卵巢浆液性囊腺癌化疗耐药和化疗敏感组织中的miRNAs差异表达谱检测及生物信息学分析

目的:寻找卵巢浆液性囊腺癌化疗耐药及化疗敏感组织中microRNA的差异表达,为研究上皮性卵巢癌化疗耐药产生的分子机制及逆转其化疗耐药提供理论基础和依据.方法:首先,应用microRNA表达谱基因芯片寻找卵巢浆液性囊腺癌化疗耐药及化疗敏感组织中差异表达的microRNAs;其次,选取部分差异表达的microRNAs应用RT-PCR实验检测技术在扩大的组织样本中进行验证;最后,运用生物信息学技术对符合要求的microRNAs进行相关生物信息学分析.结果:在microRNA表达谱基因芯片中筛选出与卵巢浆液性囊腺癌化疗耐药相关的miR-27a-3p、miR-141-3p、miR-200b-3p等17个表达上调的miRNAs和miR-93-3p、 miR-497-5p、miR-675-3p等15个表达下调的miRNAs.上调miRNAs预测的靶基因GO(BP模块)分析结果显示凋亡信号通路、Notch信号通路和凋亡过程,KEGG Pathway分析结果显示Wnt信号通路、PI3K-Akt信号通路和ErbB信号通路可能与化疗耐药存在相关性.下调miRNAs预测的靶基因GO(BP模块)分析结果显示负调控凋亡过程、Wnt信号通路生物学过程,KEGG Pathway分析结果显示PI3K-Akt信号通路、细胞循环可能与化疗耐药存在相关性.结论:MicroRNA表达谱基因芯片及生物信息学技术能为研究上皮性卵巢癌化疗耐药产生机制提供新的思路.miR-27a-3p、miR-141-3p、miR-200b-3p、miR-93-3p、miR--p、miR--p可能分别通过调控靶基因PRKCB、MAPK、PAK、PRKAA、CCNE、IGFR参与卵巢浆液性囊腺癌化疗耐药.     

miR-409-3 p调控靶基因Beclin-1抑制小细胞肺癌细胞的自噬进而抑制其生长和转移

目的:探究miR-409-3p及其靶基因对小细胞肺癌细胞自噬、生长和转移的影响.方法:qRT-PCR检测miR-409-3p在HPAEpiC、SBC-5、NCI-H446、HOP-92细胞中的表达,SBC-5细胞中转染miR-409-3p mimic和miR-NC,CCK8法检测转染后细胞增殖,Transwell小室法...     

miR-296在卵巢癌中的表达及其靶基因的预测研究

目的 观察miR-296在卵巢癌中的表达及其靶基因的预测.方法 收集卵巢癌患者组织样本22例和妇科活检为正常的样本22例,在提取RNA后进行RNA纯度检测,进而检测miR-296在卵巢癌中的表达;在卵巢癌细胞中稳定转入高表达miR-296的质粒,miRNA芯片进行靶基因检测.结果 卵巢癌组织中miR-296高表达,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.001).在卵巢癌细胞系中,当高表达miR-296时,microRNA143和microRNA215在转染组中高表达,microRNA96、microRNA551b、microRNA502-3p低表达.结论 miR-296在卵巢癌中高表达,且其潜在的靶基因有可能作为临床卵巢癌诊断的标志.     

miR-409-3p通过抑制LHX2调控VEGF/VEGFR2信号通路促进前列腺癌细胞凋亡、抑制细胞增殖

目的:探讨微小RNA-409-3p（microRNA-409-3p,miR-409-3p）对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法:qRT-PCR与Western blot平行检测前列腺癌细胞中miR-409-3p与LIM同源框基因2（LIM-homeobox gene 2,LHX2）的表达;CCK-8实验检测miR-409-3p过表达对前列腺癌细胞增殖能力的影响,以及LHX2过表达对前列腺癌细胞增殖能力的恢复作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因检测miR-409-3p与LHX2的靶向作用关系;Western blot检测细胞中LHX2、CyclinD1、CDK4、Cleaved-caspase-3及VEGF/VEGFR2信号通路相关蛋白表达。结果:miR-409-3p在前列腺癌细胞中的表达水平显著低于正常前列腺上皮细胞（P＜0.05）,LHX2的表达水平高于正常前列腺上皮细胞（P＜0.05）;miR-409-3p过表达可显著抑制前列腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡（P＜0.05）,并可上调Cleaved-caspase-3的表达（P＜0.05）,下调CyclinD1、CDK4、VEGF、t-VEGFR2、p-VEGFR2的表达（P＜0.05）;双荧光素酶实验证明miR-409-3p与LHX2存在靶向关系,miR-409-3p可负性调控LHX2的表达;LHX2过表达可部分逆转miR-409-3p对前列腺癌细胞增殖、凋亡及VEGF/VEGFR2信号通路的影响。结论:miR-409-3p可通过下调LHX2的表达而促进前列腺癌细胞凋亡、抑制细胞增殖,其作用机制可能与抑制VEGF/VEGFR2信号通路激活有关。     

miR-155-5p在肿瘤中的表达、功能以及调控作用

MicroRNA(miRNA)是一类小的、单链非编码RNA,作为与基因表达相关的调控因子参与生命过程中的一系列重要进程。目前,已有大量研究表明miRNA的表达失调可能是人类肿瘤产生和发展机制中的重要一环。多数情况下,miR-155-5p作为一种促肿瘤microRNA,可以通过作用于多个靶基因参与肿瘤的发展进程,但也有一些研究指出该miRNA也具有抑癌基因的功能。本文对miR-155-5p在各类型肿瘤中对癌细胞增殖、侵袭、迁移和耐药的影响,以及作为可能的潜在标志物在协助诊断方面的价值作一综述。     

miR-363-3p和miR-5100在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨小分子RNA(microRNA)miR-363-3p 和miR-5100在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义.方法:利用荧光定量PCR的方法,检测肿瘤组织、癌旁组织及远离肿瘤的正常组织中致癌基因Myc的mRNA 和miR-363-3p、miR-5100的表达,然后分析miR-363-3p 和miR-5100与临床病理特征之间的相关性.结果:Myc在肿瘤组织中表达明显升高;miR-363-3p在肺癌组织中的表达明显低于正常组织(P<0.001),而在癌旁组织中的表达却远远高于正常组织(P<0.05);miR-5100在肺癌组织中的表达显著地高于正常组织(P<0.001),并且癌旁组织中的表达也高于正常组织(P<0.05).临床相关性分析显示,miR-363-3p的表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.001),miR-5100的表达与临床分期也呈正相关性(P<0.05).结论:miR-363-3p 和miR-5100可能参与了非小细胞肺癌早期的发生和转移,并可能作为早期诊断和预后的分子标志物.     

microRNA-613在恶性肿瘤中的研究进展

微小RNA（microRNA,miRNA）作为一种在恶性肿瘤发生中起到非常重要作用的短链非编码RNA,通过与其靶基因的特异性结合从转录后水平调控肿瘤相关基因的表达。微小RNA-613（microRNA-613,miR-613）定位在人染色体12p13.1,通过对靶基因的调控,参与肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、癌周浸润等恶性进程的调控。近年来研究表明,miR-613在多种肿瘤中异常表达并与肿瘤的临床特征及预后密切相关。鉴于其在恶性肿瘤中的重要作用,miR-613或可成为分子靶向治疗的新靶点。     

miR-10a-5p基因甲基化对卵巢癌铂类耐药的影响

目的 卵巢癌是死亡率最高的妇科肿瘤,较强的化疗耐药性是其预后差的主要原因之一,为了阐明卵巢癌对铂类药物的耐药机制,本研究探讨miRNA基因的甲基化水平对卵巢癌铂类耐药的影响.方法 将卵巢癌组织分为敏感组和耐药组,每组各3例;采用基因芯片技术,对比分析了两组微RNA(microRNA,miRNA)的表达差异;采用实时荧光定量PCR,分别在6例敏感和3例耐药组织、铂类药物敏感(CoC1)和耐药的卵巢癌细胞系(CoC1/DDP),检测了候选miRNA的表达差异;应用Massarray技术,检测敏感组织(15例)与耐药组织(6例)中miRNA基因启动子的甲基化差异;应用生物信息学分析,鉴定目标miRNA的潜在靶基因.结果 以铂类药物敏感的卵巢癌组织样本为对照,利用基因芯片筛选,鉴定了6条在耐药组织样本中出现表达上调的miRNA(miR-493-3p、miR-10a-5 p、miR-16-2-3p、miR-1248、miR-451a、miR-628-3p)和6条表达下调的miRNA(miR-509-3p、miR-1197、miR-376a-3p、miR-1273a、miR-550a-3p、miR-19b-3p).组织验证发现,miR-509-3p、miR-493-3p、miR-10a-5p、miR-16-2-3p和miR-451a,与芯片结果一致;培养细胞研究发现,4条miRNA的表达调控方式与组织芯片结果一致,miR-10a-5p、miR-16-2-3p、miR-1248和miR-628-3p在耐药细胞系中高表达.进一步研究发现,与敏感肿瘤组织相比,耐药组织中miR-10a-5p基因启动子的甲基化水平出现显著降低,P=0.04.结合生物信息学预测HOXA1和USF2为miR-10a-5p与耐药相关的靶基因.结论 与敏感组相比,耐药组miR-10a-5p基因启动子甲基化水平显著降低,miR-10a-5p表达升高,通过抑制 HOXA1和USF2,抑制细胞凋亡,导致铂类化疗药物耐受.     

miR-21作用于PTEN与肿瘤耐药关系的研究进展

miRNA(microRNA)是一类非编码的微小RNA,其成熟体通过与靶mRNA 3' 端非编码区特异性结合,可在翻译和转录后水平调控靶基因的表达。有研究表明miRNA与细胞的发展、分化、凋亡和增殖有着密切的关系。miR-21(microRNA-21)作为miRNA的一个重要分子,在肿瘤的形成和耐药中发挥着重要作用。在众多耐药肿瘤细胞中,miR-21通过下调靶基因PTEN从而抑制肿瘤细胞的凋亡,增加肿瘤细胞的生长、转移和侵袭。本文就miR-21通过作于其靶基因PTEN与肿瘤耐药的关系作一综述。     

miR-199a在消化系统肿瘤中的相关研究进展

microRNA（miRNA）是一类内源性非编码短链RNA。研究发现miRNA具有癌基因或抑癌基因样作用,参与多种恶性肿瘤的演进,是肿瘤发生、发展过程中的重要分子,其中miR-199a最受关注。miR-199a在消化系统肿瘤中表达上调,发挥着类似于癌基因的作用。miR-199a通过对靶基因的调控,增强肿瘤细胞的增殖、浸润及转移能力,且与消化系统肿瘤患者的无复发生存时间与总生存时间密切相关。体外研究证实,抑制miR-199a表达或阻碍其与靶基因的相互作用在消化系统肿瘤的治疗中具有广阔的应用前景。本文就miR-199a在消化系统肿瘤的调控机制、增殖与凋亡、侵袭、耐药与转移中的 作用,及其临床价值作一综述。     

miR-454-3p在恶性肿瘤中的研究进展

近年来,越来越多的国内外研究显示微小RNA（microRNA,miRNA）与恶性肿瘤的发生、发展过程紧密相连。因此,miRNA成为目前肿瘤研究的新热点。miR-454-3p不仅在许多恶性肿瘤中异常表达,同时也发挥着重要作用。本文就miR-454-3p在各种恶性肿瘤中的表达、作用以及调控机制作一综述。     

MicroRNA-409 suppresses tumour cell invasion and metastasis by directly targeting radixin in gastric cancers

Emerging evidence has shown that aberrantly expressed microRNAs (miRNAs) are highly associated with tumour development and progression. However, little is known about the potential role of miRNAs in gastric cancer (GC) metastasis. In this study, miR-409-3p was found to be downregulated frequently in human GCs, and its expression was significantly associated with tumor-node-metastasis (TNM) stage and lymph node metastasis. Enforced expression of miR-409 in GC cells significantly reduced their migration and invasion in vitro and their capacity to develop distal pulmonary metastases and peritoneal dissemination in vivo. Moreover, we found that miR-409 exerted its function predominantly through the mature miR-409-3p, but not miR-409-5p. Microarray and bioinformatics analysis identified the pro-metastatic gene radixin (RDX) as a potential miR-409-3p target. Further studies confirmed that miR-409-3p suppressed the expression of RDX by directly binding to its 3'-untranslated region. Silencing of RDX by small interfering RNAs phenocopied the effects of miR-409 overexpression, whereas restoration of RDX in miR-409-overexpressed GC cells reversed the suppressive effects of miR-409. Taken together, these results demonstrate that miR-409 suppresses GC cell invasion and metastasis by directly targeting RDX and that patients with downregulated miR-409-3p are prone to lymph node metastasis.     

miR-17-5p 在肿瘤中作用的研究进展*

微小RNA （microRNA,miRNA ）作为生物体内一种重要的基因调控分子,其异常表达与人类多种疾病密切相关。近年来,miRNA 在多种肿瘤中起着抑癌基因或是致癌基因的作用,因此,miRNA 已成为肿瘤学研究的新方向。miR-17- 5p 作为miR-17～92簇的一员,是近年来疾病研究的热点,多种肿瘤发生发展中均有涉及。本文主要对miR-17- 5p 的基本特征及其在肿瘤中的作用进行综述。      

miR-409-3p靶向调控RRM2抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的:探究微小RNA-409-3p(miR-409-3p)对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测人永生化鼻咽上皮细胞(NP69)、鼻咽癌细胞5-8F、6-10B中miR-409-3p、核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)的表达差异;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测miR-409-3p过表达或RRM2过表达对6-10B细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测miR-409-3p过表达或RRM2过表达对6-10B细胞迁移及侵袭的影响。双荧光素酶报告实验与Western blot测定miR-409-3p与RRM2在6-10B细胞中的调控关系;Western blot检测c-Myc、细胞周期蛋白1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达量。结果:与NP69细胞相比,5-8F、6-10B细胞中miR-409-3p的表达水平显著降低(P<0.05),RRM2的表达水平显著升高(P<0.05);miR-409-3p过表达后细胞存活率显著降低(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),c-Myc、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-409-3p能够靶向结合RRM2,增强miR-409-3p的表达后6-10B细胞中RRM2的表达下调(P<0.05);RRM2过表达能够明显减弱miR-409-3p过表达对6-10B细胞增殖、迁移及侵袭能力的抑制作用(P<0.05)。结论:miR-409-3p可能通过负向调控RRM2的表达从而抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。     

ceRNA调控miR-145-5p介导肿瘤发生发展的研究进展

miR-145-5p是一种微小RNA分子,基因定位于染色体5q32.1,参与恶性肿瘤的发生发展。竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)与mRNA竞争结合miRNA结合位点,进而调控miRNA的作用,可能参与调控肿瘤的生物学特性。因此,本文就ceRNA靶向调控miRNA-145-5p与肿瘤的发生发展作一综述。