剖析狂犬病（六）狂犬病疫苗使用须知

狂犬病疫苗是预防狂犬病的有力武器。随着科学技术的发展，狂犬病疫苗的种类不断更新，产品质量也不断提高。目前，我国生产的狂犬病疫苗主要是：原代地鼠肾细胞疫苗和Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞）疫苗。由于原代地鼠肾细胞疫苗时常出现一些过敏反应，导致个别患者无法完成全程注射，因此又开发出了纯化地鼠肾细胞佐剂疫苗和纯化地鼠肾细胞无佐剂疫苗。     

国产纯化狂犬病疫苗与法国“维尔博”狂犬病疫苗免疫效果比较观察

我国目前用于预防狂犬病的疫苗为３～５倍浓缩地鼠肾细胞狂犬病疫苗,虽然该疫苗效价可达到ＷＨＯ规定的２－５ＩＵ／剂,但其注射后的副反应如注射部位疼痛、大面积红肿、全身荨麻疹等时有发生,致使一些病例不能完成全程免疫。为此我们对新研制的国产纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗与法国“维尔博”纯化Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗接种的副反应及免疫学效果进行了观察。结果报告如下。材料和方法　（１）疫苗：①浓缩纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗（ＰＨＫＣＶ）,由沈阳安迪生物高科技公司生产。１－０ｍｌ／剂,液体佐剂苗,批号：９７０８０２。②法…     

人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗的研制

狂犬病是一种自然疫源性疾病，是由狂犬病毒引起的所有温血动物都易感的人兽共患性疾病，一旦发病，１００％死亡。唯一有效的预防手段就是及时注射狂犬疫苗。我国每年需要６００万人份左右的狂犬病疫苗。但是我国现行的原代地鼠肾细胞培养狂犬病疫苗。生产工艺落后，生产...     

接种狂犬病疫苗免疫失败原因分析及预防对策

目前,我们使用的狂犬病纯化疫苗（Vero细胞）,是地鼠肾狂犬病疫苗的替代产品,该疫苗选用Vero细胞为细胞基质,其安全性和效果均优于地鼠肾狂犬病疫苗。一般来说,只要做到及时、足量、全程注射疫苗,就可以有效地防止狂犬病的发生^[1]。但是,在预防过程中,确有极少数注射了疫苗后仍然发生狂犬病而死亡,给人民群众的生命安全造成严重威胁。现就接种狂犬病疫苗免疫失败的原因和预防对策分析如下。     

人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗效果观察

目前 ,我国已研制成功精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗 ,虽然效价已达到ＷＨＯ规定的 2 .5ＩＵ/剂 ,副反应亦有显著降低 ,但由于以原代地鼠肾细胞为基质 ,其制备需人工饲养并解剖大量地鼠 ,不适于工业化大生产 ,且很难控制细胞外源因子。Ｖｅｒｏ细胞是经ＷＨＯ检定合格并推荐作为生产人用灭活狂犬病疫苗的传代细胞 ,它不仅来源方便 ,繁殖速度快 ,维持时间长 ,容易控制外源因子污染 ,且对狂犬病毒敏感 ,适合大规模生产狂犬病疫苗。 1993年我们在卫生部批准立项 ,开始了Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗研制工作 ,并于 1998年研制成功。现将该疫苗人体观察结…     

应用Vero细胞制备狂犬病疫苗最适条件的研究

我国目前用于预防狂犬病的主要是地鼠肾细胞疫苗,其产量和质量尚不能满足防病、灭病的需要。Ｖｅｒｏ细胞经ＷＨＯ检定合格并推荐作为生产人用灭活狂犬病疫苗的传代细胞,不仅来源方便,繁殖速度快,维持时间长,容易控制外源因子污染,而且对狂犬病毒敏感,适合大规模生...     

冻干狂犬病纯化疫苗(VERO细胞)免疫效果分析

为探讨国产冻干狂犬疫苗的安全有效性，萍乡市预防门诊将2004年600例动物咬伤的病例随机分为两组，分别使用冻干人用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）和狂犬病纯化疫苗（VERO液体细胞）进行免疫，并对免疫后效果进行分析。     

人用Vero细胞狂犬病疫苗纯化工艺的建立

目的 建立人用Vero细胞狂犬病疫苗的纯化工艺。方法 应用2步柱层析对Vero细胞狂犬病疫苗原液进行纯化，对该疫苗效价及残余小牛血清、Vero细胞DNA等纯化指标进行检测。结果 经纯化的疫苗各项纯化指标均达到《中国生物制品规程》的要求，并较好保留了疫苗活性。结论 该法适用于人用Vero细胞狂犬病疫苗的纯化。     

人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺中样品浓度对纯化效果的影响

经过Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ 4ＦＦ凝胶柱层析法纯化的人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗 ,其杂蛋白去除率可达 99%以上 ,副反应率较现行的 3～ 5倍浓缩疫苗明显降低 ,免疫效价可达 3.5 0ＩＵ/ｍｌ以上 ,值得大力推广并最终取代浓缩疫苗。在深入研究纯化工艺最佳条件时 ,发现待纯化的浓缩疫苗蛋白浓度的高低直接影响纯化后疫苗的质量 ,要达到理想的纯化效果 ,样品蛋白浓度应在 40ｍｇ/ｍｌ以下。1　材料和方法1.1　细胞与病毒培养　使用 12～ 14ｇ健康金黄地鼠 ,无菌取肾 ,按常规方法制备单层细胞 ,用 3Ｌ转瓶 37℃及 33℃常规培养 ,于接种后第 4、第 7…     

广西应用原代地鼠肾细胞人用狂犬病疫苗接种效果的研究

目的评价原代地鼠肾细胞人用狂犬病疫苗的预防接种效果。方法观察性研究。结果广西16年应用原代地鼠肾细胞人用狂犬病疫苗接种狂犬病暴露人群保护率为86．0％,疫苗用量由1982年10万人份增加到1995年的50万人份,使广西狂犬病疫情下降呈剪刀叉的趋势。全国情况也是一样。1987年广西全面建立犬伤门诊后,按照局部伤口清洗,抗血清应用与疫苗免疫“三者并重”原则的处理方法,对狂犬病的预防效果与所产生的社会效果是巨大的。结论原代地鼠肾细胞人用疫苗预防效果良好,价格低廉,比精制鸡胚细胞疫苗与精制录猴肾细胞疫苗等容易在发展中国家中推广使用。     

人用狂犬病纯化疫苗Ⅱ期临床观察的研究总结

按国家药品监督管理局新药临床研究批件的要求，辽宁省疾病预防控制中心参加了由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所主持的沈阳安迪生物高科技公司申报的人用狂犬病纯化疫苗（Vero细胞）Ⅱ期临床观察的研究工作。现将观察结果报告如下。     

武生狂犬病防制系列产品及相关研究

中国生物技术集团公司所属武汉生物制品研究所具有50多年的生物制品生产历史,1980年率先研制成功原代地鼠肾细胞制备的狂犬病疫苗（PHKCV）,疫苗用病毒株为北京aG株,并开始大量生产应用.1993年,为了进一步提高狂犬病疫苗效力,生产出浓缩地鼠肾细胞狂犬病疫苗,使狂犬病疫苗效力由过去的1.3 IU/剂提高到2.5 IU/剂.但由于同时也浓缩了一些组织培养过程中的杂蛋白,如牛血清蛋白及细胞蛋白等,临床上出现的不良反应也增多起来,因此在1999年,又研制成功第二代狂犬病疫苗即纯化的Vero细胞狂犬病液体疫苗--武生旺宁.该疫苗首次使用CTN毒株,接种在长成单层的Vero细胞上,经超滤浓缩、病毒灭活并纯化后,加入铝佐剂而成.通过一系列的浓缩和纯化工艺,去除了大量的杂蛋白,使病毒有效成分的含量和纯度大幅提高,所引起的不良反应大大降低.经临床Ⅱ期试验接种31人,5针接种后14 d平均抗体效价达到11.89 IU/mL,抗体阳转率达到100%.临床Ⅲ期试验接种观察304人,结果全身反应率为4.28%,注射局部反应率为7.24%.武生旺宁是所有狂犬病疫苗中唯一通过我国狂犬病街毒攻击保护性试验的,试验结果表明,武生旺宁即使1：5稀释免疫小鼠,仍能100%抵抗我国狂犬病街毒的攻击.经过对我国狂犬病街毒和疫苗株的分子流行病学分析发现,疫苗株CTN与另一疫苗株aG株相比,更接近我国的街毒株（待发表）.其生产工艺和质控指标2005年还通过了世界卫生组织专家的考察,其细胞残留DNA低于100 pg/mL,符合国家药典标准,与国外同类产品相比更安全.     

两种无佐剂国产狂犬病疫苗的免疫效果观察

目的评价以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)及以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)的免疫效果。方法选取35名(1组)和46名(2组)一般的Ⅱ级暴露后患者,按0、3、7、14和28d的免疫程序,分别接种武汉生物制品研究所(CTN-1株毒种、Vero细胞)和河南普新生物技术公司生产的无佐剂狂犬病疫苗(aG株毒种、原代地鼠肾细胞),观察接种后的不良反应,采用快速荧光灶抑制实验(RFFTT)检测初免后7、14d血清狂犬病毒中和抗体。结果两种疫苗初免后7d的抗体阳转率分别为58.52%和65.22%,无显著性差异,初免后14d的抗体阳转率均为100%,接种Vero细胞狂苗组无不良反应;接种原代地鼠肾细胞狂苗组有1人接种第二针后出现4cm×4cm的红肿。结论两种无佐剂国产狂犬病疫苗产生保护性抗体时间短,以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)免疫效果好于以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)。     

两种人用狂犬病疫苗免疫效果观察

为了解百色市被动物致伤者接种不同种类狂犬病疫苗后的免疫效果,我们对2006年8月至2007年4月收集到的598例被动物致伤者进行狂犬病疫苗全程免疫后效果分析。1材料和方法1.1狂犬病疫苗A组为北京生物制药有限公司生产的人用狂犬病纯化疫苗(地鼠肾细胞),批号:2006051402,规格:≥2.     

不同狂犬病毒毒株在Vero细胞上的传代研究

近年来,我国狂犬病流行较为严重,病死数居所有传染病之首。预防和治疗狂犬病的惟一方法是注射狂犬病疫苗,因此,生产优质高效的狂犬病疫苗显得尤为重要。在狂犬病疫苗生产过程中,所选用的毒株直接影响到疫苗的病毒滴度和免疫原性,为了给生产厂家提供一些有效的参考数据,我们对不同的狂犬病毒毒株在Vero细胞上进行了传代比较。1　材料和方法　狂犬病毒液体毒株CTN 1V10 株、CTN BHK株,狂犬病毒脑毒株CTN 1V10 M3 株、aG株,均由中国药品生物制品检定所提供,病毒滴度均在7.0～8.0LogLD50 /ml之间。Vero细胞来源于美国ATCC ,由中国药品…     

柱层析法纯化传代Vero细胞狂犬病疫苗上样量的选择

传代Vero细胞狂犬病疫苗较原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗具有效价高,工艺简单,无外源因子污染,易于大规模生产的优点.其浓缩液经过Sepharose 4FF凝胶柱层析纯化后[1],其杂蛋白去除率可达99%以上,一、二期临床试验证明副反应率极低,且免疫效价可达4.5IU/ml以上,高于<中国生物制品规程>所规定的2.5IU/ml要求.在深入研究纯化工艺最佳条件时,发现待纯化的浓缩疫苗上样量的多少直接影响纯化后疫苗的质量.对此,我们做了研究,结果报告如下.     

进口和国产Vero细胞狂犬病疫苗安全性分析

近年我国已推广应用国产经Vero传代细胞培养制成的纯化狂犬病疫苗。我们于 2 0 0 2年 2～ 12月按《国际临床试验规范》(GCP)方法对进口和国产Vero细胞狂犬病疫苗的安全性进行了临床试验观察。1.材料与方法 :实验组为维尔博 (Veroab)精制纯化Vero细胞狂犬病冻干疫苗 ,由安万特 巴斯德公司生产 ,0 .5ml× 5针 ,批号 :U 0 940 2 ;对照组为人用狂犬病纯化疫苗 (Vero细胞 )由中国长春长生实业股份有限公司生产 ,为液体疫苗 ,1.0ml× 5针 ,批号 :0 2 0 80 9 9。试验目的旨在评价暴露后伤者使用进口精制纯化Vero细胞狂犬病疫苗 (维尔博 )和国…     

628例接种人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗者血清IgG抗体水平调查

目的了解人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗的免疫接种效果。方法收集2009年1月-2011年12月接种人用地鼠肾细胞狂犬纯化疫苗628人的流行病学资料,并分别采集接种疫苗后第7 d和第15 d的血清标本。用ELISA方法检测血清IgG抗体,对不同性别、不同年龄组和接种后不同时间的血清抗体水平进行比较分析。结果共检测疫苗接种人群628人,免疫后7 d和15 d的IgG抗体阳性率分别为59.71%和94.11%,经χ2检验,两者间差异有统计学意义(P<0.01)。10岁以下年龄组接种人群无论是接种7 d还是接种15 d的血清IgG抗体阳性率高于60岁以上年龄组(P<0.05)。不同性别免疫接种7 d后与免疫接种15 d后的IgG抗体阳性率间差异无统计学意义(P>0.05)。结论接种人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗的人群IgG抗体阳性率与接种人群的年龄、接种后的时间相关,接种后15 d的IgG抗体阳性率达到94.11%,60岁以上年龄组的IgG抗体阳性率明显低于10岁以下年龄组。     

人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化方法比较

我国现行的人用浓缩地鼠肾细胞狂犬病疫苗 ,虽然免疫效价可达到 2 .5ＩＵ 剂以上 ,但因其为 3～ 5倍的浓缩液 ,杂蛋白含量高 ,接种者副反应率明显上升。为此我们用蔗糖密度区带离心法、ＤＥＡＥ -ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换柱层析法及ｓｅｐｈａｒｏｓｅ凝胶柱层析法 ,对浓缩疫苗进行纯化效果试验。1　材料与方法1.1　细胞与病毒培养　使用 12～ 14ｇ健康金黄地鼠 ,无菌取肾 ,按常规方法制备单层细胞 ,用 3Ｌ转瓶于 37℃及 33℃常规培养 ,于接种后第 4、7ｄ两次收获病毒液。1.2　毒种　以北京ａＧ株固定毒为生产毒种 ,来源于中国药品生物制…     

广州市8417例狂犬病疫苗免疫者流行病学分析

为进一步有效地预防狂犬病 ,广州市疾病预防控制中心预防门诊部坚持对完成全程狂犬病疫苗接种者进行流行病学观察 ,现将 841 7例狂犬病疫苗免疫者的流行病学分析报告如下。1 .对象与方法 :(1 )对象 :收集 2 0 0 2年 3～ 1 0月因动物致伤后在门诊部全程接种人用狂犬病疫苗者的记录 ,并加以整理和统计。 (2 )疫苗来源 :分两种。其中维尔博狂犬病疫苗为进口Vero细胞疫苗 (经活化、提纯并真空冻干 ) ,需用稀释液 0 .5ml,稀释后注射。辽宁生物技术公司地鼠肾纯化人用精制狂犬病疫苗 (纯化疫苗 )每支 1ml。2 .结果 :(1 )免疫时间分布 :841 7例均…