高糖高溶血磷脂胆碱环境下血小板活化因子在内皮细胞与系膜细胞相互关系中的作用

目的 探讨高糖高溶血磷脂胆碱环境下内皮细胞与系膜细胞相互作用对细胞外基质(ECM)积聚的影响及血小板活化因子(PAF)在其中的作用.方法 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与人肾小球系膜细胞(HMC)共培养和HMC单独培养,将两种培养模型分别分为对照组、甘露醇组、高糖高脂组、PAF受体拮抗剂BN52021组,比较各组细胞上清液人纤维连接蛋白(Fn)、人Ⅳ型胶原(Col IV)、PAF含量及HMC中PAF受体(PAF-R)mRNA的表达水平.结果 (1)高糖高脂促进单培养和共培养细胞Fn、 Col IV和PAF含量的升高,且共培养组Fn、 Col IV和PAF水平均高于单培养组,BN52021可抑制高糖高脂刺激的Fn和Col IV升高(P均<0.05).(2)高糖高脂上调HMC中PAF-R mRNA的表达水平(P<0.05).结论 高糖高脂环境下,系膜细胞和内皮细胞存在异常的相互作用,促进Fn、Col IV、PAF的产生,高糖高脂刺激的ECM分泌增加可能与PAF有关.     

人重组骨形成蛋白-7对高糖诱导的肾系膜细胞转化生长因子-β1及结缔组织生长因子表达的影响

目的 探讨人重组骨形成蛋白-7(rhBMP-7)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)基因表达及细胞外基质(ECM)成分Ⅳ型胶原(ColⅣ)和纤维黏连蛋白(FN)分泌的影响.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为四组:正常对照组(DMEM培养基含1 000 mg/L葡萄糖)、高糖组(DMEM培养基含4 500 mg/L葡萄糖)、rhBMP-7低剂量组(DMEM培养基含4 500 mg/L葡萄糖+50 nmol/L rhBMP-7)、rhBMP-7高剂量组(DMEM培养基含4 500 mg/L葡萄糖+100 nmol/L rhBMP-7).RT-PCR技术检测TGF-β1和CTGF基因表达水平,ELISA技术检测上清液中TGFβ1、ColⅣ、FN含量.结果 高糖组系膜细胞TGF-β1和CTGF mRNA水平明显高于正常对照组(P<0.01),TGF-β1、ColⅣ和FN分泌增多,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与高糖组比较,rhBMP-7不同剂量(50、100 ng/ml)TGF-β1和CTGF mRNA表达明显降低,培养上清中TGF-β1、ColⅣ及FN分泌量亦明显减少,且差异显著(P<0.05).结论 RhBMP-7通过抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1、CTGF基因表达和ECM的分泌可能起到抗纤维化作用.     

高脂环境下ET-1在系膜细胞与内皮细胞相互关系中的作用及氯沙坦的干预作用

目的探讨高脂条件下内皮素-1（ET-1）在系膜细胞与内皮细胞相互关系中的作用及氯沙坦的干预作用。方法建立人肾小球系膜细胞与内皮细胞的共培养模型，待细胞生长至80％融合时加入无血清DMEM同步化12h，实验分为对照组、高脂组、干预组及氯沙坦组，分别加入D-葡萄糖、溶血卵磷脂（LPC）、LPC拮抗剂BQ-123及氯沙坦，培养24h后采用ELISA法测定细胞上清液Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）、纤维连接蛋白（Fn）含量，放免法测定上清液ET-1水平。结果高脂组共培养和单培养细胞上清液中Fn、Col Ⅳ和ET-1水平显著高于对照组（P均〈0．05），尤以共培养时为著；干预组Col Ⅳ、Fn、ET-1水平及氯沙坦组Col Ⅳ、Fn水平显著低于高脂组（P均〈0．05）。结论高脂环境下，系膜细胞与内皮细胞存在异常的相互作用，这种作用能促进Fn、Col Ⅳ、ET-1产生；高脂刺激的Fn、Col Ⅳ分泌增加可能与ET-1有关；氯沙坦通过干预系膜细胞与内皮细胞的相互关系而产生肾脏保护作用。     

辛伐他汀和西拉普利对人肾小球系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ表达的影响

目的 探讨辛伐他汀和西拉普利对人肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子Ⅰ(ICF-Ⅰ)表达的影响。方法 体外培养人胎肾小球系膜细胞，在低糖(5．6mmol／L)和高糖(30mmol／L)环境下，加入辛伐他汀(10μmol／L)、西拉普利(10μmol／L)及辛伐他汀 西拉普利培养48h后，分别测定细胞上清液中TGF-β1、纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原(酶免法和放免法)浓度及系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ mRNA表达水平(RT-PCR法)。结果 与低糖比较，高糖环境中系膜细胞过度增殖，TGF-β1和IGF-Ⅰ mRNA表达明显增高，细胞上清液中TGF-β1、纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原含量也显著升高。加入辛伐他汀和西拉普利后，高糖环境下系膜细胞TGF-β1和ICF-Ⅰ mRNA的表达明显降低，细胞上清液中TGF-β1和基质蛋白含量也亦显著下降。合用辛伐他汀和西拉普利对系膜细胞TGF-β1表达的抑制作用较单独用上述两药更强。结论 高糖可促进系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ的表达，辛伐他汀和西拉普利可一定程度逆转高糖环境中系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ的过度表达，并降低细胞上清液中TGF-β1和基质蛋白的含量。     

高糖状态下肾脏系膜细胞葡萄糖转运蛋白1的表达及氟伐他汀的干预研究

目的观察高糖环境中大鼠肾脏系膜细胞（MC）葡萄糖转运蛋白1（GluT-1）及转化生长因子1（TGF-β1）mRNA表达变化以及氟伐他汀（Flu）的干预作用，探讨其保护肾脏的可能机制。方法原代培养MC分为正常对照（NG）组、甘露醇（MG）组、高糖（HG）组及HG＋Flu组，RT-PCR法检测细胞中GluT-1mRNA和TGF-β1 mRNA的表达，放免法测定各组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原含量。结果HG组各时相点GluT-1mRNA、TGF-β1 mRNA表达量均高于NC组（P〈0．01），从48h开始HG组细胞上清液Ⅳ型胶原的含量较NC组增高（P〈0．05），而HG＋Flu组GluT-1 mRNA表达量、TGF-β1 mRNA的表达、细胞上清液Ⅳ型胶原含量均较同时点HG组明显降低（P〈0．01）。结论高糖刺激使MC内GluT-1 mRNA表达增高，TGF-β1 mRNA表达上调，Ⅳ型胶原分泌增多。高糖状态下，Flu抑制细胞外基质积聚的作用可能与其抑制高糖引起MC GluT-1过表达、减少TGF-β1的合成有关。     

胡芦巴多糖A2对大鼠肾小球系膜细胞CTGF表达的影响

目的 探讨胡芦巴多糖A2含药血清对大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质(ECM)沉积及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 制备胡芦巴多糖A2含药血清,体外培养大鼠肾小球系膜细胞,观察胡芦巴多糖A2血清对大鼠肾小球系膜细胞分泌纤维连接蛋白(FN)、胶原(Col)Ⅳ、TGF-β1和CTGF的影响.结果 与高糖培养基组比较,A2组FN、ColⅣ含量明显下降;TGF-β1和CTGFmRNA表达明显下调.结论 胡芦巴多糖A2可通过下调CTGF表达,减少高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞FN、ColⅣ的分泌,从而抑制ECM积聚.     

高糖对人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质的影响

目的 观察不同浓度的葡萄糖对人肾小球系膜细胞增殖的影响及对细胞外基质纤维连接蛋白(Fn),Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响.方法 体外培养人肾小球系膜细胞株,分别加入葡萄糖终浓度为5.5、10、20、30、40 mmol/L进行处理,于不同时间段(12、24、48、72 h)用MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖情况,ELISA法检测培养48 h后条件培养基中Fn及ColⅣ的含量.结果 高糖作用12、24、48、72 h均能促进细胞的增殖,且随着葡萄糖浓度升高作用时间的延长促进作用增强.检测细胞上清液的Fn和ColⅣ.与对照组相比,30 mmol/L D-葡萄糖作用48 h后,Fn和ColⅣ表达增高.结论 高浓度葡萄糖对系膜细胞增殖作用具有量效及时效关系,我们选择30 mmol/L浓度的葡萄糖作用48 h为最合适的细胞刺激条件.高浓度葡萄糖可促进系膜细胞细胞外基质的产生,而系膜细胞细胞外基质过度表达,可以直接导致细胞外基质的积聚,从而导致肾小球硬化的发生.     

灵芝多糖对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子-β1和Ⅳ型胶原的影响

目的探讨灵芝多糖对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞表达转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的影响。方法用不同浓度的灵芝多糖加入高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中测不同时间TGF-β1、Col-Ⅳ蛋白的表达。结果高糖可使系膜细胞TGF-β1、Col-Ⅳ的表达明显增加(P<0.01),而灵芝多糖干预后TGF-β1、Col-Ⅳ表达降低,并呈剂量依赖性(P<0.01)。结论灵芝多糖可抑制高糖环境下肾小球系膜细胞的TGF-β1、Col-Ⅳ过度表达,并呈剂量依赖性,这可能是其延缓及减轻糖尿病肾病的初步机制。     

西格列汀对高糖下系膜细胞细胞外基质表达的影响

目的探讨高糖对肾小球系膜细胞细胞外基质表达的影响,以及西格列汀(SIT)对其的干预作用。方法培养肾小球系膜细胞,分为对照(Con)组、高糖(HG)组,以及高糖联合不同浓度的SIT组(HG+S1组、HG+S5组、HG+S10组和HG+S20组)。培养24 h、48 h后,用MTT法测定细胞增殖程度,ELISA检测细胞培养上清层粘连蛋白(LN)、大鼠Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达的变化。结果高糖培养24 h、48 h后,可观察到不同浓度的SIT均可抑制高糖诱导的系膜细胞增殖;SIT组与HG组比较,差异有统计学意义;Con组肾小球系膜细胞可分泌一定量的LN、Col-Ⅳ和TGF-β1,高糖刺激后LN、Col-Ⅳ和TGF-β1分泌增加,而SIT对系膜细胞分泌物的抑制随其浓度的升高而增强。结论SIT可抑制高糖条件下系膜细胞的增殖,且能降低高糖条件下LN、Col-Ⅳ、TGF-β1的表达,SIT可能对糖尿病患者的肾脏有一定的保护作用。     

沉默信息调节因子1对高糖诱导的系膜细胞内皮素-1和转化生长因子β1的影响

目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)对高糖诱导的系膜细胞内皮素-1(ET-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法体外培养系膜细胞分为:(1)高糖组(高糖培养液);(2)SIRT1激动剂(白藜芦醇)+高糖组,含1μmol/L白藜芦醇的高糖培养液;(3)SIRT1 RNAi干扰+高糖组,加入pTRC-shSIRT1慢病毒感染;(4)正常对照(NC)组。检测各组细胞SIRT1基因表达,以及ET-1和TGF-β1水平。结果高糖组、SIRT1激动剂+高糖组、SIRT1RNAi干扰+高糖组及NC组ET-1含量分别为(56.1±6.3)、(31.9±5.1)、(105.63±8.2)和(17.3±3.4)pg/ml;TGF-β1含量分别为(43.3±5.7)、(27.5±4.9)、(87.4±7.3)和(15.6±3.6)ng/ml。高糖抑制SIRT1表达,上调ET-1和TGF-β1表达(P0.05);SIRT1激动剂可改善高糖对SIRT1的抑制,下调ET-1和TGF-β1表达(P0.05);沉默SIRT1,可上调ET-1和TGF-β1表达(P0.05)。结论 SIRT1基因对高糖诱导的系膜细胞ET-1和TGF-β1可能起负调控作用。     

槲皮素对高糖诱导的系膜细胞活性氧簇类及单核细胞趋化蛋白1表达影响的研究

目的观察槲皮素(QUE)对高糖诱导的大鼠系膜细胞氧化应激、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及细胞外基质表达的影响,探讨QUE治疗糖尿病肾脏疾病(DKD)的理论基础。方法培养大鼠系膜细胞,将系膜细胞分为对照组(Con)、高糖组(HG)和高糖+QUE组(HG+QUE)。采用流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的表达,采用ELISA检测细胞培养上清MCP-1、转化生长因子β1(TGF-β1)和纤连蛋白(FN)的表达。结果培养48h,HG组FN、TGF-β1、MCP-1及ROS表达量均高于HG+QUE组及Con组(P0.01);与HG组比较,QUE可抑制高糖条件下系膜细胞FN、TGF-β1、MCP-1及ROS的表达(P0.01)。结论 QUE可通过抑制高糖条件下系膜细胞氧化应激和炎症因子的表达,减少细胞外基质的合成,发挥肾脏保护作用。     

高糖条件下基质细胞趋化因子1α抑制人肾小管上皮细胞Ⅳ型胶原表达

目的 本文探讨基质细胞趋化因子1α （stromal cell-derived factor-1,SDF-1α）对人肾小管上皮细胞（HK细胞）细胞外基质（Ⅳ型胶原）表达的影响.方法 不同浓度的葡萄糖培养HK细胞,分为正常葡萄糖组（NG组：含5.5 mmol/L葡萄糖）和高糖组（HG组：含25.0 mmol/L葡萄糖）,分别用转化生长因子β1 （TGF-β1）和SDF-1α干预HK细胞12h,再分为空白对照组（NC组）、阴性对照组（DMSO组）、T组（TGF-β1组）、S组（SDF-1α组）、T＋S组（TGF-β1和SDF-1α共同干预组）,采用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting分别检测Ⅳ型胶原mRNA和蛋白的表达.两组间比较采用t检验.结果 （1）HK细胞能持续表达SDF-1α和其受体CXCR4 mRNA.高糖条件下SDF-1α和CXCR4mRNA表达呈时间梯度增加,24 h两者表达量达到高峰.24 h CXCR4 mRNA表达量是12h表达量的1.2倍（t=6.08,P＜0.05）,SDF-1αmRNA表达量是12h的1.58倍（t=7.52,P＜0.05）.（2）高糖条件下SDF-1α抑制HK细胞Ⅳ型胶原mRNA和蛋白的表达,并能降低由TGF-β1诱导的Ⅳ型胶原表达.S＋T组Ⅳ型胶原mRNA表达量是T组的0.33倍（t=12.57,P＜0.05）,蛋白表达量是T组的0.47倍（t=14.23,P＜0.05）.但在正常葡萄糖条件下,SDF-1α对由TGF-β1诱导的Ⅳ型胶原表达没有影响.（3）TGF-β1促进HK细胞Ⅳ型胶原mRNA和蛋白表达,高糖条件下其促进作用更为显著.T组Ⅳ型胶原mRNA是正常对照组的6.63倍（t=19.21,P＜0.05）,蛋白表达量是其2.59倍（t=15.71,P＜0.05）.结论 高糖条件下SDF-1α能减轻TGF-β1诱导的HK细胞Ⅳ型胶原表达,可能由此改善肾脏纤维化.TGF-β1促进HK细胞Ⅳ型胶原的表达,促进肾脏纤维化的发生发展.     

高糖对原代培养人系膜细胞表达TGF-β1的影响

目的了解高糖对原代培养的人肾小球系膜细胞表达TGF-β1的影响,并进一步探讨糖尿病肾病的发病机制。方法取自愿水囊引产的胎儿肾并解剖取肾皮质剪碎,应用肾皮质组织块法合优生选择法培养人肾小球系膜细胞。以ELISA方法检测TGF-β1的表达。结果与正常组相比较,高糖组TGF-β1在24、48、72h均显著升高(P0.05或P0.01)。结论高糖能够升高系膜细胞TGF-β1分泌,这可能与肾小球系膜细胞细胞外基质积聚和糖尿病肾病发病密切相关。     

不同浓度游离脂肪酸对大鼠系膜细胞外基质基因表达的影响

目的 探讨不同浓度游离脂肪酸(FFAs)对大鼠系膜细胞外基质基因表达及合成分泌的影响.方法 以体外培养大鼠系膜细胞为基础,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子(TGF-β1)mRNA的表达;采用酶联免疫吸附(ELISA)试验法检测培养系膜细胞上清液ColⅣ、FN的水平.结果 25、100、400 μmol/L 软脂酸(PA)刺激组ColⅣ、FN、TGF-β1 mRNA的表达分别为(0.99±0.18、1.24±0.16、1.38±0.21)、(0.91±0.13、1.14±0.12、1.28±0.11)和(1.21±0.09、1.43±0.07、1.54±0.06),与0 μmol/L对照组比较(0.61±0.17、0.62±0.08、0.81±0.10),差异有统计学意义(均P＜0.01);25、100、400 μmol/L PA刺激组ColⅣ、FN的分泌分别为(59.97±6.48、67.24±6.86、74.38±7.21)ng/ml和(100.91±7.13、135.04±8.12、154.18±9.11)ng/ml,与0 μmol/L对照组比较(48.84±6.17、88.68±8.08)ng/ml,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 FFAs具有促进系膜细胞外基质基因表达和分泌的作用,可能在肾小球硬化病理过程中发挥着重要作用.     

LncRNA-Gm4419对小鼠肾小球系膜细胞炎症、纤维化和增殖的影响

目的：探讨在高糖条件下小鼠肾小球系膜细胞(MGMC)中lncRNA-Gm4419与miR-7214-3p结合对炎症、纤维化和增殖的影响。方法：qRT-PCR测定低糖组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)和高糖组(25 mmol/L葡萄糖)MGMC中miR-7214-3p的表达水平;生物信息学预测lncRNA-Gm4419与miR-7214-3p的结合位点;荧光素酶报告基因方法检测MGMC中lncRNA-Gm4419与miR-7214-3p的结合能力;qRT-PCR检测单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、纤维蛋白(Fn)和胶原蛋白Ⅳ(Col.Ⅳ)的表达水平,流式细胞术和细胞计数试剂盒(CCK8)方法测定细胞增殖能力。结果：在高糖培养下,MGMC中miR-7214-3p的表达水平显著降低(P<0.05)。在低糖组中,沉默miR-7214-3p后MCP-1、TNF-α、IL-1β、Fn和Col.Ⅳ表达水平升高,系膜细胞增殖能力增强(P<0.05);在高糖组中,过表达miR-7214-3p后MCP-1...     

脂联素对高糖环境下心肌细胞中TGF-β_1/Smads传导通路的影响

目的探析脂联素对高糖环境下心肌细胞中转化生长因子β_1(TGF-β_1)/Smads传导通路的影响及作用机制。方法将培养的心肌细胞分为对照组、观察A组(高糖培养)、观察B组(脂联素干预),对3组心肌细胞的Smad-3、Smad-7表达情况、细胞上清液转化生长因子β_1以及骨形成蛋白(BMP-7)的含量进行回顾性评价。结果观察A组Smad-3、TGF-β_1含量均高于对照组,且Smad-7及BMP-7的含量低于观察A组(P0.05);观察B组的Smad-7及BMP-7的含量高于观察A组,Smad-3、TGF-β_1含量低于观察A组(P0.05)。结论脂联素对高糖环境下心肌细胞中TGF-β_1/Smads传导通路具有一定的影响作用,TGF-β_1/Smads活化可能是导致此种现象的主要机制。     

1-脱氧野尻霉素对高糖刺激大鼠系膜细胞增殖的影响

观察1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)对大鼠系膜细胞增殖的影响及进行机制探讨.结果 显示,DNJ抑制高糖刺激的系膜细胞增殖呈剂量和时间依赖性.DNJ可降低高糖刺激的系膜细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、整合素β1 mRNA、蛋白及黏着斑激酶(FAK)的蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01),抗整合素β1抗体、FAK抑制剂genistein也可抑制高糖刺激系膜细胞α-SMA的蛋白表达(均P＜0.01).     

岩藻聚糖硫酸酯对高糖培养肾小球系膜细胞的影响

目的 探讨岩藻聚糖硫酸酯(FPS)对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和细胞外基质(ECM)积聚的影响.方法 购自威海地区的干海带,经过水提取、层析分离制备FPS.体外培养大鼠GMCs并分为正常组、高糖损伤组、缬沙坦(Val)对照组、FPS治疗组.通过MTT法观察药物对GMCs增殖的影响,ELISA法检测TGF-β1的含量,免疫组化法检测IV-胶原(Col-Ⅳ)表达量.结果 FPS提取率为1.01%,平均分子量为83万D,总糖含量为67.03%,硫酸根的含量为38.29%.与正常对照组相比:自行制备的FPS高剂量组能够显著抑制高糖培养的大鼠GMCs的增殖(P＜0.01),抑制TGF-β1的过量分泌(P＜0.01)和Col-Ⅳ的过多表达(P＜0.01).与阳性对照组相比,其效果没有差异.结论 FPS能显著抑制GMCs增殖、TGF-β1的过量分泌和Col-Ⅳ的过多表达,对糖尿病肾病具有保护作用.     

沉默转化生长因子β1表达与抑制肾小管上皮细胞(HK-2)Notch信号通路的相关性研究

目的探讨沉默转化生长因子β1(TGF-β1)表达与抑制肾小管上皮(HK-2)细胞Notch信号通路的相关性。方法检测TGF-β1在DN的表达;TGF-β1小干扰RNA(TGF-β1-siRNA)和阴性对照(siRNA-NC)转染HK-2,空脂质体转染细胞为对照,检测各组TGF-β1;将HK-2分为低糖、高糖、siRNA-NC+高糖和TGF-β1-siRNA组+高糖组,检测细胞存活,凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1表达。结果 TGF-β1在DN表达高于正常肾组织(P0.05);TGF-β1-siRNA组TGF-β1表达低于对照组(P0.05);高糖组细胞存活低于低糖组,凋亡率、Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1高于低糖组(P0.05),siRNA-NC+高糖组细胞存活、凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1表达与高糖组相当(P0.05);TGF-β1-siRNA+高糖组细胞存活高于高糖组,凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1低于高糖组(P0.05)。加入GSI细胞存活、凋亡及Cleaved caspase 3、Notch1和Hes1表达与沉默TGF-β1一致。结论 TGF-β1在DN高表达,高糖能抑制HK-2的存活,促进凋亡,沉默TGF-β1能减弱这种效果,可能与Notch信号通路调控有关。     

SB431542对高糖环境中小鼠足细胞Cdk5/p35表达的影响

目的应用SB431542及Roscovitine处理高糖培养的足细胞,观察抑制转化生长因子(TGF)-β1通路对高糖培养足细胞中Cdk5/p35表达的影响及抑制Cdk5激酶活性对高糖和TGF-β1诱导足细胞凋亡的影响。方法采用不同浓度SB431542(0.1,1.0,10μmol/L)处理高糖培养的足细胞,Western印迹法及RT-PCR技术检测各处理组Cdk5及p35蛋白和mRNA的表达变化情况。应用流式细胞术检测Roscovitine对高糖及TGF-β1刺激足细胞凋亡的影响。结果高糖(HG组)Cdk5和p35的蛋白及mRNA表达水平明显增高,显著高于正常血糖组(NG)组和甘露醇组(M组)(P0.05),并且呈时间依赖性升高。加入SB431542后,高糖培养导致的足细胞内Smad-2蛋白磷酸化水平明显降低。同时,HG+SB431542组足细胞内Cdk5和p35的蛋白及mRNA表达水平呈浓度依赖性显著降低,明显低于HG组(P0.05)。加入Roscovitine后,高糖及TGF-β1诱导足细胞的足细胞凋亡水平显著下降(P0.05)。结论高糖可能通过活化TGF-β1通路上调Cdk5/p35表达从而诱导足细胞凋亡。