低分子肝素对局灶性脑缺血大鼠再灌注后细胞凋亡及NMDA受体Ⅰ型亚单位mRNA表达的影响

目的研究低分子肝素（LMWH）对局部脑缺血再灌注后脑组织中NMDA受体Ⅰ型亚单位（NR1）mRNA表达及细胞凋亡的影响，探讨LMWH对缺血再灌注后神经元的保护作用及可能机制。方法参照Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型（MCAO），140只SD大鼠被随机分成假手术组、缺血再灌组（MCAO组）和LMWH干预组。每组大鼠再随机分成4组：分别在再灌注后6h、24h、48h、96h处死。进行TUNEL染色检测缺血区细胞凋亡情况，并用原位杂交方法检测NR1 mRNA。结果MCAO组大鼠大脑皮质梗死灶的凋亡细胞和NR1mRNA表达与假手术组比较明显增强（P〈0．01），而LMWH干预组未能阻止再灌注后凋亡的发生，且阳性细胞数48h最多，与6h、24h比较有统计学意义（P〈0．01），但与MCAO组比较有凋亡细胞数明显减少（P〈0．01）。结论再灌注后脑组织中NR1mRNA表达增强，与细胞凋亡密切相关。低分子肝素可能通过抑制NR1mRNA的表达，抑制缺血半暗区的细胞凋亡。     

丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响

目的观察丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注（I/R）后大脑皮质缺血灶周围区Caspase-3、Survivin的时相表达及对神经细胞凋亡的影响。方法将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、丹红注射液治疗组（治疗组）时检测,应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型。假手术组于术后,模型组、治疗组于缺血2 h后再灌注6 h2、4 h、48 h、72 h时检测,应用免疫组化技术和原位末端标记法（TUNEL）检测不同时相各组缺血灶周围脑区Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达。结果大鼠I/R后在缺血灶周围区各个时间点均可见到Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达,治疗组与模型组比较,两组Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达趋势基本一致,Caspase-3和TUNEL阳性细胞的表达高峰在I/R后24 h,Sur-vivin的表达高峰在I/R后48 h。治疗组各时间点Caspase-3和TUNEL阳性细胞的光密度值较模型组明显降低（P〈0.05）,Sur-vivin的光密度值较模型组明显升高（P〈0.05）。结论丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与丹红注射液促进Survivin的表达,抑制Caspase-3表达,减轻迟发性神经元的凋亡有关。     

低分子肝素对局灶性脑缺血再灌注后iNOS表达的影响

参照Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型。140只SD大鼠随机分成假手术组、缺血再灌组（即MCAO组）和低分子肝素（LMWH）治疗组。每组大鼠再随机分成4组，分别于再灌注后6、24、48、96h处死。检测缺血区iNOS情况。结果MCAO组大脑皮质梗死灶的iNOS表达与假手术组比较明显增强（P〈0．01），LMWH治疗组明显低于MCAO组。低分子肝素可能通过抑制iNOS的表达而起脑保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血-再灌注后X-连锁凋亡抑制蛋白和活化半胱氨酸蛋白酶-3 p17的表达

目的研究大鼠局灶性脑缺血-再灌注（IR）后脑组织X-连锁凋亡抑制蛋白（Xlinked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）和Caspase-3 p17的动态表达。方法30只雄性Wistar大鼠，分为假手术组、缺血1．5h后再灌注6、12、24、48和72h组，每组5只。采用线栓法制作局灶性脑缺血1．5h再灌注动物模型。用免疫组化法分别观察脑组织XIAP、Caspase-3 p17表达。结果假手术组和IR组非缺血侧可见少量XIAP阳性细胞，但未见Caspase-3 p17阳性细胞；与假手术组相比，XIAP阳性细胞再灌注6h开始增加（P=0．00），12h达高峰，24h下降，48h趋于正常（P=0．549）；而再灌注6h可见少量Caspase-3 p17阳性细胞，24h达到高峰，至72h仍较多，显著高于再灌注6h时（P=0、004）。结论局灶性脑缺血可诱导凋亡抑制蛋白XIAP和促凋亡蛋白Caspase-3 p17短暂性表达增加，且前者表达的高峰时间早于后者。     

单细胞凝胶电泳技术检测大鼠脑缺血再灌注后DNA损伤及海风藤提取物的干预作用

目的用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测局灶性脑缺血再灌注（I／R）大鼠神经细胞DNA损伤及海风藤干预作用。方法应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型，单细胞凝胶实验技术分别观察假手术组、模型组、二甲基亚砜（DMSO）组、海风藤提取物治疗组缺血灶周神经细胞DNA损伤的变化。结果与假手术组比较，模型组和DMSO组DNA损伤率6～72h明显增加，但海风藤组DNA损伤率与其他组比较24、72h有明显下降（P〈0．01，P〈0．05）。结论海风藤可以减轻I／R后神经细胞DNA损伤，对缺血脑组织有保护作用。     

低分子肝素对局灶性脑缺血大鼠再灌注后细胞凋亡及NMDA受体I型亚单位mRNA表达的影响

目的研究低分子肝素(LMWH)对局部脑缺血再灌注后脑组织中NMDA受体I型亚单位(NR1) mRNA表达及细胞凋亡的影响,探讨LMWH对缺血再灌注后神经元的保护作用及可能机制。方法参照Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO),140只SD大鼠被随机分成假手术组、缺血再灌组(MCAO组)和LMWH干预组。每组大鼠再随机分成4组:分别在再灌注后6h、24h、48h、96h处死。进行TUNEL染色检测缺血区细胞凋亡情况,并用原位杂交方法检测NR1 mRNA。结果MCAO组大鼠大脑皮质梗死灶的凋亡细胞和NR1 mRNA表达与假手术组比较明显增强(P<0.01),而LMWH干预组未能阻止再灌注后凋亡的发生,且阳性细胞数48h最多,与6h、24h比较有统计学意义(P<0.01),但与MCAO组比较有凋亡细胞数明显减少(P<0.01)。结论再灌注后脑组织中NR1 mRNA表达增强,与细胞凋亡密切相关。低分子肝素可能通过抑制NR1 mRNA的表达,抑制缺血半暗区的细胞凋亡。     

SIRT1信号通路在白藜芦醇保护脑缺血再灌注损伤中的作用机制

目的探讨白藜芦醇(Res)对大脑缺血再灌注损伤后大鼠神经元凋亡的影响及其作用机制。方法采用线栓法制作短暂性大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。将60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注模型组(MCAO组)、白藜芦醇低剂量(10 mg/kg)组(Res 10组)、白藜芦醇高剂量(30 mg/kg)组(Res 30组)。栓塞缺血2 h、再灌注24 h后对各组大鼠进行神经功能损伤评分、脑组织含水量及脑梗死体积评估,TUNEL染色检测细胞凋亡,同时测定缺血再灌注损伤缺血测脑组织中SIRT1、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果脑缺血再灌注后24 h,MCAO组脑梗死体积大于Sham组(P0.01),神经功能损伤评分、脑组织含水量、TUNEL(+)细胞数及Bax mRNA、Caspase-3 mRNA表达量均明显高于Sham组(P0.01),而SIRT1 mRNA表达量较Sham组明显降低(P0.01)。与MCAO组比较,Res 10组、Res 30组脑梗死体积明显缩小(P0.01),神经功能损伤评分、脑组织含水量、TUNEL(+)细胞数以及脑组织中Bax mRNA、Caspase-3 mRNA表达量明显降低(P0.01),SIRT1 mRNA表达明显增加(P0.01)。结论白藜芦醇可通过减轻缺血脑组织神经元凋亡对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥神经保护作用,其可能通过激活SIRT1信号通路从而抑制或逆转脑缺血再灌注神经损伤的发生。     

黄体酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织神经生长因子表达的影响

目的 观察黄体酮对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后缺血区皮层神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)在mRNA与蛋白质水平表达的影响,探讨黄体酮在脑缺血-再灌注损伤中的脑保护作用机制. 方法 采用SD雄性大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型.将96只大鼠随机分为4组:假手术组、缺血再灌注组、溶剂组和黄体酮组各24只.应用Real time-PCR和Western blot技术分别对缺血区皮层NGF和BDNF mRNA与蛋白表达情况进行测定. 结果 在缺血区皮层,缺血2h再灌注6h后,缺血再灌注组NGF和BDNF的mRNA及蛋白质表达达高峰,再灌注24 h后,回复到假手术组水平;缺血2h再灌注12 h后,黄体酮组NGF和BDNF mRNA及蛋白表达达高峰,再灌注24 h后,表达仍高(P＜0.05). 结论 黄体酮可以使脑缺血-再灌注损伤后NGF和BDNF的mRNA表达上调,促进脑内NGF和BDNF蛋白的合成,从而发挥脑保护作用.     

辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时间窗的影响

目的研究辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血不同灌注时间窗的脑保护作用;探讨药物干预再灌注时间窗的可行性。方法线栓法制作大鼠缺血再灌注损伤模型,实验随机分为假手术组（A组）、缺血组（B组）、缺血/再灌注组（C组）、缺血/再灌注组加辛伐他汀组（D组）。C组、D组又各分为MCAO术后2h、4h、6h再灌注组。在完成预定操作后进行神经功能评分优于B组,测梗死体积,脑组织病理变化情况。结果D组各时间点神经功能评分优于B组,梗死体积小于B组（P〈0.05或P〈0.01）,脑组织病理变化改善。结论辛伐他汀预处理可改善神经功能评分,缩小梗死体积,改善脑组织病理变化,延长再灌注时间窗。     

福辛普利对大鼠缺血/再灌注损伤心肌细胞Caspase-3表达的影响

目的观察福辛普利对大鼠心肌缺血/再灌注损伤后细胞凋亡关键酶Caspase-3表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支,30 m in后松开结扎线,假手术组只穿线不结扎,大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、福辛普利组（20 mg/kg）。福辛普利组分别于术前24 h及术前2 h灌胃给药,观察24 h后心肌细胞电镜下的形态改变和Caspase-3 mRNA的表达。结果福辛普利组电镜下肌丝肌节清晰,而缺血再灌注组闰盘结构不清,肌丝断裂,大鼠心肌Caspase-3 mRNA表达灰度值福辛普利组为0.37±0.03,缺血/再灌注组为1.14±0.05（P<0.01）。结论福辛普利可以使心肌缺血/再灌注后的Caspase-3的表达下降。