reported from Belgium and we havefound that ICSI is universally applicable to all forms of severemale factor infertility. ICSI produces fertilization, pregnancyand freezing rates comparable to routine IVF with normozoospermicsamples and has none of the drawbacks of other assisted fertilizationtechniques.