荧光原位杂交与逆转录聚合酶链反应在尤文肉瘤/原始神经外胚层肿瘤分子诊断中的应用

目的探讨运用荧光原位杂交（FISH）与逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测尤文肉瘤/原始神经外胚层肿瘤（ES/PNET）石蜡包埋组织特异性染色体易位的临床应用价值.方法收集ES/PNET 10例,分离石蜡包埋组织中的肿瘤细胞,利用Vysis公司的EWSR1双色易位分离探针,间期核FISH检测EWS基因的易位.运用RT-PCR检测t（11;22）（q24;q12）和t（21;22）（q22;q12）形成的融合转录子EWS-FLI1和EWS-ERG.结果10例ES/PNET中FISH观察9例有EWS基因的易位.RT-PCR 8例检测出EWS-FLI1的表达,没有检测出EWS-ERG的表达.结论利用FISH与RT-PCR检测ES/PNET石蜡包埋组织特异性染色体易位可作为可靠的分子诊断指标;两者相比,FISH敏感性和稳定性要优于RT-PCR.     

FLI-1在小圆细胞肿瘤鉴别诊断中的应用

目的研究FLI-1和CD99在小圆细胞肿瘤中的表达情况,探讨二者在小圆细胞肿瘤鉴别诊断中的应用价值。方法对46例小圆细胞肿瘤进行FLI-1和CD99免疫组化标记,并结合临床与病理组织学进行对比研究。结果FLI-1在Ewing肉瘤／外周原始神经外胚叶肿瘤（EWS／PNET）中阳性表达率为90．5％（19／21）,在分化差的滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤分别为14．3％（1／7）、22．2％（2／9）,而在嗅神经母细胞瘤和间叶软骨肉瘤均无表达。CD99在EWS／PNET中阳性表达率为95．2％（20／21）,在分化差的滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤、嗅神经母细胞瘤和间叶软骨肉瘤分别为71．4％（5／7）、66．7％（6／9）、75．0％（3／4）和60％（3／5）。FLI-1标记在EWS／PNET的敏感性为90．5％,特异性为88％;而CD99在EWS／PNET的敏感性为95．0％,特异性为32％。FLI-1在EWS／PNET中的特异性明显高于CD99（P〈0．05）。结论FLI-1在EWS／PNET诊断中的价值优于CD99,并且可用于小圆细胞肿瘤的鉴别诊断。     

外周原始神经外胚叶瘤/尤因肉瘤临床病理学

目的:研究原始神经外胚叶瘤(PNET)/尤因肉瘤的(EWS)的诊断、鉴别诊断.方法:41例病人按传统病理学分为3类,并用免疫组织化学两步法检测CD99、NSE、S-100蛋白、Syn、Vim、LCA、Des、Myo抗体的表达.结果:(1)41例病人有27例PNET,8例EWS和6例Askin瘤.(2)免疫表型:CD99有87.8%强阳性表达,NSE 53.7%,S-100蛋白22%,Syn 4.9%,vim 41.5%,统计结果显示CD 99强阳性表达与NSE、S-100蛋白、Syn、Vim强阳性表达差异有显著性(P<0.01).(3)PNET、EWS、Askin瘤对各种抗体的阳性表达差异无显著性(P>0.05).结论:(1)PNET、EWS、Askin瘤属同一肿瘤家族.(2)用组织学、免疫组织化学可与其他小圆细胞肿瘤进行鉴别诊断.     

应用RT-PCR技术鉴别软组织小圆细胞恶性肿瘤

软组织小圆细胞恶性肿瘤,如尤因肉瘤/原始神经外胚层瘤(EWS/PNET)、横纹肌肉瘤、低分化滑膜肉瘤等,大多由弥漫成片的小圆形细胞所组成,并且组织形态多样。临床上小圆细胞肿瘤多属高度恶性的肿瘤,病情进展迅速,预后较差。近年来研究证实,在大多数小圆细胞肿瘤中存在特异性染色体     

外周原始神经外胚肿瘤／尤因肉瘤临床病理学

目的：研究原始神经外胚叶瘤（PNET）／尤因肉瘤的（EWS）的诊断,鉴别诊断。方法：41例病人按传统病理学分为3类,并用免疫组织化学两步法检测CD99,NSE,S－100蛋白,Syn,VIm,LCA,Des,Myo抗体的表达。结果：（1）41例病人有27例PNET,8例EWS和6例Askin瘤。（2）免疫表型,CD99有87．8％强阳性表达,NSE53．7％,S－100蛋白22％,Syn4.9%,vim41.5%,统计结果显示CD99强阳性表达与NSE,S-100蛋白,Syn,Vim强阳性表达差异有显著性（P＜0．01）。（3）,PNET,EWS,Askin瘤对各种抗体的阳性表达差异无显著性（P＞0．05）,结论：（1）PNET,EWS,Askin瘤属同一肿瘤家族,（2）用组织学,免疫组织化学可与其他小圆细胞肿瘤进行鉴别诊断。     

颅内原始神经外胚叶肿瘤中TIG1启动子的高甲基化

目的检测颅内原始神经外胚叶肿瘤(primitive neuroectodermal tumor,PNET)中TIG1(tazarotene induced gene-1)基因启动子的甲基化状态。方法使用甲基化特异PCR(MSP)法检测25例原发髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)、9例原发幕上原始神经外胚叶肿瘤(supratentorial primitive neuroectodermal tumor,SPNET)和7株PNET细胞系中TIG1的甲基化水平。用RT-PCR方法检测PNET细胞中TIG1的转录水平。并用去甲基化试剂处理PNET细胞,观察基因转录水平与甲基化状态间的关系。结果原发MB及SPNET中TIG1启动子的异常甲基化率分别为40%(10/25)和44%(4/9)。该基因在PNET中的甲基化异常是肿瘤特异性的。PNET细胞系中均有TIG1高甲基化,并伴有转录水平的表达减少或丢失(7/7)。TIG1的表达水平与启动子甲基化状态呈明显负相关。并且,这种相关性得到去甲基化试剂处理实验的支持。经去甲基化试剂5-aza-2′-deoxycyti-dine处理的全部细胞系中TIG1的表达都得到了恢复。结论大部分PNET细胞系中都有TIG1表达的减少和缺失,且该基因缺失与启动子高甲基化密切相关。同时,TIG1的高甲基化率在原发PNET中也能检测到,提示TIG1可能在颅内PNET的肿瘤发生中起重要作用。     

联合运用BCL-10和Trypsin在胰腺腺泡细胞癌诊断和鉴别诊断中的作用

目的探讨联合运用BCL-10和Trypsin在胰腺腺泡细胞癌(pancreatic acinar cell carcinoma, PACC)、胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine tumors, PNET)及胰腺实性假乳头肿瘤(solid pseudopapillary neoplasm, SPN)中的诊断和鉴别诊断作用。方法收集安徽医科大学第一附属医院病理科2014～2018年已确诊的46例胰腺肿瘤相关病例,其中7例PACC来自复旦大学附属中山医院病理科及皖南医学院弋矶山医院病理科,采用免疫组化EnVision两步法检测BCL-10、Trypsin、CD10、β-catenin、CgA、Syn在PACC、PNET和SPN中的表达。结果 BCL-10、Trypsin在PACC中的阳性率分别为80.0%和70.0%,在SPN中均阴性;BCL-10在PNET中均阴性,Trypsin在PNET中的阳性率为18.8%。CgA、Syn在PNET中的阳性率分别为100.0%和93.7%,在PACC和SPN中的阳性率较低(0～40.0%)。在SPN中CD10阳性率和β-catenin核阳性率分别为95.0%和100.0%,β-catenin在另外两种肿瘤中主要呈散在胞膜弱阳性,胞核阳性率较低(10.0%～25.0%)。BCL-10和Trypsin在PACC中的敏感性分别为80.0%、70.0%,特异性分别为94.7%、91.7%。联合使用BCL-10和Trypsin的敏感性和特异性分别为90.0%、97.1%。结论与传统指标Trypsin相比,BCL-10对PACC的诊断具有较高的敏感性和特异性,联合运用BCL-10和Trypsin对PACC、PNET及SPN的鉴别诊断具有重要价值。     

髓母细胞瘤与幕上原始神经外胚叶肿瘤中RASSF1A基因的甲基化差异

目的通过研究髓母细胞瘤与幕上原始神经外胚叶肿瘤（SPNET）中RASSF1A基因的甲基化改变,探讨颅内原始神经外胚叶肿瘤（PNET）的不同亚型中该基因的表遗传学差异及其意义。方法收集25例原发髓母细胞瘤,9例原发SPNET,3株髓母细胞瘤细胞系和2株SPNET细胞系。采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测RASSF1A基因启动子区的甲基化状态。应用去甲基化试剂5-aza-2’deoxycytidine处理存在基因表达缺失的细胞系,探讨基因表达与甲基化之间的关系。结果100％（25／25）的原发髓母细胞瘤、6／9的原发SPNET及全部PNET细胞系中均检测到RASSFIA基因的甲基化。相反,该基因甲基化在全部正常组织（包括2例小脑,5例大脑）中均未检测到。并且,RASSF1A在SPNET中的甲基化率明显低于髓母细胞瘤（Fisher精确检验,P=0．014）。在经去甲基化试剂处理的PNET细胞中,该基因表达得以恢复,证明甲基化与该基因沉默相关。结论RASSF1A甲基化是肿瘤特异性的,RASSF1A甲基化与PNET的发生有一定关联,不同亚型的PNET之间RASSF1A基因的不同甲基化状态提示髓母细胞瘤和SPNET是表遗传学上存在差异的两类肿瘤。     

女性生殖系统原发性原始神经外胚层肿瘤5例临床病理分析

目的探讨女性生殖系统原发性原始神经外胚层肿瘤(primitive neuroectodermal tumor,PNET)的临床病理学特征。方法收集5例原发于女性生殖道PNET的临床资料,应用常规病理及免疫组化En Vision两步法分析其临床病理特点,采用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridizatio,FISH)检测EWSR基因易位。结果 5例患者年龄25~79岁,其中发生于子宫2例,卵巢、外阴、阴道各1例。5例PNET肿瘤大小不等,结节状,呈圆形或者椭圆形,境界清。肿瘤实质切面灰白、灰红色,质嫩,呈鱼肉样,可见出血、坏死。镜下:肿瘤组织呈片状、条索状分布,瘤细胞体积小,大小较一致,圆形或卵圆形,细胞界限不清,胞质少,核圆形,染色质呈粗颗粒状,核分裂象多见,脉管内可见癌栓。免疫表型:CD99均阳性(5/5),vimentin均阳性(3/3),Syn阳性(4/5);其中3例检测有EWSR易位信号。随访:2例术后约1年复发死亡,1例无病生存,2例失访。结论 PNET原发于女性生殖系统罕见,在镜下形态学和免疫组化符合可以诊断,结合EWS-FLI-1融合基因可用于PNET确诊。早期明确诊断、合理的综合治疗,可使部分患者获得较好预后。由于该肿瘤恶性程度高、易早期发生转移,其长期生存率低,总体预后差。     

成熟性畸胎瘤恶性转化为原始神经外胚层肿瘤3例并文献复习

目的 探讨成熟性畸胎瘤恶性转化为原始神经外胚层肿瘤(primitive neuroectodermal tumour,PNET)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法 收集3例成熟性畸胎瘤恶性转化为PNET的临床资料,采用HE、免疫组化EnVision两步法染色,并复习相关文献。结果 PNET临床表现为腹膜后肿块2例、子宫肿块1例,肿块直径12～18 cm。眼观:2例肿块均为囊实性,切面灰黄、灰白色,内含毛发、皮脂、骨组织等;1例为会诊病例。镜检:肿瘤组织内可见脂肪、软骨、平滑肌、鳞状上皮、皮脂腺等,3例均可见PNET成分,肿瘤细胞弥漫分布,被纤维组织分割,细胞体积小,核圆形,染色质细腻,核分裂象3～5个/HPF,伴坏死。免疫表型:小圆细胞CD99(3/3)、Syn(2/3)、CD56 (2/3)均阳性,Ki-67增殖指数60%～80%。2例腹膜后肿块行肿瘤切除+后腹膜淋巴结清扫。结论 成熟性畸胎瘤恶性转化为PNET临床症状无特异性,确诊需依靠组织病理学及免疫组化检测。     

乳腺尤因肉瘤(ES)/原始神经外胚层肿瘤(PNET)1例报道并文献复习

目的 探讨乳腺尤因肉瘤/原始神经外胚层肿瘤(primitive neuroectodermal tumors,PNET)的病理诊断及鉴别诊断.方法 对1例乳腺尤因肉瘤/PNET进行免疫组化染色,并复习相关文献.结果镜下观察瘤组织由形态一致的小圆细胞所组成,呈实性片状或乳头状排列,局部可见菊形团样结构.免疫组化显示瘤细胞表达CD99、ER、CD56、GFAP、FLI-1、Calponin等.结论乳腺尤因肉瘤/PNET是少见的小圆细胞恶性肿瘤,CD99、FLI-1及神经内分泌标记物阳性对确诊有重要意义,ER可能在乳腺尤因肉瘤/PNET诊断中有一定的意义.     

女性生殖道原始神经外胚层肿瘤:19例形态学、免疫组化和分子遗传学分析

<正>女性生殖道原始神经外胚层肿瘤(PNET)临床罕见,其合适的分类尚未建立。作者报道19例妇科PNET的临床、组织学及免疫组化特征及EWSR1基因重排状态,其中卵巢10例,子宫8例和会阴部1例。年龄12~68岁,发生于卵巢和子宫PNET平均年龄分别为20岁和51岁。15例PNET可见中枢神经系统(CNS)肿瘤形态学特征,包括9例髓母细     

儿童中枢神经系统肿瘤中INI1的表达及意义

目的研究整合酶相互作用分子1(Integrase Interactor1,INI1)在儿童中枢神经系统肿瘤的表达情况,探讨其用于中枢神经系统肿瘤诊断及鉴别诊断的意义。方法应用组织芯片和免疫组织化学方法检测INI1在55例儿童中枢神经系统肿瘤中的表达。结果 2例非典型畸胎样/横纹肌样瘤,肿瘤细胞INI1表达缺失,肿瘤内的血管内皮细胞阳性表达INI1,其余53例肿瘤包括星形细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、PNET等肿瘤细胞INI1均阳性表达。结论 INI1在非典型畸胎样/横纹肌样瘤中特异性表达缺失,可用于诊断及鉴别诊断非典型畸胎样/横纹肌样瘤与其他中枢神经系统肿瘤;使用免疫组织化学方法检测INI1是一种方便快速、可靠的方法;有必要对所有儿童中枢神经系统肿瘤尤其是胚胎性肿瘤应用免疫组织化学方法检测INI1表达的情况。     

儿科早期预警评分及常见血常规、炎症标志物对危重症手足口病患儿早期诊断的价值

目的 探讨儿科早期预警评分(EWS)及常见血常规、炎症标志物对危重症手足口病(HFMD)患儿早期诊断的价值.方法 收集2016年6月至2020年6月我院儿科诊治的120例危重症HFMD患儿(疾病组)和普通型HFMD患儿60例(对照组)的临床资料,比较两组早期预警评分(EWS)、主要血常规检测结果 [白细胞计数(WBC)、降钙素原(PCT)和中性粒细胞比例(NEUT)]、炎症标志物[白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)]水平.采用ROC曲线分析EWS及常见血常规、炎症标志物对危重症HFMD早期诊断价值.结果 疾病组EWS评分、WBC、PCT、NEUT较对照组明显升高(P<0.05),疾病组IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、CRP水平较对照组明显升高(P<0.05),ROC曲线分析提示EWS、常见血常规检查结果 、炎症标志物联合检测诊断危重症HFMD曲线下面积、灵敏度和特异性较三者分别检测的高(P<0.05),HFMD患儿EWS评分与WBC、PCT、NEUT、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、CRP呈明显正相关(P<0.05).结论 儿科EWS、常见血常规检查结果 、炎症标志物联合检测可明显提高危重症H FMD早期诊断,有望为危重症H FMD的早期诊治提供理论依据.     

胸部原始神经外胚层瘤5例临床病理分析

目的 探讨胸部原始神经外胚层瘤(PNET)的临床病理特征、免疫学表型及其鉴别诊断。方法 对5例发生于胸部的PNET进行光镜观察和免疫组化研究。结果 5例PNET中4例为女性,1例男性,年龄12～52岁,平均27．0岁。肿瘤体积较大,平均直径11．4cm,无包膜或包膜不完整。镜下：肿瘤由小圆细胞构成,细胞胞质少,部分区域肿瘤细胞胞质透亮,可见Homer-Wwright菊形团和假菊形团。免疫表型：5例CD99(MIC2)、NSE阳性,4例synaptophysin阳性,3例vimentin阳性,2例S-100蛋白阳性。结论 胸部PNET是较少见的高度恶性软组织肿瘤,其诊断主要依据病理形态学特征及免疫组化标记。     

CIC-DUX4融合基因阳性的圆细胞肿瘤中DUX4是一种高度敏感和特异的免疫组织化学标志物

正儿童和成人圆细胞肿瘤的组织学鉴别诊断非常广,其中包括最近发现的CIC-DUX4融合基因阳性的圆细胞肿瘤。CIC-DUX4肿瘤可以通过光镜和免疫表型诊断,但是现在需要基因检测辅助才能明确诊断,比如常规的染色体核型分析、荧光原位杂交或分子学手段。作者希望通过实验来确定DUX4的表达能否作为融合基因阳性圆细胞肿瘤的特异性免疫组化标志物,以鉴别CIC-DUX4融合基因阳性肿瘤和可     

基因类肿瘤相关物质对肺癌的诊断价值

肿瘤相关物质（ tumor supplied group of factors, TSCF）又名恶性肿瘤相关物质群，其与血清肿瘤相关物质（BXTM）中的综合指标基因类肿瘤相关物质（GTM）在检测原理和方法上是基本一致的，但TSGF对肿瘤的诊断敏感度和特异性各家报道不一，与GTM对肿瘤的诊断敏感度和特异性也不一致，存在争议。本文仅以肺癌患者血清的GTM检测为例，探讨其对肺癌的诊断价值，现报道如下。     

NKX2.2:一种诊断Ewing肉瘤有用的标记

Ewing肉瘤是累及儿童和青年人骨和软组织的高级别圆细胞肉瘤,以一致的小圆细胞弥漫性增生为特征,鉴别诊断包括各种各样的小圆细胞肿瘤。Ewing肉瘤藏匿有特定的周期性染色体易位,几乎在所有病例中,该易位引起EWS     

肺原发性骨外尤因肉瘤1例并文献复习

目的探讨骨外尤因肉瘤(Ewing’s sarcoma, EWS)的临床病理特征、组织学形态、免疫表型、诊断及鉴别诊断。方法采用免疫组化MaxVision两步法检测NKX2.2、CD99、CD56、ALK、Cyclin D1、CK(AE1/AE3)、BCL-2等的表达,分析EWS临床病理特征并进行相关文献复习。结果组织学形态示肺组织原有结构被破坏,肿瘤细胞于间质内弥散性生长,细胞体积较小,呈圆形或卵圆形,染色质较细腻,核仁不明显,核分裂可见,胞质稀少,部分细胞围血管呈假菊形团样生长。免疫表型:肿瘤细胞CD99、NKX2.2均弥漫阳性,CD56、ALK、Cyclin D1均阳性,CK(AE1/AE3)、BCL-2、BCL-6、CD15、CD20、CD3、CD30、CD5、EMA、PAX5、TTF-1、CD117、TdT均阴性,EBER原位杂交呈阴性,Ki-67增殖指数约80%,FISH检测示EWRS1基因重排。结论肺原发的EWS临床少见,诊断较为困难,预后差。     

肾Ewings肉瘤/外周原始神经外胚层肿瘤6例临床病理分析

目的探讨肾尤因肉瘤(Ewing sarcoma,EWS)/外周原始神经外胚层肿瘤(peripheral primitive neuroectodermal tumor,pPNET)的临床病理特征、诊断、鉴别诊断、分子病理学特征及预后。方法分析6例肾EWS/pPNET的临床病理特征并复习相关文献。结果 EWS/pPNET男、女性各3例,年龄3个月~41岁(中位年龄23岁)。肿块最大径4~15 cm(平均9 cm)。低倍镜下肿瘤细胞呈索状或弥漫分布,细胞大小较一致,呈圆形或卵圆形,核膜清晰,染色质细腻,可见小核仁,胞质少,界不清,可见Homer-Wright菊形团,核分裂象可见,有坏死。免疫表型:肿瘤细胞CD99阳性,NSE、Syn、CgA、CD56不同程度阳性,部分细胞vimentin、S-100均呈阳性,而CK、WT-1、CD45、desmin和MyoD1均呈阴性,Ki-67增殖指数40%~60%。6例均行根治性肾切除术,1例术后给予化疗;随访3~66个月,2例分别在术后3个月和4个月死亡,2例无复发,2例失访。结论肾脏pPNET临床十分罕见,确诊主要依赖组织学形态、免疫表型及分子病理学检测,组织学特征需与发生于肾脏的肾母细胞瘤、神经母细胞瘤等鉴别。EWS/pPNET以手术完整切除为主要治疗方法,并结合术后化疗。