白细胞介素-13对肾小球系膜细胞炎症反应的拮抗作用

目的:探讨白细胞介素-13(IL-13)对肾小球系膜细胞(MC)炎症反应的调节作用。方法:ELISA法测定体外培养MC上清中TNF-α浓度。流式细胞术检测MC膜表面ICAM-1表达。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)评估MCTNF-αmRNA及ICAM-1mRNA表达。结果:未受刺激的MC无TNF-αmRNA及其蛋白表达。经脂多糖(LPS)(10mg/L)刺激后,MC可高表达TNF-αmRNA及其蛋白。IL-13浓度为1μg/L、10μg/L时显著抑制LPS诱导MC表达TNF-αmRNA及其蛋白。IL-13(0.1μg/L)无抑制作用,IL-13(100μg/L)时完全抑制LPS诱导MC分泌TNF-α。无任何刺激时,MC低表达ICAM-1。TNF-α(100μg/L)诱导MC高表达ICAM-1mRNA及其蛋白。IL-13(10μg/L)和TNF-α(100μg/L)共作用MC,各时点均显示IL-13对TNF-α诱导MC表达ICAM-1mRNA及蛋白有抑制作用。结论:IL-13既抑制LPS刺激MC分泌TNF-α,也抑制TNF-α诱导MC表达膜糖蛋白ICAM-1。提示IL-13能从多个环节抑制MC的炎症反应。     

IL-13对LPS诱导人系膜细胞分泌IL-12的影响

目的: 探讨白细胞介素13（IL-13）对肾小球系膜细胞分泌白细胞介素12（IL-12）的影响作用。方法: 用酶联免疫吸附（ELISA）法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测系膜细胞IL-12蛋白和L-12p40 mRNA表达。结果: LPS诱导系膜细胞的IL-12p40 mRNA表达及其蛋白分泌（P<0.01）。IL-13在1-100 μg/L浓度范围内呈剂量依赖性抑制LPS诱导的系膜细胞IL-12分泌及其mRNA表达（P<0.05或P<0.01）。结论: IL-13可能通过抑制LPS诱导系膜细胞分泌IL-12，而调整了体内Th1/Th2细胞因子平衡。     

IL-13抑制人肾小球系膜细胞IL-12的表达

为了探讨白细胞介素 13(IL 13)对体外培养的人肾小球系膜细胞产生白细胞介素 12 (IL 12 )的影响。我们用脂多糖(LPS 10 μg/ml) ,不同浓度的IL 13对系膜细胞培养 ,分别采用ELISA法和半定量RT PCR法检测细胞上清液的IL 12和系膜细胞IL 12p4 0mRNA表达。结果提示 5 %NCSRPMI 16 4 0基础培养条件下的系膜细胞未检测到IL 12蛋白分泌及其mRNA表达。在LPS刺激下系膜细胞的IL 12p4 0mRNA表达加强 ,并分泌出大量的IL 12。IL 13在 1～ 10 0ng/ml浓度范围内对LPS诱导的系膜细胞IL 12分泌及IL 12p4 0mRNA表达的抑制作用呈剂量依赖趋势。本研究认为IL 13可能通过抑制IL 12的产生 ,而调整了体内Th1/Th2细胞因子平衡 ,作为抗炎性细胞因子在肾小球肾炎发病机制中发挥一定作用     

白细胞介素12与系统性红斑狼疮

白细胞介素12(IL-12)在诱导T细胞向Th1类细胞分化过程中起关键性作用,可选择性抑制自身免疫性抗体分泌细胞B1细胞的增殖.对系统性红斑狼疮(SLE)患者的多种体外研究均说明:IL-12分泌减少在SLE患者细胞因子分泌异常及多克隆自身抗体产生中起重要作用.     

LPS和IL-13影响系膜细胞表达IL-12的研究

目的：探讨脂多糖（LPS）及IL-13对系膜细胞表达IL-12的影响作用。方法：用酶联免疫吸附（ELISA）法检测LPS对系膜细胞分泌IL-12的影响，实验分组：①LPS（20μg／ml）对系膜细胞刺激不同时间；②不同剂量LPS刺激系膜细胞24小时。用ELISA法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测IL-13对系膜细胞IL-12蛋白和IL-12p40 mRNA表达的影响，分空白对照组，LPS（10μg／ml）刺激组及实验组（LPS 10μg／ml＋不同浓度的IL-13）。结果：未受LPS刺激的系膜细胞几乎不分泌IL-12，在一定的剂量范围内，LPS诱导系膜细胞显著表达IL-12，但随着LPS刺激时间及浓度的增加，IL-12的表达量反而减少。IL-13在1。100μg／ml浓度范围内呈剂量依赖性抑制LPS诱导的系膜细胞IL-12分泌及其mRNA表达（P〈0．01）。结论：LPS可诱导系膜细胞表达IL-12，但系膜细胞在表达IL-12时对LPS的长期及高浓度刺激产生耐受性。IL-13可能通过抑制LPS诱导系膜细胞分泌IL-12，作为抗炎性细胞因子在肾小球肾炎发病机制中发挥一定作用。 12；系膜细胞     

白细胞介素10 通过抑制自噬调节树突状细胞功能

目的:研究白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)对树突状细胞(Dendritic cells,DCs)自噬及功能的影响。方法:体外培养C57BL/6 小鼠骨髓来源的DCs 分为对照组、LPS 刺激组、IL-10 干预组、IL-10 与雷帕霉素干预组、雷帕霉素干预组,分别通过流式细胞术分析DCs 表面共刺激分子CD40、CD80 的表达、DCs 摄取OVA 抗原的比例以及诱导OT2 细胞增殖比例,ELISA 检测DCs 分泌IL-6,TNF-β的水平等DCs 相关功能;蛋白免疫印迹法检测DCs 自噬蛋白LC3 的表达,比较组间差异,以探讨IL-10 对DCs 功能及自噬的影响。结果:(1)与LPS 刺激组比较,IL-10 处理组DCs 的表面共刺激分子CD40、CD80的表达下降、分泌IL-6、TNF-β水平下降、刺激T 细胞增殖的比例明显减弱、摄取OVA 抗原的能力增加,IL-10+雷帕霉素干预组的DCs 与IL-10 单独处理组相比,表面CD80 的表达明显增加(P<0.05)、分泌IL-6、TNF-β能力及刺激T 细胞增殖的能力均明显增加(P<0.000 1)。(2)DCs 的自噬相关蛋白(LC3 / LC3 比例)明显下降。结论:IL-10 可能通过抑制DCs 自噬水平调节树突状细胞功能。     

小儿单纯性肾病白细胞介素6探讨

<正> 白细胞介素6(IL—6)是由T细胞等免疫活性细胞产生的多功能淋巴因子,具有诱导B细胞增殖、分化并产生抗体,刺激肝细胞产生急性期蛋白,诱导T细胞表达IL-2受体等多种作用。本文观察单纯性肾病(INS)患儿外周血淋巴细胞体外产生IL-6活性水平,并分析IL-6与患儿免疫球蛋白G的关系,以探讨INS低IgG血症的可能机理。     

Notch信号在脂多糖诱导的骨髓间充质干细胞中的作用

目的:探讨Notch信号对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和趋化因子CXCL1分泌的影响。方法:全骨髓培养法制备BMSCs;采用q PCR与Western blot实验比较LPS对BMSCs中Notch信号通路配体、受体及靶基因表达的变化;MTT法和活细胞计数检测Notch信号对细胞增殖的影响;并以ELISA法检测Notch信号通路抑制剂DAPT对IL-6和CXCL1分泌的调节作用。结果:经10μg/L、100μg/L和1 mg/L的LPS刺激后,BMSCs增殖和IL-6分泌呈现上升趋势(P0.05或P0.01)。q PCR与Western blot结果显示Notch信号通路受体和配体在BMSCs中均有表达,但LPS对其mRNA与蛋白水平并无明显影响,然而LPS可显著诱导Notch信号靶基因Hes1与Hey1的蛋白表达。Notch信号通路抑制剂DAPT可以降低LPS诱导的BMSCs活力的上升(P0.01),同时对LPS诱导的BMSCs增殖有抑制作用。另外,LPS显著诱导BMSCs中IL-6与CXCL1的分泌,而抑制Notch信号通路可显著抑制LPS所诱导的IL-6与CXCL1的分泌(P0.05)。结论:抑制Notch信号可以抑制LPS诱导的BMSCs增殖,并抑制IL-6与CXCL1的分泌。     

白细胞介素12与系统性红斑狼疮

白细胞介素 12 (IL - 12 )在诱导T细胞向Th1类细胞分化过程中起关键性作用 ,可选择性抑制自身免疫性抗体分泌细胞B1细胞的增殖 .对系统性红斑狼疮 (SLE)患者的多种体外研究均说明 :IL - 12分泌减少在SLE患者细胞因子分泌异常及多克隆自身抗体产生中起重要作用     

白细胞介素1β通过p38信号通路上调系膜细胞表达白细胞介素6

目的：探讨p38信号通路(p38MAPK)在白细胞介素1(IL-1)β上调肾小球系膜细胞表达白细胞介素6(IL-6)中的作用。方法：应用Western Blotting检测p38MAPK在IL-1β诱导的肾小球系膜细胞炎症反应中的活化程度，应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和ELJSA法检测IL-1β诱导的系膜细胞促炎症介质IL-6的表达水平并观察p38MAPK特异性抑制剂SB203580对其mRNA的转录和蛋白质生成的影响。结果：IL-1β以时间和剂量依赖方式刺激系膜细胞引起p38MAPK的活化，并明显上调系膜细胞IL-6表达。SB203580以剂量依赖方式从基因转录和翻译水平显著抑制IL-1β诱导的IL-6表达。结论：p38MAPK在IL-1β诱导的肾小球系膜细胞炎症反应产生炎症介质IL-6中起重要作用。     

白细胞介素-13上调巨核细胞系-Dami细胞原癌基因c-mpl的研究

目的:研究重组人白细胞介素-13(rhIL-13)对巨核细胞系-Dami细胞原癌基因c-mpl表达的影响。方法:用RT-PCR法检测c-mplmRNA的表达。用配体结合实验检测膜蛋白c-mpl的表达。结果:经25μg/LrhIL-13处理过的实验组Dami细胞c-mplmRNA的表达比对照组高24.8%。经100μg/LrhIL-13处理过的实验组Dami细胞膜蛋白c-mpl的表达比对照组高28.5%(P＜0.05)。结论:rhIL-13增强了Dami细胞原癌基因c-mpl表达;膜蛋白c-mpl与促血小板生成素(TPO)的结合功能正常;rhIL-13促进Dami细胞增殖的部分机制可能是通过上调原癌基因c-mpl的表达来实现的。     

白细胞介素3与c-kit+Lin-细胞的增殖

背景：c-kit+Lin-即为骨髓衍生肝干细胞,与其他造血干细胞类似,c-kit+Lin-细胞的数量有限,难以满足科研的需要。 目的：观察在无血清无基质的条件下,白细胞介素3和因子组合对扩增c-kit+Lin-细胞的影响。 方法：采用免疫磁珠法分离小鼠骨髓c-kit+Lin-细胞,在干细胞因子、肝细胞生长因子、FLt-3配基、促血小板生成素和白血病抑制因子组合中添加不同剂量的白细胞介素3培养7 d,检测细胞总数、c-kit+Lin-细胞扩增倍数及细胞凋亡率。 结果与结论：各因子组均可显著扩增c-kit+Lin-细胞,扩增倍数7~19倍不等。随白细胞介素3剂量加大,虽然细胞总数上升,但是超过一定浓度后c-kit+Lin-细胞扩增反而不明显。40 μg/L白细胞介素3组细胞总数扩增245.41倍,但c-kit+Lin-细胞扩增仅为15.80倍,与20 μg/L白细胞介素3组差异有显著性意义(P < 0.05)。但40 μg/L白细胞介素3组细胞凋亡率最低,仅为4.66%。提示白细胞介素3能协同干细胞因子+肝细胞生长因子+ FLt-3配基+促血小板生成素+白血病抑制因子有效地扩增c-kit+Lin-细胞,其表型并不受影响,但过高剂量反而促使干细胞分化。20 μg/L剂量的白细胞介素3扩增效果最佳。 关键词：骨髓c-kit+Lin-细胞;白细胞介素3;干细胞生长因子;肝干细胞;扩增 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.01.028      

Production by cultured human monocytes of mesangial cell proliferation factor(s) differing from interleukin-1 and interleukin-6.

Conditioned media from human peripheral blood leucocytes treated with lipopolysaccharide (LPS) induced a marked increase in the 3H-thymidine incorporation of cultured mesangial cells at low serum concentration (four to six times higher than control). Two sizes (100-70 and 8-12 kD) of monocyte-derived mesangial cell proliferating factors (MDF) were separated by column chromatography. Their peaks were distinct from those of thymocyte proliferating activity. The addition of anti-human interleukin-1 (IL-1) or anti-recombinant human interleukin-6 (IL-6) antibody to the fractionated MDF failed to have any effect on the mitogenic activity toward mesangial cells. The addition of anti-human platelet-derived growth factor (PDGF) antibody to the low molecular weight fraction decreased mesangial cell mitogenic activity (40-60% of control), but addition to the higher fraction did not (80-100% of control). From these data it seems that a large portion of the monocyte-derived mesangial cell growth factor was not comprised of IL-1 or IL-6 but of PDGF-like molecules; and that there is an unknown mesangial cell proliferating factor (or factors) besides IL-1, IL-6 and PDGF.     

肝素通过TLR4减少脂多糖刺激的人内皮细胞IL-8表达

目的:观察肝素对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的人内皮细胞白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)水平的影响,并探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR 4)在其中的可能影响。方法:用LPS(10 mg/L)刺激人肺微血管内皮细胞诱导损伤,肝素治疗组提前15 min分别加入100 U/L及10³ U/L普通肝素,正常对照组加入等量磷酸盐缓冲液。分别在刺激2、6、12 h收集细胞上清,采用酶联免疫吸附法测定上清中IL-8的浓度。在刺激2、6、12 h收集细胞提取RNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中IL-8、CD14及TLR4 mRNA水平变化。结果:与正常对照组比较,LPS刺激组IL-8 mRNA水平增高,6 h达到高峰,其蛋白水平于12 h达到高峰。LPS刺激下TLR4 mRNA水平增高,6 h达到高峰,肝素降低其水平,差异有统计学意义(P＜0.05)。未检测到CD14 mRNA的表达。结论:LPS刺激下人肺微血管内皮细胞IL-8表达增加。肝素可能通过调节TLR4降低IL-8的水平,从而发挥保护作用。     

IL-22对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的作用

目的:探究白细胞介素(IL)-22对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)功能的影响及机制。方法:组织块法培养RA-FLSs。将不同浓度(0、1、10、100μg/L)的重组人源性IL-22(rhIL-22)与RA-FLSs共培养24 h、48 h、72 h,CCK-8法检测细胞活力的改变;利用10μg/L的rhIL-22作用于RA-FLSs 24 h,流式细胞术检测细胞周期改变。rhIL-22和/或信号转导和转录因子3(STAT3)特异性抑制剂STA-21以不同浓度作用RA-FLSs 24h,Western blot法检测Bcl-2和p-STAT3蛋白水平的变化。结果:不同浓度的rhIL-22作用于RA-FLSs 24 h、48 h、72h后,RA-FLSs细胞活力明显增高,均显著高于对照组(P0.05)。rhIL-22刺激RA-FLSs后,S期和G_2/M期细胞明显增多,G_0/G_1期细胞减少。Western blot法检测结果提示rhIL-22可上调RA-FLSs中Bcl-2、p-STAT3的蛋白水平,而STA-21单用或联用rhIL-22均可抑制RA-FLSs中Bcl-2及p-STAT3的表达(P0.05)。结论:IL-22在RA-FLSs细胞活力和周期调节中起重要作用,且STAT3在IL-22促RA-FLSs细胞Bcl-2表达的过程中起关键作用,提示IL-22可能对RA-FLSs凋亡有一定的影响。     

重组白细胞介素13促进成纤维细胞增殖及胶原合成

目的：观察重组白细胞介素13（rIL-13）对3T3细胞的作用，探讨肺纤维化的发生机制。 方法： 3T3细胞分为实验组和对照组，分别加入rIL-13 (80 μg/L)及DMEM培养液, 作用24 h、48 h，利用透射电镜观察成纤维细胞的超微结构，用Hoechst 试剂盒观察细胞DNA形态；用MTT法测细胞增殖率，用Western blotting检测成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原以及用放免法检测细胞上清中IL-6、IL-8水平。 结果： 实验组细胞DNA合成增加，细胞核增大，细胞质中可见较多核糖体及线粒体；rIL-13呈剂量依赖方式刺激成纤维细胞增殖，当rIL-13浓度在40-160 μg/L时，细胞增殖率几乎呈直线式增长。对照组及实验组均可检测到Ⅰ型胶原（CoⅠ），对照组分泌胶原的量显著高于对照组（P<0.01）。细胞培养上清中，实验组IL-6、IL-8含量显著高于对照组（P<0.01）。 结论： rIL-13通过促进成纤维细胞增殖及分泌炎性介质和Ⅰ型胶原，可能在肺纤维化的发病机制中发挥关键作用。     

阿托伐他汀通过下调NLRP1炎性体表达抑制IL-1β和IL-18的释放

 目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎性体在阿托伐他汀抑制THP-1巨噬细胞白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)分泌中的作用。方法:用10 μg/L脂多糖诱导THP-1巨噬细胞分泌IL-1β和IL-18,以不同浓度阿托伐他汀(1、10和20 μmol/L)孵育细胞24 h,或以10 μmol/L阿托伐他汀处理细胞不同时间(12、24和48 h),或转染NLRP1 siRNA以沉默细胞内NLRP1的表达。采用RT-PCR检测细胞内NLRP1炎性体mRNA的表达,Western blot检测细胞内NLRP1炎性体蛋白的表达,ELISA检测细胞上清液中IL-1β和IL-18的含量。结果:阿托伐他汀可抑制THP-1巨噬细胞NLRP1炎性体mRNA和蛋白的表达,且这种效应呈浓度和时间依赖性。转染NLRP1 siRNA后,THP-1巨噬细胞NLRP1的蛋白表达明显下降,且阿托伐他汀对IL-1β和IL-18分泌的抑制作用明显增强。结论:阿托伐他汀通过抑制NLRP1炎性体表达减少巨噬细胞IL-1β和IL-18的释放,发挥抗炎作用,进而延缓动脉粥样硬化进展。