荧光反射薄层扫描法测定食品中黄曲霉毒素B_1的技术探讨

荧光反射薄层扫描法测定食品中黄曲霉毒素Ｂ_１的技术探讨谭雯茵，陈捷目前国内测定食品中黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＴＢ１）普遍采用薄层色谱法。此法延用已久，但由于手续繁复，用肉眼观察荧光强度进行测定，易引起系统误差，一般仅限于半定量。使用薄层扫描仪测定ＡＦＴＢ?..     

免疫亲和─荧光光度法快速测定食品中的黄曲霉毒素

黄曲霉毒素（ａｆｌａｔｏｘｉｎ,ＡＦＴ）是一组以二呋喃香豆素为基本结构的化合物。在花生、玉米、麦类等农作物中的存在形式为Ｂ１、Ｂ２、Ｇ１、Ｇ２。自６０年代末期,黄曲霉毒素的致癌性被发现后,在世界各国受到广泛关注。研究证实,ＡＦＴ的急性毒性是氰化钾的 １０倍     

启东肝癌中黄曲霉毒素白蛋白加成物水平和p53蛋白表达的研究

对３０例启东肝癌病例和１６例对照用竞争抑制放射免疫法检测血清黄曲霉毒素白蛋白加成物，７例血清ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ均阳性的手术病例的石蜡包埋组织用免疫组化法检测ｐ５３蛋白表达。结果表明，病例组黄曲霉毒素白蛋白加成物水平在１．０７～３．４６ｐｍｏｌＡＦＢ１／ｍｇ白蛋白之间，对照组在０．８５～２．９９ｐｍｏｌＡＦＢ１／ｍｇ白蛋白之间，两组比较无显著性差异。６例癌组织、４例癌旁组织ｐ５３蛋白表达阳性，且这６例阳性者黄曲霉毒素白蛋白加成物平均水平为１．８１５±０．６２２ｐｍｏｌＡＦＢ１／ｍｇ白蛋白。提示较长时间内病例和对照黄曲霉毒素暴露的蓄积剂量并无显著性差异。启东肝癌病例ｐ５３蛋白表达率很高，但引起ｐ５３高蛋白表达率的原因尚不能确定     

花生油产地9年花生油黄曲霉毒素B1监测报告

黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉产生的一类代谢产物，结构相似，均为二呋喃香豆素的衍生物，它对人类及某些动物具有很强的毒性和致癌性，其中以黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＴＢ１）的毒性和致癌性最强。花生是最容易受污染的食品之一［１］。福建省惠安县盛产花生，花生油的色、香、味均佳，但花生油中的ＡＦＴＢ１污染状况如何？引人关注。本文报道了１９９０～１９９８年惠安县花生油中ＡＦＴＢ１的监测结果。１　材料与方法样品来源　１９９０～１９９８年的花生油榨季（８～９月），派出经培训的专业人员到各乡镇主要的榨油厂，结合现场作卫生…     

昭通酱中黄曲霉毒素消长情况的探讨

昭通酱中黄曲霉毒素消长情况的探讨吴璇，王佩琼调味品在酿制过程中用霉菌制曲，其成品中有无黄曲霉毒素（ＡＦＢ＿１）及含量多少，为人们所关注。我们研究了昭通地区特产昭通酱酿制过程中ＡＦＢ＿１消长情况，报告如下：一、方法对居民自酿的酱采酱曲、酱醅、成品，按卫...     

高效液相色谱测定牛奶中黄曲霉毒素M1

黄曲霉毒素 (ａｆｌａｔｏｘｉｎ ,ＡＦＴ)是一类由真菌产生的二次毒性代谢产物 ,现已证实有数十种存在形式。由于黄曲霉毒素具有致癌、致畸及致基因突变等危害[1] ,尤其随着近年来国际贸易中非关税壁垒的广泛使用 ,世界各国包括我国在内纷纷制订了食品及牛奶中黄曲霉毒素的卫生限量标准加以控制 ,其中最低限量达 0 .0 5 μｇ/ｋｇ[2 ] 。黄曲霉毒素在牛奶及奶制品中 ,通常以Ｍ1的形式存在 ,ＡＦＴＭ1是ＡＦＴＢ1在生物体内的羟化产物 ,世界卫生组织 (ＷＨＯ)将ＡＦＴＭ1列为ⅡＢ类可疑致癌物。由于儿童和老人是牛奶消费的重要人群 ,因此加…     

黄曲霉毒素B_1抗原的构建

黄曲毒素Ｂ１是只有反应原性而无免疫原性的半抗原，不能直接刺激动物抗体，只有和牛血清蛋白（ＢＳＡ）、卵清白蛋白（ＯＶ）等载体蛋白连接后才能刺激动物产生分泌抗体，黄曲霉毒素Ｂ１抗原的构建是黄曲霉毒素Ｂ１免疫学检测研究的第一步。本文首先研究了回流温度和时间对黄曲霉毒素Ｂ１肟产生的影响，通过统计分析得到８５℃，回流２ｈ时黄曲霉毒素Ｂ１肟的产率最高，产率高达８９％。在此基础上进一步研究了黄曲霉毒素Ｂ１肟与载体蛋白—牛血清白蛋白反应的起始摩尔比对产物摩尔比的影响，随着反应起始摩尔比的增加，产物的摩尔比也稍有增加，但是增加幅度不显著，而黄曲霉毒素Ｂ１肟的利用率则随着起始摩尔比的增加而减少，选择３０∶１为黄曲霉毒素Ｂ１肟与牛血清白蛋白的反应起始摩尔比得到摩尔比为６．５∶１的黄曲霉毒素Ｂ１肟与牛血清蛋白的连接物。     

镰刀菌毒素与黄曲霉毒素的联合毒性研究--AFB1和DON的RDS实验

为了解黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）与镰刀菌毒素的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）对ＤＮＡ损伤修复的影响,用化学物质诱导的细胞增殖的变化实验,（ｒｅｐｌｉｃａｔｉｖｅ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ,ＲＤＳ）实验进行研究。结果表明：ＡＦＢ１和ＤＯＮ均可诱导细胞分化的Ｓ期ＤＡＮ的合成,并且二者间存在交互作用。结果提示：ＡＦＢ１与ＤＯＮ在肿瘤的发生中既以遗传毒性物质的形式发挥作用,又以非遗传毒性物质的形式共同发挥作用     

三种危险因素的协同致肿癌作用

为分析黄曲霉毒素，乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒在致人原发性肝细胞癌时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法，嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测，ＡＦＢ１，ＨＢＶ，ＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ，检出率分别为６７．７％，８８．２％，和１３．２％。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶ ＤＮＡ重叠检出率为５８．１％，ＨＢＶ ＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％，由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１，ＨＢＶ、     

黄曲霉毒素致肝癌的分子机制及其化学预防

本文就黄曲霉毒素的分子生物标志物、黄曲霉毒素Ｂ１与乙型肝炎病毒感染、黄曲霉毒素Ｂ１与ｐ５３基因突变、吡噻硫酮预防黄曲霉毒素Ｂ１致肝癌作用等方面的研究进展作一综述     

黄曲霉素致肝癌的分子机制及其化学预防

本文就黄曲霉毒素的分子生物标志物、黄曲霉毒素Ｂ１与乙型肝炎病毒感染、黄曲霉毒素Ｂ１与Ｐ５３基因突变、吡噻硫酮预防黄曲霉毒素Ｂ１致肝癌作用等方面的研究进展作一综述。     

转基因细胞系CHL-3A4的建立及其代谢活化作用

目的建立ＣＨＬ３Ａ４细胞系为某些遗传毒性化合物的代谢途径研究提供模型细胞系，并用于新合成化学物质的致突变性检测。方法应用ＲＴＰＣＲ和ＤＮＡ重组技术从人肝组织中克隆细胞色素Ｐ４５０３Ａ４基因的ｃＤＮＡ至ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＭ１３载体上，经限制性内切酶图谱分析和克隆片段部分序列测定，证实为ＣＹＰ３Ａ４ｃＤＮＡ。然后构建真核细胞重组表达质粒ｐＲＥＰ９３Ａ４，导入中国仓鼠ＣＨＬ细胞。结果建立了ＣＨＬ３Ａ４转基因细胞系，双核细胞微核试验证明该细胞系能代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、杂色霉菌毒素（ＳＴＣ）、环磷酰胺（ＣＰＡ）。结论所建ＣＨＬ３Ａ４细胞系确实能表达人细胞色素Ｐ４５０３Ａ４，并能代谢活化ＡＦＢ１、ＳＴＣ、ＣＰＡ。     

关于ELISA法用于啤酒黄曲霉毒素B_1检测适用性的探讨

黄曲霉毒素Ｂ1(ＡＦＢ1)是目前发现的真菌毒素中毒性最大,污染范围最广的毒素之一,能引起人类及各种动物的急性中毒死亡,可致畸、致癌和致突变。过去我们一直采用国家标准推荐的薄层色谱法(ＴＬＣ法),但该法操作繁琐。现在我们采用酶联免疫吸附法(ＥＬＩＳＡ)检测粮食、豆类发酵食品、食用油类等食品中的ＡＦＢ1取得了满意的结果,与经典的ＴＬＣ法对比结果完全一致。但由于ＥＬＩＳＡ法中酶的高度敏感性,在测定啤酒中ＡＦＢ1时必须经过特殊处理,否则易造成假阳性,作者对全区20个品种37份啤酒在检测ＡＦＢ1,时进行了对比。结果报告如下。材料…     

Psp189／veroE6细胞检测系统的建立及其在筛选霉菌毒素诱变性中的应用

采用国内尚未报道的新型穿梭质粒Ｐｓｐ１８９与非洲绿猴肾ｖｅｒｏＥ６细胞组成穿梭质粒／哺乳动物细胞诱变检测系统并成功地将其应用于食品中黄曲霉毒素Ｂ１（ＡｆａｔｏｘｉｎＢ１，ＡＦＢ１）的诱变性检测，结果表明：随着ＡＦＢ１作用质粒ＤＮＡ时间的延长，经哺乳动物细胞内复制并在宿主菌中筛选得到的突变体逐渐增加，并呈明显的剂量－反应关系，检出的突变体经０．８％琼脂糖凝胶电泳分析大多为点突变     

抗氧化剂对黄曲霉毒素染毒的转基因小鼠肝肿瘤的防护

目的研究抗氧化剂２,３叔丁基４羟基茴香醚（ＢＨＡ）对黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）染毒的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）转基因小鼠肝肿瘤发生的防护作用。方法对ＡＦＢ１染毒和未染毒的４９只转基因小鼠与４８只非转基因小鼠,测定肝醌还原酶（ＱＲ）和谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）活性、肝丙二醛（ＭＤＡ）含量、肝氧自由基浓度（ＯＦＲ）。结果染毒的转基因小鼠ＢＨＡ组肝腺瘤发生率１７％,癌变率０,显著低于普通饲料组的肝腺瘤发生率（６７％）和癌变率（２２％）。与普通饲料组比较,ＢＨＡ使肝ＯＦＲ和ＭＤＡ含量显著降低;ＢＨＡ组肝ＱＲ和ＧＳＴ活性平均升高３～７倍。结论ＢＨＡ能显著诱导肝脏生物转化Ⅱ相酶活性,清除氧自由基,抑制变异肝细胞生长,可能与抑制或延缓小鼠肝癌的发生、发展进程有关     

肝癌危险因素的相互作用研究

笔者对原发性肝癌的主要危险因素饮水污染、乙型肝炎病毒感染、黄曲霉毒素污染间相互作用的关系进行了研究。运用相对危险度函数参数簇模型（从次相加结构到超相乘结构）来拟合病例对照资料，评判何种模型为佳。本文的结果提示：肝癌发生的主要危险因素饮水污染、乙型肝炎病毒感染、黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）污染间存在协同作用；ＡＦＢ１与另两个肝癌主要危险因素乙型肝炎和饮沟塘水的联合作用似一种倾向于相加的结构，而乙型肝炎和饮沟塘水的联合作用似一种偏向于相乘的结构。不同模型间数量上的差别对病因学的解释和预防措施实践具有重要意义。     

C型肉毒素毒性评价

肉毒毒素是肉毒梭菌繁殖时产生的外毒素,是一种强烈的神经毒素。根据其抗原性不同,分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ和Ｇ型,其中仅Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ型能引起人类中毒［１］。Ｃ型肉毒素（Ｂｏ－ｔｕｌｉｎｔｙｐｅＣ）是由Ｃ型肉毒梭菌产生的一种高分子蛋白质毒素［２］,由两...     

粮食中霉菌数量与产毒量关系

对常见的几种粮食霉菌及其毒素两者之间关系进行了实验探讨,结果表明,不同的毒素含量与其产毒的霉力数量有关,并取决于该毒素适应的基质,小麦适合于产生伏马菌素（ＦＢ）,烟曲霉震颤素（ＳＴ）,杂色曲霉素（ＡＦＢ１）及黄曲霉毒素又适合于在多种粮食上产生,提示易产生毒素的粮食在贮存过程中应加强防霉措施,在制定粮食中的霉菌毒限量标准时,不同的粮食应有不同的要求。     

抗黄曲霉毒素B_1蛋黄抗体的制备及其性质的研究

将黄曲霉毒Ｂ１－牛血清白蛋白（ＡＦＢ１Ｏ—ＢＳＡ）连接物免疫注射４只（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ）产蛋鸡。研究了抗ＡＦＢ１蛋黄抗体的产生进程,除鸡Ｂ外,其它３只鸡从第一次注射抗原后的第９０天开始有较明显的抗体产生,第１３５天达到高峰,从第１６５天开始下降。在抗体产生高峰期,蛋黄抗体Ａ、Ｃ、Ｄ的间接ＥＬＩＳＡ效价分别为１∶８０００、１∶６０００、１∶６０００。以蛋黄抗体Ａ为材料,研究了抗体的特异性,结果表明：该抗体有较好的特异性。但是抗体与ＡＦＢ１的结构类似物（ＡＦＢ２、ＡＦＧ２、ＡＦＧ１、ＡＦＭ１）除ＡＦＭ１外都有不同程度的交叉反应,达到５０％的竞争抑制率时,ＡＦＢ１、ＡＦＢ２、ＡＦＧ１、ＡＦＧ２的灵敏度分别为６、２５、１２５和２４９５ｎｇ／ｍｌ。     

三种危险因素的协同致肝癌作用

为分析黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在致人原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法、嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，检出率分别为６７．７％（２１／３１）、８８．２％（６０／６８）和１３．２％（９／６８）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为５８．１％（１８／３１），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％（６／６８），由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组，３种危险因素全部阴性。结果表明，３种危险因素均与人类肝癌直接相关，并且存在着协同致癌效应