对无菌试验培养基灵敏度试验法准确性的初步研究

目的：研究《中国生物制品规程》(2000年版)(简称《规程》)中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法的准确性。方法：按照《规程》中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法，同时采用平皿[乙型溶血性链球菌采用血琼脂平皿，短芽孢杆菌采用营养琼脂平皿，生孢子梭状芽孢杆菌(简称生孢梭菌)采用硫乙醇酸盐软固体琼脂平皿(厌氧培养)，白色念珠菌采用真菌培养基琼脂平皿]计数法，在相同稀释度及培养温度条件下平行进行1mL菌液的菌落形成单位(Colony Forming Units，CFU)计数。将菌液稀释至与标准比浊管相同之浓度，然后作10倍系列稀释。将稀释度为10^-6～10^-8的短芽孢杆菌、10^-6～10^-8的生孢梭菌，10^-7～10^-9的乙型溶血性链球菌菌液各1mL，分别接种到9mL硫乙醇酸盐培养基中；将稀释度为10^-5～10^-7的白色念珠菌菌液各1mL，分别接种到9mL真菌培养基。每个稀释度至少接种3管，用未接种培养基作对照。将接种短芽孢杆菌的培养基，置35℃培养5d，接种生孢梭菌或乙型溶血性链球菌的培养基，置35℃培养3d，接种白色念珠菌的培养基，置25℃培养5d，同时重复3次试验，记录结果。用每个菌种，按照需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法重复进行3次灵敏度试验。结果：按照《规程》中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法，同一种培养基，用同一质控菌种重复3次灵敏度试验，结果往往不同，尤其是用乙型溶血性链球菌进行质控时，更为明显。平皿CFU计数与比浊菌数常有显著差异。结论：《规程》中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法准确性欠佳。     

复方乳酶生散杂菌检查方法验证

目的建立复方乳酶生散杂菌检查方法。方法非致病性杂菌检查采用磷酸盐缓冲液营养琼脂平皿涂布法30～37℃培养;真菌计数采用玫瑰红钠琼脂平皿涂布法20～28℃培养;控制菌检查采用平皿涂布法。结果非致病性杂菌检查、真菌计数和控制菌检查方法均满足中国药典2015年版适用性试验的基本要求。结论该方法可作为复方乳酶生散杂菌检查方法。     

磷酸氯喹片微生物限度检查方法适用性研究

目的:建立磷酸氯喹片微生物限度的限度检查方法。方法:按照《中国药典》2015年版通则1105、1106和1107,采用平皿法及培养基稀释法建立磷酸氯喹片的微生限度检查方法。结果:对4个厂家7批产品行常规平皿法检查,B、D厂家3次试验各菌株的回收均在0.5~2范围内;而A、C厂家检查,不能消除本品对铜绿假单胞菌或枯草芽孢杆菌的抑制作用,需采用供试液稀释法进行检查:A厂家采用1∶50供试液,C厂家采用1∶20供试液,3次试验各菌株的回收均在0.5~2范围内。结论:需氧菌和真菌采用常规平皿法,控制菌采用培养基稀释法的检查方法,适用于磷酸氯喹片微生物限度检查。     

激光对真菌生长作用的试验报告(摘要)

[试验方法] 1.真菌菌种:共10种(我科真菌室保存菌种供用)。 2.培养基:改良沙氏葡萄糖琼脂基(Weidman及springer)。放冰箱内保存备用。     

地衣芽孢杆菌活菌颗粒杂菌检查方法验证

目的 建立地衣芽孢杆菌活菌颗粒杂菌检查方法。方法 控制菌检查采用平皿涂布法;非致病性杂菌检查以杂菌率不得过0.1%为限度指标,采用营养琼脂平皿涂布法37 ℃培养;真菌计数采用玫瑰红钠琼脂平皿涂布法25 ℃培养。结果 控制菌检查、非致病性杂菌检查和真菌计数方法均满足中国药典2010年版验证试验的基本要求。结论 该方法可作为地衣芽孢杆菌活菌颗粒杂菌检查方法。     

螨虫培养与纯培养初探

螨虫是强烈的致敏原,能引起人体的变态反应性疾病,培养出较纯的螨虫才能做出高效价的变应原。这对螨虫过敏性疾病的诊断、治疗有一定的意义。我们先后三次在夏秋季节进行螨虫培养,均失败,因而改为冬季培养,取得了满意的效果,现介绍如下。 1 取材与方法:于11月末在粮站地面、墙壁收集粉尘,先用60目筛过筛,然后用132目筛过筛,取132目筛以上的粉尘备用。用10立升干燥器一个,在下面放饱合盐水300ml,把备用的粉尘200g,用直径16cm的玻璃皿装好,放在干燥器内二层格上,并放于湿度计一个盖好,置培养箱或暧气旁进行培养。干燥器内的温度     

某医院真菌分离培养及耐药状况分析

目的分析医院真菌感染及耐药情况。方法对各类临床标本经分离培养，用酵母菌显色琼脂平皿进行鉴定，纸片法进行药敏实验。结果601份临床标本共分离真菌212株，以白色念珠菌为主，各种真菌对7种抗真菌药物均出现不同程度的耐药。结论真菌感染呈上升趋势，并且产生一定的耐药株。     

2500例痰标本细菌培养结果分析

<正>1材料与方法1.1菌种来源标本来自2005至2007年宣威市人民医院下呼吸道感染住院患者,分离培养菌株主要有13株。1.2分离培养嘱患者刷牙、漱口以除去口腔内大部分杂菌,用力咳出肺部痰液置无菌容器内,接种于血平皿、巧克力平皿及麦康凯平皿普通需氧培养48h。1.3鉴定与药敏试验     

杭州西湖山区药用真菌初步调查

杭州西湖山区,地处浙江北部,属于亚热带季风气候,水热充沛,四季分明,雨热同期,亚热带、暖温带植物交互生长,植物种类繁多。由于西湖山区属风景名胜自然保护区,故有发育良好的植被,并具有复杂的地形。自然植被的更替,林木的代谢产物和多年积累的枯枝落叶腐殖质,形成了真菌得以生长发育的丰富基质,适宜多种真菌繁衍。作者于86至87年对该区的药用真菌进行了初步调查,共采集标本100多号(均存放在浙江省中药研究所药用微生物室内),经鉴定有15种药用真菌,隶属于12个科、14个属。现将有价值的,具有代表性及分布较广的种类名录于后。     

东山县沃角伤寒暴发流行的调查

活角是东山县陈城公社的一个自然村,位于该县的东南角,三面环海,有371户,1974人,以渔为主,农业为辅。解放后没有发生过伤寒流行,人群也未注射过伤寒菌苗。1977年7月底发现伤寒病人,8月初开始流行,8月下旬至9月中旬形成高峰,9月下旬基本控制。至10月2日共发生病人152例,健康带菌者12例。调查方法流行病学调查:确定伤寒流行后,8月底派医务人员协助开展防治和调查工作,对每一个可疑病人都进行流行病学调查,绝大多数病人采血作肥达氏反应和粪便培养。细菌培养:粪检采用肛拭法;苍蝇以15～20只为一组磨碎培养。各种标本用亚硒酸钠肉汤增菌,于37℃孵育16～18小时,用S.S平皿做分离培养。从S.S平皿上挑选可疑菌落接种克氏双糖斜面进行鉴定。细菌学鉴定:按常规方法进行。     

芽枝菌属在空气中的飘散

目的探讨空气中芽枝菌属孢子飘散数量、规律及其与气象因素的关系.方法对2000年3月～2001年2月同时应用曝片、曝皿法,进行为期一年的调查.并将芽枝菌属曝片监测计数资料与同期江西省气象台气象因素资料进行了多元逐步线性回归分析.结果全年观察到芽枝菌属孢子5033个,菌洛5129个,芽枝菌属孢子飘散量与平均湿度(r3=0.17,P＜0.05)、最大风速(r5=0.219,P＜0.05)、平均气压(r1=0.246 ,P＜0.05)和平均气温(r2=0.269,P＜0.05)呈负相关.结论南昌城区空气中芽枝菌属飘散高峰位于5月,这与气象因素有关.     

挥发油的抗菌活性

本文测定并比较了22种挥发油对5种细菌和5种真菌的抗菌活性。方法:(1)琼脂扩散法。为用营养琼脂培养基每100ml接种菌液1ml,沙氏培养基每100ml接种孢子悬液0.5ml,分别加挥发油于小钢管中,细菌于37°培养48小时,霉菌于30°培养15天,观     

肝炎后肝硬化并发真菌感染临床分析

本文对我科住院的 76例Ｃｈｉｌｄ ＰｕｇｈⅢ级肝硬化并发真菌感染的患者进行了调查 ,现分析报告如下。对象与方法一、调查对象 :76例Ｃｈｉｌｄ ＰｕｇｈⅢ级肝硬化患者与 83例Ｃｈｉｌｄ ＰｕｑｈⅠ～Ⅱ级肝硬化患者 (对照组 )均为我科 1996年 8月～ 2 0 0 0年 12月收治住院患者 ,年龄 2 0～ 77岁。二、调查方法 :采用回顾性调查方法 ,经临床体征及实验室检查结果确立诊断。三、诊断标准 :同一标本直接涂片查到真菌孢子及菌丝或培养出同一种真菌 ,并结合临床表现确诊。四、统计方法 :应用 χ2 检验。结果一、肝功能分级 :比较了Ｃｈｉｌ…     

5种洗剂类医疗机构制剂微生物限度检查方法验证

目的建立5种洗剂类医疗机构制剂微生物限度检查法。方法细菌、真菌和酵母菌计数方法的验证分别采用平皿法、培养基稀释法和薄膜过滤法;控制菌检查法的验证分别采用直接接种法、培养基稀释法和薄膜过滤法。结果 1种洗剂的细菌、真菌和酵母菌计数可采用培养基稀释法,控制菌检查可采用直接接种法。另4种洗剂的细菌、真菌和酵母菌计数和控制菌检查均需采用薄膜过滤法。结论 5种洗剂类医疗机构制剂微生物限度检查法均通过验证。     

山西某煤矿井下工人脚癣调查

<正> ×矿井下工人6024人,分别在六个区从事井下作业。该矿大部分作业区实现了机械化、半机械化采煤技术和湿式开采的作业方式,所有井下工人,均配备有个人防护用品,如长筒胶靴、手套等。井口设有浴室、更衣室、保健站等福利设施。一、调查对象:除去请假、外出等远离矿者,均属调查对象,实查4861人,普查率为80.69％。二、调查方法:1.普查点设在井口福利大楼内,利用工人班前会时间,进行调查。2.制定统一调查表,让所有井下工人填写。3.根据调查表所列项目,对每一位受检者,进行详细的问诊及视诊。初诊为脚癣者,随即进行真菌镜检及培养。4.调查人员深入矿工中,了解井下生产环境与脚癣发病的关系。三、调查结果:1.患病人数及患病率:普查     

深部病原性真菌感染及耐药性分析

目的:探讨深部病原性真菌感染的特点及耐药趋势.方法:用回顾调查的方法对我院住院病人及门诊病人各类标本培养的68株病原性真菌对常用抗真菌药物药敏试验结果进行分析.结果:分离出的68株病原真菌以内科系统为主,共52株(占76.47%);检出病原性真菌最多的部位是呼吸道,占真菌标本的64.71%;真菌以白色假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌和类星型念球菌为主,分别占58.82%、8.82%、8.82%;药敏结果,氟胞嘧啶、两性霉素B 90%敏感,白色假丝酵母菌对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐药率很高均在70%以上,5种常见抗真菌药物对其他病原真菌的敏感率均在90%以上.结论:加强临床病原性真菌分离株,对抗真菌药物的耐药性检测,然后根据药敏试验结果科学合理选用抗真菌药物十分重要.     

西药制剂黄豆苷元胶囊平皿计数方法的验证

目的:是为了验证微生物限度检查方法是否适用于供试品的需氧菌、霉菌及酵母菌的检查.方法:取样品10g,加pH7.0氯化钠一蛋白胨缓冲液至100mL,混匀,做为1∶10供试液,按照《中国药典》2010年版二部附录(Ⅺ) J微生物限度培养基稀释(0.2mL/皿)法检查[1].结果:三次独立的平行试验中,稀释剂对照组的菌回收率均大于70％,试验组经低速离心沉淀—培养基稀释(0.2mL/皿)法消除了供试品的抑菌成分后的菌回收率均大于70％.结论:可用低速离心沉淀—培养基稀释(0.2mL/皿)法测定黄豆苷元胶囊的需氧菌、培养基稀释法测定其霉菌及酵母菌数.     

以纯琼脂平皿为空白对照辨别细菌菌落与药物颗粒

目的:探讨一种简单易行、能替代显微镜辨别微生物限度检测中细菌菌落与药物颗粒的方法.方法:取琼脂粉配制成纯琼脂基,与微生物限度检测样品同时试验.计数时以营养琼脂平皿上的菌落数减去纯琼脂平皿上的菌落数,即得样品中的实际菌落数.结果:用4种标准菌株制成的供试液(100个/mL)在营养琼脂平皿、玫瑰红钠琼脂平皿上分别生长出100,99,98,98个/mL菌落,而在纯琼脂平皿上没有细菌生长;以4种(1:10)中草药合成制剂的供试液经培养后,计算得出样品中的实际菌落数在正常范围内,与省、市药检所抽检的结果一致.结论:在纯琼脂基上微生物不能生长,药物颗粒因能定置而显现出来,故用纯琼脂基作空白对照,可以代替显微镜判定样品中菌落与药物颗粒.     

关于标准菌株用于室内药敏质控代次的探讨

目的 探讨标准菌株用于室内药敏质控的代次.方法 采用纸片扩散法,制备MH琼脂平皿,同一厂家同一批号的药敏纸片,对3种标准菌株:金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、大肠埃希菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)的1～6代分别做药敏实验,测量抑菌圈直径.结果 随着标准菌株代次的增高,抑菌圈直径由小逐渐增大,低代次(1、2代)时,抑菌圈直径过小,高代次(6代)时,抑菌圈直径又过大.只有中间的代次(3～5代)时抑菌圈直径才在标准范围内,适用于室内药敏质控.结论 标准菌株传代至3～5代时最适合用于室内药敏质控.6代以后细菌老化,不再适用于室内药敏质控.     

78例真菌双重感染的抗菌药应用及相关因素分析

目的:对真菌双重感染病例的抗菌药应用情况及其他相关因素进行分析,以利于合理用药.方法:采用限定时间段内全方位调查方法,对确认的78例真菌双重感染病例,进行抗菌药用药分析;并对原发疾病、致病菌及其耐药性进行调查分析.结果:78例真菌双重感染病例多存在免疫力低下、病情危重及耐药菌株感染的特定情况,10d之内抗菌药应用品种达25种,单品种累计换算DDDs达1 350,抗菌药使用档次高,联用多,用时长.结论:广谱高效抗菌药的过度使用是诱发双重感染的重要原因.