磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞矿化能力的影响

目的 研究不同强度的磁性附着体静磁场对成骨细胞矿化能力的影响.方法 对体外培养的SD大鼠成骨细胞分别进行12.5、125、250 mT的静磁场加载1、3、5、7 d,考马斯亮篮法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;静磁场加载21 d后,茜素红S钙染法检测矿化结节并计数.结果 静磁场加载1 d后,各磁场处理组和对照组相比,ALP活性无明显差异(P＞0.05)静磁场加载3 d后,125 mT和250 mT磁场组ALP活性和对照组差异有统计学意义(P＜0.05);静磁场加载5、7 d后,各磁场组ALP活性与对照组差异有统计学意义(P＜0.01),而且125 mT和250 mT磁场组ALP活性高于12.5 mT磁场组.静磁场加载21 d后,各磁场组矿化结节计数高于对照组.结论 在本实验条件下,磁性附着体静磁场可以促进成骨细胞的ALP活性和矿化能力.     

磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞形态和表面超微结构的影响

目的研究磁性附着体模拟的静磁场对成骨细胞形态和表面超微结构的影响，以期逐步了解磁性附着体的生物学效应。方法对体外培养的SD大鼠成骨细胞施加12．5、125和250mT的静磁场，加载1、3、5、7d，对照组不加载静磁场，观察细胞形态、排列及表面超微结构。结果各组细胞生长良好，均未见静磁场对细胞形态、排列有影响。125mT和250mT静磁场加载3d，12．5mT静磁场加载5d后，细胞表面出现较多的微囊泡。结论静磁场加载对成骨细胞的形态、排列无明显影响；静磁场加载后细胞表面超微结构发生改变。     

磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞分化功能的影响

目的 研究不同强度的磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞分化功能的影响.方法 利用细胞静磁场加载装置,对体外培养的SD大鼠成骨细胞分别进行12.5、125和250 mT的静磁场加载.连续加载1、3、5和7 d.同时设不加载静磁场的对照组,采用放射免疫测定技术.检测成骨细胞培养上清液骨钙素(OCN)含量.结果 静磁场加载1和3 d后,各磁场处理组OCN活性和对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).静磁场加载5和7 d后,12.5、125和250 mT磁场处理组成骨细胞分泌OCN的活性明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),且保持较高水平.但各磁场处理组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在本试验条件下,一定强度静磁场可以促进成骨细胞合成骨钙素的功能,促进成骨细胞分化.     

磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞增殖活性和周期分布及凋亡率的影响

目的研究不同强度磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞增殖活性、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法通过模拟Magnedisc 800磁性附着体静磁场,对体外培养的SD大鼠成骨细胞进行3种强度（12.5、125、250 mT）、持续不同时间的静磁场加载,检测成骨细胞的增殖活性,流式细胞术分析细胞周期分布和细胞凋亡率。结果成骨细胞加载3种强度的静磁场1、3、5、7、9 d后,细胞增殖活性未发生明显改变,各组细胞生长趋势基本一致,静磁场作用无明显的剂量- 效应关系。成骨细胞加载1、3、5、7 d后,未发现静磁场对G0 /G1期、S期、G2/M期细胞百分比、增殖指数及细胞凋亡率产生明显影响。结论磁性附着体静磁场在闭合磁路、磁体和衔铁的闭合过程中以及开放磁路下,对成骨细胞的增殖均无明显的促进和抑制作用,未改变细胞的周期分布和促进细胞凋亡的发生。     

磁性附着体模拟静磁场对人牙周膜成纤维细胞形态和超微结构的影响

目的 探讨磁性附着体静磁场对人牙周膜成纤维细胞形态和超微结构的影响。方法 对体外培养的人牙周膜成纤维细胞分别进行12．5mT、125mT和250mT静磁场持续加载4天，另设无外加静磁场作用的对照组，在倒置显微镜和透射电镜下观察人牙周膜成纤维细胞的形态、生长情况和细胞超微结构的变化。结果 各试验组细胞的形态、数量、排列及分布与对照组细胞无差异，未观察到细胞超微结构的明显改变。结论 12.5mT～250mT磁性附着体静磁场加载4天对体外培养的人牙周膜成纤维细胞形态和超微结构无明显影响。     

磁性附着体模拟静磁场对人牙周膜成纤维细胞致突变性的研究

目的:探讨磁性附着体静磁场是否对人牙周膜成纤维细胞具有致突变作用。方法:对体外培养的人牙周膜成纤维细胞分别进行12.5、125、250mT静磁场持续加载4d,另设无外加静磁场作用的阴性和阳性对照组,采用微核试验和彗星试验对各组细胞分别进行染色体和DNA损伤检测。结果:各磁场剂量组细胞微核发生率与阴性对照组比较未见明显差异(P>0.05),其彗星细胞拖尾率和尾长亦与阴性对照组无显著差异(P>0.05)。结论:在现设定条件下,磁性附着体静磁场对人牙周膜成纤维细胞染色体和DNA无明显损伤作用。     

磁性附着体模拟静磁场对人牙周膜成纤维细胞的生物学效应研究

目的探讨磁性附着体静磁场对人牙周膜成纤维细胞（HPDLF）的生物学效应。方法对体外培养的HPDLF分别进行12.5、125和250 mT静磁场持续加载4 d,设无外加静磁场作用的对照组,分别测定各组细胞的碱性磷酸酶（ALP）和超氧化物歧化酶（SOD）活性,采用流式细胞仪行细胞周期分析。结果高剂量静磁场（250 mT）明显增强HPDLF的ALP活性（P<0.05）。各磁场剂量组的细胞SOD活性与对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。细胞G0 /G1期、S期、G2 /M期分布和增殖指数与对照组相比也无统计学差异（P>0.05）。结论在本实验条件下磁性附着体静磁场可促进HPDLF的ALP活性,而对SOD活性以及细胞周期分布无明显影响。     

静磁场对口腔变形链球菌生长影响体外实验

目的:研究磁性附着体静磁场对口腔变形链球菌生长的影响.方法:将口腔变形链球菌分为12.5 mT和120 mT强度的静磁场加载组以及未加载磁场对照组,厌氧培养20 h,从培养后第8 h开始,每2 h进行活菌计数.结果:12.5 mT静磁场组变形链球菌活菌数与对照组相比未见显著差异(P>0.05),120 mT静磁场组细菌...     

静磁场对口腔变形链球菌生长影响体外实验

目的：研究磁性附着体静磁场对口腔变形链球菌生长的影响。方法：将口腔变形链球菌分为12.5 mT和120 mT强度的静磁场加载组以及未加载磁场对照组,厌氧培养20 h,从培养后第8 h开始,每2 h进行活菌计数。结果：12.5 mT静磁场组变形链球菌活菌数与对照组相比未见显著差异（P〉0.05）,120 mT静磁场组细菌活菌数低于对照组（P〈0.05）。结论：12.5 mT静磁场对口腔变形链球菌生长无影响,120 mT静磁场抑制变形链球菌的生长。     

磁性附着体静磁场对人牙龈成纤维细胞形态的影响

目的：研究牙科磁性附着体静磁场对人牙龈成纤维细胞形态的影响，为磁性附着体在人口腔中的临床应用提供指导。方法：采用细胞静磁场加载装置，分别模拟闭合磁路、开放磁路磁性附着体的静磁场，对体外培养的人牙龈成纤维细胞加载10mT、120mT静磁场12～60h，倒置相差显微镜观察活细胞形态及分布，HE染色后光镜下观察细胞形态。结果：对人牙龈成纤维细胞加载10mT、120mT静磁场12～60h后，细胞形态大小和分布特征出现不同程度的改变。随静磁场加载时间延长，细胞胞体收缩变小，胞浆突起变短，磁场照射区细胞数量减少，出现细胞稀疏区。结论：磁性附着体静磁场在本实验条件下能使人牙龈成纤维细胞形态发生一定程度的改变。     

静磁场对人牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的:研究不同磁路设计的磁性附着体所产生静磁场对人牙龈成纤维细胞酶学的相关作用.方法:使用自主设计的磁场加载系统,产生不同强度的静磁场,对体外培养的人牙龈成纤维细胞进行不同时间的磁场加载.通过与对照组的比较,探讨磁场对该类细胞碱性磷酸酶活性的影响.结果:改变加载强度(120 mT、10 mT、0mT)或加载时间(1、3、5个加载周期),静磁场对人牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性均无显著性影响(P＞0.05).结论:静磁场对牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性没有影响,初步提示开放及闭合磁路系统磁性附着体所产生静磁场,对牙龈成纤维细胞的相关酶不存在生物学效应.     

TGF-β1对钛表面成骨相关蛋白基因表达的影响

目的:通过观测特定浓度的转化生长因子β1(transforming growth factorsβ1,TGF-β1)对钛表面成骨细胞中骨钙素(osteocalcin,OC)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和I型胶原蛋白(collagen-I,COL-I)基因表达的影响,以探讨其对钛表面成骨细胞分化的作用。方法:体外培养成骨细胞接种于钛片表面,将其分为实验组和对照组,实验组加入0.5ng/ml的TGF-β1刺激细胞增殖和分化,收集第1d、3d、7d培养的细胞。通过RT-PCR检测不同培养时间OCmRNA、BSPmRNA和Col-ImRNA表达情况,对照组不加TGF-β1。结果:浓度为0.5ng/ml的外源性TGF-β1加入到接种于钛片表面的成骨细胞中后,均可显著增加几种细胞因子(OC、BSP和Col-I)基因的表达(P<0.05)。结论:浓度为0.5ng/ml的外源性TGF-β1对钛片表面的成骨细胞成骨相关因子表达有一定的促进作用。     

机械张力对人成骨样细胞TGF-β表达的影响

目的 观察机械张力对人成骨细胞TGF-β基因表达的影响。方法 通过Flexercell细胞拉伸力学装置对人成骨样细胞MG-63进行6%，12%和24%的拉伸应变加载实验，用RT-PCR反应检测细胞受力后TGF-βmRNA的表达。结果 6%和12%的拉伸率能显著促进MG-63细胞TGF-β的表达，但24%的拉伸率作用对细胞TGF-β基因表达影响不明显。结论 恰当大小的机械张力可以增加成骨细胞TGF-β的表达。过大的应力刺激可能没有这种效应。     

转化生长因子β1对钛表面成骨细胞中骨钙素基因表达的影响

目的:通过观测特定浓度的转化生长因子β1(transforming growth factorsβ1,TGF-β1)对钛表面成骨细胞中骨钙素(osteocalcin,OC)基因表达的影响,旨在探讨其对钛表面成骨细胞分化的作用。方法:体外培养成骨细胞接种于钛片表面,将其分为实验组和对照组,实验组加入0.5μg/L的TGF-β1刺激细胞增殖和分化,对照组不加TGF-β1,分别收集第1、2、3、5、10天培养的细胞。通过RT-PCR检测不同培养时间OCmRNA表达情况。结果:浓度为0.5μg/L的外源性TGF-β1加入到接种于钛片表面的成骨细胞中后,可显著增加OC基因表达(P<0.05)。结论:浓度为0.5μg/L的外源性TGF-β1对钛片表面的成骨细胞OC因子表达有一定促进作用。     

静磁场对大鼠成骨细胞增殖分化功能的影响

目的研究静磁场刺激对成骨细胞的增殖和分化的影响,为临床选择合适的磁场参数,科学利用磁场疗法提供实验依据。方法体外培养Wistar大鼠颅骨成骨细胞,实验分为5组,分别置于0、40、62、83、108mT不同磁场强度的静磁场中作用24、48和72h,用噻唑兰(MTT)法检测成骨细胞的增殖情况;化学方法测定ALP酶的活性。结果随着细胞培养时间的增加,各组细胞出现不同程度的增殖和ALP活性增高,,以40mT和62mT组成骨细胞的增殖明显,与0mT组比较有显著性差异,P<0.05。结论一定强度的静磁场可以促进成骨细胞的增殖和分泌ALP的能力。     

流体剪切力作用下喷砂酸碱处理钛表面对原代成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白mRNA表达的影响

目的探讨流体剪切力及喷砂酸碱处理钛表面在不同时相对原代成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白表达的影响。方法制备抛光处理纯钛钛片(P组)、喷砂酸碱处理纯钛钛片(S组),取新生第一天SD大鼠颅骨进行原代成骨细胞培养并分别接种于玻片(G组)、P组钛片、S组钛片表面,培养72h后,置于流体加载系统中,在0dynes/cm2(静止组)和12dynes/cm2(受力组)大小的流体剪切力下分别作用0h、0.25h、0.5h、1h、2h、4h,通过实时荧光定量聚合酶链反应检测低密度脂蛋白受体相关蛋白5(low-density lipoprotein receptor-relat-ed protein5,LRP5)和β-连环蛋白(β-catenin)的mRNA表达变化。结果 3种表面受力组LRP5和β-catenin的mRNA表达水平均比静止组高(P<0.05)。LRP5的mRNA表达水平在S组最高(P<0.05);细胞受力时G组在1h、P组和S组在0.5h时LRP5的mRNA表达量达到最高峰。β-catenin的mRNA表达水平在S组最高(P<0.05);细胞受力时表达量最高峰在3种表面均出现在0.5h。结论适宜大小的流体剪切力以及喷砂酸碱处理钛表面均能促进成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的激活,并且喷砂-酸碱处理钛表面提高了成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路对流体剪切力刺激的敏感性。     

静磁场对牛蛙坐骨神经电生理特性的影响

目的：研究静磁场不同的加载时间和温度是否对牛蛙坐骨神经电生理特性产生影响。方法：分离牛蛙的坐骨神经,对其进行实时体外加载。通过BL-420F生物机能实验系统,观察不同的加载时间（加载前、加载中30min、1h、6h、加载后）和不同温度下（10℃、25℃及37℃）神经兴奋性和传导性的变化。结果：不同静磁场加载组不同加载时间之间差异无统计学意义（P〉0．05）。两实验组不同温度之间存在统计学差异（P〈0．05）。结论：12．5mT和125mT的静磁场加载过程中和加载后,其兴奋性下降,与加载时间长短无关。不同温度条件下,12．5mT和125mT的静磁场对牛蛙坐骨神经的兴奋性和传导性的影响作用是不同的,在37℃时,神经组织的兴奋性明显下降。     

不同强度恒定磁场对小鼠成骨细胞增殖及功能的影响

目的研究不同强度恒定磁场（CMF）对小鼠成骨细胞增殖及功能的影响。 方法选取小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞株进行培养,加载0、50、100、150、200 mT的恒定磁场,筛选出最显著促进、抑制成骨细胞生长的加载强度（150、200 mT）。将培养的细胞随机分为3组,分别加载0 mT（对照组）、150 mT（促进组）、200 mT（抑制组）的CMF,检测细胞增殖活性、Ⅰ型前胶原羧基端肽（PICP）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）含量。 结果150 mT的CMF可以促进小鼠成骨细胞增殖及功能,强度为200 mT的CMF可以抑制小鼠成骨细胞的增殖及功能。 结论CMF可以促进小鼠成骨细胞增殖及功能,且存在"强度窗"效应,超过这一特定强度时,则表现为抑制作用,150 mT左右即为可能的"强度窗"之一。     

转化生长因子β促进面突外胚间充质干细胞向平滑肌细胞分化

目的　探讨转化生长因子β(TGF-β)对面突外胚间充质干细胞向平滑肌细胞分化的影响。方法　 60 pmol/LTGF-β作用于面突外胚间充质干细胞,分别于1 d、2 d后进行抗α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体免 疫组化图象分析检测,2 d后定量RT-PCR检测α-SMA mRNA的表达。结果　免疫组化显示,TGF-β诱导组表达α- SMA的细胞数约为95%,而未加分化抑制剂的自然分化组表达α-SMA的细胞数约为65%。图象分析显示,1 d、2 d TGF-β诱导组抗α-SMA着色平均灰度值小于未加分化抑制剂的自然分化组。定量RT-PCR显示TGF-β诱导组α-SMA mRNA量大于自然分化组。有分化抑制剂的对照组细胞不表达α-SMA。结论　TGF-β诱导组细胞表达α-SMA强于 自然分化组。TGF-β可以促进外胚间充质干细胞向平滑肌细胞分化。     

静压力对髁突软骨转化生长因子β1表达影响的体外研究

目的:观察静压力对体外培养髁突软骨细胞表达TGF-β1的影响。方法:解剖、培养SD大鼠髁突软骨,应用静压力加载装置对实验组软骨加载强度为10kPa的持续静压力1h。对照组除软骨不加力外,其它培养条件与实验组相同,加力完成后2组同时收集样本。用免疫组化技术检测2-实验组和对照组髁突软骨TGF-β1的含量和分布,用彩色病理图像分析仪检测髁突软骨各层TGF-β1表达的强度。结果:实验组的髁突软骨各层细胞TGF-β1表达均增强,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。其中成软骨细胞层改变最明显(P<0.01)。结论:静压力促进髁突软骨各层细胞TGF-β1表达增强,其中成软骨细胞层表达增强最为明显。