甲基莲心碱增强阿霉素抗肿瘤作用的体外实验研究

目的观察甲基莲心碱(neferine，Nef)在体外对阿霉素(adriamycin，ADR)抗肿瘤作用的影响以探讨其化疗增敏作用。方法以人乳腺癌细胞(MCF-7／S)和人骨肉瘤细胞(Soas-2)为细胞模型，采用MTT法检测药物的细胞毒性，PI染色流式细胞术检测细胞凋亡。结果1、5、10μmol／L Nef对细胞无明显细胞毒性，但可使ADR对人乳腺癌细胞(MCF-7／S)和人骨内瘤细胞(Soas-2)的IC50下降。不同浓度ADR分别与5，10μmol／L Nef合用24h后，MCF-7／S细胞和Soas-2细胞的凋亡率分别较不合用Nef时增加。结论Nef能增强ADR的体外抗肿瘤作用，可能是一种化疗增敏剂。     

托瑞米芬对人肺腺癌细胞A549/DDP耐顺铂的逆转作用

【目的】研究托瑞米芬对人肺腺癌细胞系A549／DDP耐顺铂的逆转作用,探讨其与多药耐药蛋白表达之间的关系。【方法】以MTT法检测托瑞米芬及与顺铂联合对A549／DDP细胞的细胞毒性作用,以免疫细胞化学法检测A549／DDP细胞MRP的表达情况。【结果】15μmol／L、2．5μmol／L托瑞米芬对A549／DDP细胞的抑制率分别为5．39％、1．43％,与无药对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。≥10μmol／L托瑞米芬可抑制A549／DDP细胞生长（P〈0．01）。2．5μmol／L、5μmol／L托瑞米芬可使顺铂对A549／DDP细胞的IC50从1．764μg／ml分别降至1．047μg／ml、0．588μg／ml,逆转A549／DDP细胞对顺铂的耐药（P〈0．01）,逆转倍数分别为1．686、3．001。A549／DDP细胞MRP呈强阳性表达。5μmol／L、2．5μmol／L托瑞米芬与顺铂联用可以下调MRP表达,与无药组及单用顺铂组比较,具有显著性差异（P〈0．01）。【结论】托瑞米芬能抑制A549／DDP细胞增殖和逆转A549／DDP细胞对顺铂的耐药;其耐药逆转可能与下调MRP表达有关。     

尼美舒利对耐药胃癌细胞SGC7901/VCR的逆转作用

目的：研究选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂尼美舒利对耐药胃癌细胞药物敏感性的影响及其作用机制，为COX-2抑制剂应用于胃癌的联合化疗提供支持依据。方法：以长春新碱（VCR）诱导的人胃癌多药耐药细胞SGC7901／VCR为研究对象。应用MTT法观测尼美舒利对SGC7901／VCR耐药性的逆转作用。采用高效液相色谱（HPLC）法分析尼美舒利对SGC7901／VCR细胞内VCR浓度的影响。结果：尼美舒利能逆转耐药细胞SGC7901／VCR对长春新碱的耐药，且呈浓度依赖性，逆转倍数在尼美舒利浓度为100、200、400Izmol／L时分别为1．38、3．07、6．45倍：400μmol／L尼美舒利能增加SGC7901／VCR中VCR的浓度3．22倍。结论：尼美舒利能增加耐药细胞内VCR浓度．从而部分逆转胃癌细胞SGC7901／VCR对VCR的耐药     

细胞色素C对阿糖胞苷诱导白血病细胞凋亡的影响

【目的】探讨细胞色素C（CytC）对小剂量阿糖胞苷（LD-Ara—C）诱导白血病细胞凋亡的影响。【方法】用HL-60白血病细胞株进行传代培养,MTT试验检测Ara—c和Cyt C不同药物浓度对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡。【结果】12μg／ml浓度以下的CytC具有促进HL-60细胞增殖的作用,不同浓度的CytC干预后HL-60细胞凋亡率均低于干预前（P〈0．01）。联合应用CytC和LD-Ara—C,HL-60细胞凋亡率明显高于单用LD-Ara—C组（P〈0．01）。【结论】外源性CytC在12μg／ml浓度以下时仅能促进白血病细胞增殖,联合应用CytC和LD-Ara—C可增强LD-Ara—C诱导白血病细胞凋亡的作用。     

甲基莲心碱对长春新碱人抗视网膜母细胞瘤细胞作用的影响及与RB蛋白表达的关系

目的：探讨甲基莲心碱对长春新碱（Vincnstine,VCR)抗人视网膜母细胞（Retinoblastoma,RB)作用的影响及与RB蛋白表达的关系。方法：甲氮甲唑蓝（MTT）法检测药物对肿瘤细胞增殖的影响，流式细胞仪检测RB蛋白的表达，PI染色流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡，结果：（1）5、10umol/L Nef能降低VCR抑制Rb细胞的IC50，（2）5、10umol/L Nef能促进VCR诱导Rb细胞凋亡，（3)10umol/L能促进Rb细胞的RB蛋白的表达，（4）Nef能促进Rb细胞G1阻断。结论：（1）Nef能增加VCR抑制Rb细胞增殖，促进VCR诱导Rb细胞凋亡，具有较好的化疗增敏作用，（2）Net通过促进Rb细胞Rb蛋白的表达和Rb细胞G1阻断，而实现对视网膜母细胞瘤的化疗增敏作用。     

Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对膀胱尿路上皮癌T24细胞钙黏附蛋白E表达的影响

【目的】探讨Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对膀胱移行细胞癌T24细胞Src蛋白下游信号钙黏附蛋白E（E-Cadherin）的作用。【方法】应用半定量RT—PCR法检测0μmol／L、0．2μmol／L、1．0μmol／L、5．0μmol／L Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后的人膀胱癌T24细胞各浓度组的E—Cadherin表达情况。【结果】Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后,E-Cadherin表达呈上调趋势;人膀胱癌T24细胞E-Cadherin mRNA表达水平随加入Src Kinase Inhibitor Ⅱ浓度增加呈上调趋势,0．2μmol／L、1．0μmol／L、5．0μmol／L浓度组OD比值显著高于0μmol／L浓度组,组间比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）。【结论】Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对C-Src蛋白下游信号E-Cadberin具有上调作用,进一步证实了c-Src蛋白及其下游信号E-Cadherin作为膀胱移行细胞癌分子靶向治疗的可能性。     

熊果酸对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响

【目的】探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响。【方法】常规培养人卵巢癌 SKOV3细胞,应用 UA 浓度为5、10、20、40和80μmol/L 分别干预12 h、24 h 和48 h,采用 MTT 法检测细胞增殖;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化,应用 Western blot 技术检测细胞周期相关蛋白 P21、CyclinD1的表达水平。【结果】与空白对照组(0μmol/L UA)比较,40和80μmol/L UA 分别作用 SKOV3细胞12 h、24 h 和48 h 后 OD 值均显著降低(P <0.05);10、20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和 G0/G1期比率较对照组升高,20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞周期蛋白 Cyclin D1明显降低而 P21水平显著升高(P <0.05)。【结论】体外实验中,UA 可抑制人卵巢癌 SKOV3细胞增殖和促其凋亡,其机制可能与细胞周期蛋白 Cyclin D1表达降低和 P21表达升高有关。     

熊果酸对人前列腺癌DU145细胞增殖及凋亡的影响

【目的】探讨熊果酸对人前列腺癌DU145细胞增殖及凋亡的影响。【方法】常规培养前列腺癌细胞系DU145,采用不同浓度熊果酸干预48 h ,细胞增殖与毒性分析（CCK‐8）法检测DU145细胞增殖;流式细胞术检测DU145细胞的凋亡率;Western blot检测DU145细胞p‐Akt及bcl‐2蛋白表达;实时定量聚合酶链式反应（qRT‐PCR）检测 PTEN mRNA 表达。【结果】细胞增殖抑制试验显示熊果酸呈浓度依赖性抑制DU145细胞生长;0、10、20μmol／L药物处理细胞48 h后其早期凋亡率分别为（2．15±0．24）％、（13．52±1．83）％及（16．69±2．56）％,晚期凋亡率分别为（3．28±0．53）％、（18．47±2．64）％及（23．70±1．99）％,差异均有统计学意义（ P ＜0．05）;与空白对照组相比,熊果酸作用的DU145细胞p‐Akt及bcl‐2蛋白表达水平均降低（均 P ＜0．05）,PTEN mRNA表达水平上升（ P ＜0．05）。【结论】熊果酸能够浓度依赖地抑制DU145细胞增殖,其机制可能是通过抑制PT EN／P13K／Akt信号转导通路来实现的。     

熊果酸抑制胃癌细胞SGC7901的COX-2表达

【目的】探讨熊果酸(ursolic acid,UA)抑制人胃癌细胞SGC7901增殖与抑制环氧合酶2(cycloox-ygenase-2,COX-2)表达间联系。【方法】体外常规培养人胃癌细胞株SGC7901,MTT法检测0、10、20、30、40μmol/L UA作用不同时间对细胞增殖的影响;倒置显微镜观察不同浓度UA作用24 h后细胞形态变化;Western blot法检测COX-2蛋白表达;放射免疫分析法测定COX-2催化产物前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平。【结果】20~40μmol/L UA可抑制SGC7901细胞的增殖,并呈浓度和时间依赖性,其作用12、24、36、48 h的药物半数抑制浓度(IC50)分别为(57.50±1.18)、(34.28±2.05)、(27.54±1.11)(、24.83±1.02)μmol/L;20~40μmol/L UA作用24 h后,SGC7901细胞变圆,出现不同程度的漂浮;COX-2蛋白表达减弱;PGE2水平下降。【结论】熊果酸对SGC7901细胞具有增殖抑制作用,其机制可能与抑制COX-2表达进而减少PGE2生成有关。     

尿多酸肽联合亚砷酸对K562细胞凋亡及细胞增殖的影响

【目的】观察尿多酸肽（cDA-2）、亚砷酸、CDA_2与亚砷酸联合体外诱导慢性髓细胞白血病细胞（K562）株凋亡、抑制增殖的作用;探讨CDA-2与亚砷酸联合对诱导K562细胞凋亡及抑制增殖的协同作用。【方法】不同浓度的CDA-2、亚砷酸及二者联合处理K562细胞株,通过MTT比色法检测K562细胞细胞生长率,计算IC50值;应用倒置相差显微镜、A0荧光染色观察细胞凋亡及形态学变化;应用流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】①MTT结果显示,在一定的范围内,K562细胞的生长率存在剂量及时间依赖性降低,CDA-2作用K562细胞24h、48h、72h的IC50值分别为75mg／L、59mg／L和37mg／L,亚砷酸作用K562细胞24h、48h、72h的IC50值分别为11．55μmol／L、6．14gmol／L及5．18μmol／L;②荧光染色结果显示,与未加药的对照组相比,二者单药均可促进细胞凋亡,二者联合后凋亡作用更加显著;③流式细胞术显示,cDA-262．5mg／L处理K562细胞24h早期凋亡细胞为（1．77±0．49）％,亚砷酸4umol／L处理K562细胞24h早期凋亡细胞为（1．33±0．58）％,而相同浓度的二者联合用药作用于K562细胞24h早期凋亡细胞为（11．03±0．7）％（P〈0．05）,按照预计效应公式得出,两药联合存在协同作用,且协同作用于24h,两药最低浓度联合时已开始,随着两药浓度的增加,协同作用逐渐增大。【结论】CDA-2、亚砷酸单药及二者联合均可抑制K562细胞株增殖并促进凋亡,二者具有协同作用。     

肝胆管结石合并胆管癌的诊治分析

目的 探讨肝胆管结石合并胆管癌的诊断、治疗和预后.方法 对广州市花都区人民医院近10 a来收治的肝胆管结石合并胆管癌21例诊治情况作回顾性研究.结果 胆管癌在肝胆管结石患者的发生率为3.3％;术前诊断正确率61.9％;CA199阳性率为76.2％,术前诊断正确率B超为56.3％,CT为67.8％,MRI/MRCP为82.3％,根治性切除肿瘤42.8％,姑息性手术57.2％,根治性切除肿瘤1、2、3a生存率分别为91.3％、71.5％和50.7％;姑息性手术1、2、3a生存率分别为30.3％、18.4％和0.00％.结论 肝胆胆管癌患者中血清CA199升高的敏感性、特异性较高,对胆管癌的患者的诊断有较高的价值;且血清CA199在监测术后复发中也具价值.肝胆管结石合并胆管癌根治性手术能明显延长患者寿命,疗效的关键是早期诊断、早期治疗,争取根治性切除.     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者体液离子含量的变化

目的：了解慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者体液离子含量的变化。方法：选择46例合并肺心病的COPD急性加重期患者，测定其血清、红细胞、白细胞及24h尿K、Na、Ca、Mg离子含量。结果：患者自细胞Ca增高，红细胞Ca、Mg、K及白细胞Mg、血清Mg、Na均显著降低。红细胞Mg与白细胞Mg显著正相关。该组患者尿Ca增多占54％，尿K、Na、Mg减低者分别占92％，65％及32％。结论：COPD患者存在K、Mg缺失，用红细胞Mg评价机体的Mg状态更具有实用性。     

CT诊断早期肝炎后肝硬化与临床病理对照分析

目的：探讨CT对早期肝硬化诊断的价值。方法：将48例CT诊断早期肝炎后肝硬化组及96例慢性肝炎分轻、中、重组行肝脏穿刺活检。活检标本分别进行苏木素（HE）、网状纤维Gomori法、范基森（VG）、结缔组织Masson三色法染色检查,将病理检查结果与临床及CT影像特征相对照。结果：CT检查提示早期肝硬化病理检查结果仅6例符合（6/48,12.5%）。慢性肝炎轻、中度与病理诊断符合率各为85.7%（36/42）、75%（36/48）。但两组不符合部分仅为轻-中度之间的交叉。慢性肝炎重度与病理诊断符合率100%（6/6）。CT肝脏形态缩小的影像特征,与肝组织病理学纤维化指征符合率达100%。与无肝缩小征象组对照,无一例符合。结论：CT肝脏形态缩小是早期肝硬化的较可靠诊断依据。慢性肝炎临床诊断与病理符合率高,如非必要,可免将肝活检用于慢性肝炎的常规诊断检查。     

隐球菌性脑炎患者颗粒酶B、颗粒溶素、穿孔素的表达及临床意义

目的研究颗粒酶B（grmazymeB,GrB）、颗粒溶素（granulysin,GNLY）及穿孔素（pefforin,又称pore-formingpro—tein,PFP）三种免疫效应分子在隐球菌性脑膜炎（cryptococcalmeningitis）外周血单个核细胞中的表达及其临床意义。方法首先用密度梯度离心法分离得到25例隐球菌性脑膜炎患者和30例健康人外周血单个核细胞（peripheral blood monotmclearcells,PBMC）,其次用免疫印迹（western blot）的方法检测其中的GrB、GNLY、及PFP的蛋白含量,用实时荧光定量（RVQ）-PCR方法测定其中GrB、GNLY、及PFP的mRNA含量。并分析隐球菌性脑膜炎患者蛋白含量与一些免疫指标的相关性。结果与健康对照组比较,隐球菌性脑膜炎患者PBMC中GNLY、PFP蛋白含量和mRNA均明显降低,而GrB无明显变化。隐球菌性脑膜炎患者中GNLY蛋白表达水平与血清IgG、IFN-γ水平成正相关（r=0．477,P〈0．05;r=0．534,P〈0．05）,与IL-10水平成负相关（r=-0．505,P〈0．05）。结论GNLY、PFP）可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为探讨隐球菌性脑膜炎的病情监控和有效治疗提供了新的线索。     

胸膜孤立性纤维瘤6例报告并文献复习

目的探讨胸膜孤立性纤维瘤（SFTP）的诊断和外科治疗。方法回顾分析河南大学淮河医院胸外科1990-01-2009-08间收治的胸膜孤立性纤维瘤6例的临床资料。结果胸闷、胸痛、咳嗽、咯痰、发热是SFTP的主要症状。诊断主要依据免疫组化分析,所有患者的CD34、vi mentin、bcl-2和CD99均阳性表达。随访5个月至19 a,无复发及转移。结论胸膜孤立性纤维瘤的诊断主要依[靠免疫组化分析,根治性切除是主要治疗手段。     

胆囊癌肉瘤1例报告并文献复习

目的：探讨胆囊癌肉瘤的临床病理特征、诊断及鉴别诊断、治疗、误诊的原因和预防。方法：分析1例胆囊癌肉瘤的临床表现,对标本进行组织病理学和免疫组织化学染色观察,并复习文献,了解该肿瘤的特征。结果：胆囊癌肉瘤罕见,女性多于男性,恶性度高,预后差。组织学检查显示有癌和肉瘤成分,免疫组织化学对鉴别诊断有帮助。手术及放、化疗均疗效不好。结论：原发于胆囊的癌肉瘤较罕见,预后与肿瘤分期有关。临床实践中要特别重视本病与胆囊的一些相似疾病鉴别。避免误诊。     

精神分裂症患者利培酮治疗停药后的血脂水平变化

[目的]探讨精神分裂症患者利培酮治疗停药后的血脂变化.[方法]将本院收治的94例精神分裂症患者分为3组,首发未接受抗精神病药物治疗者33例(A组),持续接受抗精神病药物治疗者31例(B 组),停止抗精神病药物利培酮治疗至少3个月以上者30例(C组).另外选择32例健康志愿者作为正常对照(D组).采集所有入组人员的一般临床资料和人口学资料,并测量其体质量,腰围和臀围,检测其空腹血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)、载脂蛋白A2 (apoA2)水平.[结果]A组血清HDL-C、apoA1水平显著低于D组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05);C组BMI显著高于A组,差异具有统计学意义(P＜0.05);B组、C组血清HDL水平显著低于A组,差异具有统计学意义(P＜0.05).[结论]精神分裂症患者利培酮治疗停药后短缺内不能逆转已经出现的血脂异常.     

缬沙坦对家兔急性心肌梗死后Itoβ亚单位KChIP2 mRNA表达的影响

目的探讨缬沙坦对家兔急性心肌梗死KChIP2 mRNA表达量的影响。方法家兔36只,随机等分为手术组、药物组、假手术组;各组按术后1周、4周分成2个亚组。应用逆转录-聚合酶链式反应方法检测各组梗死周围区心肌KChIP2 mRNA的水平。结果手术组和药物组在AMI后1周、4周,KChIP2 mRNA表达量均显著降低(P<0.001)。与手术组相比,药物组1周、4周后KChIP2 mRNA表达量均显著升高(P<0.05)。结论缬沙坦能够提高家兔AMI后KChIP2 mRNA水平。     

阴囊特发性钙盐沉着症1例报告并文献复习

目的：报告1例阴囊特发性钙盐沉着症。方法：分析1例阴囊特发性钙盐沉着症的诊断与治疗并复习相关文献。结果：患者男，37岁，阴囊起白色硬性结节7a，病理符合阴囊特发性钙盐沉着症。结论：阴囊特发性钙盐沉着症临床罕见，本病需与多发性脂囊瘤相鉴别。     

氯沙坦与氨氯地平治疗高血压合并高尿酸血症的疗效比较

[目的】比较氯沙坦与氨氯地平治疗老年高血压合并高尿酸血症患者的疗效。【方法】将2009年5月至2010卑3月期间收治的高血压合并高尿酸血症患者64例，随机分为两组，A组口服氯沙坦50mg／d，B组给予氨氯地平5mg／d，治疗6周。观察患者服药后舒张压、收缩压、血尿酸等指标的变化。【结果】治疗6周后，A组降压总有效率（84．38％，27／32）低于B组（93．75％，30／32）差异有显著性（P〈0．05）；A组血尿酸水平明显下降（P〈0．01），B组尿酸水平无明显变化（P〉0．05）。【结论】氯沙坦适用于高血压合并高尿酸血症的治疗。