骨髓单个核细胞缺血肢体局部移植对缺血组织血管再生作用的研究

目的分析骨髓单个核细胞局部移植对缺血组织血管再生的作用及机制。方法从大鼠胫骨及股骨采集骨髓细胞，密度梯度离心法分离出骨髓单个核细胞分离、切断近交系Wistar大鼠右侧股动脉及其分支，建立单侧后肢缺血模型。分7点局部注射单个核细胞悬液(移植组)或磷酸盐缓冲液(对照组)术后第3、7、14d获取内收肌制作组织匀浆，ELISA法测定匀浆中bFGF、VEGF和IL-18因子水平；术后第2,4周免疫组化法分析肌肉组织毛细血管密度。结果术后第3d，移植组bFGF表达水平高于对照组(P＜0．01)。术后第3、7d，移植组IL-1β水平高于对照组(P＜0．01)术后第2、4周移植组内收肌毛细血管密度高于对照组(P＜0.01)。结论在大鼠缺血后肢局部直接植入骨髓单个核细胞可诱导新生血管形成；骨髓单个核细胞分泌bFGF、IL-1β等多种因子在局部直接植入骨髓单个核细胞促进血管再生的机制中可能起主要作用。     

子宫内膜异位患者TGF-β、VEGF和ICAM-1水平及与临床分期关系

目的:观察子宫内膜异位症(EMS)患者纤维化因子转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平,并分析其临床意义。方法:选取2017年2月-2018年8月本院接受治疗的子EMS患者100例为观察组,同期体检健康女性100例为对照组。比较两组及观察组不同临床分期患者TGF-β、VEGF和ICAM-1水平,Pearson相关分析法分析观察组TGF-β水平与VEGF、ICAM-1水平的相关性。结果:观察组TGF-β(389.25±12.36pg/ml)、VEGF(178.45±10.02pg/ml)和ICAM-1(186.34±13.15μg/ml)高于对照组(322.16±15.04pg/ml、120.27±8.45pg/ml、104.28±12.93μg/ml(均P<0.001);观察组临床分期Ⅲ-Ⅳ期患者TGF-β、VEGF和ICAM-1水平(411.35±12.95pg/ml、192.92±8.35pg/ml、204.15±15.17μg/ml)高于Ⅰ-Ⅱ期患者(352.94±15.24pg/ml、155.36±7.28pg/ml、168.28±10.02μg/ml)(均P<0.001);TGF-β水平与VEGF、ICAM-1水平正相关(r=0.523、0.489,P<0.05)。结论:子宫内膜异位症患者的TGF-β、VEGF和ICAM-1水平较正常者高,且临床分期高者水平更高。TGF-β与VEGF、ICAM-1水平正相关。     

用VEGF165和bFGF诱导单个核细胞分化成内皮祖细胞的试验研究

目的研究从健康人外周血中提取单个核细胞，用VEGF165和bFGF诱导细胞分化成内皮祖细胞，并分析细胞形态、成集落数量，细胞数量活性。方法选择健康人20例，用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞，用生长因子VEGF165和bFGF诱导细胞分化，7d后将贴壁细胞进行分析。荧光显微镜鉴定FITC-UEA-I和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC；流式细胞仪检测CD34和KDR；MTT法检测细胞生长状态；并分析生长因子VEGF165和bFGF干预后细胞形态和成集落的数量。结果VEGF165和bFGF干预后EPC的细胞数目和集落数明显增加，细胞增殖活性明显增强。结论成人外周血中提取的单个核细胞，在VEGF165和bFGF作用下可培养为内皮祖细胞。     

sflt-1、VEGF、NF-κB p65与子宫内膜异位症发生发展的相关性研究

目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体1 (sflt-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、核转录因子κB (NF-κB) p65与子宫内膜异位症的关系,为临床上子宫内膜异位症的预后评估提供理论参考。方法选取2015年2月-2016年10月在长沙市中心医院治疗的子宫内膜异位症患者60例为病例组,同时选取正常生育期妇女60例为对照组,测定两组妇女血清sflt-1和VEGF水平,同时采用免疫组化法检测子宫内膜异位症患者内膜组织NF-κB p65表达。结果病例组患者血清sflt-1和VEGF分别为(301.40±84.26) pg/ml和(430.11±98.46) pg/ml明显高于对照组妇女的(96.51±17.82) pg/ml和(118.43±35.54) pg/ml,差异均有统计学意义(P0.05); r-AFS分期为Ⅲ～Ⅳ期患者血清sflt-1、VEGF以及内膜组织NF-κB p65表达分别为(345.35±90.13) pg/ml、(486.70±99.13) pg/ml和(0.814±0.110)明显高于Ⅰ～Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P0.05)。sflt-1、VEGF以及内膜组织NF-κB p65表达与r-AFS分期呈正相关(P 0.05);内膜组织NF-κB p65表达与患者血清sflt-1和VEGF无相关性(P0.05)。结论血清sflt-1、VEGF水平以及内膜组织NF-κB p65表达与子宫内膜异位症发生发展有一定的关系,值得进一步研究。     

寨卡病毒感染人神经胶质瘤细胞所诱导的细胞因子表达水平的变化

目的研究寨卡病毒(ZIKV)感染人神经胶质瘤细胞(U251)所导致的细胞因子分泌的变化,探讨ZIKV影响神经系统功能紊乱的机制。方法建立ZIKV感染U251细胞模型,收获感染后第1、3、5、7天细胞培养上清液,采用悬浮芯片系统(Bio-Plex~? 200)Luminex多重检测技术同时定量检测细胞因子IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α和IL-12P70的浓度。结果细胞因子IL-4的浓度水平低于检测范围(0.001 pg/mL);病毒感染组分泌IL-5、IL-6、TNF-α和IL-12P70(169.9±12.1、7 747.9±949.2、29.0±0.5和93.3±2.0 pg/mL)的浓度水平均高于对照组(分别为124.6±8.6、2 652.2±386.0、25.5±0.8和85.4±1.8 pg/mL),且随着病毒感染时间的增加而分泌增加;在所有检测的细胞因子中,最显著表达的细胞因子是IL-6。结论 ZIKV感染U251细胞可分泌浓度水平相对较高的促炎性细胞因子,促炎细胞因子可能是影响神经发育的关键因素。     

早期自然流产与转化生长因子-β1的相关性研究

目的　探讨自然流产患者外周血单个核细胞内转化生长因子 -β1(TGF-β1) m RNA的异常表达与自然流产的相关性。　方法　采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)技术 ,检测3 0例早期自然流产患者、 2 5例正常妊娠妇女、 2 5例正常未妊娠妇女外周血单个核细胞内 TGF-β1m RNA表达量。　结果　早期自然流产患者、正常妊娠妇女、正常未妊娠妇女 3组研究对象外周血单个核细胞表达 TGF-β1m RNA相对含量分别为 (2 1.5± 9.4) %、(95.7± 12 .9) %、(87.0± 13 .8) % ,组间比较差异均有显著性 (P<0 .0 5)。　结论　正常早期妊娠妇女外周血单个核细胞 TGF-β1m RNA表达水平较正常未妊娠妇女显著升高 ,早期自然流产患者则显著下降 ,提示 TGF-β1对妊娠维护起重要作用 ,而其低表达水平可能与自然流产相关     

皮肤血管瘤患儿脉冲激光治疗前后外周血生长因子的变化

目的 对比分析皮肤血管瘤患儿脉冲激光治疗前后外周血血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF-β1)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达变化.方法 选取皮肤血管瘤患儿73例(增生期35例、消退期17例、消退完成期21例)及非血管性皮肤病患儿22例(对照组),所有增生期皮肤血管瘤患儿均采用脉冲染料激光进行治疗;取外周静脉血,检测VEGF、TGF-β1及bFGF的mRNA表达水平及蛋白含量.结果 治疗前,增生期患儿的VEGF、TGF-β1及bFGF的mRNA表达水平和蛋白含量高于消退期,消退期高于消退完成期与对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05),消退完成期和对照组之间无统计学差异(P＞0.05).治疗后,增生期患儿VEGF、TGF-β1及bFGF的mRNA表达水平和蛋白含量均显著低于治疗前(P＜0.05).结论 脉冲染料激光可下调皮肤血管瘤患儿外周血VEGF、TGF-β1及bFGF的mRNA表达水平,从而减少各蛋白分泌,可能为其发挥治疗作用的重要机制之一.     

N-乙酰半胱氨酸对矽尘诱导肺泡巨噬细胞自噬影响

目的探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383在染尘不同时间的自噬活动影响。方法常规培养NR8383细胞,染尘3、6、12、20、24 h,并给予NAC,分别收集细胞上清液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-βⅠ(TGF-βⅠ)表达水平,自噬水平检测采用蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光法。结果体外巨噬细胞染尘模型最佳时间为20 h;NAC+矽尘组NR8383细胞TNF-α表达[(116.82±8.98)pg/mL]低于矽尘组[(1823.58±764.85)pg/mL](P0.05);NAC+矽尘组NR8383细胞TGF-βⅠ表达[(8.27±3.62)pg/mL]与矽尘组[(14.28±5.71)pg/mL]比较差异无统计学意义(P0.05);NAC+矽尘组与矽尘组NR8383细胞LC3蛋白表达[分别为(3.52±0.57)、(3.84±0.53)pg/mL]高于对照组[(2.24±0.56)pg/mL];免疫荧光结果显示,矽尘组NR8383细胞在20 h荧光信号强于对照组;NAC+矽尘组NR8383细胞荧光强度与矽尘组无明显差异。结论矽尘刺激使NR8383细胞自噬表达增强;NAC可降低细胞上清液中TNF-α分泌水平,NAC可能参与染尘肺泡巨噬细胞的炎症反应过程。     

2型糖尿病患者外周血白细胞TLR2的表达及其功能的研究

目的探讨2型糖尿病患者外周血单个核细胞TLR2介导的免疫功能。方法应用流式细胞术检测35例2型糖尿病患者和30名对照人群外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞TLR2的表达。将两组人群外周血单个核细胞进行体外分离、培养,经TLR2配体HKLM刺激后,检测TLR2的表达及TNF-α的分泌。结果对照组外周血淋巴细胞、单核细胞TLR2表达为(1.75±0.50)%、(28.38±13.92)%低于糖尿病组的(2.12±0.84)%、(35.09±12.69)%(P0.05)。HKLM刺激后,对照组淋巴细胞、单核细胞TLR2表达为(7.76±2.31)%、(58.74±15.76)%与糖尿病组TLR2表达(4.67±1.54)%、(56.32±16.34)%均有增加(P0.05);HKLM刺激前后,经配对t检验分析,对照组淋巴细胞、单核细胞TLR2表达的上调高于糖尿病组(P0.05)。用HKLM刺激对照组、糖尿病组单个核细胞TNF-α的分泌为(83.67±40.87)pg/mL、(40.82±32.52)pg/mL,高于用PBS刺激单个核细胞的(14.32±9.87)pg/mL、(18.36±11.27)pg/mL(P0.05);对照组TNF-α分泌的增加高于糖尿病组(P0.05)。结论 2型糖尿病患者外周血单个核细胞TLR2表达升高,但其介导的细胞免疫功能受损。     

塞来希布对胃癌细胞增殖抑制作用

目的 观察塞来希布对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进胃癌BGC-823细胞的增殖抑制影响,探讨塞来希布抑制肿瘤细胞增殖的机制.方法 不同浓度组的塞来希布作用于经25 ng/ml bFGF作用后的胃癌BGC-823细胞,用蛋白印迹(westem blot)分析法检测环氧化酶-2(COX-2)、核转录因子-KB(NF-kB)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达变化.结果 25 ng/ml bFGF通过PKB信号转导通路能增强胃癌BGC-823细胞中COX-2、NF-kB、VEGF蛋白的表达,对胃癌BGC-823细胞有促增殖作用,呈时间依赖性(P＜0.01).不同浓度组的塞来希布对经25 ng/ml bFGF作用的胃癌BGC-823细胞中COX-2、NF-kB、VEGF蛋白的表达均有抑制作用(P＜0.01).结论 塞来希布对bFGF促进BGC-823胃癌细胞的增殖有一定的抑制作用.     

IGF系统与胎儿生长发育

胎儿几乎所有组织中都能合成及分泌胰岛素样生长因子。胰岛素样生长因子以自分泌和旁分泌机制与靶细胞表面特异受体结合 ,在局部组织发挥生理作用 ,加强机体同化作用。其对胎儿是必需的 ,在胎儿组织器官生长发育和成熟中起重要作用。母体及胎盘胰岛素样生长因子水平也影响胎儿的生长。基因重组多肽类生长因子已用于产科临床治疗一些相关病症     

宫内生长迟缓儿血清GH、IGF-1、IGFBP-3和瘦素水平及临床意义

【目的】探讨宫内生长迟缓(intrauterine growth retarded,I UGR)新生儿血清生长激素(growth hormone,GH)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin-like growth factorbinding protein-3,IGFBP-3)、瘦素的浓度水平及临床意义。【方法】选择出生48-72 h的I UGR新生儿62例和足月适于胎龄儿(appropriate for gestional age,AGA)37例与早产AGA36例,其中I UGR分为重度I UGR组(29例),轻度I U-GR组(33例)和足月小于胎龄儿(small for gestional age,SGA)32例与早产SGA30例;分别于上午9时抽取静脉血,分离血清。采用放射免疫法测定GH、IGF-1、IGFBP-3和瘦素。【结果】①足月SGA和足月AGA组血清GH、IGF-1、IGFBP-3、瘦素浓度(μg/L)分别为6.58±1.42和24.32±3.59,11.89±3.01和37.12±6.4,82.3±19.66和256.55±33.62,2.75±0.66和7.58±1.26;早产SGA和早产AGA组血清GH、IGF-1、IGFBP-3、瘦素浓度(μg/L)分别为8.18±2.55和13.83±3.98,13.59±4.83和21.05±3.44,93.48±16.44和157.33±39.34,3.21±0.61和4.9±0.83,各组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01)。②轻度和重度I UGR组血清GH、IGF-1、IGFBP-3、瘦素浓度(μg/L)分别为5.82±1.02和8.67±2.07,9.96±2.19和14.56±3.87,77.48±20.51和99.13±7.16,2.61±0.63和3.31±0.51,两组比较差异均有显著性(P<0.01)。【结论】新生儿血清GH、IGF-1、IGFBP-3、瘦素浓度水平与胎儿生长发育有密切关系,是调节胎儿宫内生长发育的重要因素。     

Diet and the growth of healthy infants*

This paper reviews published work on the patterns of infant growth in Cambridge, UK and in Gambia, West Africa and other countries. Growth patterns are related to patterns of infant feeding and compared with currently accepted growth standards, namely the ‘Tannerl Revised Standards, 1975’ and the NCHS Standards. It is concluded that these standards, derived from predominantly bottle-fed infants, may be inappropriate for breast-fed infants and may lead to unnecessary anxiety on the part of health workers and mothers when breast-fed babies cross ‘standard’ growth centiles.     

儿童身体发育标准的制定和集体发育水平的评定法

以秦振庭等对近三千名七岁以下、能获得充分营养及合理护理的男女儿童的身长和体重测量结果为基础,制定了一份七岁以下儿童身体发育标准。把秦氏材料中男女儿童的身长和体重生长曲线和标准差曲线修勺,画成光滑曲线,即为此样本中的“理论”生长曲线。从这些曲线上可以读出以一个月为年龄组距的各年龄组男女儿童的身长和体重的修正平均值和相应的标准差。用这些数值先制成一份表。然后把每一个年龄组的修正平均值M加减一个或两个标准差S,连同超过两端范围的,就可以把每个年龄组的身长或体重的发育水平划分为六个等级。用这些数字来制定一份“七岁以下儿童的身长和体重发育水平评定标准表”。 在评定一个儿童的身长或体重发育水平时,先按照规定的要求,测量儿童的身长或体重,然后根据儿童的准确年龄,在标准表中查出该儿童的测量值在哪一个等级数字的范围内,就可以决定该儿童的身长和体重发育水平属于哪个等级。 用这个标准评定了15个托儿所的1672名儿童的身长和体重发育水平,并在这个基础上,又对每一个托儿所儿童的身长和体重的“集体发育水平”作了评定。结果看出:各单位儿童的身长和体重集体发育水平的高低,是和膳食的营养质量与生活条件有直接关系的,因而这样制定的标准和评定方法都是合用的。     

Markers of fetal growth and serum levels of insulin-like growth factor (IGF) I, -II and IGF binding protein 3 in adults

Fetal growth has been linked with increased risk of cancer and cardiovascular disease later in life. The insulin-like growth factor (IGF) axis has recently been proposed as a predictor of risk of subsequent cancer and cardiovascular disease. However, only few data are available on the possible association between fetal growth and levels of IGFs later in life. We examined the association between markers of fetal growth, i.e. birth weight, birth length and Ponderal Index, from birth records and serum IGF-I, IGF-II, and IGF binding protein 3 (IGFBP-3) levels in 545 middle-aged Danish men and women. We fitted separate multivariate models including birth weight, birth length, Ponderal Index and serum IGF-I, IGF-II, and IGFBP-3, respectively. After adjustment for age, alcohol intake, smoking, diabetes mellitus, systolic and diastolic blood pressure, serum total cholesterol and current height and weight, we found negative associations between birth weight and Ponderal Index, respectively, and serum IGF-II in men, i.e. the mean regression coefficients were -49.41 (95% CI: -87.06-11.77) (microg/l)/kg and -3.49 (95% CI: -6.73-0.25) (microg/l)/(kg/m3), respectively. Furthermore, in men birth weight was negatively associated with the (IGF-I + IGF-II)/IGFBP-3 and IGF-II/IGFBP-3 ratios, which are believed to be indicators of bioavailable IGF and IGF-II, respectively. However, no other associations were found in any of the models. Between 1 and 16% of the variance in serum IGF-I, IGF-II, and IGFBP-3, respectively, could be explained by the statistical models used in the analyses. We found very little support to the hypothesis of an association between fetal growth and the IGF axis throughout life.     

Biotin deficiency in mice is associated with decreased serum availability of insulin-like growth factor-I

Background  Biotin deficiency leads to decreased weight and nose-rump length in mice. Aim of the study  The mechanisms underlying this impairment in body growth are yet unclear. Biotin restriction, however, could affect the availability of growth hormone (GH) and/or insulin like growth factor-I (IGF-I) since both hormones control body growth. We then conducted a correlative study aimed at establishing whether biotin dietary restriction is associated with decreased GH/IGF-I serum concentrations. Methods  Levels of GH and IGF-I were measured through ELISA in serum samples of male BALB/cAnN mice fed with: 1] standard chow diet (control diet); 2] 30% egg-white biotin-deficient diet; or 3] 30% egg-white diet supplemented with 16.4 μmol biotin per kilogram (biotin sufficient diet). Relative food consumption, as adjusted per gram of body weight, was also determined. GH and IGF-I measurements were taken individually for 20 weeks beginning at the postnatal week 3, when the animals started consuming the corresponding diets. In addition, femur’s weight and longitudinal growth and the organization of its growth plate were all analyzed as indicators of GH/IGF-I function. Results  No differences in relative food consumption were observed among the three groups of mice along the experimental period that was evaluated. IGF-I serum levels, but not GH ones, were decreased in biotin deficient mice. These animals also showed decreased femur’s longitudinal growth, speed of lengthening and weight gain, as well as shorter and disorganized growth plates. Conclusions  This study shows that biotin dietary restriction is indeed associated with decreased availability of IGF-I and diminished long bone growth and elongation. These conditions could explain the impairment of longitudinal body growth previously reported in biotin deficient mice. Although cause-effect studies are still needed, we believe our results support the notion that biotin might modulate the availability of IGF-I. This work was supported by grants from the Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA), Universidad Nacional Autónoma de México (PAPIIT IN230905, IN200205, IN208605) and the Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología, México (52746, 42568Q).     

补充不同钙量对低钙膳食大鼠血钙及生长的影响

报告了低Ｃａ（ＬＣ），补充钙（ｍｇ／ｋｇ）３００（ＬＣ＋３００Ｃａ）、６００（ＬＣ＋６００Ｃａ）、１０００（ＬＣ＋１０００Ｃａ）、２０００（ＬＣ＋２０００Ｃａ）、４０００（ＬＣ＋４０００Ｃａ）对低钙膳食大鼠血钙及生长的影响。结果表明，低钙膳食（ＬＣ）喂养大鼠血钙、总蛋白（ＴＰ）及生长激素（ＧＨ）水平较低，生长迟缓，明显低于常规食组。补充不同水平的钙均可改善大鼠上述状态，呈明显的量效关系。当膳食内总钙水平达１０００ｍｇ／ｋｇ左右时，即ＬＣ＋６００ｍｇ／ｋｇ组，血钙水平接近正常；ＧＨ分泌增加、ＴＰ增加，与ＬＣ组比差异显著。说明低钙对喂养大鼠所造成的生长迟缓起重要作用。当膳食内总钙至１０００ｍｇ／ｋｇ时，可改善生长状态及代谢编移。