金属硫蛋白与儿童健康相关因素

金属硫蛋白（metallothionein,简称MT）是一类低分子量（分子量约为7000Da）、富含半胱氨酸的金属结合蛋白。自1957年由Margoshes和Vallee首次在马肾中分离出以来,     

金属硫蛋白与人类疾病

金属硫蛋白(MT)是一种低分子量,富含半胱氨酸可结合重金属的蛋白质。从微生物到脊椎动物由Cd、Zn、Cu、Ag、激素及各种应急诱导产生金属硫蛋白。金属硫蛋白主要参与重金属解毒及氧化损伤解毒,储存金属,调节Zn及Cu的代谢,清除自由基。金属硫蛋白基因的表达调控是在转录水平上进行的,通过与金属,糖皮质激素及血反应元素顺式作用,及与DNA-结合蛋白,金属调节蛋白的反式作用达到调节的作用。众所周知,MT与一些疾病的发病过程密切相关。科学研究广泛地探索了心脏MT的抗氧化功能。最近采用心脏定位的MT-表达过量的转基因小鼠模型研究结果强力支持MT的这一生理作用。在急性及慢性刺激下如用阿霉素处理、局部缺血-再灌注损伤、食物中铜的限制,MT-表达过量的转基因小鼠心脏显示了对损伤的显著抗性。实验结果表明MT调节免疫系统,但MT的主要功能还不清楚。     

金属硫蛋白在代谢性疾病中的研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类富含半胱氨酸的低分子金属结合蛋白,主要通过抗氧化应激、抗感染、抑制细胞凋亡机制,对肥胖症、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)和糖尿病(DM)及并发症起到保护作用.     

镉与人金属硫蛋白基因表达的诱导

过渡金属元素镉 (Cd)是一种有毒的重金属环境和工业污染物 ,可通过呼吸道、消化道等不同途径进入人体 ,对肝、肾、骨骼、血液、免疫系统等产生广泛的损害作用 ,大量实验证明 ,Cd具有致癌、致畸、致突变的三致作用 ,并已被国际癌症研究中心 (IARC)确定为第一类致癌物〔1 ,2〕。近年来 ,有关 Cd的分子毒理学研究 (如 Cd与细胞凋亡、 DNA损伤、基因调控等 )取得了重要进展。金属硫蛋白 (MT)是由 MT基因家族编码的一种低分子蛋白 ,其分子量在 60 0 0 -70 0 0 Da之间 ,其分子中富含半胱氨酸 ,广泛分布于体内 ,是唯一的在金属代谢中作用肯…     

金属硫蛋白降低GRP78和CHOP蛋白表达减轻大鼠砷中毒肝细胞凋亡

目的 研究葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)在金属硫蛋白(MT)减轻大鼠砷中毒肝细胞凋亡中的作用.方法 建立MT治疗亚砷酸钠(NaAsO2)诱导的大鼠砷中毒肝损伤模型,用MT治疗2周,以TUNEL法检测肝细胞凋亡,免疫组化法、Western blot检测大鼠肝脏GRP78、CHOP蛋白表达.结果 砷中毒模型组大鼠肝细胞凋亡、肝组织GRP78和CHOP蛋白表达较对照组显著升高(P＜0.05),MT治疗组肝细胞凋亡、肝组织GRP78和CHOP蛋白表达明显回降(P＜0.05),但仍然高于对照组(P＜0.05).结论 MT可通过降低GRP78和CHOP蛋白表达减轻大鼠砷中毒所致的肝细胞凋亡.     

金属硫蛋白（MT）与男性不育患者精浆铅镉及精子参数的研究

目的探讨金属硫蛋白（Metallothionein,简称MT）与男性不育精浆铅镉、精子参数的关系。方法采用钨舟原子吸收光谱法检测患者口服金属硫蛋白前、后精浆铅Pb镉Cd的浓度;采用（computer aided semen anlysis,CASA）方法检测精子质量,分析各组数据间有无统计学意义。结果服用MT1-2个疗程前后进行统计学配对t检验：精子活率检测,密度、活率达到正常参考值的分别为46.8% P〈0.05统计学上有显著差异、34.78% P〈0.001统计学上有极显著差异。精子密度、精子活率的改善率分别为58.69% P〈0.05统计学上有显著差异、56.52%〈0.05统计学上有显著差异。结论口服MT后精子参数有不同程度的改善,对方怀孕11人占19.64%。     

中华绒螯蟹重组金属硫蛋白的原核表达与分离纯化

金属硫蛋白(MT)由于其独特的结构和性质,而成为潜在的医用蛋白资源。本研究将重组中华绒螯蟹金属硫蛋白基因cDNA克隆入原核表达载体pET-GST,转化大肠杆菌BL21。重组蛋白以可溶和包涵体两种形式表达。根据金属硫蛋白的特性,优化了表达条件。Western blot证实了表达产物的正确性,用锌柱亲合层析得到高纯度的重组金属硫蛋白。为以后金属硫蛋白的生物学功能研究奠定了良好的基础。     

金属硫蛋白对大鼠骨骼肌挤压缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察大鼠挤压伤模型中骨骼肌的变化并探讨金属硫蛋白对大鼠挤压伤骨骼肌的保护作用。方法健康雌性SD大鼠随机分为对照组、挤压伤组(CI)、挤压伤+金属硫蛋白(CI+MT)组(8只/组),全自动生化分析仪检测血清中血钾、血肌酐、血尿素氮、肌酸激酶水平的变化,HE染色观察骨骼肌与肾脏形态学改变,检测挤压部位骨骼肌湿干重比、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活力变化。结果 CI组大鼠骨骼肌组织内可见肌纤维坏死、溶解、断裂、炎症细胞浸润,肾脏组织内可见肾小管壁肿胀、小管上皮细胞水肿、管腔变细,可见少量炎细胞浸润及蛋白管型。CI+MT组与对照组有损伤改变,但损伤程度较CI组轻;CI组骨骼肌湿干比值、丙二醛含量明显高于对照组,但CI+MT组水平低于CI组(P0.05);CI组骨骼肌超氧化物歧化酶活力明显低于对照组,但CI+MT组水平高于CI组(P0.05)。结论挤压伤缺血再灌注导致骨骼肌肌纤维损伤,外源性MT对挤压伤骨骼肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

应用金属硫蛋白治疗儿童铅中毒致腹痛的临床分析

目的 探讨金属硫蛋白（MT）治疗儿童铅中毒致腹痛的效果.方法 应用金属硫蛋白制剂对58名以腹痛为主诉的轻、中度铅中毒患儿进行治疗观察,以服用MT后血铅＜100μg/L,腹痛症状消失作为临床治愈标准进行观察.结果 服用MT 2～3个月效果较显著,未见不良反应.随着血铅水平的下降,腹痛及伴随症状消失.患儿腹痛症状消失与服用时间长短无关联关系（χ^2=3.65,P＞0.05）.结论 应用MT治疗儿童铅中毒是一种既安全又有效的新型预防和干预手段.     

金属硫蛋白与肿瘤的关系研究

金属硫蛋白广泛存在于自然界及生物界中,目前认为金属硫蛋白是一类低分子量、富含半胱氨酸的内源性小分子蛋白物质,其具有较为独特的结构特征、理化性质及生物学特性。研究发现其在多种疾病的发生发展、发病机制、诊疗及药物耐药性等方面发挥着重要的作用,目前尤其是对于金属硫蛋白与各种肿瘤的发病机制、发生发展、诊断治疗、预后评估及抗肿瘤药物耐药性等关系的研究方面,逐渐受到愈来愈多的关注。本文主要对金属硫蛋白的结构与功能、主要生物学功能及其与肿瘤的关系进行综述。     

金属硫蛋白的抗休克作用及其与内皮素的关系

为探讨金属硫蛋白(MT)的细胞保护机制及与内皮素(ET)的关系,在大鼠止血带休克模型上观察到MT明显改善动物休克状态的同时显著抑制其血浆ET含量的增加。离体实验发现MT呈剂量依赖地抑制ET的缩血管作用和抑制血管紧张素Ⅱ刺激ET的释放。提示MT可以通过抑制ET的释放和拮抗ET的缩血管效应,发挥其内源性抗损伤物质的作用。     

金属硫蛋白在人不同结肠组织中的表达

目的 :研究金属硫蛋白 (MT)在人正常结肠组织和结肠癌组织中的表达及其生物学意义。方法 :应用免疫组织化学方法检测 1 0例人正常结肠组织和 2 0例结肠癌组织标本中金属硫蛋白的表达水平 ,比较MT表达的差别。结果 :MT在人正常结肠组织和结肠癌组织中的阳性率均为 1 0 0 % ,用HPISA - 1 0 0 0图像分析系统测得其不同的平均阳性灰度值 (AGA)分别为 6 7 5 4± 7 4 6 ,93 71± 9 1 2。MT在人正常结肠组织和结肠癌组织中的表达有显著性差异 (p <0 0 5 )。结论 :MT在人正常结肠组织和结肠癌组织中的不同表达显示MT与结肠癌关系密切 ,对结肠组织的恶性变具有一定的意义     

金属硫蛋白的研究进展

本文报道了在第三届国际金属硫蛋白会议(1992.12.8—10,东京)上各国专家所交流的以及自第二届国际金属硫蛋白会议以来,金属硫蛋白的结构动力学,分子及细胞生物学和生物学功能等方面的研究进展。     

Zn~(2+)预处理对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

目的 :观察Zn2 + 预处理诱导金属硫蛋白 (MT)在心肌细胞的表达及对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法 :3 2只Sprague Dawley大鼠随机分为对照组及实验组 ,实验组按腹腔注射ZnSO4 到建立再灌注模型的时间分为E1 2h,E2 4h及E4 8h组 ,每组各 8只。检测LDH ,CK、ATP含量及心功能指标 (LVSP与±dp/dtmax) ,用1 0 9Cd/血红素饱和法测量心肌组织中金属硫蛋白的含量。结果 :E2 4h及E4 8h组MT表达量较对照组高 (P <0 .0 1) ,E1 2h组虽有表达 ,但其与对照组间差异无显著性。E2 4h及E4 8h组LDH与CK较其它二组低 ,而ATP较其它二组高 ,心功能指标较其它二组改善。E1 2h组及对照组之间相应各指标 (LDH ,CK、ATP、LVSP与±dp/dtmax)间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :Zn2 + 预处理可诱导MT在心肌细胞的表达而对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌具有保护作用。     

男性不育与金属硫蛋白制剂临床干预的研究

目的探讨男性不育患者血液和精浆中微量元素含量和精子质量以及用金属硫蛋白制剂干预治疗前后患者改善状况。方法对男性不育症患者进行血液、精液微量元素、血清激素及精液常规检查,并进行金属硫蛋白干预治疗两个月,每日2支,空腹口服。结果就诊130名患者中有84.68%血铅〉70μg/L（102.41±43.77）,40.54%精浆铅〉70μg/L（69.13±41.19）,70.29%血镉〉1.0μg/L（2.74±2.29）,41.82%精浆镉〉1.0μg/L（1.69±2.17）。对52例患者进行了含金属硫蛋白制剂干预,血铅、镉与干预后精浆铅、镉下降值呈极显著的正相关（r=0.727、r=0.692）。干预前、后患者血铅、血镉、精浆铅、精浆镉有极显著性差异P〈0.01,干预前、后精子密度、A级精子、A＋B级精子之间有极显著差异P〈0.01。干预显效率（至少三项精液指标改善）70.90%。结论金属硫蛋白对重金属（铅、镉）损伤引起的男性不育有显著的治疗效果。     

金属硫蛋白基因在上皮性卵巢肿瘤中的表达及临床意义

目的 研究金属硫蛋白（MT）基因在上皮性卵巢肿瘤中的表达及临床意义。方法 采用SABC免疫组化法，对72例上皮性卵巢肿瘤中金属硫蛋白的表达进行检测。恶性肿瘤、交界性肿瘤和良性肿瘤MT的表达分别为64．4％，30．0％和11．8％，恶性肿瘤，交界性肿瘤MT的表达明显高于良性肿瘤（分别为P＜0．01和P＜0．05）。随肿瘤组织病理分级及临床分期的增高，MT的表达也增加（P＜0．05）。MT高表达者的生存期明显缩短。结论 MT参与了上皮性卵巢恶性肿瘤的发生与发展，并有可能成为一个判定预后的有效指标。     

CCl4肝纤维化过程中肝组织金属硫蛋白与肝星状细胞MMP-2表达及活性之间相关性研究

目的： 研究金属硫蛋白（MT）在体内及体外与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达、活性之间的相关性。方法: 昆明种雄性成年小鼠50只,其中实验鼠 40只,对照鼠10只,用CCl4诱导小鼠肝纤维化模型。向肝星状细胞（HSCs）条件培养基（含有MMP-2）中加不同浓度MT,使之与MMP-2酶学共浴,检测MMP-2活性。制作小鼠肝组织芯片,天狼猩红染色判断肝纤维化程度。免疫组化法测肝组织MMP-2、MT蛋白表达,酶图法测鼠肝组织匀浆和培养基中MMP-2活性。结果: ①模型组小鼠肝组织MMP-2和MT蛋白表达水平均随纤维化进展而呈波浪式交替升高,但二者时相变化相反。 ②模型组小鼠肝组织MMP-2活性随实验时间的增加而逐渐升高,亦有波动。除个别时点外,酶活性与MT表达呈负相关。③肝星状细胞条件培养基与不同浓度的MT直接作用后,MMP-2活性随MT浓度增加活性逐渐降低(P＜0.01)。结论: 在小鼠肝纤维化发生发展过程中,肝组织MT蛋白和MMP-2蛋白表达均有上升趋势,二者间可能存在相互作用;MT蛋白和MMP-2活性呈负相关,前者对后者可能起抑制作用。     

河南华溪蟹金属硫蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备小鼠抗河南华溪蟹金属硫蛋白(MT)单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性。方法分别利用小泛素样修饰蛋白(SUMO)融合表达系统和碱性磷酸酶(phoA)分泌表达载体制备河南华溪蟹重组蛋白SUMO-MT和His-MT,以SUMO-MT为免疫抗原、His-MT为检测抗原,利用杂交瘤技术建立抗河南华溪蟹MT mAb杂交瘤细胞株。采用间接ELISA测定mAb腹水效价,Western blot法、Dot-ELISA分析mAb的特异性。结果成功建立了2株稳定分泌抗MT蛋白的mAb杂交瘤细胞株,分别命名为mAb-MT2和mAb-MT3,均属于IgG1亚类。腹水效价分别为1∶500 000、1∶1000 000,Western blot和Dot-ELISA结果证实2株mAb均能特异性识别重组MT和内源性MT。结论成功制备了具有较高特异性的河南华溪蟹MT mAb。     

6-羟基多巴胺诱导的帕金森病大鼠眼内褪黑素受体的变化

目的:观察6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的偏侧帕金森病(PD)模型大鼠毁损同侧及对侧眼褪黑素受体MT1和MT2的变化及其与视网膜酪氨酸羟化酶(TH)的关系。方法:将6-OHDA注射至大鼠右侧黑质致密部和前脑内侧束两点,制备偏侧PD模型。大鼠分为溶剂对照和PD模型组,于建模后6周取双侧眼球。采用RTPCR和Western-Blot检测大鼠两侧眼组织褪黑素受体MT1和MT2的表达水平,采用免疫荧光组织化学检测MT1和MT2受体,以及TH在大鼠视网膜内的分布及表达情况。结果:与对照相比,PD大鼠毁损对侧眼组织MT1和MT2的mRNA水平分别降低了84.06%和81.66%(P0.01),蛋白水平分别降低了59.06%和41.06%(P0.01),而PD大鼠毁损同侧眼组织MT1和MT2的mRNA、蛋白水平无显著变化(P0.05)。MT1和MT2受体在视网膜全层均有分布,且主要分布在感光细胞层内段、内丛状层、外丛状层和神经节细胞层,TH分布于内核层与内丛状层之间;与对照组相比,PD大鼠毁损对侧视网膜MT1和MT2以及TH荧光强度分别减少了61.6%、51.2%和43.0%(P0.01),TH和MT1或TH和MT2存在共定位,且毁损对侧视网膜共定位细胞数减少52.3%,而PD大鼠毁损同侧视网膜无显著变化(P0.05)。结论:6-OHDA诱导的偏侧PD大鼠毁损对侧眼褪黑素受体表达下调可能与PD有关。     

肝细胞单层培养中IL-6对金属硫蛋白基因和锌代谢的调节

金属硫蛋白(metallothionein,MT)在体内参与锌的代谢。它不仅能结合锌,而且膳食锌在转录水平上也调节MT的表达;另外多种激素对MT合成的诱导又可使锌从血浆转移至肝脏.MT可提供锌到金属酶中及DNA结合的锌指区,也可作为清道夫来保护细胞和锌的供体用作稳定细胞膜。本文主要阐明(rh)IL-1α、rhIL-6、细胞外锌和地塞