系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞NF-κB信号通路活化检测

目的检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血单一核细胞 (PBMC) NF－κ B信号通路活化情况 ,并探讨其临床意义。方法 NF－κ B活性检测采用电泳迁移率改变试验 , Iκ Bα蛋白及其磷酸化产物采用蛋白印迹 ,抗 dsDNA抗体、 IgG、 IgM测定采用 ELISA方法。结果 SLE患者 PBMC NF－κ B活性显著高于正常对照组 (P< 0.05),活动期明显高于缓解期 (P< 0.05), SLE组 Iκ Bα蛋白表达显著低于正常对照组（ P< 0.05） ,活动期患者低于缓解期 (P< 0.05)。 SLE组 Iκ Bα磷酸化产物显著高于正常对照组（ P< 0.05） ,活动期患者高于缓解期 (P< 0.05)。 NF－κ B活性和 Iκ Bα磷酸化产物均与抗 dsDNA抗体、 IgG和 SLE疾病活动指数呈正相关 ,而与 IgM无相关关系。结论 SLE患者 PBMC存在 NF－κ B信号通路异常活化 ,且与抗 dsDNA抗体、 IgG分泌密切相关。检测 SLE PBMC内 NF－κ B信号通路蛋白表达可能有助于 SLE疾病活动的判断。     

甲基结合蛋白MeCP2与mbd2在SLE患者中的表达

目的　探讨甲基结合蛋白MeCP2及去甲基化酶mbd2基因的表达异常在SLE发病中的作用。方法　以RT-PCR方法检测SLE缓解期、活动期患者与正常人外周血单一核细胞（PBMC）中MeCP2及mbd2基因的表达水平,并进行相关性分析。结果　SLE活动期、缓解期及正常人对照组PBMC中MeCP2的表达差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。SLE缓解期患者PBMC中mbd2的表达水平显著高于正常人对照组（t = 12.8,P ＜ 0.01）;SLE活动期患者PBMC中mbd2表达显著高于SLE缓解期（t = 20.0,P ＜ 0.01）。SLE患者PBMC中mbd2的表达与SLEDAI评分呈正相关（r = 0.737,P = 0.0001）。正常人对照组PBMC中mbd2的表达与MeCP2的表达呈正相关（r = 0.550,P = 0.0222）。结论　在正常情况下,MeCP2和mbd2的表达相互制约,在SLE患者中这种关系被破坏。     

催乳素对系统性红斑狼疮患者单一核细胞产生IgG和抗dsDNA抗体的影响

目的 探讨催乳素(PRL)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)产生抗体和自身抗体的影响。方法 体外培养SLE患者和正常人PBMC,用催乳素(PRL)和白介素2(IL-2)、白介素10(IL-10)和植物凝集素(PHA)刺激外周血淋巴细胞,采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖情况,用ELISA测定PBMC分泌的IgG型抗体和抗dsDNA抗体。结果 ①10^-9mol/LPRL可刺激SLE患者的PBMC增殖。②10^-9mol/L的PRL分别可以刺激SLE患者PBMC分泌IgG型抗体和抗dsDNA抗体,且活动期患者显著高于静止期患者和正常人对照(P<0.01)。③PHA+PRL、IL-2+PRL刺激SLE患者PBMC分泌IgG型抗体和抗dsDNA抗体分别显著高于PRL组(P<0.01);抗IL-2抗体+PRL组低于PRL组,差异有显著性(P<0.01);IL-10+PRL组与PRL组间差异无显著性(P>0.05)。结论 PRL能够刺激体外培养的SLE患者PBMC分泌IgG型抗体和抗dsDNA抗体;PHA、IL-2与PRL有协同作用。     

系统性红斑狼疮患者肿瘤坏死因子和可溶性白细胞介素2受体的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子和可溶性白细胞介素2受体在系统性红斑狼疮发病中的意义。方法：采用单抗,多抗双抗体夹心ELISA法测定了35例系统性红斑狼疮（SLE）患和20例正常人血清肿瘤坏死因子α（TNF－α）和可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R)水平,并对其相关性进行了分析。结果：与正常人群比较,活动期SLE及非活动期SLE患血清sIL-2R水平均明显增高（P＜0．01）,且活动期高于非活动期（P＜0．01）;活动期SLE患血清TNF－α水平高于非活动期及正常对照组（P＜0．01）,活动期SLE患血清TNF－α与sIL-2R水平呈正相关。结论：检测SLE患血清TNF－α与sIL-2R水平,可作为监测SLE患病情活动的指标。     

以鸡卵核42 000蛋白为抗原的斑点金免疫渗滤法的建立及对SLE血清学诊断的评价

目的开发一种基于斑点金免疫渗滤法的系统性红斑狼疮（SEE）血清学诊断方法。方法我们先前的研究提示抗鸡卵核42000蛋白可与大部分SLE患者中的自身抗体特异性反应，本研究以该蛋白为待测抗原建立斑点金免疫渗滤法（DIGFA），并检测了191例治疗前后的SLE患者血清、198例结缔组织病患者血清（皮肌炎，多发性肌炎72例，硬皮病48例。混合性结缔组织病78例）和100例健康对照者血清。以抗鸡卵核42000蛋白特异性IgM和IgG的几何平均滴度倒数（GMRT）为指标评价其对SLE血清学诊断的有效性。结果本方法用于SLE血清学诊断的敏感性和特异性分别为94．24％（180／191 SLE患者血清呈阳性反应）和100．00％（所检测的皮肌炎／多发性肌炎、硬皮病、混合结缔组织病及健康对照者血清均呈阴性反应）。在174例（71例活动期，103例非活动期）特异性IgM和IgG抗体均阳性的SLE患者中，活动期与非活动期患者治疗前后IgM、IgG的GMRT均显著下降（P值均〈0．01）。且IgM的GMRT下降幅度较IgG的更大。结论以鸡卵核42000蛋白为抗原的斑点金免疫渗滤法对SLE血清学诊断敏感特异，抗鸡卵核42000蛋白特异性IgM水平的检测在疗效评定方面优于对相应IgG的检测。     

SLE患者外周血单一核细胞淋巴细胞功能相关抗原1表达的检测

目的 研究SLE患者外周血单一核细胞（PBMC）淋巴细胞功能相关抗原1（LFA-1）的表达,探讨LFA-1与SLE的发病及病情变化的关系及其临床意义。方法 提取30例SLE患者（SLE组）和24例正常人（对照组）的PBMC,用抗人CD3-FITC和抗人CD11a-PE对其进行标记后,采用流式细胞术检测其CD11a的表达率。结果 PBMC CD11a的表达率对照组为68.21% ± 4.58%,SLE组为73.74% ± 7.89%,活动期组为77.11% ± 7.46%,稳定期组为69.33% ± 6.27%,SLE组PBMC CD11a的表达率显著高于对照组（P ＜ 0.05）,且活动期组亦显著高于对照组（P ＜ 0.05）,而稳定期组与对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。活动期组与稳定期组比较,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。相关性分析显示,SLE患者CD11a的表达率与其采血时的SLEDAI呈正相关（r = 0.64,P ＜ 0.01）。结论 LFA-1的过表达参与SLE的发病,并与疾病活动相关。     

系统性红斑狼疮外周血单一核细胞Fas和FasL mRNA的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞Fas及其相应配体FasL的表达水平及在SLE发病中的作用。方法：应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞（PBMC）中Fas和FasL mRNA的表达水平。结果：活动期SLE患者PBMC中FasL的阳性检出率为91.18%,明显高于正常对照组（63.30%),差异非常显著（P＜0.01);Fas的阳性检出率与对照组相比无明显差异（P＞0.05)。活动期SLE患者PBMC中Fas和FasL mRNA的平均表达水平均高于正常对照组,差异显著（P＜0.05)。结论：Fas和FasL的高水平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。平表达可能与SLE患者外周血T淋巴细胞活化、凋亡增加有关,Fas介导的淋巴细胞凋亡可能参与了SLE的发病过程。     

系统性红斑狼疮患者可溶性肿瘤坏死因子受体及肿瘤坏死因子α水平的研究

目的：了解系统性红斑狼疮（SLE）患者血清中可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNFR)和肿瘤坏死因子α（TNFα）水平、两者的比值以及同临床 症状的关系。方法：采用双抗体夹心ELISA法检测血清和外周血单一核细胞（PBMC）培养上清液中TNFα、sTNFRI及sTNFRII水平,同时检测其它免疫项目。结果：①SLE患者血清中sTNFR I、sTNFR II、TNFα水平及sTNFR I/TNFα和sTNFR II／TNFα比值显著高于正常人对照组（P＜0.01）,sTNFR I与sTNFR I与sTNFR II之间呈显著正相关（r=0.88,P＜0.01）。②PBMC培养上清液中TNFα、sTNFR I及sTNFR II水平显著高于正常人对照组,且与血清中的TNFα和sTNFR II浓度呈显著正相关（r=0.58-0.73;P＜0.01）。③TNFα与感染有平行关系,而sTNFR II同临床症状评分呈相关（r值分别为0．69和0.75）。结论：SLE患者sTNFR、TNFα水平及sTNFR I及炎症方面发挥作用,sTNFR I及sTNFR II对于监测SLE疾病活动和严重程度明显优于抗dsDNA抗体等指标。     

系统性红斑狼疮血清干扰素诱导蛋白10的检测及其意义

目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清干扰素诱导蛋白10(IP-10)水平,并探讨其临床意义.方法:采用ELISA法检测58例SLE患者及40名正常对照者血清IP-10,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI)、肾损害、抗dsDNA、补体C3和白细胞计数的相关性.结果:SLE患者血清IP-10水平明显高于正常对照组(P＜0.01),并且活动期高于静止期(P＜0.01),肾损组高于无肾损组.血清IP-10水平与SLEDAI(P＜0.01)、抗dsDNA抗体滴度对数值呈正相关(P＜0.05),与C3(P＜0.01)、白细胞计数(P＜0.05)呈负相关.结论:检测血清IP-10水平有可能作为狼疮活动的敏感指标之一.     

系统性红斑狼疮病人外周血淋巴细胞CD38的表达

目的：探讨CD38在系统性红斑狼疮（SLE）发病中的作用以及与抗双链DNA（dsDNA)抗体间的关系。方法：采用流式细胞仪检测23例活动期SLE病人和20例正常对照者外周血淋巴细胞（PBL）CD38表达,免疫印迹法检测抗dsDNA抗体,结果：SLE病人PBL CD38表达水平明显高于对照组,治疗后虽有下降,但仍高于对照组（P＜0．01）,治疗前后无显著差异（P＞0．05）,CD38的升降与抗dsDNA抗体的水平呈正相关（r=0.68),结论：CD38可能参与了SLE的发病过程,它可以作为反映病情的有效指标。     

凋亡调控分子BclGL表达与系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞凋亡的研究

【摘要】 目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单一核细胞（PBMC）中凋亡调控分子BclGL的表达及其意义。 方法 流式细胞仪检测20例活动期SLE患者（A-SLE）、18例非活动期SLE患者（I-SLE）以及30例健康对照者PBMC的细胞绝对数;用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）细胞凋亡双染试剂盒检测各组PBMC早期凋亡率;荧光定量PCR技术检测各组PBMC中BclGL mRNA的表达量;Western 印迹检测BclGL蛋白表达量;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组血清中干扰素（IFN）-α水平;采用SPSS13.0统计软件进行组间非参数Mann-Whitney或Kruskal-Wallis检验,并使用Pearson相关分析法分析SLE患者PBMC中BclGL表达量与细胞凋亡率及临床指标间的相关性。 结果 A-SLE患者外周血中PBMC细胞绝对数［（0.16 ± 0.06） × 109/L］低于I-SLE［（0.27 ± 0.14） × 109/L］及健康对照［（0.34 ± 0.23） × 109/L］（均P < 0.01）;A-SLE患者PBMC凋亡率（22.6% ± 1.1%）较I-SLE（16.4% ± 0.9%）及健康对照（10.1% ± 0.4%）升高,I-SLE患者也高于健康对照（均P < 0.01）;A-SLE患者PBMC中BclGL表达量高于I-SLE及健康对照（均P < 0.01）;SLE患者外周血血清IFN-α含量［（32.5 ± 2.2） μg/L］较健康对照［（15.5 ± 1.3） μg/L］增高（均P < 0.01）;SLE患者PBMC中上调的BclGL表达与PBMC凋亡率（r = 0.486,P < 0.01）及SLE疾病活动指数（SLEDAI）、抗核抗体（ANA）滴度、IFN-α水平呈正相关（r = 0.496,0.516,0.535,均P < 0.01）,与患者补体C3水平呈负相关（r = －0.515,P < 0.01）。结论 SLE患者PBMC中BclGL分子表达上调可能参与SLE患者PBMC的凋亡异常,从而在SLE发病中起作用。 【关键词】 红斑狼疮,系统性; 外周血单一核细胞; BclGL; 细胞凋亡     

SLE患者血清IL-15水平检测及其意义

检测系统性红斑狼疮（SLE）患者血清IL-15水平并探讨其临床意义。方法：用双抗体夹心ELISA法检测42例SLE患者和20例正常人外周血IL-15的水平、活动期与非活动期SLE患者外周血IL-15的水平，按常规方法检测了血清补体，抗ds—DNA抗体，抗ENA抗体谱，免疫球蛋白IgG、IgM、IgA等指标。结果：与正常人相比，SLE患者血清IL-15水平增高（P〈0．05）；且活动期SLE患者血清IL-15水平显著高于非活动期的水平；出现抗ds—DNA阳性、低补体C3血症、高IgG血症的IL-15水平均分别显著高于无上述表现者。SLE患者血清IL-15水平明显升高，且其血清水平与抗ds—DNA阳性、补体低下，高免疫球蛋白血症具有相关性，它可能在SLE的发病机制中起一定作用。     

SLE患者外周血造血干/祖细胞的检测及临床意义

目的 探讨SLE患者外周血CD34+造血干/祖细胞（HSC/HPC）数目与CD34膜表达的变化。方法 采用异硫氰酸荧光素标记抗体,以流式细胞仪检测30例SLE患者和14例正常人外周血CD34+ HSC/HPC,分析CD34+ HSC/HPC细胞占全部淋巴细胞的百分比和CD34平均荧光强度,并结合临床资料进行相关性分析。结果 活动期和稳定期SLE患者外周血CD34+ HSC/HPC细胞占淋巴细胞百分比分别为（0.15 ± 0.10）%和（0.09 ± 0.07）%,低于正常人对照组［（0.37 ± 0.17）%,F = 17.18,P < 0.01］,而活动期和稳定期SLE患者差异无统计学意义（t = 1.51,P > 0.05）;活动期SLE患者外周血CD34抗原的平均荧光强度为41.35 ± 19.24,高于正常人对照组（27.43 ± 7.57,F = 3.13,P < 0.05）,而稳定期SLE患者与正常人对照组差异无统计学意义（F = 3.13,P > 0.05）。外周血CD34+ HSC/HPC细胞百分比与血清IgG水平呈负相关（r = -0.588,P < 0.01）,与SLE疾病活动指数（SLEDAI）、补体、抗dsDNA抗体、抗C1q抗体、抗核小体抗体等无统计学相关性。结论 SLE患者外周血CD34+ HSC/HPC细胞数减少,并且CD34抗原表达增加,提示SLE患者HSC/HPC功能存在异常,可能参与SLE的发病。     

转录因子Aiolos基因在SLE患者外周血单一核细胞中的表达

目的 探讨SLE患者外周血单一核细胞（PBMC）中转录因子Aiolos的表达水平。方法 采用Western印迹法分别检测19例SLE活动期患者及13例SLE稳定期患者PBMC中转录因子Aiolos蛋白的表达水平,并以30例健康志愿者作对照。对SLE患者Aiolos蛋白表达水平与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关分析。结果 PBMC中转录因子Aiolos蛋白表达相对值正常对照组为0.81 ± 0.09,SLE组为0.56 ± 0.17,两组比较差异有统计学意义（P < 0.01）;SLE活动期组（0.52 ± 0.14）与稳定期组（0.65 ± 0.19）比较,差异有统计学意义（P < 0.05）;SLE患者转录因子Aiolos蛋白的表达与SLEDAI呈显著负相关（r = -0.65,P < 0.01）。结论 SLE患者PBMC中转录因子Aiolos的表达水平显著降低,且与SLE疾病活动指数呈一定相关性。     

SLE患者外周血单一核细胞凋亡率与病情活动性的相关性研究

目的：研究SLE患者外周血单一核细胞（PBMC）凋亡、自身抗体、病情活动性的相互关系。方法：用吖啶橙染色法检测新鲜PBMC凋亡率；免疫印迹法检测自身抗体；按文献方法计算SLE病情活动指数（SLEDAI）。结果：SLE患者BPMC凋亡率升高，并与SLEDAI高度正相关（P＜0.01)；自身抗体种类的多少与PBMC凋亡率、SLEDAI均无明显相关性（P＞0.05)。结论：SLE患者PBMC凋亡与其病情有关。     

SLE患者淋巴细胞表面粘附分子的表达及血清TNF-α、IL-8的测定

为探讨粘附分子和炎性细胞因子与SLE发病的关系，用流式细胞术及免疫双荧光染色法，检测了SLE患者淋巴细胞表面CD11a、CD54的表达，同时用放射性免疫法（RIA）检测了血清TNF－α和IL－8的水平。结果表明（1）SLE患者的血淋巴细胞表面CD11a,CD54的表达和血清TNF－α、IL－8的水平较正常对照组显著性升高（P＜0．01），且活动期患者高于稳定期患者（P＜0．01）；（2）SLE伴皮肤血管炎患者淋巴细胞表面CD11a,CD54的表达较SLE不伴皮肤血管炎患者显著性升高（P＜0．01）；（3）SLE患者血清TNF－α与IL－8的表达呈显著正相关（P＜0．05）；SLE患者淋巴细胞表面CD11a与CD54的表达呈显著正相关（P＜0．05）。外周血淋巴细胞表面CD11a,CD54的表达和血清TNF－α、IL－8的水平均可作为SLE病情活动的参考指标。     

SLE患者抗核小体抗体、抗dsDNA抗体及抗C1q抗体的检测

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者抗核小体抗体、抗dsDNA抗体及抗C1q抗体水平并探讨其临床意义。方法采用ELISA法检测抗核小体抗体及抗C1q抗体水平,间接免疫荧光法检测抗dsDNA抗体水平。结果活动期狼疮肾炎患者其抗C1q阳性率及三种抗体的协同阳性率显著高于非活动期患者(P0.01);三种抗体均与SLEDAI呈正相关(P均0.05),ROC曲线分析表明抗C1q抗体试验效能优于抗核小体抗体与抗dsDNA抗体。结论三种抗体与SLE及LN的活动度密切相关,联合检测可较好的辅助判断SLE特别是LN的活动及严重情况。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Th17相关转录因子RORγt mRNA的表达

目的 探讨Th17细胞在系统性红斑狼疮(SLE)免疫炎症反应中的作用机制.方法 逆转录PCR(RT-PCR)检测12例活动期SLE患者、9例非活动期SLE患者和12例正常人对照PBMC中维A酸相关孤儿核受体γt (RORγt) mRNA表达水平.活动期SLE患者组、非活动期SLE患者组与正常人对照组PBMC中RORγt mRNA表达水平采用近似F检验(Welch方法)和校正的多重比较方法(Dunnett's T3)进行分析.结果 活动期SLE患者、非活动期SLE患者及正常人对照RORγt mRNA表达水平分别为1.06±0.44,0.65±0.25,0.22±0.08,3组之间差异有统计学意义(F=23.286,P＜ 0.01).其中活动期SLE患者组显著高于非活动期患者组(F=2.453,P＜0.05)及正常人对照组(F=6.504,P＜0.05),非活动期SLE患者组显著高于正常人对照组(F=3.343,P＜0.05).SLE患者RORγt mRNA表达水平和SLEDAI之间存在显著正相关(rp=0.623,P＜ 0.01).结论 证实SLE患者存在Th17细胞极化现象,拮抗调控Th17细胞分化的关键转录因子RORγt能减轻SLE的免疫炎症反应而达到治疗SLE的目的.     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞刺激因子及其受体BAFF-R的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单一核细胞（PBMC）中B淋巴细胞刺激因子（BLyS）及其受体BAFF—R（属于肿瘤坏死因子家族的B细胞活化因子受体）的表达情况。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）以及免疫印迹法（westem blot）分别检测28例SLE活动期患者及24例SLE稳定期患者PBMC中BLyS与BAFF—RmRNA及蛋白的表达水平，并以21例健康志愿者作对照；同时将两者mRNA及蛋白的表达水平与SLE疾病活动程度进行相关分析。结果 SLE活动期、稳定期患者PBMC中BLyS与BAFF—R mRNA及蛋白的表达水平均明显高于正常人（P〈0．01），活动期患者的表达高于稳定期患者（P〈0．01）；BLyS mRNA及蛋白的表达与狼疮活动指数（SLEDAI）呈显著正相关（P〈0．01），BAFF—R mRNA及蛋白的表达与SLEDAI无明显相关性（P〉0．05）。结论 BLyS及其受体BAFF—R可能参与了SLE的发病机制。     

BLyS及其受体BAFF-R在SLE患者中的表达及与SLEDAI和血清IgG的相关性研究

目的:通过在基因和蛋白水平上检测系统性红斑狼疮(SLE)患者BLyS及其受体BAFF-R的表达水平,探讨BLyS及BAFF-R与SLE发病机制的相关性。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(Realtime PCR)检测60例SLE患者(其中病情活动期34例,稳定期26例)、50例健康人群外周血单个核细胞(PBMC)的BLyS mRNA、BAFF-R mRNA的表达水平,ELISA方法检测其血清BLyS的表达,并分析其与SLE活动指数(SLEDAI)、血清免疫球蛋白IgG的相关性。结果:SLE患者PBMC中BLyS、BAFF-R mRNA及血清中BLyS蛋白表达水平均明显高于健康对照组(t值分别为14.02、14.6、9.56,P值均0.01);活动期BLyS mRNA及BLyS蛋白表达水平明显高于稳定期(t值分别为2.26、3.96,P值均0.05),BAFF-R mRNA表达在活动期和稳定期之间没有差别(t=1.49,P0.05)。SLE患者BLyS mRNA及BLyS蛋白水平均与SLEDAI积分和血清IgG水平呈正相关(P值均0.01),BAFF-R mRNA水平则与SLEDAI、IgG均无相关性(P值均0.05)。结论:SLE患者BLyS mRNA、BAFF-R mRNA、BLyS蛋白表达水平升高,BLyS在一定程度上反映了病情的活动,表明BLyS及其受体可能参与SLE的发生和发展,并为监控SLE的病情和治疗效果提供了新的辅助方法。