免疫调节剂在哮喘治疗中的研究进展

随着对哮喘发病机制及慢性炎症机制的不断了解,免疫调节剂成为治疗哮喘的一种方法.研究表明在哮喘中,Th2细胞分化增多,Th1细胞分化减少,因此,调节Th1/Th2反应,促进Th1细胞因子生成,抑制Th2细胞因子是重要的免疫治疗方法.目前抗IgE抗体、抗IL-5制剂、含非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤的寡核苷酸、咪喹莫特、细菌提取物、中药等免疫调节剂在哮喘中的应用取得了一些进展,并在临床上取得很好疗效.     

IL-12对小鼠哮喘模型Th亚群和气道炎症的影响

目的观察腹腔注射IL-12对哮喘小鼠Th亚群的调节和气道炎症的影响,并寻找更有效的干预阶段。方法将36只BALB/c小鼠分为4组,每组9只,分别为哮喘组、IL-12干预A组、IL-12干预B组及正常对照组。采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法制成哮喘模型,正常对照组小鼠同时以等量的生理盐水腹腔注射加雾化吸入。干预A组在致敏和激发阶段均给予IL-12腹腔注射进行干预,干预B组仅在激发阶段给予IL-12腹腔注射进行干预。最后1次激发结束后24h处死所有小鼠,取左肺作病理切片(HE染色),右肺提取总RNA并逆转录成cDNA后,应用半定量RT-PCR法检测肺组织内IFN-γ基因mRNA的转录表达情况,实时定量PCR法检测肺组织内IL-4基因mRNA的转录表达情况。结果与正常对照组相比,哮喘组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达显著减少(P<0.05),IL-4mRNA表达显著增多(P<0.05);与哮喘组相比,IL-12干预A、B组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达均显著增多(P均<0.05),IL-4mRNA表达均显著减少(P均<0.05)。干预A组与干预B组相比,IL-4mRNA的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),而IFN-γmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-12能有效纠正哮喘小鼠失衡的Th亚群及控制气道炎症;致敏、激发阶段同时干预与仅激发阶段的干预均能有效的抑制Th2型免疫反应和气道炎症改变,前者能更有效的降低IL-4mRNA的表达水平。     

卡介菌多糖核酸注射液和特异性免疫治疗对哮喘的疗效

目的研究卡介菌多糖核酸（BCG-PNA）和特异性免疫治疗（SIT）对哮喘患儿肺功能、血清IgE和分泌细胞因子的影响。方法用BCG-PNA和SIT治疗哮喘患儿45例，治疗前后检测肺功能，酶联免疫吸附试验检测血清IgE和外周血单个核细胞分泌细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-13、IL-12水平。结果BCG-PNA和SIT明显改善哮喘患儿的用力肺活量、第1秒用力呼气容量、25％最大呼气流量等指标，降低血清IgE，抑制IL-4、IL-13分泌，促进IFN-γ、IL-12产生，两者联合治疗对于降低IL-13、增加IFN-γ产生有协同作用。结论BCG-PNA和SIT能改善哮喘患儿肺功能，增强Th1反应，降低Th2应答，调节Th1／Th2平衡。两者联合治疗对改善哮喘患儿失衡的细胞因子网络有一定协同作用。     

白细胞介素-12与哮喘辅助T细胞亚群失衡的调节

支气管哮喘是一种以辅助T细胞（Th）2优势应答的慢性气道变应性炎症，患儿体内Th1应答水平较正常人减低。白细胞介素-12是近年来发现的一种特异性促进细胞免疫功能的细胞因子，可促进Th1的增殖分化，上调γ干扰素的表达，为哮喘的治疗提供新的前景。     

哮喘小鼠肺组织GATA-3及Th2型细胞因子表达的意义

目的探讨Th2特异性转录因子GATA-3及Th2型细胞因子（IL-5、13）在支气管哮喘（哮喘）小鼠中的表达及意义。方法BALB/c小鼠16只随机分为对照组和模型组。卵清蛋白致敏制备哮喘模型。HE染色观察小鼠肺组织病理变化,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小鼠肺组织GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠肺组织IL-5、-13蛋白的表达。结果HE染色示模型组支气管周围见大量炎性细胞浸润,而对照组则不明显。与对照组相比,模型组GATA-3 mRNA和IL-13蛋白表达量明显增加（Pa〈0.05）。结论哮喘小鼠肺部存在GATA-3高表达,GATA-3可直接调控IL-5、-13表达,参与哮喘呼吸道炎症的发生。     

哮喘患儿PBMC中β_2AR和IL-12基因mRNA表达及相互关系

目的探讨β2受体(β2AR)和IL-12基因mRNA表达与儿童哮喘的相关性,白三烯受体(CysLT1-Receptor)基因表达水平与IL-12、β2AR基因表达的关系,以及儿童哮喘发作程度与β2AR和IL-12基因表达的关系。方法提取哮喘儿童外周血白细胞,调取相关基因,对电泳结果通过电泳凝胶定位成像仪成像,应用1D-凝胶分析软件进行半定量分析。结果哮喘组患儿白细胞IL-12、β2AR表达明显低于正常组(P<0.01)。哮喘发作时IL-12基因表达与β2AR基因表达呈正相关(r=0.34,P=0.001),与CysLT1-Receptor基因表达呈负相关(r=-0.92,P=0.001);β2AR与CysLT1-Receptor呈负相关(r=-0.85,P=0.003)。IL-12基因表达与哮喘发作程度无关(P=0.16);β2AR基因的表达与哮喘发作程度呈负相关(P=0.003)。结论IL-12、β2AR和CysLT1-Receptor基因在哮喘儿童外周血单个核细胞(PBMC)中的表达存在相关性。IL-12基因表达与哮喘的发作程度无关,β2AR基因表达与哮喘的发作程度呈负相关。     

外源性哮喘的特异性免疫治疗原理

特异性过敏原的免疫治疗(IT)用于治疗外源性哮喘等Ⅰ型变态反应性疾病已有多年历史。以前常称为减敏治疗或脱敏治疗。近9年来列入医学索引的文献达1200篇之多,但     

Th17细胞与Treg细胞在支气管哮喘发病机制中的研究进展

近年来,众多研究发现支气管哮喘的发病机制已不能单纯用Th1/Th2平衡理论来解释,CD4+ CD25+调节性T细胞和Th17细胞及其细胞因子IL-10、IL-17、转化生长因子-β等与支气管哮喘发病明显相关.由于Th17细胞与CD4+ CD25+调节性T细胞在功能上相互拮抗,而在分化上密切相关,因此这两种细胞的免疫失衡也是支气管哮喘发病的重要原因.糖皮质激素可通过维甲酸相关孤核受体γt信号途径降低IL-17的表达,还可以通过诱导转录因子Foxp3的表达调控CD4+ CD25+调节性T细胞的分化和功能.     

辅助T细胞17与支气管哮喘研究进展

中性粒细胞性气道炎症是支气管哮喘(哮喘)的重要特征,尤其是成年人重症哮喘和儿童哮喘.白细胞介素-17(IL-17)与中性粒细胞性炎症密切相关,最近发现辅助T细胞(Th)17是以表达IL-17为特征的Th新亚型.大量研究表明Th17与Th2共同参与哮喘发病,Th17/IL-17不仅介导哮喘中性粒细胞性气道炎症,也调节嗜酸粒细胞和巨噬细胞性炎症等,与特应体质发生、气道高反应性和气道黏液分泌均密切相关.     

转录因子GATA-3 圈套核苷酸抑制哮喘小鼠呼吸道炎性反应的实验研究

目的 探讨转录因子GATA-3在支气管哮喘小鼠发病机制中的作用及 GATA-3圈套核苷酸治疗支气管哮喘的可行性.方法BALB/c小鼠32只,随机分为4组:正常对照组、哮喘模型组、GATA-3圈套核苷酸治疗组(ODN组)和突变圈套核苷酸治疗组(mODN组),每组8只.采用鸡卵白蛋白致敏方法建立支气管哮喘小鼠模型;通过呼吸道给药的方式,将GATA-3圈套核苷酸及突变GATA-3圈套核苷酸转染至哮喘小鼠肺部.应用免疫组织化学染色检测其GATA-3蛋白的表达,应用反转录聚合酶链反应检测小鼠肺组织IL-5、IL-13 mRNA表达;收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),进行细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)计数,HE染色评价肺组织病理变化.结果哮喘模型组小鼠肺组织GATA-3蛋白表达水平、肺组织IL-5、13 mRNA表达水平、BALF细胞总数及EOS计数均明显高于正常对照组(Pa<0.01);ODN组小鼠肺组织IL-5、13 mRNA表达水平均明显低于哮喘模型组(Pa<0.01),BALF中细胞总数及EOS计数亦均较哮喘模型组显著减少(Pa<0.01),HE染色显示ODN组小鼠肺血管周围和支气管周围炎性反应明显减轻;而mODN组小鼠与哮喘模型组比较,上述指标均无明显变化.结论GATA-3高表达在小鼠哮喘模型效应阶段呼吸道炎性反应中具有重要作用,GATA-3圈套核苷酸通过特异性阻断GATA-3活性,有效抑制Th2型细胞因子的产生,从而减轻哮喘小鼠呼吸道炎性反应.GATA-3 圈套核苷酸可作为一种新的方法治疗哮喘及其他以Th2型免疫反应为主的变应性疾病.     

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??Objective??To observe the clinical efficacy of Huaiqihuang in the treatment of children with bronchial asthma and its effects on the level of cytokines Th1??Th2 and PON1. Methods??A total of 180 children with bronchial asthma admitted between June 2014 and June 2015 in the Fourth Hospital of Baotou were randomized into the observation group??96 cases of GINA regimen treatment combined with Huaiqihuang??and the GINA regimen treatment group??84 cases????healthy children were enrolled as control group??50 cases??. Times of respiratory tract infection occurrence, asthmatic attacks, application of emergency medicine, hospitalization due to asthmatic and the levels of IL-4??IL-12??IL-13??INF-γ and PON1 were observed before and after treatment. Results??There were significant differences about the times of upper respiratory tract infections, bronchitis and pneumonia, asthma attacks, application of emergency medicine and hospitalization due to asthmatic??P??0.05??. There were significant differences about the changes of IL-4, IL-12, IL-13, INF-γ and PON1 before and after treatment??P??0.01??. Conclusion??The treatment of bronchial asthma in children with Huaiqihuang granule can reduce the incidence of respiratory infections and the number of asthmatic attacks and improve clinical effect. The Huaiqihuang granule alleviating asthma symptoms may by decreasing the levels of Th2 cytokines??IL-4??IL-13??and also by increasing the levels of Th1 cytokines??IL-12, IFN-γ??and PON1.     

Reduced IL-2-induced IL-12 responsiveness in atopic children

Atopy may be associated with a reduced T-cell function particularly regarding maturation of T helper 1 (Th1) responses. We hypothesized that atopic children may have a reduced capacity to up-regulate the β₂ subunit of the interleukin-12 (IL-12) receptor (IL-12Rβ₂, the signal-transducing component). The study included 38 children followed from birth to the age of 7 years. Twenty one had a cumulative history of atopic disease, whereas 17 had none. Sixteen out of 21 children also had atopic symptoms within the past year (current), out of whom 10 children had atopic airway symptoms. The expression of IL-12Rβ₂ mRNA was analyzed by quantitative real-time PCR and the secretion of interferon-γ (IFN-γ), IL-5 and IL-10 was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Children with current atopic airway symptoms and high levels of total IgE up-regulated IL-12Rβ₂ mRNA expression less than non-atopic children with low IgE levels after IL-2 stimulation. This was accompanied by a low IL-2- and IL-12-induced IFN-γ production, possibly reflecting the reduced capacity of atopic children to up-regulate the IL-12 receptor. As IL-2 is needed to initiate and sustain immune responses and IL-12 promotes Th1 responses, this may contribute to the Th2-skewed pattern in atopic children.     

Th17细胞及其在哮喘等过敏性疾病中的作用

Th17细胞作为独立的CD4+T细胞谱系,分泌一系列特有的免疫调节因子,在各种免疫介导的疾病中发挥重要作用.研究证明,Th17分泌的特征性细胞因子IL-17,参与哮喘等过敏性疾病的诱导,介导其炎症过程.IL-17诱导产生趋化因子IL-8,在严重哮喘的气道中募集中性粒细胞浸润,而且可能对哮喘息者气道腺体的高分泌、气道高反应性及气道重塑起作用.假设Th17细胞过度活化和过敏性气道炎症之间存在密切关联,那么针对Th17细胞的治疗方法将有广阔前景,但其临床应用有待进一步研究.     

Th17细胞及其在哮喘等过敏性疾病中的作用

Th17细胞作为独立的CD4+T细胞谱系,分泌一系列特有的免疫调节因子,在各种免疫介导的疾病中发挥重要作用.研究证明,Th17分泌的特征性细胞因子IL-17,参与哮喘等过敏性疾病的诱导,介导其炎症过程.IL-17诱导产生趋化因子IL-8,在严重哮喘的气道中募集中性粒细胞浸润,而且可能对哮喘息者气道腺体的高分泌、气道高反应性及气道重塑起作用.假设Th17细胞过度活化和过敏性气道炎症之间存在密切关联,那么针对Th17细胞的治疗方法将有广阔前景,但其临床应用有待进一步研究.     

Th17细胞及其在哮喘等过敏性疾病中的作用

Th17细胞作为独立的CD4+T细胞谱系,分泌一系列特有的免疫调节因子,在各种免疫介导的疾病中发挥重要作用.研究证明,Th17分泌的特征性细胞因子IL-17,参与哮喘等过敏性疾病的诱导,介导其炎症过程.IL-17诱导产生趋化因子IL-8,在严重哮喘的气道中募集中性粒细胞浸润,而且可能对哮喘息者气道腺体的高分泌、气道高反应性及气道重塑起作用.假设Th17细胞过度活化和过敏性气道炎症之间存在密切关联,那么针对Th17细胞的治疗方法将有广阔前景,但其临床应用有待进一步研究.     

IL-12对支气管哮喘小鼠Th2免疫应答的影响

目的　哮喘是Th2细胞介导的气道慢性非特异性炎症。IL 12在抗原致敏阶段可有效抑制Th2免 疫应答形成,而对已产生的Th2免疫应答是否同样具有抑制作用尚有争议。本研究探讨IL 12对哮喘时已产生的 Th2免疫应答的影响,为临床应用提供可靠的理论依据。方法　实验一:取25只6～8周雌性BALB/c小鼠,腹腔 注射鸡卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝致敏。于致敏前、致敏后第7,14,21,28天,各取处死5只检测脾脏单个核细胞 培养上清液中的Th2类细胞因子IL 4和IL 5水平,观察Th2免疫反应形成情况。实验二:另取40只相同小鼠随机 分为哮喘组(n=20)和IL 12治疗组(n=20),均腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝致敏后雾化吸入OVA诱 发哮喘。IL 12治疗组在致敏后25d开始连续5d腹腔内注射0.5μg(1mL)重组IL 12,哮喘组仅注射PBS。两组 均在最后1次诱发后(致敏后30d)处死,取支气管肺泡灌洗液(BALF)和脾脏单个核细胞培养上清液检测Th2类 细胞因子IL 4、IL 5和Th1类细胞因子IFN γ水平(ELISA法)。结果　实验一:小鼠在致敏后14d脾脏单个核细 胞分泌IL 4和IL 5明显增高,说明小鼠致敏后第14天已形成Th2免疫应答。实验二:与哮喘组比较,IL 12治疗组 BALF中IL 4(192±19pg/mLvs19±5pg/mL)和IL 5浓度(328±71pg/mLvs141±15pg/mL     

哮喘患儿IL-4、IL-12与IgE水平的初步研究

采用双抗夹心EIASA法测定30例哮喘发作期、12例哮喘缓解期患儿血浆及外周血单个核细胞(PBMC)白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素12(IL-12)与血清IgE的水平,结果表明:哮喘患儿发作期、缓解期血清IgE水平、血浆及PBMC经PHA和LPS刺激后的IL-4水平较正常对照组明显升高(P<0.01),IL-12水平较正常对照组明显降低(P<0.01)。且缓解期IgE、IL-4及IL-12水平较发作期均有明显差异(P<0.05)。提示哮喘患儿发作期及缓解期均存在IgE、IL-4及IL-12水平失衡。     

IL-4IL-5及IgE在儿童咳嗽变异性哮喘中的价值

目的：咳嗽变异性哮喘(CVA)是一种与气道炎症相关的疾病,有研究表明IL-4,IL-5与IgE的产生有相关性,而且与哮喘的形成有关,因此推测IL-4,IL-5在CVA发病中起重要作用。该文旨在观察IL-4,IL-5及IgE在咳嗽变异性哮喘中的诊断价值。方法：用酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测咳嗽变异性哮喘患儿、哮喘急性发作期患儿、正常同龄儿童各30例外周血单个核细胞(PBMC)内IL-4,IL-5及血清IgE水平。结果：①咳嗽变异性哮喘患儿发作期PBMCIL-4为91.57±12.19ng/L、IL-5为13.28±0.31ng/mL,显著高于缓解期的74.68±11.54ng/L,6.53±0.28ng/mL及正常对照组70.32±18.16ng/L,5.29±0.36ng/mL,(均P<0.01),但缓解期及正常对照组间差异无统计学意义;②咳嗽变异性哮喘发作期患儿血清IgE水平为279.6±41.3KU/L,显著高于缓解期153.8±37.5KU/L,两组均显著高于正常对照组的90.6±44.8KU/L,(均P<0.01);③咳嗽变异性哮喘患儿发作期IL-4,IL-5及IgE水平与哮喘患儿发作期的92.21±3.12ng/L,15.11±1.37ng/mL,287.5±41.9KU/L之间相比差异无统计学意义。结论：联合检测单个核细胞内IL-4,IL-5及血清IgE水平对咳嗽变异性哮喘的诊断有重要价值;IL-4,IL-5可能在咳嗽变异性哮喘的发病机制中起重要作用;咳嗽变异性哮喘可能存在与哮喘相同的发病机制,是典型哮喘的前驱表现。     

Childhood asthma as an allergic disease: rationale for the development of future treatment

The fundamental abnormality in asthma is inflammation of the airways. T-helper 2 (Th2) lymphocytes are the key orchestrators of this inflammation, initiating and propagating inflammation through the release of Th2 cytokines. Interleukins(IL)-4, IL-5 and IL-13. IL-4 and IL-13 promote IgE production by B-cells, mast cell growth and differentiation, and upregulate adhesion molecule expression on vascular endothelium. IL-4 also promotes differentiation of uncommitted Th0 lymphocytes into Th2 lymphocytes. IL-5 promotes differentiation and recruitment of eosinophils and activates them to degranulate within tissues, resulting in damage to the respiratory epithelium. Current treatment of childhood asthma relies predominantly on corticosteroids that have nonspecific anti-inflammatory activity and are associated with potential side-effects. Novel therapies that selectively target the underlying immunopathogenesis hold great promise. Disruption of the Th2 lymphocyte induced allergic inflammatory response represents a novel approach to selectively inhibiting allergic inflammation at its origin. Possible therapeutic interventions include inhibition of Th2 response (CpG oligonucleotides, vaccination, CTLA4Ig fusion protein, IL-12, IL-10), inhibition of IgE (the anti-IgE antibody rhuMAb-E25 omalizumab, which is undergoing clinical trials), inhibition of mediator activity (leukotriene modifiers, which are approved for use in childhood asthma), and targeting Th2 cytokines (soluble IL-4 receptors, IL-5 antibody, IL-13). Other therapeutic approaches targeting downstream events in the allergic inflammatory cascade are also currently under investigation (chemokine receptors CCR3, tryptase inhibitors, and inhibitors of cyclic AMP-specific phosphodiesterase 4). CONCLUSION: As we further understand the pathophysiology of asthma, the potential to develop novel treatments increases. This paper addresses current possible new treatments for the future.