安徽省淮南市2012-2013年流感病毒细胞分离及其流行特征分析

目的：观察安徽省淮南市2012-2013年流感病毒细胞培养分离结果,研究淮南市流感流行特征,为该市流感防控提供科学依据。方法实时荧光定量PCR法对哨点医院送检咽拭子标本进行核酸快速分型后采用狗肾（ MDCK）传代细胞培养法分离病毒,红细胞凝集试验（ HA）鉴定病毒滴度,红细胞凝集抑制试验（ HI）进行型和亚型的鉴定。结果从148份流感网络实验室实时定量PCR阳性标本中,分离出流感毒株68株,总分离率45．9％,其中 A1（H1N1）型26株,分离成功率56．5％,A3（H3N2）型25株,分离成功率33.3％;BY型4株,BV型13株,B型毒株分离成功率为63．0％;各型毒株的分离成功率差异有统计学意义（P＜0．05）。2012年淮南市流行株为BV型流感病毒,于3月份达到流行高峰;2013年流行株为A（H1N1）型流感病毒,流行高峰期则是12月份。结论淮南市2012-2013年甲型流感病毒抗原的变异性强;细胞培养分离病毒对流感流行的病原鉴定起决定性作用;流感病毒B型毒株和新A（H1N1）型毒株分离成功率较高。     

2002—2003年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2001年10月至2002年2月，全球分离到的甲型流感病毒主要为甲型流感（H3N2）病毒，与乙型流感病毒共同传播，在一些国家也分离到甲型流感（H1N1）和甲型流感（H1N2）病毒。对流感病毒分离株的抗原性分析表明，甲型流感（H3N2）病毒分离株的抗原性与A／莫斯科／10／99／和A／巴拿马／2007／99参考病毒密切相关；甲型流感（H1N1）病毒和甲型流感（H1N2）病毒分离株的抗原性与A／新喀里多尼亚／20／99密切相关；乙型流感病毒分离株的抗原性与B／四川／379／99和B／香港／330／2001参考病毒密切相关。     

贵州省分离出一株甲3型流感病毒新变异株

目的：了解人群中流感流行的流感病毒型别，及时发现新的变异性。方法：采用鸡胚和MDCK细胞培养，进行病毒分离，用血凝试验进行型和亚型鉴定，以及作抗原分析，结果：2001年4月在贵阳类流感病人中分离一株A3／112／GuiZhou/2001的新变异株。结论：在我省人群中出现甲3型（A3）流感病毒新变异株，必须加强流感监测，防止流感流行。     

采用PCR和细胞培养方法比较流感样病例不同标本的流感病毒检出观察

目的探讨采用PCR和细胞培养方法比较流感样病例不同标本的流感病毒检出情况。方法分析我中心2013年12月~2014年3月收集的流感指征患者193例作为研究对象,分别采集鼻拭子和咽拭子各1份,分别通过荧光PCR、细胞培养对流感病毒进行检测。结果鼻拭子对B亚型流感病毒敏感性较高,通过PCR和MDCK细胞接种中阳性率高于咽拭子(P0.05),另外A(H1N1)pdm09亚型在咽拭子中检出率较高,差异有统计学意义(P0.05)。而在H3N2亚型检出率中二者无明显差异(P0.05)。结论流感病毒监测过程中,根据当地流行主要流感病毒亚型来选择鼻拭子和咽拭子,对于提高流感病毒检出率具有很重要的意义。     

2001—2002年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2000年10月至2001年2月,全球分离到的甲型流感病毒主要为甲型流感（H1N1）病原,而在一些国家则与乙型流感病毒一起传播,对流感病毒分离株的抗原性分析表明,甲型流感（H1N1）病毒分离株的抗原性与A／新 里多尼亚／20／99密切相关;甲型流感H3N2）病毒分离株的抗原性与A／莫斯科／10／99和A／巴拿马／2007／99密切相关;乙型流感病毒分离株的抗原性与B／四川／379／99和B／山东／7／97密切相关。     

2005～2006年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2004年10月至2005年1月，全球分离到甲型流感(H1N1)、甲型流感(H1)、甲型流感(H1N2)、甲型流感(H3N2)、甲型流感(H5N1)和乙型流感病毒。全球流感疫情比去年同期轻，北美洲在10月开始有疫情，北半球国家的疫情逐渐加剧。对流感病毒分离株的抗原性分析表明，甲型流感(H1)病毒的抗原性与A／新喀里多尼亚／20／99密切相关；甲型流感(H3N2)病毒的抗原性与A／福建／411／2002病毒和A／怀俄明／3／2003参考病毒密切相关，但越来越多的新近分离株与A／怀俄明／3／2003和A／惠灵顿／1／2004有区别，而与A／加利福尼亚／7／2004较密切相关；乙型流感病毒的抗原性与原型疫苗株B／上海／361／2002(B／山形／16／88谱系)密切相关；其余与B／香港／330／2001(B／维多利亚／2／87谱系)相关。     

贵州省2010年H3N2亚型流感病毒HA1基因序列分析

目的 了解2010年贵州省H3N2亚型流感病毒HA1基因变异特征.方法 用MDCK细胞分离流感病毒,采用血凝抑制试验分型鉴定,随机选取8株H3N2亚型流感毒株进行RNA提取,逆转录扩增获得HA1基因产物,将其进行基因产物测序,测定的序列用相关的生物信息软件进行分析.结果 贵州省各代表株在同一分支.该分支与2008-2009年疫苗推荐株A/Brisbane/10/2007(H3N2)接近,与WHO 2010年疫苗推荐株A/Perth/16/2009 (H3N2)相距较远.结论 2010年根据WHO疫苗推荐株生产的疫苗对该年我市H3N2亚型流感预防效果不好,以至于H3亚型在我省成为优势株,引起广泛流行.     

2005～2008年河北省儿童流感病毒检测分析

目的了解2005～2008年河北省儿童流感病毒感染的流行情况。方法狗肾传代细胞（MDCK）进行流感病毒分离,用血凝试验、血凝抑制试验进行型和亚型的鉴定。结果2005年10月至2008年3月共采集流感样患儿咽试子标本2 071份,分离出205株流感病毒,检出率为9.90%。2005～2006年流行期流感病毒分离阳性率为10.05%,H1N1优势株;2006～2007年流行期分离阳性率为11.85%,以H3N2占优势;2007～2008年流行期分离阳性率为8.08%,B型流感病毒替代了A型流感病毒占据优势地位,B型yamagata系成了优势株。按月统计流感病毒分离阳性率高峰在每个流行期的1月或3月;3岁以上儿童流感病毒分离阳性率高于3岁以下儿童。结论近年来河北省儿童中同时流行着H1N1、H3N2亚型和B型流感病毒,然而,不同年份优势株不一样。儿童流感病毒阳性率3岁以上是高峰年龄段,冬春季是发病高峰季节。     

2004～2005年流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

2003年9月至2004年2月，全球分离到甲型流感(H1N1)、甲型流感(H1N2)、甲型流感(H3N2)和乙型流感病毒。也分离到甲型流感(H5N1)和甲型流感(H9N2)。流感疫情北美和西欧比过去3年开始较早和较严重，东欧和亚洲开始略晚，疫情一般为中度。对流感病毒分离株的抗原性分析表明，甲型流感(HINI)和甲型流感(HIN2)病毒的抗原性与A／新喀里多尼亚20／99／密切相关；甲型流感(H3N2)病毒的抗原性与A／福建／411／2002病毒密切相关；乙型流感病毒的抗原性与原型疫苗株、B／香港／330／2001(B／维多利亚2／87谱系)密切相关。     

2011—2012年赣州市流感监测结果分析

目的探讨赣州市流感病毒流行亚型的变化。方法对2011—2012年赣州市流感监测国家哨点医院监测的流感样病例（ILI）以及网络实验室对国家哨点医院采集标本的核酸检测结果进行分析。结果（1）2011-2012年赣州市国家哨点医院共报告流感样病例1936例．ILI％为1．78％．2012年ILI％高于2011年。（2）2011-2012年ILI％的高峰出现在冬春季。（3）2011—2012年赣州市共检测标本840份,共分离流感病毒185株,阳性率为22．02％,其中B型占50．81％,新甲H1型占27．03％,季节性H3型21．62％,混合型占0．54％。（4）2011年流感类型以B型和新甲H1型为主,2012年流感毒株以B型和季节性H3型为主。（5）2011-2012年阳性株主要分布在1—3月．占阳性株总数的77-30％。结论2011—2012年赣州市流感的流行高峰出现在冬春季。2011年B型和新甲H1型为优势株,2012年B型和季节性H3型为优势株。     

Influenza vaccination in patients with end-stage renal disease

Introduction: Patients with end-stage renal disease (ESRD) are considered at higher risk of influenza-related complications and are listed worldwide among the subjects for whom yearly influenza vaccination is strongly recommended. However, influenza vaccination coverage of patients with ESRD is significantly lower than desired.

Areas covered: This paper explores why compliance with official recommendations for influenza vaccination is poor in patients with ESRD and analyzes the true risk of infection as well as the immunogenicity, the effectiveness and the safety of influenza vaccination in these patients.

Expert opinion: Epidemiological and clinical data support the importance of influenza in conditioning clinical deterioration of patients with ESRD, particularly in relation to their level of immunosuppression. However, the variable levels of immunodeficiency detected in patients with ESRD may reduce the immune response to influenza vaccination, which appears to be lower than that usually found in healthy subjects. However, few studies are available, and they are difficult to compare for several reasons. Additionally, limited data have been collected on influenza vaccine effectiveness, although the available studies support positive results of vaccination on outcomes of severe disease. Despite such limitations, it is important to highlight that all the available studies have confirmed the good safety and tolerability of inactivated influenza vaccines. These findings, together with the risks associated with influenza in these patients, support annual influenza vaccination in patients with ESRD as well as vaccination of their close contacts and should be presented in educational programs organized for nephrologists and patient associations.     

Discovery of dihydro-alkyloxy-benzyl-oxopyrimidines as promising anti-influenza virus agents

A series of novel dihydro-alkyloxy-benzyl-oxopyrimidine derivatives were synthesized and evaluated for their activity against influenza virus in Madin-Darby canine kidney cells. Four dihydro-alkyloxy-benzyl-oxopyrimidine derivatives (4a1, 4a2, 4a3, and 4d1) showed potent activity against influenza virus. Among them, compound 4a3 was the most promising lead with broad activity against influenza A (antiviral EC(50) values of 9 and 18 μm for the A/H1N1 and A/H3N2 subtype, respectively) and influenza B viruses (EC(50) : 33 μm). The antiviral mechanism of action of these dihydro-alkyloxy-benzyl-oxopyrimidine derivatives must be quite different from that of the currently approved anti-influenza virus drugs that target the viral M2 or neuraminidase proteins. The dihydro-alkyloxy-benzyl-oxopyrimidine derivatives represent a new avenue for further optimization and development of novel anti-influenza virus agents.     

流行性感冒和禽流感的抗病毒治疗

早期抗病毒治疗是改善流行性感冒和禽流感患者预后的关键。目前临床用于抗流感病毒的药物按作用机制可大致分为两类,一类作用于病毒表面的糖蛋白神经氨酸酶,另一类作用于离子通道M2蛋白。我国目前常用的抗流感病毒药物主要有奥司他韦、扎那米韦、金刚烷胺和金刚乙胺。抗流感病毒治疗应在发病后48h内尽早进行;在缺乏耐药检测结果的情况下,甲型流感病毒可选用奥司他韦、扎那米韦、金刚烷胺或金刚乙胺进行治疗,乙型流感病毒选用奥司他韦或扎那米韦治疗。耐药分析表明,对于甲型H1N1型流感、H5N1型禽流感和H7N9型禽流感应首选神经氨酸酶抑制剂治疗,疗程通常为5d,对重症患者可增加药物剂量并延长治疗时间。流感病毒耐药性的出现给抗流感病毒治疗带来了挑战,可考虑采用具有不同作用机制的抗流感病毒药物联合治疗耐药流感病毒感染。     

Development of a Stable Liquid Formulation for Live Attenuated Influenza Vaccine

Live attenuated influenza vaccine (LAIV) is considered one of the most effective vaccines and can be manufactured quickly and inexpensively to counter seasonal or pandemic influenza. Lyophilization is widely used in vaccine production. However, it requires a longer production cycle and large-scale equipment, thus posing a considerable financial burden for developing countries. A potential solution is the development of liquid LAIV, which can increase the yield and reduce the cost of production. In this study, influential factors of LAIV, such as potential stabilizing excipients and pH, were optimized by an orthogonal design. We found that pH is the most critical factor for the stability of LAIV; salt concentration and initial virus titer are also important for LAIV stability. With these data, we developed a liquid formulation consisting of 2.5% sucrose, 0.1% monosodium glutamate, 1% arginine, and 0.5% human serum albumin, with pH ranging from 6.2 to 6.9 (optimum pH 6.5-6.7), for optimal production of monovalent or trivalent LAIVs. This liquid formulation has the potential to considerably improve vaccine production capacity to compensate for the immense shortfall in influenza vaccines globally.     

synthesis and preliminary biologic evaluation of 5-substituted-2-(4-substituted phenyl)-1,3-benzoxazoles as a novel class of influenza virus A inhibitors

The diversity-oriented chemistry synthesis together with the random screening approach has permitted the discovery and optimization of novel antiviral lead compounds. In this paper, a series of novel 5-substituted-2-(4-substituted phenyl)-1,3-benzoxazoles was synthesized and evaluated for their in vitro anti-influenza A virus and anti-influenza B virus activity. The activity was monitored by the MTS assay in the Madin-Darby canine kidney cells. Compound 7h showed excellent inhibitory activity and selective index against A/H3N2 (EC(50) = 37.03 μm, SI > 5), which were all higher than that of the reference drug oseltamivir (EC(50) > 59.00 μm, SI > 1). However, no compound displays inhibitory activity against influenza B virus.     

大流行流感与甲型H1N1流感

目的对大流行流感和甲型H1N1进行综述。方法参考国内外近期的有关文献和WHO的相关报道,介绍了流感病毒的基本知识、大流行流感的定义和发展,以及甲型H1N1流感的特点和流行现状等。结果与结论大流行流感具有传播性强、危害大等特点,2009年的甲型H1N1流感为21世纪的第1次大流感,应加以重视。     

禽流感及抗禽流感病毒药物

禽流感是由正粘病毒科中A型流感病毒引起的禽烈性传染病。本文介绍了禽流感的病原学以及禽流感和人禽流感的相互关系，回顾了禽流感在人群中的流行概况；对目前正在使用和开发中的抗禽流感病毒药物进行了综述，重点介绍了神经氨酸酶抑制剂扎那米韦和奥司他韦。     

MDCK细胞基质与鸡胚基质单价流感疫苗在小鼠中诱导的免疫反应的比较研究

目的:比较鸡胚基质和细胞基质的H1N1单价流感疫苗在小鼠体内诱导的免疫反应的差异。方法:分别采用鸡胚基质和MDCK细胞基质H1N1流感疫苗注射C57BL/6小鼠,通过体外中和实验,胞内细胞因子染色及多细胞因子检测比较2种基质生产的单价流感疫苗诱导的体液及细胞免疫反应的差异。结果:体液免疫方面,细胞基质疫苗组血清滴度与鸡胚基质疫苗组血清滴度基本一致。在细胞免疫方面,细胞基质疫苗组的细胞免疫相关细胞因子分泌水平更加显著。结论:由于病毒培养基质的不同,2种流感单价疫苗在诱导免疫反应时间存在一定差异。细胞疫苗具有诱导多种免疫反应的优势,综合细胞工艺的其他优势,说明利用细胞工艺生产流感疫苗将会成为趋势。本实验有助于评价不同基质制备的单价流感疫苗在小鼠中诱导的免疫水平。     

季节性流感疫苗接种对大流行流感的影响研究

加拿大研究发现,季节性流感疫苗接种增加2009年大流行甲型流感(H1N1)感染的危险性,而澳大利亚研究未能证实这个发现.雪貂实验结果表明,以前的季节性流感感染能防御大流行甲型流感(H1N1),但以前的季节性流感疫苗接种则不能.模型研究显示,流感感染可导致对不同亚型的暂时性免疫.这些观察可以解释加拿大和澳大利亚的不一致发...     

芪丹复感颗粒对呼吸道病毒感染小鼠TLRs信号通路的影响

目的 探究芪丹复感颗粒对呼吸道病毒感染小鼠肺组织的保护作用及对TLRs信号通路的影响。方法 120只小鼠随机分为对照组,模型组,阳性药组（利巴韦林100 mg·kg^-1）,芪丹复感颗粒低、中、高剂量组（芪丹复感颗粒1,2,4 g·kg^-1）,每组20只,其中12只用于观察死亡情况。除对照组外,其余各组小鼠均通过鼻饲流感病毒PR8建立流感病毒感染模型。通过HE染色观察肺组织形态,ELISA检测小鼠血清和肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）的浓度。分别使用Western blot和RT-qPCR检测Toll样受体4/7（TLR4/7）、髓样分化因子（MyD88）、核因子κB（NF-κB）蛋白表达和mRNA水平。结果 建模第7天,模型组小鼠全部死亡,死亡率为100.0%。在建模后第14天阳性药组死亡3只（25.0%）,芪丹复感颗粒低、中、高剂量组分别死亡9只（75.0%）、6只（50.0%）和5只（41.7%）。造模第5天,模型组,阳性药组,低、中、高剂量组的血清和BALF中的TNF-α、IL-6、IL-1β水平以及肺组织中TLR4/7、MyD88、NF-κB蛋白表达和mRNA水平均显著高于对照组（P<0.05）,阳性药组,低、中、高剂量组均显著低于模型组（P<0.05）,中、高剂量组显著低于低剂量组（P<0.05）,而中、高剂量组之间无显著差异。结论 芪丹复感颗粒可以减轻流感病毒造成的肺损伤,可能是通过抑制TLR4/7-MyD88-NF-κB通路的表达抑制炎症因子的释放,从而降低肺损伤。