二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠内源性硫化氢体系的调节作用

目的 研究二氧化硫( SO2)对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内源性硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶( CSE)以及H2S/巯基丙酮酸转硫酶(MPST)体系的调节作用.方法 将雄性Wistar大鼠(32只)随机分为对照组、低氧组、低氧+ SO2组和低氧+天冬氨酸异羟肟酸(hydroxamate,HDX)组,每组8只.低氧处理采用常压低氧的方法,氧浓度为10％,每天低氧6h,持续21 d.对照组大鼠在常氧环境中饲养.低氧处理结束后采用右心导管法测定肺动脉平均压,采用硫电极法测定肺组织H2S含量和H2S产率,采用免疫组化法检测各组大鼠肺小动脉内膜及中膜CSE和MPST的蛋白表达.结果 低氧组大鼠肺动脉平均压较对照组高[(33.38 ±6.32) mm Hg vs(16.74±3.81) mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,P＜0.01];低氧+SO2组大鼠肺动脉平均压较低氧组低[(29.65±2.53)mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01],低氧+HDX组大鼠肺动脉平均压较低氧组高[(39.44±6.26) mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01].低氧组大鼠肺组织H2S含量[(2.02±0.43) μmol/g vs (3.11±0.42) μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(19.64±3.48) nmol/(g· min)vs(28.20±5.95) nmol/(g·min),P＜0.05]均较对照组低.给予SO2供体后,低氧+SO2组肺组织H2S含量[(2.73±0.20)μmol/g vs(2.02±0.43)μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(26.24±1.92) nmol/(g· min)vs(19.64±3.48) nmol/(g· min),P＜0.01]均较低氧组升高.当给予内源性SO2生成酶抑制剂HDX后,低氧+HDX组肺组织H2S含量[(1.64±0.23) μmol/g vs (2.02±0.43)μmol/g,P＜0.05]及肺组织H2S产率[(13.94±3.63) nmol/(g·min) vs (19.64±3.48) nmol/(g·min),P＜0.05]均较低氧组低.低氧组大鼠肺小动脉内膜[(0.31±0.02)vs(0.36±0.01),P＜0.01]及中膜[(0.27±0.01)vs (0.30±0.01),P＜0.01]中CSE蛋白表达均较对照组低.低氧+SO2组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组高[(0.35±0.02) vs (0.31 ±0.02),P＜0.01].低氧+HDX组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组低[(0.26±0.01) vs (0.31±0.02),P＜0.01].与对照组相比,低氧组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.低氧+SO2组大鼠肺小动脉中膜MPST的蛋白表达较低氧组高[(0.32±0.02) vs (0.29±0.01),P＜0.01];而与低氧组相比,低氧+ HDX组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.结论 外源性给予SO2供体可上调低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉内膜H2S生成酶CSE及肺小动脉中膜MPST蛋白表达,促进H2S生成增多,从而间接缓解低氧性肺动脉高压的形成.     

二氧化硫对实验性腹主动脉-下腔静脉分流大鼠肺动脉压力的影响

目的 研究二氧化硫( SO2)对高肺血流性肺动脉高压的调节作用.方法 25只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为对照组(n=8)、分流组(n=8)和分流+ SO2供体组(n=9).对分流组和分流+SO2供体组大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术;分流+SO2供体组大鼠每天腹腔内注射亚硫酸钠／亚硫酸氢钠( Na2SO3/NaHSO3) 85 mg·kg-1·d-1,8周后以右心导管的方法测定3组大鼠肺动脉收缩压(PASP)、肺动脉平均压(PAMP)及肺动脉舒张压(PADP).结果 分流组大鼠PASP显著高于对照组大鼠[(3.91±0.66) kPa vs (2.26±0.47) kPa,P＜0.05];分流+SO2供体组大鼠PASP显著低于分流组大鼠[(3.04±0.36) kPa vs (3.91±0.66)kPa,P＜0.05];分流+SO2供体组大鼠PASP较对照组大鼠[(3.04±0.36) kPa vs(2.26±0.47)kPa,P＜0.05]显著增高.分流组大鼠PADP较对照组大鼠显著升高[(1.81±0.45) kPa vs (1.26±0.32) kPa,P＜0.05];而分流+SO2供体组大鼠PADP与分流组大鼠比较差异无统计学意义[(1.49±0.19) kPa vs (1.81±0.45) kPa,P＞0.05].分流组大鼠PAMP显著高于对照组大鼠[(2.53±0.43) kPavs(1.60±0.36) kPa,P＜0.05];分流+SO2供体组大鼠PAMP显著低于分流组大鼠[(2.01±0.23) kPa vs(2.53±0.43)kPa,P＜0.05].分流+SO2组PAMP显著高于对照组[(2.01±0.23) kPavs (1.60±0.36) kPa,P＜0.05].结论 SO2可明显降低高肺血流大鼠的PASP和PAMP.     

低氧性肺动脉高压时内源性一氧化碳体系的研究

目的 探讨内源性血红素氧合酶／一氧化碳(HO／CO)系统在低氧性肺动脉高压大鼠体内的变化。方法 采用常压低氧大鼠肺动脉高压模型,观察低氧大鼠肺动脉平均压(mPAP)和肺组织匀浆碳氧血红蛋白(HbCO)含 量,用核酸原位杂交和免疫组织化学的方法检测低氧大鼠肺动脉血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA和HO-1蛋白的表 达。结果 低氧组大鼠mPAP为(22.00±2.31)kPa,较对照组[(16.57±2.51)kPa]增高32.77％(t=3.90,P <0.01);低氧大鼠在mPAP升高的同时,伴有肺动脉HO-1 mRNA和HO-1蛋白表达积分值增加,分别较对照组增 加82％和260％(t=3.79、5.79,P均<0.01);低氧组大鼠肺组织匀浆CO含量(16.74±0.92)nmol/μg,较对照组 (14.05±1.49)nmol／μg增高19.14％(t=5.85,P<0.01)。结论 低氧促使HO／CO系统上调,HO／CO参与了低 氧性肺动脉高压的发病机制。     

红-9-(2-羟基-3-壬基)腺嘌呤对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力和内源性腺苷的影响

目的 观察红-9-(2-羟基-3-壬基)腺嘌呤(EHNA)对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺动脉压力和内源性腺苷水平的影响,了解HPH与内源性腺苷水平的关系.方法　24只SD大鼠随机分为常氧组、低氧组和低氧+EHNA组,每组8只.低氧组和低氧+EHNA组大鼠每天置于含氧体积分数为(100±5) mL·L-1、二氧化碳体积分数<1 mL·L-1的大型玻璃箱中,在缺氧3 d后分别腹腔注射等量9 g·L-1盐水和EHNA(30 mg·kg-1·d-1)连续4 d.常氧组大鼠在自然空气条件下饲养.于实验第8天将大鼠麻醉,右颈外静脉插管,利用四道生理记录仪测定每只大鼠的平均肺动脉压(mPAP);完成压力测量后,左心室取血,采用高效液相色谱仪检测其血浆中腺苷水平.结果 低氧组mPAP水平[(16.50±2.43) mmHg,1 mmHg=0.133 kPa]及内源性腺苷水平[(24.75±3.08) mg·L-1]均显著高于常氧组[(11.25±1.75) mmHg,(11.50±2.05) mg·L-1](Pa＜0.01);低氧+EHNA组内源性腺苷水平[(8.58±1.90) mg·L-1]低于低氧组,而mPAP[(19.64±3.44) mmHg]显著高于低氧组(Pa＜0.01).结论　EHNA导致HPH大鼠肺动脉压力进一步升高,可能与其降低血浆内源性腺苷水平有关.     

外源性二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力的影响

目的探讨外源性二氧化硫(SO2)对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力的影响。方法将大鼠分为对照组、低氧组和低氧加SO2组(予亚硫酸钠/亚硫酸氢钠)。对低氧和低氧加SO2组大鼠进行低氧处理21d。低氧处理后检测各组大鼠肺动脉平均压、收缩压及舒张压,分析外源性SO2对肺动脉压力的影响。结果与对照组比较,低氧组大鼠肺动脉平均压升高127.13%;与低氧组比较,低氧加SO2组大鼠肺动脉平均压降低24.0%。与对照组比较,低氧组大鼠肺动脉收缩压升高84.93%;与低氧组比较,低氧加SO2组大鼠的肺动脉收缩压降低23.10%。与对照组比较,低氧组大鼠肺动脉舒张压升高154.59%;与低氧组比较,低氧加SO2组大鼠的肺动脉舒张压下降不明显(P=0.065)。结论外源性SO2能显著降低低氧大鼠肺动脉平均压和肺动脉收缩压,而对肺动脉舒张压的影响不显著。     

法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压及其右心室肥厚的影响

目的 探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)及其右心室肥厚的影响.方法　雄性SD大鼠24只随机分为对照组、模型组和法舒地尔干预组(干预组).采用常压间断低氧法建立大鼠HPH模型.测定各组大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI);透射电镜观察各组右心室心肌细胞超微结构变化.应用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 模型组大鼠mPAP、RVHI分别为(31.38±1.98) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)、0.47± 0.03,均明显高于对照组大鼠[(15.25±0.91) mmHg、0.25±0.02](Pa＜0.01);透射电镜显示对照组心肌细胞及毛细血内皮呈正常结构,模型组大鼠右心室心肌细胞线粒体明显增多、肿胀,嵴模糊、消失,心肌肌丝明暗带不清晰.干预组大鼠mPAP、RVHI分别为(16.63±1.53) mmHg、0.27±0.02,均显著低于模型组(Pa＜0.01).干预组大鼠右心室心肌细胞及毛细血管内皮基本正常.结论　法舒地尔对低氧所致的肺动脉高压、右心室肥厚及其心肌细胞损伤大鼠具有较好的预防和逆转作用.     

二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉胶原堆积的影响

目的 探讨二氧化硫(SO2)对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉胶原堆积的影响.方法 将雄性Wistar大鼠34只分为对照组(8只)、低氧组(8只)、低氧加SO2组(腹腔注射亚硫酸钠/亚硫酸氢钠混合液0.5 mL/d)(9只)和低氧加天冬氨酸异羟肟酸(HDX)组[腹腔注射HDX 3.7 ms/(kg·d)](9只).对低氧组、低氧加SO2组和低氧加HDX组大鼠进行低氧处理21 d,氧体积分数为(100±5)mL/L,低氧处理6 k/d.采用羟脯氨酸水平测定及天狼猩红染色法分析低氧性肺动脉高压大鼠肺组织及肺动脉胶原的变化.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 4组大鼠肺组织羟脯氨酸水平有显著性差异(F=12.363 Pa<0.01).与对照组比较,低氧组大鼠羟脯氨酸水平升高34.53%(P<0.01),随着低氧性肺动脉高压的形成,大鼠肺动脉中羟脯氨酸水平升高.与低氧组比较,低氧加SO2,组大鼠羟脯氨酸水平降低17.58%(P<0.05),低氧加HDX组大鼠羟脯氨酸水平升高21.30%(P<0.05).天狼猩红偏振光法分析显示,与对照组比较,低氧组大鼠血管壁胶原纤维明显增加;与低氧组比较,低氧加SO2组大鼠血管壁Ⅰ型胶原较少,呈红色或黄色粗纤维状,与Ⅲ型胶原伴行,低氧加HDX组大鼠血管壁胶原明显增加.结论 SO2能显著降低低氧大鼠的肺动脉胶原堆积.     

硫化氢对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉增殖细胞核抗原及Bcl-2的调节作用

目的　探讨硫化氢 (H2 S)对低氧性肺动脉高压 (HPH)大鼠肺动脉结构重建和肺动脉平滑肌细胞增殖、凋亡的调节作用。方法　选取体重 180～ 2 0 0g的健康雄性Wistar大鼠 2 4只 ,随机分为常氧组、低氧组、低氧 硫氢化钠 (NaHS)组。监测其血液动力学变化及肺动脉结构重建 ,采用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)和Bcl 2凋亡蛋白表达 ,并对肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡进行定位和半定量分析。结果　低氧组大鼠平均肺动脉压 (mPAP)明显升高 (P <0 .0 1) ,右室 / (左室 室间隔 )比值显著增加 (P <0 .0 1) ,肺动脉相对中膜厚度 (RMT)和相对中膜面积 (RMA)增加 (P均 <0 .0 1) ;NaHS可明显降低肺动脉压力及抑制肺动脉重建 (P <0 .0 1)。低氧组大鼠肺小动脉平滑肌细胞PCNA和Bcl 2凋亡蛋白表达分别较对照组增高 (P <0 .0 1) ;NaHS可明显下调肺小动脉平滑肌细胞PCNA和Bcl 2蛋白表达 (P <0 .0 1)。结论　新型气体信号分子H2 S可降低肺动脉压力 ,抑制肺动脉平滑肌细胞增殖 ,在HPH及肺血管结构重建的形成中发挥重要作用     

二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉内皮细胞炎性反应的影响

目的 探讨外源性及内源性二氧化硫(SO2)对低氧性肺动脉高压(HPH)模型中炎性反应的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为4组:对照组(n＝8)、低氧组(n＝8)、低氧加SO2组(n＝10,予外源性SO2供体Na2SO3/NaHSO3)和低氧加天冬氨酸异羟肟酸(HDX)组(n=10,予内源性SO2生成酶抑制剂HDX).对低氧组、低氧加SO2组和低氧加HDX组大鼠予低氧处理21 d,对照组大鼠置常氧环境.检测各组大鼠肺动脉平均压、肺组织匀浆中SO2水平,免疫组织化学法检测其肺小动脉内皮细胞核转录因子(NF)-κB 和细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达情况.结果 与对照组比较,低氧组大鼠肺动脉平均压升高127.13%(P<0.01),其肺组织匀浆中SO2水平降低42.64%(P<0.01),肺小动脉内皮细胞NF-κB表达阳性百分比升高303.47%(P<0.01),ICAM-1表达升高119.25%(P<0.01);与低氧组比较,低氧加 SO2组大鼠肺动脉平均压降低15.09% (P<0.05),肺组织匀浆中SO2水平升高40.54%(P<0.01),内皮细胞NF-κB表达阳性百分比降低37.71%(P<0.01),ICAM-1表达降低13.65%(P<0.01);与低氧组比较,低氧加HDX组大鼠肺动脉平均压升高13.58% (P<0.01),肺组织匀浆中SO2水平降低40.54%(P<0.01),内皮细胞NF-κB表达阳性百分比升高22.18%(P<0.01),ICAM-1表达升高11.92%(P<0.01).结论 SO2在HPH炎性反应形成过程中发挥重要的保护性调节作用.     

法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压及其肺血管结构重建的影响

目的 探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)及其肺血管结构重建的影响.方法 采用常压间断低氧法建立大鼠HPH模型.雄性SD大鼠24只,随机均分为对照组、模型组和法舒地尔干预组.测各组大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、平均颈动脉压力(mCAP)、右心室肥厚指数(RVHI);光镜下结合图像分析进行肺血管结构重建观察;透射电镜观察肺小动脉内皮细胞超微结构的变化.结果 ①模型组mPAP、RVHI、肺小动脉管壁厚度与外径比值(WT%)、管壁面积与管总面积比值(WA%)分别为(31.38±1.98)mmHg、0.47±0.03、(31.13±5.74)%、(54.93±3.34)%均明显高于对照组(15.25±0.91)mmHg、0.25±0.02、(13.24±2.03)%、(31.81±3.62)%,P均＜0.01;管腔面积与管总面积比值(LA%)为(45.07±3.34)%,明显低于对照组(68.20±3.62)%,P＜0.01;透射电镜显示模型组肺小动脉内皮细胞损伤明显,内皮细胞周围平滑肌细胞增生、肿胀,胶原纤维增生.②法舒地尔干预组mPAP、RVHI、WT%、WA%分别为(16.63±1.53)mmHg、0.27±0.02、(17.08±2.24)%、(37.30±3.69)%显著低于模型组(P＜0.01),LA%为(62.70±3.69)%明显高于模型组(P＜0.01).法舒地尔干预后肺小动脉内皮细胞损伤、平滑肌细胞及胶原纤维增生均明显减轻.③各组间mCAP差异无统计学意义(F=1.239,P＞0.05).结论 法舒地尔对低氧所致的肺动脉高压、右心室肥厚及肺血管结构重建具有较好的预防和逆转作用.     

慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管显微结构研究

目的 观察大鼠在慢性低氧环境中不同节段肺血管显微结构的变化规律，探讨其在慢性缺氧性肺动脉高压形成中的病理意义。方法 将23只Wistar大鼠随机分为对照组、低氧1周组、低氧2周组。以右心导管法测定肺动脉压力；对肺组织进行弹力纤维染色，计数各型肺内动脉百分比；应用计算机图像分析系统测定分别与三级呼吸道伴行的肺动脉的相对中膜面积（RMA）、厚度（RMT）及血管壁内弹力层（IEL）厚度。结果 低氧2周组大鼠肺动脉平均压明显高于对照组及低氧1周组，低氧1周组肺动脉平均压明显高于对照组；低氧2周组肌型动脉百分比（MA％）、三组动脉RMA、RMT均明显高于对照组及低氧1周组，低氧1周组MA％、肺泡水平动脉RMA、RMT明显高于对照组（P均＜0．05）。与对照线相比，低氧2周组和1周组肺内动脉血管壁IEL均明显减少（P均＜0．05）。多因素相关分析表明，肺动脉平均压与肺泡水平动脉RMA、RMT呈正相关；与肺泡水平肺动脉血管壁IEL厚度呈负相关（P均＜0．05）。结论 慢性低氧环境中大鼠肺血管结构呈现节段依赖性的重构规律，这一改变是缺氧性肺动脉高压形成的重要病理基础。     

硫化氢对大鼠高肺血流性肺血管重构机制影响的研究

目的 探讨硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）对大鼠高肺血流性肺血管重构的影响及其机制。方法 雄性SD大鼠32只,随机分为分流组、分流＋硫氢化钠（sodiumhydrosulfide,NaHS）组、对照组和对照＋NaHS组。分流组和分流＋NaHS组大鼠经腹主动脉一下腔静脉穿刺建立高肺血流动物模型。用敏感硫电极法测定大鼠肺组织H2S含量;计算大鼠肺肌型动脉（muscularized artery,MA）的百分比及MA的相对中膜厚度（relativemedialthickness,RMT）;应用蛋白质免疫印迹技术（Westernblot）定量分析大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen．PCNA）、细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERKl）、磷酸化细胞外信号调节激酶（phosphorylation extracellular signal-regulated kinase,P-ERK）;应用免疫组织化学法对PCNA进行定位及半定量分析。结果 分流11周后,与对照组比较,分流组大鼠肺组织H2S含量降低（P〈0．05）、肺动脉MA百分比及RMT升高（P〈0．05）;肺动脉PCNA阳性百分比、P-ERK／ERK1增高（P均〈0．01）。与分流组比较,分流＋NaHS组MA百分比及RMT低于分流组（P〈0．01）;肺动脉PCNA阳性百分比、肺动脉P-ERK／ERK1低于分流组（P〈0．01）。结论 H2S通过丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）／ERK信号转导通路调节大鼠高肺血流性肺血管重构。     

肾上腺髓质素和升压素在左向右分流肺血管重构中的变化及作用途径研究

目的 探讨肾上腺髓质素(ADM)及肾上腺升压素(ADT)在左向右分流肺血管重构中的变化及作用途径.方法 健康雄性Wistar大鼠21只,分为实验组(n=9)和对照组(n=12),实验组大鼠右侧颈总动脉与颈外静脉用套管连接,对照组行假手术.术后12周,测取大鼠肺动脉平均压(mPAP),右心室/(室间隔+左心室)[RV/(Lv+SP)]重量比,中等肺动脉壁厚度所占管径百分比(MT%).免疫组化和Western blotting测定ADM、ADT在大鼠肺组织的分布及相对含量.RT-PCR检测大鼠肺组织ADM、ADT、应力活化蛋白激酶(SAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK1)基因表达.结果 ①实验组大鼠术后mPAP、RV/(LV+SP)和MT%比例明显高于对照组(P均＜0.001).②累积光密度(A)结果显示实验组大鼠肺内ADM含量高于对照组而ADT含量低于对照组(P均＜0.001).③实验组大鼠肺组织ADM、SAPK、ERKlmRNA表达高于对照组(P＜0.01和P＜0.001),ADTmRNA表达低于对照组(P＜0.001).结论 ①左向右分流肺血管重构过程中存在来自同一前体的ADM与ADT之间的分子内调控现象;②左向右分流肺血管重构中激活了丝裂原活化蛋白激酶信号途径,ADM可能通过抑制丝裂原活化蛋白激酶信号途径来延缓肺动脉高压的形成和发展.     

电压门控性钾通道在大鼠高肺血流性肺动脉高压中的变化

目的 观察左向右分流致高肺血流肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞( PASMC)膜上电压门控性钾通道(Kv通道)电生理改变,并分析其在肺动脉高压形成过程中的作用.方法 SD大鼠40只,随机分成3组,正常对照组10只,假手术组10只,模型组20只.分别测定肺动脉平均压(mPAP)和右心室肥厚指数(RVHI),急性酶分离法分离出单个PASMC,应用膜片钳技术测定各组大鼠PASMC上Kv通道静息膜电位(Em)、膜电流及电流密度的改变,比较电流-电压曲线的变化.并对以上数据结果进行相关性分析.结果 ①模型组的mPAP和RVHI均高于正常对照组及假手术组,差异有统计学意义(P均＜0.01);②模型组膜静息电位[(- 33.00±4.09)mV]较假手术组[(-51.11±3.66)mV]及正常对照组[(-48.10±4.54)mV]高,差异具有统计学意义(p均＜0.01);③Kv通道电流(在+50 mV电压刺激时的峰值电流):模型组峰值电流为(64.80±8.40) pA/pF,较假手术组[(118.03±10.18) pA/pF]及正常对照组[(120.85±11.66) pA/pF]少,差异具有统计学意义(P均＜0.01);④模型组的电流-电压曲线较假手术组及正常对照组向右下移,差异有统计学意义(P＜0.01).而正常对照组与假手术组相比,以上各值差异没有统计学意义(P＞0.05);⑤静息(Em)与mPAP、RVHI呈显著正相关关系,而膜电流、电流密度与mPAP、RVHI、静息Em均呈显著负相关关系(P均＜0.001).结论 在左向右分流诱导高肺血流肺动脉高压形成过程中,其PASMC膜上Kv通道功能受抑制,提示钾离子通道可能参与了高肺血流性肺动脉高压的形成.     

西地那非抑制高肺血流肺动脉高压大鼠肺血管重构和上调肺血管Kv1.5mRNA表达

目的 观察高肺血流肺动脉高压大鼠肺血管结构重建和肺血管电压依从钾通道Kv1.5mRNA表达变化,探讨口服西地那非对高肺血流肺动脉高压大鼠肺血管重构及肺血管电压依从钾通道Kv1.5mRNA表达的影响.方法 将27只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=9)、分流组(n=9)、分流+西地那非组(n=9).后两组大鼠通过腹主动脉一下腔静脉分流术建立高肺血流肺动脉高压动物模型.对分流+西地那非组大鼠每天灌胃枸橼酸西地那非10 mg·kg-1·d-1,对照组和分流组每天灌胃等量生理盐水.11周后,测定肺动脉平均压(mPAP)及肺动脉收缩压(sPAP);观察右室肥厚程度,计算右室重量/(左室+室间隔)重量比值,以[RV/(LV+S)]表示;计算肺中、小血管肌型动脉相对中膜厚度(RMT);采用实时荧光RT-PCR定量法观察大鼠肺血管电压依从钾通道Kv1.5mRNA表达.结果 与对照组比较,分流组大鼠mPAP、sPAP、RV/(Lv+S)比值显著增高(P<0.01),RMT显著增加(P<0.01),肺血管Kv1.5mRNA表达水平显著降低(P<0.01).与分流组相比,分流+西地那非组mPAP、sPAP、RV/(LV+S)比值显著低于分流组(P<0.01),RMT显著降低(P<0.01),肺血管Kv1.5mRNA表达水平显著升高(P<0.01).分流+西地那非组mPAP、sPAP、RV/(Lv+S)比值和RMT与对照组比较,差异均无显著性意义(P>0.05);两组大鼠Kv1.5 mRNA表达水平也无显著性差异(P>0.05).结论 高肺血流肺高压大鼠肺血管发生重构并且其肺血管Kv1.5mRNA表达下降,而口服枸橼酸西地那非抑制高肺血流肺高压大鼠肺血管重构和上调肺血管Kv1.5mRNA表达.     

高肺血流对大鼠肺动脉结缔组织生长因子表达的影响

目的 探讨高肺血流对大鼠肺动脉结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF) 表达的影响.方法 雄性SD大鼠32只,随机分为分流组(n=16)和对照组(n=16),对分流组大鼠行腹主动脉-下腔静脉穿刺术建立高肺血流动物模型.分别在分流术后4周、11周2个时间点处死大鼠(每组8只)留取肺组织标本.制作肺组织石蜡切片,观察肺动脉相对中膜厚度(relative median thickness,RMT)的改变;以免疫组织化学方法检测肺动脉胶原Ⅰ及CTGF表达的变化.结果 分流术后11周,分流组大鼠肺动脉RMT较对照组明显增加(P＜0.05);分流后4周、11周大鼠肺动脉胶原Ⅰ及CTGF表达较对照组明显增强(P均＜0.05).结论 高肺血流上调大鼠肺动脉CTGF表达,该作用可能参与介导高肺血流所致肺血管结构重建的机制.     

肾上腺髓质素缓解低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉中胶原堆积的研究

目的：观察长期应用肾上腺髓质素（adrenomedullin, ADM）对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺血管胶原代谢的影响,以探讨ADM对慢性低氧性肺血管结构重建的作用及其可能机制。方法：19只雄性Wistar大鼠随机分为对照组（n=6）、低氧组（n=7）、低氧+ADM组（n=6）。对于低氧+ADM组大鼠,通过微量渗透泵皮下持续给予ADM（300 ng/h）2周。低氧2周后,以右心导管法测定肺动脉平均压,检测右心室与左心室加室间隔比值,观测肺血管显微变化。用免疫组化法检测肺动脉中胶原I、胶原III和转化生长因子（TGF）-β的表达。结果：低氧2周后,大鼠肺动脉平均压明显升高(P<0.01),右心室与左心室加室间隔的比值明显增加(P<0.01),肺小血管肌化程度和肺动脉相对中膜厚度较对照组均明显增高（P<0.01）,同时肺动脉胶原I、胶原III和TGF-β表达增强。与低氧组大鼠相比,低氧+ADM组大鼠肺动脉平均压明显降低（P<0.01）,右心室与左心室加室间隔的比值明显下降（P<0.01）,肺小血管肌化程度和肺动脉相对中膜厚度较低氧组均明显降低（均P<0.01）,同时肺动脉胶原I、胶原III和TGF-β表达减弱。结论：外源性补充ADM可能通过抑制肺动脉TGF-β表达,减少肺动脉壁胶原异常堆积,对低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建发挥调节作用。