浒苔多糖对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究浒苔多糖对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用水提法提取浒苔多糖,除蛋白后用DE-52离子交换柱进行纯化。用MTT法检测纯化的浒苔多糖对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用。结果纯化的浒苔多糖能明显改善H2O2导致的细胞损伤,与H2O2处理组相比,浒苔多糖100,200和300μg/mL组可使细胞存活率升高。结论浒苔多糖对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。     

卷柏总黄酮对H_2O_2所致PC12细胞损伤的保护作用

目的观察卷柏总黄酮对H2O2所致PC12细胞损伤的保护作用。方法用H2O2损伤PC12细胞建立氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞存活率;分光光度法测定LDH漏出量,检测细胞损伤程度;硫代巴比妥酸法测定MDA含量;黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。结果卷柏总黄酮能明显改善H2O2诱导的细胞损伤,与模型组相比,可使细胞存活率升高,降低LDH漏出量,降低MDA含量,提高SOD活性。结论卷柏总黄酮对H2O2所致PC12细胞损伤具有明显的保护作用。     

灯盏乙素对过氧化氢致PC12细胞损伤的抗氧化作用

目的研究灯盏乙素对过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法建立H2O2致PC12细胞损伤模型,倒置相差显微镜下进行一般形态学观察,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果100μmol/L H2O2诱导PC12细胞4 h,细胞呈现明显损伤形态,LDH释放量增加,细胞培养液和细胞内MDA含量升高,SOD活性降低。灯盏乙素可明显改善形态学损伤,显著降低LDH释放量、细胞培养液及细胞内MDA含量,提高SOD活性。结论灯盏乙素对H2O2诱导PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力有关。     

原花青素对H2O2引起PC12细胞的内质网应激损伤的保护作用

目的：研究H2O2诱导PC12细胞的内质网应激损伤作用及原花青素对其预防作用。方法：H2O2 100μmol/L 诱导PC12细胞损伤18小时复制阿尔茨海默病模型（AD）,原花青素40mg/L、SB203580 10μmol/L、Tempol 800μmol/L于造模前30min预处理后,RT-PCR检测BiP/GRP-78 mRNA水平变化;流式细胞术检测细胞内反应氧产物（ROS）阳性细胞生成率,计算平均荧光强度。结果：H2O2 100μmol/L 诱导PC12细胞损伤后BiP/GRP-78 mRNA表达显著增高,ROS生成增加;原花青素40mg/L可显著降低BiP/GRP-78 mRNA水平（P〈0.01）,减少细胞内ROS生成（P〈0.01）。结论：原花青素可减轻H2O2引起PC12细胞的内质网应激损伤。     

ERK1/2介导H_2O_2预处理对抗氧化应激损伤的保护作用

目的探讨H2O2预处理能否激活ERK1/2及ERK1/2在H2O2预处理引起的适应性细胞保护中的作用。方法在PC12细胞,建立H2O2预处理对抗高浓度H2O2诱导细胞损伤的实验模型。应用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫印迹法(Western blot)测定ERK1/2蛋白的表达及procaspase-3的表达。结果100μmol.L-1H2O2预处理PC12细胞90min能明显地保护PC12细胞对抗300μmol.L-1H2O2引起的损伤,使细胞存活率增加,细胞凋亡率降低及procaspase-3增多。H2O2预处理对ERK1/2具有明显的激活作用:诱导胞质ERK1/2磷酸化及促进其核转移。在H2O2预处理前30min应用ERK1/2抑制剂UO126(10μmol.L-1)可明显地阻断H2O2预处理的抗细胞毒性及抗细胞凋亡作用。结论H2O2预处理能激活ERK1/2,ERK1/2介导H2O2预处理的适应性细胞保护作用。     

H_2O_2预处理对PC12细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用

目的　探讨H2 O2 预处理对PC12细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用及与脑源性神经营养因子 (brain de rivedneurotrophicfactor,BDNF)的关系。 方法　采用MTT法检测细胞活力 ,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡 ,间接免疫荧光流式细胞术检测细胞BDNF的表达。结果　PC12细胞经 10 μmol·L-1H2 O2 预处理 90min后 ,2 0～ 6 0 μmol·L-1H2 O2 对PC12细胞生长的抑制程度明显下降 ,H2 O2 (2 0、30μmol·L-1)对PC12细胞凋亡的诱导作用明显受到抑制 ,BD NF的表达强度增强。结论　H2 O2 预处理对PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用 ,其作用机制可能与增加脑源性神经营养因子表达有关     

大豆异黄酮活性组分对H2O2诱导的PC12细胞损伤的影响

目的:探讨大豆异黄酮活性组分对H2 O2 诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:以H2 O2 损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型,采用光学显微镜观察细胞形态,MTT法判断细胞的存活率,LDH法检测细胞的损伤程度。结果:不同浓度大豆异黄酮能明显改善H2 O2 导致的细胞甲瓒减少,大豆异黄酮处理组细胞存活率明显高于H2 O2 处理组(P <0 .0 1) ;而LDH漏出率则明显低于H2 O2 处理组(P <0 .0 5 )。结论:大豆异黄酮活性组分对H2 O2 诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。     

三种中药活性部位对H2O2致PC12细胞损伤保护作用的比较研究

目的：比较三种中药有效部位人参皂苷、葛根黄酮和麦冬皂苷对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法：用H2O2诱导PC12细胞氧化损伤,用MTT法测定细胞的存活率,黄嘌呤氧化酶法测定培养液中超氧化物歧化酶（SOD）活性,硫代巴比妥酸法测定培养液中丙二醛（MDA）含量,Griess法测定培养液中NO含量。结果：在人参皂苷、葛根黄酮、麦冬皂苷三种中药有效组分中,葛根黄酮对H2O2氧化损伤的PC12细胞的保护作用最强,人参皂苷和麦冬皂苷较弱,且强度接近。葛根黄酮提高SOD活性的活性最强,麦冬皂苷次之,人参皂苷较弱。降低MDA的作用强度顺序为葛根黄酮〉人参皂苷〉麦冬黄酮。葛根黄酮减少NO生成的作用远强于人参皂苷,麦冬皂苷无此作用。结论：人参皂苷、葛根黄酮、麦冬皂苷均可保护PC12细胞免受H2O2的氧化损伤,该作用的强弱与它们提高SOD活性、减少脂质过氧化和NO产生的作用强弱有关。葛根黄酮的作用在三种有效组分中最强。     

槲皮素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护效果与机制

目的研究槲皮素(quercetin)对PC12细胞增殖的影响以及降低H2O2损伤PC12的效果并初步探讨其机制。方法通过MTT比色法检测槲皮素对PC12细胞增殖的影响,并用H2O2诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,通过MTT和LDH比色法以及TUNEL法检测分析槲皮素保护PC12细胞免受H2O2损伤的效果;对比分析槲皮素保护组和对照组PC12细胞内ROS水平和MDA的含量检测抗氧化的效果;比较分析SOD、CAT、GSH-PX活性初步探讨槲皮素的抗氧化机制。结果检测浓度范围内槲皮素对PC12细胞没有毒性;通过提高细胞内SOD、CAT和GSH-PX活性,槲皮素能够降低细胞内活性氧水平,减少MDA的产生,保护H2O2对PC12细胞的氧化损伤。结论槲皮素对PC12细胞没有毒性,能够通过减弱H2O2产生的活性氧保护PC12细胞。     

添加VB1后安神补脑液对神经细胞的保护作用

目的:通过研究含VB1的全方安神补脑液、不含VB1的安神补脑液、VB1液三种药液对H2O2诱导损伤PC12细胞的保护作用,探讨添加VB1后的全方安神补脑液对神经的保护作用。方法:利用H2O2诱导损伤PC12神经细胞,通过MTT法检测细胞存活率,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量,观察安神补脑液对PC12神经细胞损伤的保护作用。结果:三种药液对PC12神经细胞存活率均无显著影响,对H2O2诱导损伤的PC12细胞均具有保护作用。添加VB1后的全方安神补脑液对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用优于不含VB1的安神补脑液及VB1药液。结论:添加VB1后的全方安神补脑液能增强其对神经细胞的保护作用。     

二氢石蒜碱对过氧化氢损伤的PC12细胞的保护作用

目的:探讨二氢石蒜碱(DL)对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的影响及其可能机制。方法:用H2O2(200μmol.L-1)处理PC12细胞建立氧化应激模型,并加入二氢石蒜碱预处理作为保护。噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞存活率和细胞损伤程度,利用荧光探针DCFH-DA和JC-1分别检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位。结果:H2O2作用于PC12细胞后,细胞存活率下降,LDH活性和ROS含量增高,线粒体膜电位降低,与正常对照组比较具有显著性差异(P<0.01);10-7～10-5mol.L-1DL预处理后,细胞存活率提高,LDH和ROS变低,线粒体膜电位回升,且在一定范围呈剂量依赖性。结论:DL对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与减少ROS产生和稳定线粒体膜电位有关。     

姜黄素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护作用

目的　探讨姜黄素 (curcumin ,Cur)对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用。方法　以H2 O2 损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型 ,采用甲氮甲唑蓝 (3 [4 ,5 dimethylthia zol 2 yl] 2 ,5diphenyltetrazoliumbromide ,MTT)法检测细胞增殖状况 ,碘化丙啶 (Propidiumiodide,PI)染色流式细胞术(flowcytometry ,FCM )检测细胞凋亡 ,罗丹明 12 3(Rho damine12 3,Rh12 3)染色FCM检测细胞线粒体膜电位 (mito chondrialpotentialmembrane ,△Ψm) ,双氢罗丹明 12 3(Dihy drohodamine12 3,DHR)染色FCM检测细胞内活性氧 (reac tiveoxygenspecies,ROS)的含量。 结果　 2 0和 4 0 μmol·L-1Cur均可使 2 5～ 4 0 0 μmol·L-1H2 O2 作用 2 4h后对PC12细胞生长的抑制率下降 ,可明显抑制 10 0和 2 0 0 μmo·L-1H2 O2 作用 2 4h后对PC12细胞凋亡的诱导作用和对PC12细胞△Ψm的降低作用 ,可明显降低 10 0和 2 0 0 μmol·L-1H2 O2 作用 12h后细胞内ROS的含量。结论　Cur对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用 ,其机制可能与降低细胞内ROS的含量 ,进而抑制△Ψm的降低有关。     

阿魏酸钠对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用的探讨

目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法　在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par 4蛋白表达和Caspase 3P2 0活性片段 ,用比色法检测Caspase 3相对活性。 结果　不同剂量SF预处理 1h可提高PC12细胞的存活率 ,降低 par 4和cas pase 3的mRNA表达以及Par 4的蛋白表达 ,Caspase 3P2 0活性片段和Caspase 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论　SF可剂量依赖性地对抗H2 O2 的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par 4表达有关 ,与Caspase 3的关系尚需进一步探讨     

iNOS和COX-2在过氧化氢预处理诱导的适应性细胞保护中的作用

目的探讨H2O2预处理对PC12细胞iNOS与COX-2蛋白表达的影响及其在适应性细胞保护中的作用。方法在PC12细胞建立H2O2预处理对抗H2O2诱导细胞凋亡的实验模型,采用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞仪(FCM)检测iNOS与COX-2蛋白表达水平。结果用10μmol.L-1H2O2预处理PC12细胞90min可明显地抑制20～100μmol.L-1H2O2作用24h后引起的细胞毒性和细胞凋亡,并可明显地促进PC12细胞iNOS与COX-2蛋白表达;选择性iNOS抑制剂AG和COX-2抑制剂NS-398分别阻断H2O2预处理诱导的抗细胞凋亡作用。结论H2O2预处理可诱导适应性细胞保护作用,其机制之一可能与促进PC12细胞的iNOS与COX-2蛋白表达有关。     

香港远志黄酮类成分对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的:研究香港远志黄酮类成分对H2O2损伤PC12细胞的保护作用。方法:应用现代分离鉴定技术分离香港远志中黄酮类成分;96孔板培养PC12细胞24h加入100μmol的受试样品(以维生素C为对照),培养24h后加入400μmolH2O2作用2h。使用MTT法检测各组细胞活性,用自动酶标仪在570nm波长下测定各孔吸光度。结果:香港远志中黄酮类成分山柰酚-3-O-芸香糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、芒果苷、香港远志黄酮A、香港远志黄酮B具有一定的对H2O2损伤PC12细胞保护作用的活性。结论:本实验可为防治阿尔茨海默病新药的研发提供理论基础。     

西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响

目的考察西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组(空白组)、西洋参总皂苷低剂量组[低剂量组,50 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷中剂量组[中剂量组,100 mg/(kg·d)]、西洋参总皂苷高剂量组[高剂量组,200 mg/(kg·d)]和β-萘黄酮阳性药对照组[阳性药组,80 mg/(kg·d)],预处理11 d后,观察大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性、CYP1A2 mRNA表达和CYP1A2酶蛋白表达情况,研究CYP1A2特异性探针底物非那西丁在预处理大鼠体内的药动学变化。结果预处理后,大鼠肝微粒体CYP1A2活性、mRNA和蛋白表达随西洋参总皂苷剂量升高有增加趋势,非那西丁在预处理大鼠体内代谢速率加快。结论西洋参总皂苷对大鼠肝微粒体CYP1A2活性有一定诱导作用。