17β-雌二醇对去势胰岛素抵抗大鼠骨代谢及OPG/RANKL表达的影响

目的探讨17β-雌二醇对去势胰岛素抵抗大鼠骨代谢生化指标及OPG/RANKL表达的影响。方法 36只雌性大鼠卵巢切除后用高果糖饲料喂养12周,诱导胰岛素抵抗产生,大鼠随机分为模型组、雌激素替代组和溶媒对照组,另设正常对照组大鼠12只,用普通饲料喂养12周。检测各组大鼠动脉收缩压(SBP)、血清雌二醇(E2)、空腹血糖(FBS)和空腹血清胰岛素(FSI)水平,并计算胰岛素敏感指数(ISI)。测定尿钙、尿脱氧吡啶啉(Dpd)、血清骨钙素(BGP)水平。采用实时定量PCR和Western Blot检测股骨组织中护骨素/细胞核因子KB受体活化因子配体(OPG/RANKL)的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠SBP、FBS、FSI、尿钙和尿Dpd水平均显著性升高(均P<0.05),ISI、血清雌二醇和血清BGP水平显著性降低(均P<0.05),股骨中OPG mRNA和蛋白的表达显著性降低(均P<0.05),而RANKL mRNA和蛋白的表达显著性升高(均P<0.05);与模型组相比,17β-雌二醇替代逆转了上述改变(均P<0.05)。结论 17β-雌二醇抑制去势胰岛素抵抗大鼠股骨中骨吸收和促进骨形成,其作用机制可能与17β-雌二醇能上调骨组织中OPG的表达而降低骨组织中RANKL的表达有关。     

香豆雌酚对去卵巢大鼠成骨细胞MT1-MMP和TIMP-1基因表达的影响

目的通过观察香豆雌酚(Coumestrol)对去卵巢骨质疏松模型大鼠成骨细胞膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)及其抑制因子TIMP-1(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1)基因表达的作用,探讨香豆雌酚治疗绝经后骨质疏松的可能的分子机制。方法利用去卵巢大鼠骨质疏松(OVX)模型,观察香豆雌酚对骨密度和骨组织形态计量学参数的影响;行原位杂交检测OVX大鼠胫骨近端成骨细胞中MT1-MMP、TIMP-1mRNA表达,免疫组化检测骨组织MT1-MMP、TIMP-1蛋白表达。结果COU组大鼠(经coumestrol处理)第3~5腰椎骨密度(0.165±0.015)较OVX组(0.143±0.014)明显增加,骨小梁体积比(32.7±7.9)厚度(43.3±6.7)和数目(5.5±0.9)分别较OVX组(9.7±3.3)、(35.7±8.1)、(2.5±0.6)明显升高,COU组骨小梁间隔(165.4±27.1)较OVX组(591.1±113.8)明显减小;COU组成骨细胞MT1-MMP mRNA与蛋白质表达上调,而TIMP-1基因表达无差异。结论MT1-MMP低表达是发生绝经后骨质疏松的分子机制之一,香豆雌酚可使成骨细胞MT1-MMP基因表达上调,对TIMP-1表达无明显影响。     

香豆雌酚对大鼠骨髓基质干细胞增殖和成骨分化的调控研究

目的 观察香豆雌酚(coumestrol) 对大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells BMSCs)增殖和成骨分化的影响,探讨香豆雌酚对骨髓基质干细胞的调节及其对骨骼系统的影响.方法 用不同浓度(0,10-10～10-5 mol·L1-)香豆雌酚干预6～8周雌性sD大鼠的骨髓基质干细胞,并设17-βE2(17β雌二醇,10-8 mol·L-1) 为阳性对照,在干预不同时间分别用MTT法测细胞增殖率、Von kossa 染色鉴定钙化结节形成、全自动生化仪测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性、酶消化法测羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量、放免法测骨钙素(Osteocalcin,OC)含量.并用 Western-Blot 法测干预7天时骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)蛋白的表达,用Reahime-PCR法测干预7天、14天时OPG、RANKL(receptor activator of nuclear factor-kB ligand,核因子KB受体活化因子配基)基因的表达.结果 ①细胞增殖:干预24、48、72 h,10-8、10-7 mol·L-1香豆雌酚均能显著促进大鼠骨髓基质干细胞的增殖,而10-5mol·L-1 香豆雌酚在干预24、72 h抑制细胞增殖.②成骨分化:10-8 mol·L-1香豆雌酚干预25天后开始出现钙化结节;10-1、10-7 mool·L-1 香豆雌酚干预组ALP在14、21天时显著增加、Hyp在28天时显著增加,10-8 mol·L-1香豆雌酚干预组OC表达在28天时显著增加,高浓度(10-5 mol·L-1)则呈现抑制作用.③OPG/RANKL表达:干预7、14天,10-7mol·L-1 香豆雌酚能增加骨髓基质干细胞OPG mRNA及其蛋白的表达,提高OPG/RANKL基因的相对表达.结论 香豆雌酚能促进大鼠骨髓基质干细胞的增殖和成骨分化,并能通过影响OPG/RANKL 的表达来发挥骨骼系统的保护作用.     

Effects of coumestrol on expression of bone markers during primary osteoblastic cells differentiation

目的 观察植物雌激素香豆雌酚对成骨细胞增殖分化的作用并探讨其作用机制.方法 从小鼠颅盖骨获得成骨细胞并用0,10-9～10-5 M香豆雌酚孵育48 h,以17β雌二醇为阳性对照,用酶消化法测定碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原含量,放免法测定骨钙素含量,RT-PCR法测定OPG及RANKL mRNA表达情况,Western Blot测定OPG蛋白含量.结果 干预48 h,不同浓度香豆雌酚呈剂量依赖性增加碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原含量,10-6 M时达到最大效应(P<0.05),但10-5 M效应有所降低,香豆雌酚轻度增加成骨细胞骨钙素含量,各组间无统计学差异.香豆雌酚呈剂量依赖性增加OPG基因及蛋白的表达(P<0.05),轻度降低RANKL基因的表达.结论 香豆雌酚能增加成骨细胞增殖及分化,可能其部分通过OPG/RANKL发挥作用.     

补肾益骨方对去卵巢大鼠骨质疏松症治疗作用的研究

目的 探讨中药补肾益骨方对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用.方法 运用切除大鼠卵巢方法 建立去卵巢骨质疏松症模型,随机分为空白对照组、模型组、倍美力组、补肾益骨方组.采用双能X线骨密度测定法检测各组实验鼠骨密度(BMD)、骨矿含量(BMC);放射免疫分析法和ELISA法等检测各组实验鼠血清雌二醇(E2)、骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b) 和以及尿脱氧吡啶啉(Dpd).结果 补肾益骨方可明显升高 BMD、BMC,提高血清E2及BGP水平,降低TRACP5b和Dpd含量.结论 补肾益骨方通过调节机体相关内分泌功能,抑制骨吸收,降低骨的转换率,减少骨量丢失,增加骨密度,对骨质疏松症有防治作用.     

大黄酸-雌酮对去卵巢大鼠骨质量的保护作用

目的 观察新型雌激素衍生物-大黄酸-雌酮对去卵巢大鼠骨质量的保护作用及其对子宫的雌激素样作用,以评价大黄酸-哌嗪雌酚酮的抗骨质疏松活性.方法 6月龄Wistar雌性未孕大鼠48只,分为假手术组、去卵巢模型组、雌酚酮组、大黄酸-雌酮高、中、低3个剂量组,除假手术组外其余各组均行双侧卵巢切除,给药24 w后,测定大鼠全身及脊柱骨密度、骨矿盐含量、股骨生物力学及骨羟脯氨酸、骨钙含量和观察大鼠股骨远端和子宫的形态学变化.结果 大黄酸-雌酮3个剂量组大鼠全身及脊柱骨密度、骨矿物含量、最大压缩载荷、最大压缩应力、骨羟脯氨酸含量及股骨远端骺板下小梁骨体积均明显高于模型组(P<0.05或P<0.01);除骨体积少于雌酚酮组外,其余指标与雌酚酮组无明显差异;3组子宫重量、直径和内膜厚度明显小于雌酚酮组和假手术组,与模型组无明显差异.结论 大黄酸-雌酮在本实验剂量范围内与雌酚酮一样能显著改善去卵巢大鼠骨质量,而对子宫的刺激作用远远低于雌酚酮.     

大黄酸-雌酮对去卵巢大鼠子宫及骨组织 ERα和 ERβmRNA 表达的影响

目的：研究骨靶向雌激素大黄酸-雌酮（ LC）对去卵巢大鼠骨组织中的ERα和ERβmRNA表达的影响。方法72只6月龄雌性未孕Wistar大鼠，分为6组：假手术组（ Sham）、去卵巢模型组（ OVX）、雌酚酮组（ E，OVX＋雌酚酮1.0 mg/kg· d）、大黄酸-雌酮高（ H-LC， OVX＋LC 1.0 mg/kg· d）、中（ M-LC，OVX＋LC 0.5 mg/kg· d）、低（ L-LC，OVX＋LC 0.25 mg/kg· d）剂量组，除假手术组外其余各组均行双侧卵巢切除。给药24周后，采用放射免疫方法测定血中雌二醇水平，采用RT-PCR法测定子宫及骨组织ERα和ERβmRNA水平。结果与Sham组比较，OVX组雌二醇水平明显降低，与OVX组比较，E组和H-LC、M-LC组大鼠血清雌二醇明显升高，L-LC组与OVX组无明显差别。 Sham组胫骨近端ERαmRNA和ERβmRNA均有表达，OVX组ERβmRNA表达水平与Sham组相比降低，未检出ERαmRNA。 E组ERαmRNA和ERβmRNA水平均与Sham组无差异，大黄酸-雌酮各组均未检出ERαmRNA，ERβmRNA相对表达量高于OVX组，大黄酸-雌酮各剂量组之间ERβmRNA无明显差异。Sham组大鼠子宫组织有ERαmRNA和ERβmRNA表达，OVX组ERαmRNA表达量明显降低，未检出ERβmRNA。 E组大鼠子宫组织ERαmRNA和ERβmRNA均较OVX组上调。大黄酸-雌酮各剂量组之间ERαmRNA无明显差异，但均低于E和Sham组。结论大黄酸-雌酮在骨及子宫均能选择性上调ERβmRNA表达，而对ERαmRNA无影响，雌酚酮对两种亚型无选择性，这可能是大黄酸-雌酮对骨具有保护作用而对子宫并无雌激素样刺激作用的原因之一。     

熟地对去卵巢大鼠骨代谢生化指标及骨密度的影响

目的 研究熟地水煎液对去卵巢大鼠骨代谢生化指标及骨密度的影响，探讨熟地对骨质疏松症大鼠的药理作用。方法 采用去卵巢大鼠模型，每天灌胃1g/kg、2g／kg及4g/kg3种剂量的熟地水煎液，3个月后检测大鼠血清雌二醇、骨钙素、碱性磷酸酶、钙、磷、尿脱氧吡啶啉、钙、磷等生化指标及股骨骨密度的变化，并与模型组、正常对照组、己烯雌酚组比较。结果 与假手术组比较，熟地3个剂量组、己烯雌酚组ALP和BGP均明显升高（P〈0．05），E2含量均低于假手术组（P〉0．05）。与模型组比较，各用药组ALP、BGP、尿DPD／Cr、Ca／Cr含量均低于模型组（P〈0．05）。各用药组大鼠股骨骨密度均较模型组有所升高（P〈0．05）。结论 熟地可抑制骨吸收，延缓去卵巢大鼠骨量丢失，对骨质疏松症有一定的防治作用。     

绝经前子宫切除对卵巢功能及骨代谢和骨密度的影响

目的 研究子宫全切而保留卵巢患者远期卵巢激素水平及骨代谢、骨密度情况。方法子宫全切保留单侧卵巢者48例,保留双侧卵巢者15例及对照组30例。所有观察对象均测定血清E2、FSH及血清Ca、血P、血AKP、血BGP、及空腹尿Ca/Cr及尿HYP/Cr值、骨密度值。结果 单侧卵巢保留组血AKP值显著高于对照组(P<0.05),血BGP显著高于对照组(P<0.01),且空腹尿Ca/Cr及尿HYP/Cr值均显著高于对照组(P<0.01),骨密度值显著低于对照组(P<0.05)。双侧卵巢保留组尿HYP/Cr值显著高于对照组(P<0.05)。结论 子宫全切保留单侧卵巢者远期易发生骨量丢失致骨密度下降,双侧卵巢保留者亦有骨吸收加快,但无骨密度下降。     

番茄红素联合跑台运动对去卵巢大鼠骨质疏松模型的影响

目的通过观察番茄红素和跑台运动对去卵巢大鼠骨代谢指标的影响,探究番茄红素联合运动对去势大鼠骨代谢的作用机制。方法 6月龄雌性Wistar大鼠,按体质量随机分为6组:假手术组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)、去卵巢+运动组(OVX+E组)、去卵巢+番茄红素组(OVX+L组)、去卵巢+运动+番茄红素组(OVX+E+L组)、去卵巢+阿伦磷酸钠组(OVX+AL组)。在12周后取材进行相关指标测试。结果 (1)单纯性的跑台运动能降低去势大鼠脂肪量,提高骨小梁数目的同时提高骨形成标志物骨钙素(osteocalcin,OC)水平,促进骨形成。(2)单纯性的番茄红素疗法能提高去势大鼠的子宫重量、血清甲状腺激素水平,提高相对骨体积、骨小梁厚度和骨内膜骨形成率,增强骨密度的同时降低骨代谢标志物Ⅰ型胶原氨基末端交联肽(NTx)水平,抑制骨吸收。(3)运动和药物交互作用能降低去势大鼠的脂肪百分比,提高血清雌二醇水平,降低尿8-OHd G和尿脱氧吡啶酚(DPD)水平。改善去势大鼠骨小梁结构参数,提高骨外膜骨形成率、骨强度和抗性变能力,改善全身骨密度。结论 (1)适度的跑台运动可以防止去势大鼠骨丢失,改善去势大鼠骨健康。(2)12周的番茄红素对去势大鼠骨代谢的治疗作用与阿仑膦酸钠效果类似,提高骨强度,降低体内氧化还原反应、加强抗氧化系统功能,维持骨代谢平衡。(3)番茄红素和运动表现出良好的协同作用,对去势大鼠骨重建具有积极的作用。     

Faculty of Anaesthetists of the Royal College of Surgeons of Ireland

The Faculty of Anaesthetists of the Royal College of Surgeons of England, 35–43 Lincoln's Inn Fields, London WC2A 3PN. Telephone: 01-405 3474.     

深圳市某两所小学流行性腮腺炎突发疫情的流行病学分析

目的：通过对深圳市某两所小学发生的流行性腮腺炎突发疫情的流行病学特点及差异性进行分析,为制定科学、高效的防控策略提供科学依据。方法2013年5～7月深圳市大鹏新区某两所小学爆发流行性腮腺炎,以学校为整体研究对象,分别标记为学校A（24个班,学生1210例）和学校B（27个班,学生1274例）,对比两所小学的疫情流行病学差异性。结果分析发现,学校A流行性腮腺炎发病率为4.30%,发病班级所占比54.17%,均较学校B1.73%和29.63%高,对比差异有统计学意义（P＜0.05）;分析显示学校A学生出现疫病平均年龄为（11.2±1.1）岁,较学校B（9.34±1.0）岁,对比差异明显（P＜0.05）;且两组疫病患儿在接种疫苗率对比上差异无统计学意义（P＞0.05）;但疫情发生时,学校B疫苗紧急接种率明显高于学校A,对比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论小学作为流行性腮腺炎爆发的主要场所之一,疫病爆发高峰季节前,针对易感染人群给予相应的疫苗接种等预防控制措施,同时加强流行性腮腺炎的监测,对于降低感染人群数量,减轻、遏制疫情有着积极的意义,值得相关防控部门重视。