大剂量吡哆醇对大鼠睾丸细胞DNA和RNA影响的研究

目的：探讨大剂量吡哆醇(PN)对睾丸结构和功能影响的分子机制，研究其对睾丸细胞DNA和RNA的影响。方法：选用2m龄wistar雄性大鼠32只，均分为实验组和对照组，每日分别自腹腔注射PN(800mg／kg)和等量生理盐水，于第3d和7d后，采用吖啶橙荧光染色法显示睾丸细胞DNA和RNA。结果：与对照组相比，注射3d实验组大鼠睾丸细胞DNA和RNA反应活性未见明显减弱或消失，注射7d实验组大鼠睾丸DNA和RNA反应活性明显减弱。结论：大剂量PN腹腔注射后，大鼠睾丸细胞DNA和RNA活性明显减少，这些变化可能是PN损害睾丸结构和功能的重要原因之一。     

缺锌对大鼠睾丸细胞核酸及锌含量的影响

目的：探讨缺锌对睾丸结构和功能损害的分子机制,研究其对睾丸细胞核酸的影响。方法：选用２月龄Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠１６只,均分为实验组和对照组,分别喂养缺锌和常锌饲料。４ｗ后,采用原子吸收法测定血清和睾丸锌含量,采用吖啶橙荧光染色法显示睾丸细胞核酸。结果：与对照组相比,实验组大鼠血清锌和睾丸锌含量明显降低（Ｐ＜０．０５）;睾丸细胞核酸荧光显色反应强度明显减弱。结论：缺锌大鼠血清锌水平明显降低的同时,睾     

大剂量吡哆醇对大鼠睾丸一氧化氮合酶和细胞凋亡的影响

[目的]为探讨大剂量吡哆醇(PN)对睾丸结构和功能损害的分子机制,研究其对睾丸一氧化氮合酶 (NOS)和细胞凋亡的影响。[方法]实验采用吖啶橙荧光染色法显示睾丸细胞DNA和RNA,黄递酶(NADPH- d)组织化学法显示睾丸细胞NOS,采用原位缺口平移技术检测睾丸生精细胞凋亡的数目。[结果]与对照组相比,注射PN 3 d,大鼠睾丸间质细胞NOS反应活性明显增强,睾丸生精细胞凋亡数目(38．41±8．20)较相应对照组(11．39±4．86)明显增多,差异有显著性(P<0．01)。[结论]提示大剂量PN腹腔注射后,大鼠睾丸细胞NOS活性和凋亡细胞数目明显增加,这些变化可能是PN损害睾丸结构和功能的分子机制之一。     

氟化钠对小鼠睾丸组织的损伤及细胞凋亡的影响

目的 研究氟中毒对小鼠睾丸组织的影响.方法 给小鼠饮用含0 mg/L、10 mg/L、25 mg/L、50 mg/L氟化钠水,HE染色观察睾丸组织形态病理学变化,用TUNEL法检测小鼠睾丸组织细胞凋亡.结果氟中毒能诱导小鼠睾丸TUNEL阳性细胞,且凋亡细胞率较对照组明显增高.结论氟中毒可诱导小鼠睾丸组织细胞凋亡明显,凋亡发生部位与病理改变明显的部位相吻合,氟中毒小鼠睾丸组织细胞凋亡机制参与睾丸损害过程.     

硒对氟诱导的大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的作用

目的 :研究硒对氟中毒诱导的大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的作用。方法 :选用雄性SD大鼠 ,氟中毒组大鼠饮用含 15 0mg·L-1氟化钠 (NaF)的蒸馏水溶液 ,硒氟联合作用组大鼠饮用含 15 0mg·L-1氟化钠(NaF)和 2mg·L-1亚硒酸钠 (Na2 SeO3 )的蒸馏水溶液 ,染毒 4周 ,用单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤。结果 :氟中毒能明显诱导大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞的DNA损伤 ,总损伤细胞百分率分别为 5 0 .2 0 %和 4 4 .80 % ,而硒对氟造成的口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤具有明显的拮抗作用 ,总损伤细胞百分率分别为 14 .6 0 %和 12 .6 0 %。结论 :硒对氟中毒引起的大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤具有明显的拮抗作用。     

二苯乙烯苷对慢性氟中毒致脑损伤大鼠学习记忆能力、氧化应激的影响

目的:探讨二苯乙烯苷对慢性氟中毒致脑损伤大鼠学习记忆能力、氧化应激的影响。方法:30只大鼠随机分为对照组、模型组、实验组,每组大鼠10只。对照组大鼠给予去离子水自由饮用;模型组、实验组大鼠给予100 mg/L Na F溶液自由饮用,连续饮用12周。实验组给予二苯乙烯苷60 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等剂量生理盐水。比较各组大鼠逃避潜伏期、游泳时间百分比、穿过原平台次数及血浆SOD和MDA含量变化。结果:与模型组比较,实验组大鼠逃避潜伏期缩短(P0.05);与模型组比较,实验组大鼠游泳时间百分比增加(P0.05);与模型组比较,实验组大鼠穿过原平台次数增加(P0.05);与模型组比较,实验组血浆SOD含量明显增加,MDA含量明显降低(P0.05)。结论:二苯乙烯苷可明显改善慢性氟中毒致脑损伤大鼠学习记忆能力,通过降低MDA含量和提高SOD含量减轻脑损伤。     

高氟低碘对Wistar大鼠大脑组织病理学及DNA损伤的影响

目的 研究高氟与低碘对子代大鼠大脑组织病理学及脑细胞DNA损伤的影响.方法 断乳Wistar大鼠(雌∶雄 = 3∶1)32只,随机分为四组:对照组,饲喂大鼠标准饲料,去离子水;高氟组,饲喂大鼠标准饲料,饮100 mg/L氟化钠(NaF)去离子水;低碘组,饲喂低碘饲料(定做),去离子水;高氟低碘组,饲喂低碘饲料,饮100 mg/L氟化钠(NaF)去离子水.雌雄大鼠自然交配,待子代大鼠出生后,观察其在10、20天时脑皮质、海马组织病理学变化,及30、60和90天时脑DNA的损伤. 结果与对照组相比,高氟组和低碘组大鼠大脑皮质及海马内有较多神经元核固缩、核溶解及细胞轮廓不清晰.高氟低碘组,有大量神经元出现核固缩、核溶解、锥体突明显拉长等现象,并且在大鼠发育期内尤其明显.随着日龄的增加,各实验组子代大鼠脑细胞DNA损伤程度显著增加,以高氟低碘组90日龄大鼠DNA损伤最严重.结论 高氟与低碘影响了大鼠大脑皮质及海马组织形态结构与引起了脑细胞的DNA损伤.     

燃煤型氟中毒对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的：观察燃煤型氟中毒对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法：5月龄SD雄性大鼠18只,按体质量随机分为染氟组、染氟＋大豆组和对照组,各组大鼠自由饮用自来水（含氟〈0.5 mg/L）;各染氟组采用含氟量为69.33 mg/kg的煤烘玉米饲食,染氟＋大豆组的大豆重量比为20%,对照组采用含氟为9.37 mg/kg的常食玉米饲食,实验期间动物自由进食、进水;染氟第90天,处死大鼠,使用H-E染色法和TUNEL方法对大鼠睾丸切片进行染色,观察细胞凋亡情况,结果：染氟组生精细胞凋亡个数高于对照组[（278.17±25.47）个,（129±21.02）个,P〈0.05];染氟＋大豆组生精细胞凋亡个数高于对照组[（141.5±5.24）个,（129±21.02）个,P〈0.05];染氟＋大豆组生精细胞凋亡数低于染氟组[（141.5±5.24）个,（278.17±25.47）个],P〈0.05。结论：燃煤型氟中毒可造成大鼠生精细胞凋亡增加,增加营养后可有效减少氟中毒造成的生精细胞的凋亡。     

燃煤型氟中毒对大鼠睾丸组织氧化应激效应的影响

目的 研究燃煤型氟中毒对大鼠睾丸组织氧化效应的影响,探讨燃煤型氟中毒的生殖毒害机制.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组4组,每组10只.各染氟组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米的饲料,构建燃煤型氟中毒动物模型.分别于120、180 d分批处死,各时间点每组处死大鼠数为5只.采用HE染色,光镜下观察睾丸组织病理学改变;制备睾丸组织匀浆,检测睾丸组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶( SOD)、总一氧化氮合酶(T-NOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性;氟离子选择电极法检测大鼠尿氟含量及睾丸组织氟含量.结果 成功建立大鼠氟中毒模型.各染氟组大鼠睾丸组织氟含量均明显升高(P均＜0.01),睾丸生精小管均发生不同程度的损害.120d和180 d时,各染氟组大鼠睾丸组织T-NOS、iNOS活性和MDA含量均明显升高(P＜0.05或P＜0.01),且随染氟剂量增加而升高;120d和180 d时,各染氟组大鼠睾丸SOD活性较对照组明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 燃煤型氟中毒可导致大鼠睾丸内氧化系统与抗氧化系统失衡,生殖细胞受损.氧化应激损伤在燃煤型氟中毒所致的雄性大鼠生殖毒性中可能发挥重要作用.     

慢性氟中毒大鼠大脑皮质中AGEs和RAGE的改变

目的：研究慢性氟中毒大鼠大脑皮质中晚期糖基化终末产物（AGEs）及其受体（RAGE）表达,探讨氟中毒神经损害的发病机制。方法：60只SD大鼠按体质量随机分为对照组、小剂量染氟组和大剂量染氟组,采用酶联免疫方法、蛋白印迹方法和实时荧光定量PCR方法分别检测AGEs含量、RAGE的蛋白和mRNA表达水平。结果：染氟大鼠大脑皮质中AGEs含量和RAGE蛋白表达水平比对照组明显增高（P〈0．05）,染氟大鼠大脑皮质中RAGE的mRNA表达较对照组明显升高（P〈0．05）。结论：慢性氟中毒引起大鼠大脑皮质中AGEs含量和RAGE表达明显升高,这些改变可能与氟中毒性神经损伤发生机制有关。     

细胞增殖和DNA损伤在大鼠氟斑牙形成中的作用研究

目的:研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙细胞增殖和DNA损伤的影响.方法:给雄性SD大鼠饮用含10,50,100 mg/L NaF的高氟水60 d和90 d,制备氟斑牙模型.用流式细胞术检测大鼠切牙细胞增殖周期的变化,用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤.结果:雄性SD大鼠饮用含50,100 mg/L NaF的高氟水60...     

绞股蓝总皂苷对血管性痴呆大鼠大脑皮层及海马的影响

目的 观察绞股蓝总皂苷（GP）对血管性痴呆大鼠大脑皮层及海马的DNA和RNA的影响。方法 采用改良的Pulsinelli-4血管阻断（4－VO）方法建立大鼠血管性痴呆模型，用吖啶橙染色法进行GP对血管性痴呆大鼠大脑皮层及海马的DNA和RNA保护作用的研究。结果 与正常对照组比较，血管性痴呆大鼠大脑皮层及海马的DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度（反映DNA和RNA含量）明显减弱，GP200mg/kg ig给药组大脑皮层及海马的DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于血管性痴呆模型组，与正常对照组相似。结论 GP可明显减轻血管性痴呆大鼠大脑皮层及海马的DNA和RNA损伤。     

绞股蓝总苷对全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回的保护作用

目的：观察绞股蓝总皂苷（GP）对全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回DNA和RNA的保护作用。方法：采用4－血管阻断（4－VO）方法建立大鼠急发生全脑缺血模型,用吖啶橙染色法进行GP进行全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回的DNA和RNA保护作用的研究,结果：与正常对照组比较,全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度（反映DNA和RNA含量）明显减弱,GP100mg/kg ig给药组海马及齿状回DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于全脑缺血再灌注模型组,正常对照组相惟,结论GP可明显减轻缺血再灌注对大鼠海马及齿状回DNA和RNA损伤。     

长期氟暴露对大鼠心肌caspase-1和TNF-α表达的影响

目的:探究长期氟暴露对大鼠心肌半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase, caspase-1)和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法:将Wistar大鼠作为实验对象,采用随机数字法将其随机分为4组,即空白对照组、低剂量染氟组、中剂量染氟组和高剂量染氟组。空白对照组大鼠饮用去离子水,染氟组大鼠饮用不同剂量的氟化钠去离子水,所选浓度为50、100、200 mg/L,各组自由进食饮水,喂养7个月,制备长期氟暴露动物模型。采用免疫组织化学染色法检测长期氟暴露的大鼠心肌caspase-1和TNF-α表达情况。结果:染毒7个月后,与空白对照组相比,不同剂量染氟组大鼠呈现不同程度的氟斑牙,且氟斑牙程度与染氟剂量呈剂量依赖性;免疫组织化学染色结果显示,与空白对照组相比,不同剂量染氟组大鼠心肌细胞caspase-1和TNF-α表达水平增加,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:长期氟暴露可能会通过依赖caspase-1诱导大鼠心肌细胞产生大量炎症因子,从而导致心肌细胞损伤。     

绞股蓝总皂苷对血管性痴呆大鼠海马一氧化氮合酶及核酸的保护作用

目的 观察绞股蓝总皂苷(GP)对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及核酸的保护作用。方法 采用改良的Pulsinelli 4-血管阻断(4-VO)方法建立大鼠VD模型，用免疫组化法研究GP对大鼠海马nNOS的表达的影响，并用吖啶橙染色法进行GP对VD大鼠海马的DNA和RNA保护作用的研究。结果 与正常对照组比较，VD大鼠海马CA1区和CA3区nNOS阳性神经元数目明显减少，而DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度(反映DNA和RNA含量)明显减弱，GP 200 mg／kg ig给药组海马各亚区的nNOS阳性神经元神经细胞数比VD模型组明显增多。DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于VD模型组，与正常对照组相似。结论 GP可明显增强VD大鼠海马nNOS阳性神经元的表达，并对DNA和RNA有保护作用。     

硒对氟斑牙发生的拮抗作用及其对Beclin1表达的影响

目的 研究硒对小鼠氟斑牙发生的拮抗作用,并检测其对自噬相关基因Beclin1表达的影响。方法 将36只2月龄费城癌症研究所（institute of cancer research, ICR）雄鼠,随机分为3组,每组12只,建立饮水型氟斑牙模型,用亚硒酸钠（Na2SeO3）进行干预,具体分组为： 对照组（ddH2O）、氟化钠组（200mg/L NaF）、硒组（2mg/L Na2SeO3+200mg/L NaF）,喂养8周后,观察氟斑牙发生情况,记录其长度并计算小鼠下颌切牙增长率;分离下颌骨后,进行micro-CT扫描,测量小鼠切牙唇侧硬组织厚度;H-E染色观察成釉细胞的变化,免疫组化方法检测Beclin1的表达。结果 氟化钠组氟斑牙检出率为100%,表现为小鼠切牙白垩色改变;硒组未发现明显氟斑牙症状,形态与色泽介于正常与极轻度之间;micro-CT结果显示,氟化钠组切牙唇侧硬组织厚度比对照组薄,硒组介于两者之间(P<0.01);H-E 结果显示,氟化钠组成釉细胞排列紊乱,极性消失;而对照组与硒拮抗组成釉细胞呈栅栏状,排列整齐规则;免疫组化结果显示,3组中成釉细胞从分泌期到成熟期Beclin1的阳性表达均呈逐渐增强的表达趋势,且Beclin1在氟化钠组表达明显强于正常组,硒组介于两者之间。结论 2mg/L硒离子浓度对氟斑牙的发生有一定拮抗作用;其作用机制可能是通过抑制成釉细胞自噬的发生,进而减轻过量氟对小鼠切牙毒性影响。     

甘草黄酮对S180和H22荷瘤小鼠肿瘤细胞DNA和RNA的影响

目的观察甘草黄酮对S180和H22荷瘤小鼠肿瘤细胞DNA及RNA的影响.方法Si8o和H2z荷瘤小鼠随机分为甘草黄酮高、中、低剂量(25、11.25、5.58 mg/kg)组,阳性对照(环磷酰胺25 mg/kg)组和阴性对照(生理盐水)组,各组均sc给药.运用激光扫描共聚焦显微镜技术与吖啶橙(AO)荧光探针技术结合检测单一肿瘤细胞DNA和RNA的变化情况.结果不同剂量甘草黄酮组和环磷酰胺组的DNA及RNA荧光强度较生理盐水组有不同程度的减弱;甘草黄酮高、低剂量组RNA/DAN值与生理盐水组比较差异无显著性;甘草黄酮中剂量组、环磷酰胺组RNA/DNA值较生理盐水组有非常显著提高(P＜0.01).结论甘草黄酮与肿瘤细胞DNA和RNA结合后抑制其进一步复制与合成,可能是其抗肿瘤作用的途径之一.     

c-src基因敲减对大鼠精原干细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究c-Src蛋白对大鼠精原干细胞的增殖和凋亡的影响。方法：在转染c-Src RNA干涉质粒后,用western blot检测细胞内c-Src蛋白的表达;用MTT比色法观察c-Src敲减后细胞的活性;同时分别用流式细胞仪和Hoechest33342染料检测细胞的细胞周期和凋亡情况。结果：与转染对照质粒相比,c-Src敲减后能显著降低大鼠精原干细胞内c-Src蛋白的表达,细胞活性下降了29.60%（P＜0.05）,S期细胞显著减少（P＜0.05）,细胞凋亡显著增加（P＜0.05）。结论：c-Src基因敲减后可抑制大鼠精原干细胞增殖和促进细胞凋亡。