引物介导原位标记技术检测乳腺癌组织中HPV16和18型感染

探讨引物介导的原位标记技术(Primedinsitulabeling,PRINS)在检测乳腺癌组织中人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)16型和18型感染的应用和了解HPV16和18型感染与人乳腺良、恶性病变之间的关系。方法:采用引物介导的原位标记(PRINS)技术和SP法免疫组化技术检测80例乳腺癌,10例乳腺导管上皮不典型性增生,20例乳腺导管内乳头状瘤,30例乳腺腺病,30例正常乳腺组织中HPV16DNA,HPV18DNA和HPV16、18E6蛋白。结果:乳腺癌组中HPV16DNA,HPV18DNAH和HPV16、18E6蛋白的阳性表达与导管上皮不典型性增生组均无显著性差异(P>0.05),但显著高于良性病变组和正常组。中、重不典型性增生组中HPV18DNA和HPV16、18E6蛋白的表达均显著高于轻度不典型性增生组(P<0.05)。癌组中HPV16,HPV18DNA双阳性为45.0%(36/80),导管上皮不典型性增生组中HPV16、18DNA双阳性为40.0%(4/10)。结论:引物介导的原位标记技术可用于乳腺癌组织中HPV16DNA和HPV18DNA的检测,HPV16和HPV18型的混合感染可能与女性乳腺癌的发生、发展密切相关。     

人乳头状瘤病毒18型DNA在乳腺癌组织中的表达

目的：探讨人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８型感染与人乳腺癌病因学之间的关系。方法：采用生物素标记的分子原位杂效技术检测柳州地区女性乳腺癌、导管内乳头状瘤和正常乳腺组织中ＨＰＶ １８ ＤＮＡ。结果：乳腺癌、导管内乳头状瘤和正常乳腺组织中ＨＰＶ １８ ＤＮＡ的阳性率分别为４８．０％、３０．０％和１６．７％。多种组织学类型的乳腺癌组织中有ＨＰＶ １８ ＤＮＡ的存在且以整合型感染为主。癌组中淋巴结转移组ＨＰＶ     

乳腺浸润性导管癌组织中HPV16、18E6及MCM7蛋白的表达

目的：检测人乳腺浸润性导管癌及乳腺良性病变中HPV16、18E6和MCM7蛋白的表达,探讨高危型HPV感染和细胞周期复制调控异常与人乳腺癌发生、发展的关系。方法：采用免疫组织化学sP法检测30例正常乳腺、30例乳腺腺病,52例乳腺浸润性导管癌组织中HPV16、18E6和MCM7蛋白的表达。结果：癌组中HPV16、18E6和MCM7蛋白的阳性表达分别为57．69％和96．15％,均显著高于正常组和腺病组（P〈0．02、P〈0．05）。HPV16、18E6与MCM7蛋白阳性表达呈正相关（r=0．5442;P〈0．001）。MCM7蛋白阳性表达与IDC组织学分级、淋巴结转移和肿块大小有关（P〈0．01、P〈0．03、P〈0．01）。结论：高危型HPV16、18感染和MCM7蛋白的高表达导致细胞周期复制调控异常涉及了HPV感染后乳腺癌的发生发展过程。MCM7高表达与乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移有关。二者联合检测可作为评价HPV感染乳腺上皮细胞的增殖状态和评价临床预后的生物学指标。     

乳腺癌组织中HPV16 18E6及p53 MCM7蛋白的表达及意义

目的：探讨人乳腺癌及乳腺良性病变中高危型HPV16、18感染和细胞周期复制调控蛋白p53、MCM7异常表达与人乳腺癌发生、发展的关系方法：采用免疫组织化学SP法，检测30例正常乳腺、30例乳腺腺痛，55例乳腺癌、5例导管原位癌及其癌旁组织中HPV16、18E6，p53和MCM7蛋白的表达。结果：55例乳腺癌组织中HPV16、18E6，p53和MCM7蛋白的阳性表达率分别为58．18％、38．18％和96.36％，均显著高于正常组和腺病组（P〈0．01、P〈0．001、P〈0．05）浸润性导管癌HPV16、18E6阳性组中p53蛋白的阳性表达率显著低于HPV16、18E6阴性组（P〈0．01）HPV16、18E6与p53蛋白的表达呈负相关（r=-0．5769；P〈0．001），而与MCM7蛋白表达呈正相关（r=0．5442；P〈0．001）MCM7蛋白的阳性表达率与浸润性导管癌组织学分级、淋巴结转移和肿块直径有关（P〈0．01、P〈0．03、P〈0．01）结论：高危型HPV16、18E6感染后p53功能的失活和MCM7蛋白的高表达导致细胞周期复制调控异常，可能涉及了HPV感染后乳腺癌的发生、发展过程MCM7的高表达与乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移有关二者联合检测可作为评价HPV感染后乳腺上皮细胞的增殖状态、早期诊断和预测肿瘤生物学行为的重要指标。     

乳腺浸润性导管癌组织中 HPV18 DNA 及 p53 蛋白的表达

目的：探讨人乳腺浸润性导管癌组织中HPV18DNA和p53蛋白的表达及二者间的关系。方法：采用分子原位杂交和免疫组化技术检测60例乳腺浸润性导管癌、30例乳腺腺病和30例正常乳腺组织中HPV18DNA和p53蛋白。结果：癌组中HPV18DNA阳性和HPV18DNA阴性两组间p53蛋白的阳性表达均有显著性差异（P〈0．03），HPV18DNA阳性组与p53蛋白阳性表达呈显著负相关（r=-0．2954、P〈0．04）。结论：HPV18感染后导致野生型p53的灭活和降解可能涉及HPV18感染后人乳腺上皮细胞癌变的转化过程。     

人膀胱移行细胞癌HPV—18感染与G1—细胞周期表达的关系

目的：探讨人膀胱移行细胞癌（transitional cell carcinoma,TCC)组织内人乳头瘤病毒18例型（human papillomavirus type 18,HPV-18)DNA与G1－细胞周期素（D1和E）表达之间的关系。方法：用免疫组织化学方法检测57例人膀胱TCC组织（PCR测定29例HPV－18 DNA阳性、28例阴性）及对照组（7例正常膀胱）G1－细胞周期素的表达。结果：细胞周期素D1在癌组织中表达的阳性率71．93％（41／57）;HPV－18DNA阳性组阳性率55．17％（16／29）,阴性组阳性率为89．29％（25／28）,阳性组表达率较阴性组低,两者表达有差异（P＜0．05）;与对照组14．29％（1／7）相比,癌组织表达明显增高（P＜0．05）。细胞周期素E在癌组织中表达阳性率为63．16％（36／57）,在HPV－18DNA阴性（67．86％）和阳性组（58．62％）之间无明显差异（P＞0．05）;与对照组（0％）相比,癌组织表达明显增高（P＜0．05）。结论：G1－期细胞周期素的改变与膀胱移行细胞癌的发生相关。HPV－18DNA与细胞周期素D1表达存在显著的负相关。     

c—myc蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV16／18 E6蛋白表达的关系

目的：检测c-myc蛋白在宫颈鳞癌中的表达，并探讨c-myc蛋白表达与HPV16／18 E6蛋白表达之间的关系。方法：采用免疫组化中SP对21例慢性宫颈炎，40例宫颈上皮内瘤（CIN）和71例浸润性宫颈鳞癌进行c-myc蛋白和HPV16／18 E6蛋白检测。结果：慢性宫颈炎，CINⅠ级，Ⅱ级，Ⅲ级c-myc蛋白阳性率均很高，而浸润性宫颈鳞癌c-myc蛋白阳性率下降（P＜0．05）；HPV16／18 E6阳性组和HPV16／18 E6阴性组之间c-myc蛋白阳性率差异无显著性。结论：浸润性宫颈鳞癌c-myc蛋白表达明显下降，c-myc蛋白表达与HPV16／18 E6蛋白表达之间无相关性。     

宫颈癌患者外周血中HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMV DNA的检测

目的：测定宫颈癌患者外周血中人乳头状瘤病毒（HPV）、单纯疱疹病毒（HSVⅡ）和人巨细胞病毒（HCMV）DNA，探讨其对HPV感染的高危妇女发生宫颈癌的追踪及监测作用。方法：采用HPV6．11、HPV16．18、HSVⅡ及HCMV PCR试剂盒，用PE Gene Amp PCR System 2400扩增，测定104例宫颈癌患者外周血中的HPV6．11、HPV16．18和80例HSVⅡ及HCMV的DNA，并以32例子宫肌瘤患者为对照组。用χ^2行差异性检测。结果：1）宫颈癌患者外周血中HPV6．11、HPV16．18、HSVⅡ和HCMV病毒DNA测定的阳性率分别为35．58％、20．19％、10．00％和3．75％。对照组分别为12．50％、9．37％、3．13％和0％。2）宫颈癌患者外周血中HPV6．11混合HSVⅡ或混合HCMV DNA阳性率分别为2．04％和1．92％；HPV16．18混合HSVⅡ或混合HCMV DNA阳性率分别为5．36％和3．30％。对照组无1例出现病毒DNA的混合阳性。结论：1）宫颈癌患者外周血中HPV、HSVⅡ和HCMV等病毒DNA阳性率高于对照组。2）宫颈癌患者外周血中的病毒DNA阳性率以HPV为主（P＜0．05）。3）宫颈癌患者外周血中各种病毒DNA混合阳性率较低，其协同的致癌作用有待进一步研究。4）在HPV感染的高危人群中定期进行宫颈涂片和检测外周血中HPV DNA，可起到对病情的追踪及监测作用。     

HPV感染与非小细胞肺癌的相关性

背景与目的：人乳头瘤病毒（HPV）是宫颈癌的主要病因，但近来发现在非小细胞肺癌（NSCLC）中能检测到HPV，两者间的关系已经引起了人们的重视。本研究探讨人乳头瘤病毒（HPV）16、18型感染与非小细胞肺癌（NSCLC）是否存在相关性及其意义。方法：应用PCR、免疫组化和TUNEL分别检测76例NSCLC及13例肺良性病变中HPV16、18型DNA及其原癌蛋白E6 E7、端粒酶hTERT、P53、MDM2、桩蛋白（paxillin）和细胞凋亡的表达。结果：NSCLC中HPV16、18型总阳性率为40．8％（31／76），而肺良性病变组阳性率为7．7％（1／13），差异有显著性（P〈0．05）。NSCLC中HPV阳性组与阴性组之间细胞凋亡、P53、MDM2、paxillin的表达均有显著性差异（P〈0．05），而端粒酶hTERT无显著性差异。HPV感染与组织学类型及淋巴结转移无关，而与组织分化程度有显著性差异（P〈0．05）。结论：HPV16、18型感染在NSCLC发生中可能有病因学意义，其致癌机制可能与细胞凋亡、P53、MDM2及paxillin表达变化有关。     

乳腺导管内乳头状瘤及其癌变组织CD44v6蛋白表达的研究

背景与目的：CD44v6是乳腺上皮恶性转化中的一个重要成分,在乳腺良恶性病变中有不同的表达,但其在良恶性病变的鉴别诊断中的价值并没有得到很好和研究,本研究目的是检测CD44v6在乳腺导管内乳头状瘤及导管内乳头状瘤癌变组织中的表达,探讨CD44v6在乳腺导管内乳头状瘤诊断及鉴别诊断中的作用。方法：对49例导管内乳头状瘤,12例导管内乳头状瘤癌变,15例导管内癌,15例浸润性导管癌及20例正常乳腺组织的石蜡切片进行免疫组织化学染色。结果：在正常组织,导管内乳头状瘤,乳头状瘤癌变,导管内癌,浸润性导管癌中,肌上皮细胞（basal epithelial cell)的CD44v6蛋白表达阳性（＋＋／＋＋＋）率分别为95．00％,85。72％,66。66％,66。66％,0％,导管内乳头状瘤与乳头状瘤癌变之间无统计学差异（P＞0．05）,而上此细胞（luminal epithelial cell)的CD44v6蛋白表达阳性（＋＋／＋＋＋）率分别为5．00％,83．34％,93．33％,100％,导管内乳头状瘤与乳头状瘤癌变之间有统计学差异（P＜0．01）,结论：通过免疫组化检测CD44v6蛋白表达对诊断导管内乳头状瘤是否癌变具有重要参考价值。     

Human Papilloma Virus 18 Detection in Oral Squamous Cell Carcinoma and Potentially Malignant Lesions Using Saliva Samples

Background: Oral cancer has become one of the most prevalent cancers worldwide and human Papillomavirusis one of the risk factors for developing oral cancer. For this study HPV18 was chosen as it is one of the high riskHPV types and may lead to carcinogenesis. However, prevalence of HPV18 infection in Oral Squamous CellCarcinoma in Malaysia remains unclear. Objective: This study aimed to investigate the viral load of HPV18DNA in OSCC and potentially malignant lesions using saliva samples. Materials and Methods: Genomic DNAsof thirty saliva samples of normal subjects and thirty saliva samples compromised of 16 samples from potentiallymalignant lesions and 14 of OSCC patients were amplified for HPV18 DNA using a nested polymerase chainreaction analysis. All PCR products were then analyzed using the Bioanalyzer to confirm presence of HPV18DNA. Result: From thirty patients examined, only one of 30 (3.3%) cases was found to be positive for HPV18in this study. Conclusion: The finding of this study revealed that there is a low viral detection of HPV18 inMalaysian OSCC by using saliva samples, suggesting that prevalence of HPV18 may not be important in thisgroup of Malaysian OSCC.     

乳腺导管内乳头状瘤的X线诊断

[目的]应用钼钯乳腺摄影及乳导管造影,探讨乳腺导管内乳头状瘤的影像特征。[方法]回顾分析经手术病理证实的68例乳腺导管内乳头状瘤的X线表现。[结果]63例溢液性导管内乳头状瘤中,34例显示圆形或类圆形充盈缺损,16例呈不规则充盈缺损,7例呈杯口状充盈缺损伴导管截断,6例呈条状充盈缺损。5例无溢液性导管内乳头状瘤均显示结节影。[结论]乳导管造影是诊断导管内乳头状瘤最佳的影像学检查方法之一,在定位、定性诊断中具有重要价值。     

Human Papilloma Infection in Northeastern Thai-women

This study aimed to investigate the histological outcome of cervix with human papillomavirus (HPV) infectionand the association of risk factors with cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and invasive cervical carcinoma(ICC) development in Northeast Thai women. The study population (n=210) comprised 71 cases of normal cervix, 71cases of CIN and 68 cases of ICC. The histological outcome of HPV infection was determined for 9.5% of the studypopulation. Increased risk factors for CIN were observed for more than one partner (odds ratio (OR)=3.75, p<0.05),history of sexually transmitted disease (STD) (OR=2.28, p<0.05), menarche under 14 years of age (OR=0.31, p<0.05)and partners’ smoking history (OR=3.98, p<0.01). Increased risk for ICC was observed for those with a history ofSTDs (OR=0.14, p<0.01) and multiparity (OR=2.53, p<0.01). Age at first sexual intercourse was not a risk factor inthis study population. Further studies with HPV-DNA tests should more precisely quantify the risks.     

Detection of Epstein-Barr Virus in Oral Papilloma

Fifty-one cases of malignant and non-malignant oral diseases were investigated for Epstein-Barr virus (EBV). EBV DNA was detected by polymerase chain reaction analysis in 2 of 4 papillomas, but not in other tissues including 36 squamous cell carcinomas and 4 leukoplakias. The copy numbers of EBV DNA in the two positive samples were estimated to be 120 and 36 per cell, respectively. Intense EBV DNA signals were detected on papilloma cells by in situ hybridization. DNAs for the benign and malignant types of human papilloma virus were not detected in papilloma tissues. The present results suggest that EBV is a causative agent of oral papilloma.