2009年深圳口岸流感疫情监测结果分析

目的分析深圳口岸2009年流感监测结果,了解口岸这一特定人群流感流行特征。方法选择监测期内由深圳罗湖口岸、福田口岸、深圳湾口岸3个传染病监测口岸工作部采集入境有流感样症状的发热旅客鼻咽拭子样本,提取病毒RNA,采用实时荧光定量PCR法进行检测;同时进行流行病学个案调查。结果共采集鼻咽拭子样本2 166份,其中497例阳性,总阳性率为22.95%。甲型H1N1流感阳性264例(占53.12%),季节性甲型流感阳性220例(占44.27%),季节性乙型流感阳性13例(占2.62%)。男性样本1590份,阳性339例(阳性率21.32%);女性样本576份,阳性158例(阳性率27.43%)。10～19岁年龄组甲型流感病毒阳性率最高,为21.91%。2009年7、8月流感阳性率最高,阳性率分别为46.70%,41.44%;其次为2009年1、2月,阳性率分别为19.61%、21.70%。结论深圳口岸存在甲型H1N1、季节性甲型和乙型3种流感流行,以甲型H1N1和季节性甲型流感病毒为优势流行毒株;青少年易于感染甲型流感。     

拱北口岸入境人员甲型H1N1流感样症状监测结果分析

〔目的〕了解珠海市拱北口岸入境人员中有流感样症状的旅客甲型H1N1流感病毒感染情况,分析其流行特征,从而有效地开展口岸甲型H1N1监测工作。〔方法〕对拱北口岸2009年5—12月份入境人员中有流感样症状旅客监测资料进行统计分析。〔结果〕2009年5—12月份共监测具有流感样症状旅客1488例,经分子生物学检测确诊甲型H1N1流感患者70例,检出率为4.70%。70例确诊病例均以发热表现为主,伴有头痛、咽喉痛及咽部充血、咳嗽、肌肉关节痛等流感样症状。病例以从国外归来的中国籍旅客为主,占确诊病例的85.71%,10～19岁年龄组甲型H1N1流感检出率最高,为8.28%。〔结论〕甲型H1N1流感在世界范围传播迅速,且拱北口岸入境人员中甲型H1N1流感病例逐渐增多,加强甲型H1N1流感防控已成为口岸防控传染病的重点工作之一;加强入境人员甲型H1N1流感监测,加大卫生知识宣传咨询力度,提高入境人员的自我防范意识,以及制定有效防治措施,将有利于防止甲型H1N1流感在国际间的传播。     

2009－2012年广东口岸输入性流感疫情监测结果分析

目的对2009—2012年广东口岸输入性流感病例的流行病学特征进行分析,为出入境口岸流感的监测及其防控工作提供依据。方法采集广东25个口岸有发热症状的入境人员的鼻咽拭子,采用实时荧光RT-PCR法对样本进行流感病毒的检测及分型．通过Excel、SPSS18．0对不同型别的流感阳性病例的流行情况进行统计分析。结果2009—2012年广东口岸共发现5723名发热病例,其中985例为输入性流感病例,检出率为17．21％。共呈现5个流行高峰,分别为2009年6—8月,以季节性甲型流感为主;2009年10-12月,以甲型H1N1流感（2009）为主;2010年7-9月,以季节性甲型流感为主;2010年12月-2011年2月,以甲型H1N1流感（2009）为主;2011年12月-2012年2月,以季节性乙型流感为主。甲型H1N1流感（2009）在19岁以下人群检出率较高,季节性甲型流感以50岁以上人群检出率最高,季节性乙型流感则以19岁以下及50岁以上人群检出率较高。结论2009年5月至2012年2月期间,广东口岸入境流感病例中同时有甲型H1N1流感（2009）、季节性甲型流感以及季节性乙型流感的流行,并呈现相互交替的流行特征。不同流感类型在各年龄层分布不同．与性别无关。     

2013年崇左市流行性感冒实验室检测结果分析

目的对崇左市2013年流行性感冒(流感)实验室控检测结果进行分析,了解2013年崇左市流感病原学特征,为实验室诊断流感提供参考。方法采集2013年崇左市人民医院及各地送检的流感样病例咽拭子标本912份,应用实时反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)技术检测样本中的AM、BNS、H1HA、H3HA、SWH1 HA、H5HA、H9HA、H7HA、N9NA基因。结果 912份标本中,检测到乙型流感病毒核酸阳性19份,季节性流感病毒H1亚型核酸阳性0份,季节性流感病毒H3亚型阳性4份,甲型H1N1病毒特异性基因片段阳性58份,季性性H3和甲型H1N1流感病毒核酸同时阳性1份,均未检测到人感染高致病性禽流感中的H5HA、H9HA、H7HA、N9NA基因。甲型H1N1的检出率较高为6.36%(58/912),阳性构成比为70.73%。乙型流感病毒核酸阳性率为2.08%(19/912),季节性H1流感病毒阳性率为0.00%(0/912),季节性H3流感病毒阳性率为0.44%(4/912),季性性H3和甲型H1N1流感病毒核酸同时阳性率为0.11%(1/912)。均未检测出人感染H5,H9,H7N9禽流感病毒。结论甲型H1N1仍是2013年崇左市流感的主要毒株类型,流行趋势以散发为主,较2009年大暴发流行有所下降。     

深圳口岸流感771例流行病学特征分析

目的 分析深圳口岸771例流感病例的流行病学特征,为出人境口岸流感监测和预防控制提供依据.方法 收集2009年5月-2011年2月深圳各口岸监测到的流感病例771例,进行描述性流行病学分析.结果 771例流感病毒核酸阳性病例均为经深圳口岸入境的人员,以中国内地与香港最多(共91.6％);男女比例为2.3∶1,年龄＜40岁青壮年为主(73.28％);临床症状较轻,以发热为主(94.3％),体温大多＜39℃(79.8％);监测期间入境人员流感有3次高峰,分别为2009年6-9月、2010年7-10月以及2011年1—2月,第1个高峰以季节性H3型流感为主,第2个高峰以季节性H3型与甲型H1N1流感为主,第3个高峰则以甲型H1N1流感为主.结论 深圳各口岸流感的主要流行型别从季节性H3型流感逐渐转变为新型甲型H1N1流感;发病以青壮年为主.     

北京首都机场输入性甲型H1N1流感疑似及确诊病例回顾性分析

目的对输入性甲型H1N1流感疑似病例及确诊病例流行病学分析,主要是对人口学特征和临床体征进行统计分析,看两类人群是否存在差异,找出口岸甲型H1N1流感的主要筛查指标。方法对确诊病例的人口学特征、临床体征、流行病学特征等进行统计描述,计算各种特征在确诊病例中出现的概率,并按照人口学特征、临床特征、流行病学特征进行分类排序,找出口岸入境旅客中甲型H1N1流感的易感人群和高危人群。结果主要输入性确诊病例来自澳大利亚、美国、加拿大、英国、新加坡、香港、日本、韩国等疫情较严重国家和地区,占全部确诊病例的76.96%;确诊病例以回国华裔旅客为主,占全部确诊病例的68.5%;确诊病例年龄段主要分布在30岁以下,占全部确诊病例的85.6%;结论口岸入境旅客中甲型H1N1流感感染危险因素为来自甲型H1N1流感疫情主要流行国家,以外籍华人、青少年和归国留学生为主,具有发热、咳嗽、咽部充血的典型症状等。     

东莞市2009年流感监测分析

[目的]了解东莞市流感流行动态,探索流行规律,为该市流感的防控提供科学依据。[方法]每周统计监测点流感样病例数据,采集流感样病例咽拭子标本进行流感病毒核酸检测,并进行季节性流感病毒分离。[结果]东莞市监测门诊全年共监测门诊病例2688759人次,累计报告流感样病例61982例,流感样病例占门急诊病例总数构成比为2.31%;流感病毒核酸检测769例,结果阳性377例,核酸检测阳性率为49.02%,其中新型甲型H1N1流感197例,季节性H3N2型91例,季节性H1N1型40例,乙型29例,其他型别20例;共分离出季节性流感病毒83株,分离阳性率为6.72%,其中季节性H3N2流感病毒31例,乙型流感病毒30例,季节性H1N1流感病例20例,季节性H1N1及乙型流感病毒混合感染2例;共报告流感及流感样病例暴发疫情64起,其中甲型H1N1流感聚集性疫情50起、季节性流感及流感样病例聚集性疫情各7起,学校疫情占93.75%。东莞市2009年流感发病高峰为6～7月及9～12月,1～5月以乙型流感为主,6～8月以季节性甲型流感为主,9～12月以甲型H1N1流感为主导。[结论]2009年该市出现了两个流感活动高峰,6月份以来该市流感的优势毒株逐渐由季节性流感向甲型H1N1流感转变,预计在2010年上半年,新型甲型H1N1流感病毒传播将依然活跃,出现暴发疫情的风险仍然存在,仍会有重症和死亡病例的出现。     

一起外轮群体性甲型H1N1流感病例的实验室检测及分析

目的分析、溯源一起外籍船员群体性流感的原因。方法结合流行病学调查结果,采集所有船员的鼻咽拭子,处理后利用实时荧光PCR法对样本进行甲型流感、乙型流感、禽流感、甲型H3N2流感及新型甲型H1N1流感的检测;同时对所选样本进行RT-PCR确证检测及HA基因测序分析并构建分子进化树。结果实时荧光PCR检测结果显示,6例患者的甲型流感病毒及新型甲型H1N1流感病毒检测均为阳性,但均未检出乙型流感、禽流感及甲型H3N2流感病毒;RT-PCR确证实验以及HA基因测序结果也表明为新型甲型H1N1流感病毒阳性。结论引起本次群体性流感事件的原因为新型甲型H1N1流感病毒感染。分子进化分析表明,引起本次流感事件的病毒株与从香港分离得到的病毒株属同一分支。     

自贡市2009年流感哨点医院检测结果分析

[目的]了解自贡市流感病毒感染状况,为制定预防和控制流感措施提供依据。[方法]采集2009年6～12月自贡市流感哨点医院流感样病人的咽拭子标本,分别用实时荧光Real-time PCR与逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)方法对甲型H1N1、季节性流感A(H1N1)亚型、季节性流感A(H3N2)亚型和乙型流感病毒的RNA进行检测。[结果]收到的327例流感样患者的咽拭子标本中,检出甲型H1N1流感119例,阳性率36.4%、季节性流感A(H1N1)亚型阳性16例,阳性率4.9%;季节性流感A(H3N2)亚型阳性4例,阳性率1.2%;未检出乙型流感病毒。甲型H1N1流行时间分布:9月开始流行,当月检出阳性率为38.9%,11月达到顶峰,10月、11月、12月甲型H1N1流感检出的阳性率分别为34.4%、64.5%、29.5%。[结论]自贡市2009年流感流行以甲型H1N1流感为主,流行在11月达到高峰,12月甲型H1N1流感疫情出现明显下降趋势,流感防控取得阶段性成果;季节性流感以A(H1N1)和A(H3N2)亚型为主,无乙型流感发生。     

广东省2009年扩大流感监测结果分析

目的分析广东省扩大流感监测结果,探讨监测结果在疫情评估中的信息利用。方法2009年6月起广东省实施了扩大流感监测项目,将原有覆盖8个地级市的流感监测网络扩大到覆盖全省21个地级市,共设有22家国家级网络实验室、28家国家级流感样病例及病原学监测哨点医院及36家省级流感样病例监测哨点的监测网络,监测内容包括流感样病例、病原学及暴发疫情等,并对2009年6月至12月扩大流感监测项目的各项监测数据进行描述性流行病学分析。结果广东省自2009月6月1日至12月27日期间,出现了2次流感样病例就诊高峰,发病高峰期间流感样病例就诊指数(ILI%)分别达到7.05%和8.06%;第1个高峰发生在7月(第29—31周),季节性流感就诊指数峰值为2.58%,;第2次高峰发生在11月(第48周),甲型H1N1流感就诊指数峰值为4.38%;同期共收集流感样病例监测标本17 325份,流感病毒核酸总阳性率为35.02%(5 868/16 758),其中,季节性流感病毒阳性率为14.75%(2 472/16 758),甲型H1N1流感病毒阳性率为20.26%(3 396/16 758);流感病毒分离结果显示流感病毒培养阳性率为23.75%(1 093/4 602),其中,季节性流感毒株828株(以季节性流感H3N2毒株为主);甲型H1N1流感病毒毒株265株;同期共发生流感样病例暴发事件413起,其中,甲型H1N1流感暴发共287起,占暴发事件数的69.49%。结论扩大流感监测结果可客观反映广东省甲型H1N1流感的发病特征。流感样病例就诊高峰、流感病毒阳性检出高峰与暴发事件发生高峰的出现时间相一致。甲型H1N1流感的出现未引起季节性流感的流行特征的变化。     

湖北省大流行期和流行后期新甲型H1N1流感病毒基因特性分析

目的 了解湖北省大流行期和流行后期新甲型H1N1流感病毒在流行分布、基因进化、抗原表位和耐药位点等方面的差异情况。方法 对2009-2014年湖北省大流行期和流行后期新甲型H1N1流感病毒血凝素和神经氨酸酶的系统进化树、进化速率和氨基酸突变位点进行对比分析。结果 大流行期病毒核酸阳性率大于流行后期,但大流行期病毒血凝素和神经氨酸酶基因进化速率均小于流行后期,且神经氨酸酶进化速率在两个时期都大于血凝素。血凝素抗原表位突变位点K163Q、A186T、S185T和S203T在大流行期与流行后期病毒的分布数和位置存在不同偏嗜,流行期鲜有的H275Y耐药位点在流行后期的三株病毒中被发现。结论 流行后期的新甲型H1N1流感病毒进化速率不断提高,抗原表位和神经氨酸酶抑制剂耐药位点不断积累,防控工作愈加严峻,需进一步加强该病毒基因特性和耐药分析的监测。     

2017 - 2018年山东省甲型H1N1流感病毒耐药性分析

目的 调查山东省2017 - 2018流感监测年度甲型H1N1流感病毒对神经氨酸酶抑制剂（NAI）的耐药情况,分析其神经氨酸酶（NA）基因特征。方法 选取山东省2017 - 2018流感监测年度分离的20株甲型H1N1流感病毒进行生物学耐药实验,检测病毒对奥司他韦和扎那米韦的药物敏感性。提取病毒核酸后对NA基因进行测序,利用生物信息学软件分析NA基因上与耐药有关的氨基酸位点及其基因变异情况。结果 选取的20株甲型H1N1流感病毒全部对奥司他韦和扎那米韦敏感,对奥司他韦的IC50平均数为0.37 nM（0.15～0.89 nM）,对扎那米韦的IC50平均数为0.28 nM（0.14～0.78 nM）。NA基因测序结果也没有发现导致耐药的突变位点。结论 山东省的甲型H1N1流感病毒对NAI敏感,临床上可继续使用此类药物对流感患者进行治疗。     

The 2009 pandemic H1N1 virus induces anti-neuraminidase (NA) antibodies that cross-react with the NA of H5N1 viruses in ferrets

A miniaturized neuraminidase inhibition (NI) assay using HA-mismatched H6 reassortant viruses was performed to examine the neuraminidase (NA)-specific antibody response in ferrets immunized with live-attenuated influenza vaccine (LAIV) strains. The strains tested possessed different NAs derived from seasonal H1N1 and H3N2, 2009 pandemic H1N1, and the highly pathogenic influenza H5N1 virus. The anti-NA antibodies from the 2009 pandemic strain (A/California/7/2009) immunized ferrets cross-reacted with the NA of H5N1 but not with the NA of seasonal H1N1 viruses. The plaque size reduction assay confirmed the cross-reactivity between the NAs of A/California/7/2009 and the H5N1 virus. Sequence and structural analyses of these N1 NA proteins showed that the NA of the 2009 pandemic H1N1 strain shared at least 22 more amino acids in the head domain with the NAs of the avian H5N1 strains than with the NAs of seasonal human H1N1 viruses. Our data demonstrated LAIV-induced NA antibody responses in ferrets and cross-reactive NA antibodies induced by 2009 pandemic H1N1 and H5N1 LAIV viruses.     

Recombinant H1N1 virus-like particle vaccine elicits protective immunity in ferrets against the 2009 pandemic H1N1 influenza virus

The pandemic virus of 2009 (2009 H1N1) continues to cause illness worldwide, especially in younger age groups. The widespread H1N1 virus infection further emphasizes the need for vaccine strategies that are effective against emerging pandemic viruses and are not dependent on the limitations of traditional egg-based technology. This report describes a recombinant influenza virus-like particle (VLP) vaccine consisting of hemagglutinin (HA), neuraminidase (NA), and matrix (M1) proteins of influenza A/California/04/2009 (H1N1) virus. Influenza H1N1 VLPs with a diameter of approximately 120 nm were released into the culture medium from Sf9 insect cells infected with recombinant baculovirus coexpressing HA, NA, and M1 proteins. Purified recombinant H1N1 VLPs morphologically resembled influenza virions and exhibited biological characteristics of influenza virus, including HA and NA activities. In the ferret challenge model, 2009 influenza H1N1 VLPs elicited high-titer serum hemagglutination inhibition (HI) antibodies specific for the 2009 H1N1 virus and inhibited replication of the influenza virus in the upper and lower respiratory tract tissues following A/Mexico/4482/09 (H1N1) virus challenge. Moreover, a single 15 μg dose of H1N1 VLPs resulted in complete virus clearance in the ferret lung. These results provide support for the use of recombinant influenza VLP vaccine as an effective strategy against pandemic H1N1 virus.     

Outbreaks of pandemic (H1N1) 2009 and seasonal influenza A (H3N2) on cruise ship

To determine the extent and pattern of influenza transmission and effectiveness of containment measures, we investigated dual outbreaks of pandemic (H1N1) 2009 and influenza A (H3N2) that had occurred on a cruise ship in May 2009. Of 1,970 passengers and 734 crew members, 82 (3.0%) were infected with pandemic (H1N1) 2009 virus, 98 (3.6%) with influenza A (H3N2) virus, and 2 (0.1%) with both. Among 45 children who visited the ship's childcare center, infection rate for pandemic (H1N1) 2009 was higher than that for influenza A (H3N2) viruses. Disembarked passengers reported a high level of compliance with isolation and quarantine recommendations. We found 4 subsequent cases epidemiologically linked to passengers but no evidence of sustained transmission to the community or passengers on the next cruise. Among this population of generally healthy passengers, children seemed more susceptible to pandemic (H1N1) 2009 than to influenza (H3N2) viruses. Intensive disease control measures successfully contained these outbreaks.     

Stability of neuraminidase in inactivated influenza vaccines

Influenza vaccines are effective in protecting against illness and death caused by this seasonal pathogen. Antibodies that block the function of either hemagglutinin (HA) or neuraminidase (NA) contribute to vaccine efficacy, however vaccine potency is based only on HA content. NA protein content in vaccines varies from season to season due to differences in the relative amounts of HA and NA in influenza A, H1N1 and H3N2, and influenza B viruses that are selected for each manufacturing campaign. This, as well as potential inherent differences in NA immunogenicity, may result in varying responses from year to year. Moreover, the antigenic stability of NA is likely to dictate whether similar antibody responses will be obtained to this antigen throughout the shelf-life of the vaccine. To address this factor, we subjected NAs of influenza A (subtypes N1 and N2) and B viruses to denaturing conditions to evaluate the stability of enzyme activity. Each NA type/subtype had unique sensitivity to denaturing conditions. The N2 enzyme activity was more thermostable than that of N1 or influenza B, while the NA activity of influenza B was most resistant to detergent. N1 enzyme activity was most resistant of the three NAs to freeze–thaw cycling. In these experiments, enzyme activity was indicative of the immunogenicity of NA, but was strain-dependent, with greater neuraminidase inhibiting (NI) antibody titers elicited following immunization with the 2009 H1N1 pandemic virus A/California/7/2009, than the previously circulating seasonal H1N1 strain, A/Brisbane/59/2007. Robust NI antibody titers against both N1 and N2 components were induced following vaccination of mice with a trivalent inactivated influenza vaccine. When stored under recommended conditions, the NA of both N1 and N2 subtypes remained immunogenic well after the vaccine expiry date.     

郴州市2009年流感病原学监测及A(H1N1)NA基因特征研究

[目的]了解2009年郴州市流感病毒流行株的病原学特征,为流感防控提供科学依据。[方法]采集哨点医院ILI咽拭子标本,用MDCK细胞进行病毒分离,采用HA和HI试验对流感病毒进行分型鉴定;采集暴发疫情ILI咽拭子用PCR法检测流感病毒核酸;随机抽取4、10月份的季节性A(H1N1)流感毒株进行NA基因测序,测序结果与国内各省市流行株及WHO推荐的北半球疫苗株作同源性比对,绘制种系进化树。[结果]分离哨点医院监测标本2284份,阳性254份:其中季节性A(H1N1)109株、A(H3N2)97株、甲型H1N130株、B型18株;PCR检测3024份标本,甲型H1N1核酸阳性1002份,阳性率33.13%;BLAST比对结果显示,4、10月份的季节性A(H1N1)毒株与2009年WHO推荐的北半球疫苗毒株A/Brisbane/59/2007的核酸同源性分别为99%和98%;种系进化分析结果表明4月份分离株与疫苗株亲缘关系最近,而10月份分离株较4月份分离株已明显发生变异。[结论]2009年郴州市甲型流感病毒异常活跃,其中1～6月季节性A(H1N1)为优势毒株,7～9月A(H3N2)为优势毒株,10～12月甲型H1N1为优势毒株,且出现甲型H1N1流感大流行。季节性A(H1N1)病毒在流行过程中NA基因已经发生了一定的变异,有必要持续跟踪和监测其变异情况。     

2009年山东省四起甲型H1N1流行性感冒样病例暴发疫情病原学分析

目的 通过对2009年山东省济宁市4起流行性感冒(简称流感)样病例暴发疫情进行病原学分离鉴定,以及对血凝素基因(HA)和神经氨酸酶基因(NA)特性分析,研究其基因变异情况.方法 采集4起流感样病例暴发疫情中发热患者的鼻咽拭子标本34份,采用逆转录实时PCR(realtime RT-PCR)方法进行核酸检测,对阳性标本开展病毒分离,并对分离的甲型H1N1流感病毒的HA、NA基因序列进行测序.利用DNAStar软件对序列进行同源性分析,利用Mega 4.0软件进行基因进化分析和氨基酸进化分析.与WHO推荐的疫苗株及国内代表株进行对比.结果 在34份鼻咽拭子标本中,17份甲型H1N1流感病毒阳性,11份标本分离培养出了甲型H1N1流感病毒.将其中的7株进行HA基因和NA基因测序,HA、NA基因的同源性分别为98.4%～99.6%、99.2%～100.0%.与WHO推荐的疫苗株及国内代表株相比,有11个HA基因的氨基酸发生替换,分别为38、40、56、90、100、145、172、173、220、303及338位,其中38、40和303位位于抗原决定簇C区,172和173位位于抗原决定簇D区,56位位于抗原决定簇E区,同时40位为糖基化位点;有7个NA基因的氨基酸发生了替换,为80、106、241、248、351、369和386位,386位为糖基化位点;未发生神经氨酸酶蛋白275位H-Y的替换.结论 山东省甲型H1N1流感暴发流行株HA基因和NA基因均具有高度同源性,HA蛋白和NA蛋白均存在不同程度的氨基酸替换,部分流行株抗原决定簇和糖基化位点发生改变.     

Influenza virus-like particles comprised of the HA, NA, and M1 proteins of H9N2 influenza virus induce protective immune responses in BALB/c mice

Avian influenza viruses represent a growing threat for an influenza pandemic. To develop recombinant vaccine for avian influenza of the H9N2 subtype, we expressed in insect cells virus-like particles (VLPs) consisting of three structural proteins of influenza A/Hong Kong/1073/99 (H9N2) virus. Upon infection of Sf9 cells with recombinant baculoviruses, the hemagglutinin (HA), neuraminidase (NA), and matrix (M1) proteins were co-expressed in the infected cells, self-assembled, and released into the culture medium as VLPs of 80–120 nm in diameter. VLPs exhibited functional characteristics of influenza virus including hemagglutination and neuraminidase activities. In BALB/c mice, VLPs elicited serum antibodies specific for influenza A/Hong Kong/1073/99 (H9N2) virus and inhibited replication of the influenza virus after challenge. Thus, VLPs represent a potential strategy for the development of human vaccines against avian influenza H9N2 viruses.