大鼠半乳糖性白内障晶状体上皮细胞的病理变化

目的　探讨半乳糖性白内障大鼠晶状体上皮细胞的改变。方法　２４只ＳＤ雌性大鼠,分为正常对照组和白内障组,每组１２只。白内障组大鼠用半乳糖饲料喂养,正常对照组大鼠用普通颗粒饲料喂养。裂隙灯显微镜下观察大鼠晶状体混浊程度变化,观察至３０ｄ处死大鼠后取晶状体,在光镜和电镜下观察晶状体病理组织和超微结构改变。结果　观察至３０ｄ时,正常对照组大鼠晶状体保持透明,白内障组大鼠９眼（３７．５％）出现均一的皮质性混浊,１５眼（６２．５％）出现核混浊。白内障组光镜下可见晶状体皮质和核部大量纤维细胞水肿、崩解,前囊膜下及后囊膜下出现纤维细胞样的有核细胞堆积;透射电镜下可见晶状体上皮细胞变性、增生并突破晶状体上皮层向浅层皮质移行。结论　半乳糖性白内障不仅有晶状体纤维细胞水肿及结构破坏,还存在晶状体上皮细胞的异常增生、分化和移行。     

醛糖还原酶抑制剂AL-1576对大鼠半乳糖性白内障的防治研究

背景 糖性白内障是糖尿病的主要眼部并发症之一,研究表明醛糖还原酶(AR)活性的升高与糖尿病的慢性并发症密切相关,是抗糖性白内障药物研究的重要靶点,其研究对糖性白内障的防治具有重要意义. 目的 探讨AR抑制剂AL-1576对半乳糖性白内障的防治效果和作用机制. 方法 4～5周龄SD大鼠42只,通过喂养质量分数50％半乳糖饲料制作半乳糖性白内障模型.大鼠按照随机数字表法平均分为7个组,AL-1576预防组,早、中、晚期治疗组在喂食50％半乳糖饲料的当天及5、10、15d后开始添加质量分数0.0125％ AL-1576,另设空白对照组、模型对照组和AL-1576干预10d后撤除的早期撤药组.在裂隙灯显微镜下动态观察各组大鼠晶状体的混浊程度并进行分级,造模35 d时摘出晶状体,分别测量其干质量、湿质量,计算并比较各组晶状体含水量的变化;检测造模35 d时各组大鼠晶状体内AR活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及谷胱甘肽( GSH)的含量.结果 模型对照组大鼠12只眼晶状体均为Ⅳ级混浊,AL-1576预防组12只眼晶状体均透明,早期撤药组为Ⅱ～Ⅲ级混浊,早期治疗组为Ⅱ级混浊,而中期治疗组、晚期治疗组均为Ⅲ～Ⅳ级混浊,7个组晶状体混浊的程度差异均有统计学意义(H=17.760,P=0.009).各AL-1576治疗组大鼠晶状体含水量、AR活性均比模型对照组明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05),但给药的时间越晚,晶状体含水量、AR活性降低的程度越小;各AL-1576治疗组大鼠晶状体SOD活性和GSH的含量明显高于模型对照组,差异均有统计学意义( P＜0.05),AL-1576预防组的升高幅度最大. 结论 在半乳糖性白内障形成的不同阶段给予AR抑制剂AL-1576可明显抑制AR的活性.AL-1576通过阻断和减轻晶状体水肿,提高晶状体的抗氧化能力,预防和延缓晶状体混浊的发生.     

虾青素对1型糖尿病大鼠代谢性白内障的预防作用及其机制

背景 糖尿病性白内障的发病机制尚未完全明了,研究认为多种代谢通路参与其发病,其中包括氧化应激机制.研究表明虾青素有强大的抗氧化作用,可有效抑制氧化应激损伤及脂质过氧化,但目前鲜见虾青素对糖尿病性白内障防治作用研究的相关报道. 目的 观察虾青素对1型糖尿病大鼠代谢性白内障的预防作用及其机制.方法 将38只SPF级6周龄雄性SD大鼠纳入研究,其中30只大鼠用一次性腹腔内注射质量分数1％链脲佐菌素(STZ)方法制备糖尿病大鼠模型,连续3d血糖值＞16.7 mol/L者为造模成功,应用随机数字表法将造模成功的24只大鼠随机分为糖尿病模型组、低剂量虾青素组和高剂量虾青素组,正常对照组8只大鼠同法注射等容量生理盐水.低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠分别给予50mg/(kg·d)和100 mg/(kg·d)虾青素以及橄榄油和饲料混合物连续喂养3个月,糖尿病模型组大鼠以等容量橄榄油混合饲料喂养,正常对照组以正常饲料喂养.造模后用裂隙灯显微镜行眼前节照相并对晶状体混浊的严重程度分为1～5级;收集大鼠双侧眼球制备晶状体切片,采用苏木精-伊红染色法观察大鼠晶状体的组织病理学改变;采用免疫组织化学法观察晶状体中糖基化终末产物(AGEs)的阳性表达并进行定量分析;采用ELISA双抗体夹心法测定各组大鼠晶状体内AGEs质量浓度、丙二醛(MDA)浓度、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平以及谷胱甘肽(GSH)质量浓度.结果 造模后2、4、6、8、10和12周糖尿病模型组、低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠血糖水平均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),而糖尿病模型组、低剂量虾青素组和高剂量虾青素组间大鼠血糖水平的差异均无统计学意义(均P＞0.05).正常对照组大鼠晶状体透明,为1级,糖尿病模型组晶状体混浊均为5级,不同剂量虾青素组大鼠晶状体混浊度多为3～4级.低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠晶状体匀浆内的AGEs质量浓度分别为(7.23±0.50) μg/ml和(7.01±0.37) μg/ml,MDA浓度分别为(1.43±0.22) mmol/L和(1.35±0.16)mmol/L,均低于糖尿病模型组的(7.61±0.45) μg/ml和(1.62±0.42) mmol/L,差异均有统计学意义(均P＜0.05).低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠晶状体中GSH质量浓度分别为(272.70±12.53) ng/L和(283.52±16.17) ng/L,SOD含量分别为(55.45±6.47)μmol/(min·L)和(56.73 ±5.12) μmol/(min·L),CAT含量分别为(2.91±0.41) μmol/(min· L)和(3.02±0.13) μmol/(min·L),均明显高于糖尿病模型组的(241.52±15.13) ng/L、(51.67±5.45) μmol/(min·L)和(2.72±0.27)μmol/(min·L),差异均有统计学意义(均P＜0.05),低剂量虾青素组大鼠晶状体中GSH质量浓度和SOD含量明显低于高剂量虾青素组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 虾青素能够延缓1型糖尿病大鼠代谢性白内障的发生和发展,其作用机制与其抗氧化应激反应有关.     

外源性雌二醇对去势雌性Wistar大鼠晶状体上皮细胞雌激素受体表达的影响

背景 近年的流行病学和实验研究显示雌激素对晶状体的正常代谢有保护作用,但是目前关于血清中雌激素水平对大鼠晶状体上皮细胞(LECs)雌激素受体(ER)表达影响的研究尚未见报道. 目的 观察LECs中ERα、ERβ的表达,研究不同的雌二醇给药方法对成年去势雌性Wistar大鼠晶状体代谢的影响.方法 将60只健康清洁级成年雌性Wistar大鼠分为伪手术组、去势组、去势+低剂量雌二醇点眼组、去势+高剂量雌二醇点眼组、去势+低剂量雌二醇注射组和去势+高剂量雌二醇注射组6个组,每组10只大鼠.通过大鼠卵巢切除法建立鼠去势模型,每周裂隙灯显微镜下观察各组大鼠晶状体的混浊情况.造模5个月后分别给予大鼠质量分数50％、100％苯甲酸雌二醇注射液点眼,每日4次,共6周或苯甲酸雌二醇注射液每次0.200 mg/kg、0.400 mg/kg肌内注射,每3天一次,共6周.分别于造模后5个月及给药6周后检测各组大鼠血清中雌二醇的质量浓度,给药6周后过量麻醉法处死大鼠并取其晶状体,采用免疫组织化学法检测LECs中ERα、ERβ的表达.结果 大鼠卵巢切除后各组大鼠裂隙灯显微镜下未见晶状体混浊.光学显微镜下观察,各组大鼠LECs及晶状体纤维结构均正常.术后5个月时和用药后6周各组大鼠血清雌二醇质量浓度均明显低于对照组,6个组的总体差异有统计学意义(F=15490.527,P=0.000);用药前后大鼠血清雌二醇质量浓度有明显差异(F=943.236,P=0.001).大鼠用药6周后,去势组、去势+高剂量雌二醇点眼组、去势+低剂量雌二醇注射组LECs中ERα、ERβ表达率均明显低于伪手术组;而去势+低剂量雌二醇点眼组LECs中ERα、ERβ表达率高于去势组和去势+低剂量雌二醇注射组,差异均有统计学意义(P＜0.05).去势+高剂量雌二醇注射组LECs中ERα、ERβ表达率均接近伪手术组(ERα:28.04±6.80 vs.31.30±7.11;ERβ:25.38±5.59 vs.27.75±7.13);去势组、去势+高剂量雌二醇点眼组、去势+低剂量雌二醇注射组LECs中ERα、ERβ阳性细胞平均吸光度(A)值均明显低于伪手术组,而去势+低剂量雌二醇点眼组则较去势组和去势+低剂量雌二醇注射组明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),但去势+高剂量雌二醇注射组LECs中ERα、ERβ平均A值均接近伪手术组(ERα:0.1859±0.0067 vs.0.1833±0.0087;ERβ:0.1686±0.0095 vs.0.1689±0.0059). 结论 LECs 中ERα和ERβ的表达水平与体内雌激素的水平有关.雌激素的不同给药途径对晶状体ER表达的影响不同;低剂量雌激素点眼可能优于其他高剂量雌激素给药方式.     

大鼠眼钝挫伤后晶状体上皮细胞的凋亡及Survivin基因对凋亡的影响

目的 检测大鼠眼钝挫伤后晶状体上皮细胞凋亡的特点,探讨Survivin基因对晶状体上皮细胞凋亡的影响.方法 45只成年Wistar大鼠随机选取5只作正常对照组,其余40只随机分为A组、B组、C组、D组4组,每组各10只.除正常对照组外,其余鼠均用20 g钢球打击一眼制造眼钝挫伤模型后,于1h(A组)、12 h(B组)、24h(C组)、48 h(D组)后摘出晶状体,检测晶状体上皮细胞的凋亡及Survivin基因的表达情况.结果 正常对照组及A组大鼠未检测到晶状体上皮细胞的凋亡及Survivin的表达.B组、C组、D组大鼠可见晶状体上皮细胞的凋亡,凋亡率分别为(14.54±2.98)％、(41.54±6.07)％及(25.38±4.72)％,C组细胞凋亡率最高,与B组和D组相比差异均有统计学意义(=9.19、6.64,均为P＜0.05).B组、C组、D组中均可见Survivin基因的表达,相对表达量分别为0.357±0.105、0.582±0.131及0.386±0.143.B组、C组、D组中Survivin基因的表达量均与凋亡率呈显著负相关(r分别为-0.795、-0.806、-0.832,均为P＜0.05).结论 大鼠眼钝挫伤后可见晶状体上皮细胞凋亡及Survivin基因的表达,凋亡高峰出现于钝挫伤后24h,Survivin基因可能对钝挫伤引起的晶状体上皮细胞凋亡有抑制作用.     

大鼠半乳糖性白内障模型的表现和病理特征

背景建立稳定的糖尿病性白内障动物模型是研究白内障发病机制和药物治疗的前提。目前半乳糖性白内障模型已被广泛用于相关的研究,但不同的给糖方式会导致白内障出现的时间、程度及形态的差异。目的探讨半乳糖性白内障的眼部表现和病理特征。方法56只sD大鼠按随机数字表法随机分为模型组和对照组,每组28只。模型组大鼠用质量分数50％D－半乳糖饲料喂养SD大鼠共30d,对照组大鼠给予普通饲料喂养。喂养期间隔日在裂隙灯显微镜下观察晶状体的混浊部位及其形态,并对Suryanarayana提出的晶状体混浊的分级标准进行改良。于半乳糖喂养后的第5、10、15、20、25和30天分别观察大鼠的体质量变化,上述各时间点分别获取大鼠的晶状体并制作样本切片,行苏木精一伊红染色,检测晶状体的组织病理学改变。此外分别测量晶状体的湿质量和干质量,评估晶状体内水含量的变化特点。结果实验后10～30d,模型组大鼠的体质量较对照组均明显下降,差异均有统计学意义（P〈0．05）。在喂养半乳糖的过程中,随着时间的延长,模型组大鼠晶状体均发生不同级别的皮质和核的混浊,而对照组大鼠晶状体始终透明。裂隙灯下和晶状体的组织病理学检查均表明晶状体的混浊起始于赤道部皮质纤维,逐渐向中心区皮质扩展,随后晶状体核逐渐混浊、膨胀。组织学检查示晶状体皮质纤维水肿,晶状体上皮细胞分化、脱核延迟。实验第30天,模型组大鼠晶状体的湿质量明显高于对照组,差异有统计学意义（t=138．571,P〈O．05）;模型组大鼠晶状体的干质量明显低于对照组,差异有统计学意义（t=－52．468,P〈0．05）,实验过程中模型组大鼠晶状体干湿质量比明显下降,而对照组无明显变化,各时间点2组间的差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论大鼠半乳糖性白内障模型的病程与人年龄相关性皮质性白内障的自然病程和发病机制相似。喂养50％D－半乳糖饲料造模的方法具有成模时间适中、临床分期特征明确等特点,是一种较理想的研究白内障发病机制和药物防治的模型。     

双丹明目胶囊对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜的保护作用及其机制

目的 探讨双丹明目胶囊对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜的保护作用及其机制。方法 取SPF级雄性SD大鼠40只,将大鼠随机分为8组：正常组、模型组、对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、抑制剂组和激动剂组,每组5只。正常组大鼠用普通饲料喂养,其余大鼠采用高脂乳剂连续灌胃2周建立DR模型。正常组和模型组大鼠给予生理盐水(10 mL·kg^-1)灌胃,对照组大鼠给予羟苯磺酸钙胶囊(等效给药浓度为5.8 mg·kg^-1)灌胃,高、中、低剂量组大鼠给予不同剂量(22.4 g·kg^-1、11.2 g·kg^-1、5.6 g·kg^-1)的双丹明目胶囊灌胃,分别相当于临床等效剂量的2.0倍、1.0倍、0.5倍,抑制剂组大鼠给予Sirtinol(10 mg·kg^-1)、激动剂组大鼠给予SRT1720(50 mg·kg^-1)腹腔注射。各组大鼠每天给药1次,连续12周。免疫组织化学法观察各组大鼠视网膜组织结构及STAT1、 Bim表达情况,ELISA实验和...     

外源性H2S对糖尿病大鼠晶状体透明度的影响及其作用机制

目的　探讨外源性H₂S对糖尿病大鼠晶状体透明度的影响及其作用机制。方法　取SPF级健康雄性SD大鼠15只作为实验对象。通过腹腔注射链脲佐菌素制作糖尿病大鼠模型;按随机数字表法将大鼠随机分为3组,对照组（正常大鼠）、模型组（糖尿病模型大鼠）、治疗组（糖尿病模型大鼠+NaHS处理）,每组5只。造模后,治疗组大鼠每天上午腹腔注射NaHS（5 mg·kg^-1）1次,对照组和模型组给予相同体积生理盐水,连续给药12周。12周后,在田字格十字交叉处观察各组大鼠晶状体的透明度,ELISA检测各组大鼠晶状体TNF-α、AGEs的含量。结果　给药12周后,对照组大鼠晶状体透明度良好,能够清晰看到十字交叉。模型组晶状体明显混浊,看不到十字交叉。治疗组晶状体与对照组相比,出现轻微的混浊,但与模型组相比,晶状体相对透明。对照组、模型组、治疗组大鼠晶状体组织中TNF-α浓度分别为（174.91±28.44）ng·L^-1、（283.75±44.46）ng·L^-1、（200.14±22.15）ng·L^-1,AGEs浓度分别为（302.21±49.15）ng·L^-1、（470.71±56.40）ng·L^-1、（369.90±67.86）ng·L^-1。模型组TNF-α和AGEs浓度均高于对照组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;治疗组TNF-α和AGEs浓度均低于模型组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　外源性H₂S能抑制TNF-α、AGEs的表达,从而提高糖尿病大鼠晶状体透明度。     

曲安奈德缓释剂植入脉络膜上腔防治外伤性前部增生性玻璃体视网膜病变

背景 前部增生性玻璃体视网膜病变(aPVR)是多种细胞参与的损伤修复过程,目前临床尚无常规应用于防治aPVR的药物.壳聚糖是一种新型的缓释给药载体,载药量大,药物作用时间长,成为近年来研究的热点. 目的 比较壳聚糖缓释给药系统植入脉络膜上腔与玻璃体腔注射曲安奈德(TA)防治外伤性aPVR的疗效.方法 75只健康青紫蓝兔,应用随机数字表法随机分为空白对照组、TA+壳聚糖组、TA注射组、模型对照组、正常对照组,每组15只兔(15只眼).除正常对照组外,其他各组于兔左眼距角膜缘2.5 mm处10:30～11:30位制作长为5 mm的巩膜穿孔伤,并用11号手术尖刀穿刺深约10 mm,用刀轻划兔眼虹膜睫状体部制作外伤性aPVR模型,空白对照组在脉络膜上腔植入空白壳聚糖,TA+壳聚糖组在脉络膜上腔植入壳聚糖缓释给药系统(载药1mg TA),TA注射组在玻璃体腔注射TA溶液(含1 mg TA),模型对照组仅制作外伤模型.分别于术后2、5、8周利用超声生物显微镜(UBM)观察各组睫状体增厚程度以及有无增生膜形成;术后8周过量麻醉法处死动物并制作眼部组织标本,行组织病理学检查和超微结构观察.结果 组织学检查表明,实验后8周空白对照组,TA注射组、模型对照组兔睫状体组织均明显水肿,可见炎性细胞浸润,TA+壳聚糖组兔睫状体组织水肿较轻.电子显微镜下空白对照组、模型对照组兔睫状体组织细胞器明显损伤,TA+壳聚糖组损伤减轻.UBM检查显示TA+壳聚糖组兔睫状体组织及虹膜为轻度异常,而空白对照组、TA注射组、模型对照组可见明显异常.术后2、5、8周,5个组睫状体厚度值的比较差异均有统计学意义(F=212.938、515.323、447.919,P＜0.01).与正常对照组相比,各时间点空白对照组、模型对照组、TA注射组兔睫状体组织均增厚,差异均有统计学意义(P＜0.05),而TA+壳聚糖组睫状体厚度值接近正常对照组(2周:0.484±0.075 vs.0.327±0.094;5周:0.422±0.089 vs.0.327±0.094;8周:0.418±0.085 vs.0.327±0.094),差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 载药TA壳聚糖缓释给药系统能够抑制虹膜、睫状体等的增生,防治外伤性aPVR的形成.     

茶多酚对紫外线诱导大鼠晶状体上皮细胞中Caveolin-1表达的影响

观察茶多酚(tea polyphenols,TP)对紫外线诱导的大鼠晶状体上皮细胞中Caveolin-1表达的影响。方法:采用离体晶状体培养技术,通过紫外线照射氧化损伤法,建立实验性白内障晶状体模型,设置空白对照组、紫外线照射组和实验组(即紫外线照射+TP组),实验组按TP的浓度分为4个亚组,即0.02,0.2,2和20mg/L,分别于6,12,24和48h取样,运用免疫组织化学法染色计数晶状体上皮细胞中Caveolin-1阳性细胞,并运用Western-blot免疫印迹分析晶状体上皮细胞中Caveolin-1表达量的变化。结果:不同时段各组晶状体上皮细胞Caveolin-1阳性表达率和表达量的比较,各实验组与紫外线对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),不同时段实验组晶状体上皮细胞阳性表达明显高于紫外线照射组,实验组的晶状体混浊程度明显低于紫外线照射组。0.02mg/L TP实验组与空白对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);其余实验组与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TP可以抑制紫外线诱导的晶状体上皮细胞Caveolin-1表达的减少,其中0.02mg/L TP对Caveolin-1的作用最强。     

Strabisme Alternant - Etude clinique - traitement

The author defines motor and sensory alternation: the term alternation should not be used in isolation, it should always be accompanied by the name of the parameter concerned. Sensory alternation is always found together with motor alternation but the reverse is not true.The examining criteria for a diagnosis of sensory alternation are given, sensory alternation must not be confused with alternating inhibition. Working from clinical observations of cases of motor alternating strabismus, the author selects 2 types of binocular sensory relations which allow one to differentiate between:- cases of primary alternating strabismus- cases of secondary alternating strabismusThese forms will develop in different ways; in both cases a cure is possible providing that the right treatment is prescribed and once prescribed carefully followed, etc. It is always a case of serious forms of strabismus whose developmental period is spread over several years.According to the authors, the frequency of cases of true primary strabismus is from 1–3%, the frequency of cases of secondary alternating strabismus varies according to the type of therapy practised on cases of monocular strabismus with amblyopia. These latter will become cases of alternating strabismus under the influence of certain types of therapy carried out over several years (penalization, rocking, alternated occlusion, etc...).Experimental data on kittens confirm clinical data; kittens placed in abnormal environments during the sensitive period will show modification in the distribution of cortical cells and the absence of binocular cells (either because the excitation of the two eyes was not simultaneous, or not identical: artificial strabismus, occlusion, opaque glasses). This disturbances become irreversible after a certain period of exposure (a function of age, length of exposure, etc...).It is thus necessary to bear in mind: 1) the iatrogenic risks of certain orthoptic treatments, 2) the necessity for a binocular form of treatment as soon as possible, as once a certain stage is passed, cortical plasticity diminishes and the elaboration of normal binocular relations becomes impossible.

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Effects of Adenosine Agonists on Intraocular Pressure and Aqueous Humor Dynamics in Cynomolgus Monkeys

The effects of single or multiple topical doses of the relatively selective A₁adenosine receptor agonists (R)-phenylisopropyladenosine (R-PIA) and N⁶-cyclohexyladenosine (CHA) on intraocular pressure (IOP), aqueous humor flow (AHF) and outflow facility were investigated in ocular normotensive cynomolgus monkeys. IOP and AHF were determined, under ketamine anesthesia, by Goldmann applanation tonometry and fluorophotometry, respectively. Total outflow facility was determined by anterior chamber perfusion under pentobarbital anesthesia. A single unilateral topical application of R-PIA (20–250 μg) or CHA (20–500 μg) produced ocular hypertension (maximum rise=4.9 or 3.5 mmHg) within 30 min, followed by ocular hypotension (maximum fall=2.1 or 3.6 mmHg) from 2–6 hr. The relatively selective adenosine A₂antagonist 3,7-dimethyl-1-propargylxanthine (DMPX, 320 μg) inhibited the early hypertension, without influencing the hypotension. Neither 100 μg R-PIA nor 500 μg CHA clearly altered AHF. Total outflow facility was increased by 71% 3 hr after 100 μg R-PIA. In conclusion, the early ocular hypertension produced by topical adenosine agonists in cynomolgus monkeys is associated with the activation of adenosine A₂receptors, while the subsequent hypotension appears to be mediated by adenosine A₁receptors and results primarily from increased outflow facility.