实验性坐骨神经痛中辣椒素敏感初级传入纤维的作用

目的 通过局部破坏坐骨神经中辣椒素敏感传人纤维(CSPA),确定CSPA在自体椎间盘直接压迫L5神经根所诱导的机械刺激痛觉过敏的作用.方法 取大鼠自体尾部椎间盘组织放置在L5神经根下,造成对L5神经根的直接压迫,建立椎间盘突出致坐骨神经疼痛动物模型.同时暴露大鼠左侧坐骨神经,给予辣椒素溶液或溶媒处理.术前及术后不同的时间点测量大鼠双侧后足底机械刺激疼痛阈值的变化.在3周当机械刺激疼痛阈值降到最低时,利用免疫组织化学染色方法,测定脊髓后角中c-fos蛋白空间表达变化.结果 用辣椒素处理坐骨神经,完全阻止了椎间盘压迫神经根所诱致的机械刺激疼痛阈值的降低.椎间盘直接压迫L5神经根能够诱导后角中c-fos蛋白表达,而辣椒素处理坐骨神经能够抑制后角中c-fos蛋白的表达.结论 主要终止于脊髓后角浅层的CSPA纤维,可能在新的坐骨神经疼痛动物模型机械刺激痛觉过敏的发生中起着关键作用.     

吗啡对非伤害性刺激后CCI大鼠脊髓c-fos表达的影响

目的　观察慢性坐骨神经收缩损伤 (CCI)大鼠触摸刺激后机械痛阈和热痛阈的变化 ,以研究吗啡 (2mg/kg)腹腔注射后对非伤害性刺激后脊髓后角c fos表达的影响 ,探讨脊髓痛觉调控机制。方法　选择雌性SD大鼠 30只 ,随机分为假手术组、CCI组和吗啡组 ,分别于术前 2d、术后 4、7、14d给予机械痛阈和热痛阈测试。大鼠处死前 3h给于非伤害性触摸刺激 ,处死后取脊髓切片 ,免疫组织化学方法检测c fos表达。结果　CCI组和吗啡组大鼠坐骨神经结扎 4d后均呈现不同程度的痛觉过敏 ,以术后 14d为甚 ,触摸刺激导致的脊髓c fos的表达明显增加 ,主要集中分布于脊髓背角表层Ⅰ～Ⅱ层的中间内侧部 ,Ⅴ～Ⅹ层也有一定程度增多。 2mg/kg腹腔注射不能有效的阻断慢性缩神经损伤大鼠痛觉过敏。吗啡组与CCI组相比c fos的表达无明显减少 ,两组相比差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论　 2mg/kg吗啡腹腔注射不能有效抑制非伤害性刺激诱发痛觉过敏以及脊髓背角c fos的表达 ,可能与吗啡用药途径和用量过小有关 ,也可能与脊髓背角二级感觉神经元兴奋性增高有关     

神经病理性疼痛大鼠脊髓NMDA受体NR2B亚基的表达

目的研究神经病理性疼痛大鼠脊髓背角NR2B亚基表达的改变。方法体重180～200g的雄性SD大鼠随机分为四组（每组10只）：3d（D3）、7d（D7）、14d（D14）组和假手术组。建立外周神经慢性压榨性损伤（CCI）动物模型，假手术组大鼠同样分离坐骨神经，但不结扎神经。各组大鼠分别于术前和术后第3、7、14天及假手术后第3天以Von Frey纤维测定机械痛阈并进行术前术后及组间比较；之后分别于术后第3、7、14天及假手术后第3天断头处死，取患侧L4～L5脊髓背角组织采用Western blot方法测定并比较NR2B亚基的蛋白表达量。结果7d组及14d组大鼠术后机械痛阈均明显低于假手术组（P〈0．05）；其患侧脊髓背角NR2B蛋白表达量明显高于假手术组（P〈0．05）。3d组大鼠术后机械痛阈及患侧脊髓背角NR2B蛋白表达量与假手术组相比差异无统计学意义。结论神经病理性疼痛大鼠的脊髓背角的NR2B蛋白表达水平较假手术组显著升高，此蛋白表达水平的升高可能是导致大鼠神经病理性疼痛的原因之一。     

蛛网膜下腔注射氯胺酮对慢性神经病理痛大鼠的镇痛机制

外周神经损伤后,会出现痛觉异常,如自发痛、痛觉过 敏、异源痛等,可能与脊髓背角浅层神经元凋亡有关,有研 究表明蛛网膜下腔注射氯胺酮可以减轻神经病理痛。但 其作用机制尚不清楚。本研究拟通过观察蛛网膜下腔注射 氯胺酮对慢性神经病理痛大鼠脊髓背角浅层细胞凋亡的影 响,探讨其对神经病理痛的镇痛机制。     

压迫及非压迫因素在实验性神经根性疼痛中的作用

目的：探讨压迫及非压迫因素在实验性椎间盘源性神经根性疼痛中的作用。方法：取大鼠白体脊椎关节突修剪后放置在L5神经根下．造成对L5神经根的直接压迫（压迫组）；取大鼠白体尾椎椎间盘组织无压迫下放置在L5神经根表面（非压迫组）：同时设立对照组。术后不同时间点测定各组大鼠后足底机械刺激疼痛阈值的变化。结果：压迫组与非压迫组大鼠后足底均产生了一个长时程机械刺激疼痛阈值的降低；与压迫组相比．非压迫组大鼠术后1天就开始出现了疼痛阈值降低（P〈0．05），明显早于压迫组大鼠，并且疼痛阈值降低更加显著：而压迫组大鼠术后1周时才出现明显的疼痛阈值降低（P〈0．05）。对照组大鼠疼痛阈值没有发生明显的改变。结论：尽管压迫和非压迫因素都参与椎间盘源性神经根性疼痛的发生．但二者作用的时间不同＋在椎间盘突出的早期阶段非压迫因素可能在疼痛中起着重要的作用：随后压迫因素可能逐渐成为致痛的主因。     

NGF和BDNF在炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角的表达

目的 观察神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)在福尔马林致痛大鼠外周、背根神经节(DRG)和脊髓背角的表达变化及相互关系，探讨神经营养因子在疼痛发生机制中的作用。方法 采用大鼠后足掌皮下注射福尔马林溶液的外周炎性痛模型。成年SD大鼠24只随机分为四组(每组6只)：对照组(A组)；致痛组根据取材时间不同分为，致痛后2h取材(B组)、致痛后24h取材(C组)、致痛后48h取材(D组)。观察致痛1h内疼痛行为变化，应用免疫组织化学方法结合计算机图像分析技术检测致炎足底皮肤、DRG和脊髓背角浅层内NGF的表达，及DRG和脊髓背角浅层表达BDNF的变化。结果 所有致痛组大鼠都表现出明显的两期伤害性反应。在致痛后2h患侧足底皮肤、DRG和24h时脊髓背角浅层表达的NGF开始增加，致痛24h后BDNF在患侧DRG表达开始增加，且与NGF在患侧DRG神经元的表达变化成正相关。48h时BDNF在患侧脊髓背角浅层表达开始增加。结论 NGF不仅是产生炎性痛外周机制的重要介质之一，还可通过促进BDNF在脊髓背角的表达，共同参与中枢敏感化的产生。     

艾芬地尔预先给药对CCI大鼠脊髓NMDA受体NR2B亚基表达的影响

目的探讨艾芬地尔预先给药对坐骨神经慢性压榨性损伤(CCI)大鼠脊髓背角NR2B亚基表达的影响及其对神经病理性疼痛的预防作用。方法雄性SD大鼠50只,体重180～200 g,随机分为3组:假手术组(n=10)、CCI组(n=20)和艾芬地尔组(n=20)。建立CCI动物模型,假手术组大鼠仅分离坐骨神经,但不结扎神经。艾芬地尔组大鼠在术前30 min及术后1、2 d连续3 d腹腔内注射艾芬地尔(10 mg/kg);CCI组大鼠腹腔内注射相同体积的生理盐水;假手术组未给药。各组均于术前,假手术组于假手术后3 d、艾芬地尔组和CCI组均于CCI术后7、14 d分别取10只大鼠,以von Frey纤维测定机械痛阈,随后断头处死,取患侧L4.5脊髓背角组织,采用Western blot方法测定NR2B亚基的蛋白表达。结果各组术前基础机械痛阈比较差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,CCI组术后7、14 d时机械痛阈降低(P<0.05),艾芬地尔组术后7、14 d时差异无统计学意义(P>0.05);与CCI组比较,艾芬地尔组术后7、14 d时机械痛阈升高(P<0.05)。与假手术组相比,艾芬地尔组和CCI组术后7、14 d时脊髓背角NR2B蛋白表达均升高(P<0.05);与CCI组比较,艾芬地尔组术后7、14 d时脊髓背角NR2B蛋白表达降低(P<0.05)。结论大鼠腹腔内预先注射艾芬地尔,通过特异性地拮抗含NR2B亚基NMDA受体,可有效地预防CCI导致的神经病理性疼痛,其机制与降低脊髓背角NR2B亚基表达升高有关。     

脊髓背角补体异常活化与神经病理性疼痛关系的实验研究

目的 观察神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)模型大鼠脊髓背角补体C3变化,并探索脊髓补体异常活化在NPP形成中的作用.方法 实验分两部分:①84只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术后1、3、7 d组及坐骨神经结扎后1、3、7 d组,每组12只.分别在建模后1、3、7 d测定大鼠机械痛阈值.并按照分组在规定时间处死大鼠,采用RT-PCR、免疫组化和免疫比浊等测定脊髓中补体C3的表达情况.②48只SD大鼠随机分假手术+生理盐水组、CCI+生理盐水组、CCI+CVF组(持续尾静脉注射CVF组)和CCI+生理盐水+CVF组(单次尾静脉注射CVF组),每组12只.分别在术前和术后1、3、7、14 d测定大鼠机械痛阈值,两周后处死大鼠,用免疫组化和免疫比浊技术测定大鼠L4～L6脊髓中补体C,含量;并用分光光度法测定L4～L6脊髓匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),同时透射电镜观察L4～L6脊髓背角神经元内部结构变化.结果 CCI大鼠坐骨神经结扎侧后1、3、7 d脊髓L4～L6背角补体C,蛋白及mRNA都显著表达,并呈进行性升高趋势.而假手术组无明显变化;Pearson相关分析显示,CCI大鼠脊髓背角补体异常活化状况与大鼠痛觉过敏程度相关.单次尾静脉注射CVF可一过性提高模型大鼠痛觉阈值,并随着药物的代谢作用逐渐减弱;持续给予CVF可抑制大鼠痛觉过敏的发生.给予CVF可逆转模型大鼠脊髓中SOD活力并降低MDA产物含量.给予CVF可减轻模型大鼠脊髓背角神经元线粒体肿胀及核膜损伤程度(P<0.05).结论 外周神经损伤诱发的NPP大鼠脊髓背角发生了补体异常活化现象,并且该处的补体活化参与NPP的痛觉过敏形成.     

脊髓背角补体异常活化与神经病理性疼痛关系的实验研究

目的 观察神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)模型大鼠脊髓背角补体C3变化,并探索脊髓补体异常活化在NPP形成中的作用.方法 实验分两部分:①84只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术后1、3、7 d组及坐骨神经结扎后1、3、7 d组,每组12只.分别在建模后1、3、7 d测定大鼠机械痛阈值.并按照分组在规定时间处死大鼠,采用RT-PCR、免疫组化和免疫比浊等测定脊髓中补体C3的表达情况.②48只SD大鼠随机分假手术+生理盐水组、CCI+生理盐水组、CCI+CVF组(持续尾静脉注射CVF组)和CCI+生理盐水+CVF组(单次尾静脉注射CVF组),每组12只.分别在术前和术后1、3、7、14 d测定大鼠机械痛阈值,两周后处死大鼠,用免疫组化和免疫比浊技术测定大鼠L4～L6脊髓中补体C,含量;并用分光光度法测定L4～L6脊髓匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),同时透射电镜观察L4～L6脊髓背角神经元内部结构变化.结果 CCI大鼠坐骨神经结扎侧后1、3、7 d脊髓L4～L6背角补体C,蛋白及mRNA都显著表达,并呈进行性升高趋势.而假手术组无明显变化;Pearson相关分析显示,CCI大鼠脊髓背角补体异常活化状况与大鼠痛觉过敏程度相关.单次尾静脉注射CVF可一过性提高模型大鼠痛觉阈值,并随着药物的代谢作用逐渐减弱;持续给予CVF可抑制大鼠痛觉过敏的发生.给予CVF可逆转模型大鼠脊髓中SOD活力并降低MDA产物含量.给予CVF可减轻模型大鼠脊髓背角神经元线粒体肿胀及核膜损伤程度(P<0.05).结论 外周神经损伤诱发的NPP大鼠脊髓背角发生了补体异常活化现象,并且该处的补体活化参与NPP的痛觉过敏形成.     

脊髓背角补体异常活化与神经病理性疼痛关系的实验研究

目的 观察神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)模型大鼠脊髓背角补体C3变化,并探索脊髓补体异常活化在NPP形成中的作用.方法 实验分两部分:①84只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术后1、3、7 d组及坐骨神经结扎后1、3、7 d组,每组12只.分别在建模后1、3、7 d测定大鼠机械痛阈值.并按照分组在规定时间处死大鼠,采用RT-PCR、免疫组化和免疫比浊等测定脊髓中补体C3的表达情况.②48只SD大鼠随机分假手术+生理盐水组、CCI+生理盐水组、CCI+CVF组(持续尾静脉注射CVF组)和CCI+生理盐水+CVF组(单次尾静脉注射CVF组),每组12只.分别在术前和术后1、3、7、14 d测定大鼠机械痛阈值,两周后处死大鼠,用免疫组化和免疫比浊技术测定大鼠L4～L6脊髓中补体C,含量;并用分光光度法测定L4～L6脊髓匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),同时透射电镜观察L4～L6脊髓背角神经元内部结构变化.结果 CCI大鼠坐骨神经结扎侧后1、3、7 d脊髓L4～L6背角补体C,蛋白及mRNA都显著表达,并呈进行性升高趋势.而假手术组无明显变化;Pearson相关分析显示,CCI大鼠脊髓背角补体异常活化状况与大鼠痛觉过敏程度相关.单次尾静脉注射CVF可一过性提高模型大鼠痛觉阈值,并随着药物的代谢作用逐渐减弱;持续给予CVF可抑制大鼠痛觉过敏的发生.给予CVF可逆转模型大鼠脊髓中SOD活力并降低MDA产物含量.给予CVF可减轻模型大鼠脊髓背角神经元线粒体肿胀及核膜损伤程度(P<0.05).结论 外周神经损伤诱发的NPP大鼠脊髓背角发生了补体异常活化现象,并且该处的补体活化参与NPP的痛觉过敏形成.     

A Rat Model of Radicular Pain Induced by Chronic Compression of Lumbar Dorsal Root Ganglion with SURGIFLO (TM)

Background: Radicular pain is a common and debilitating clinical pain condition. To date, the mechanisms of radicular pain remain unclear, partly because of the lack of suitable preclinical models. The authors report a modified rat model of radicular pain that could mimic a subset of clinical radicular pain conditions induced by the soft tissue compression on dorsal root ganglion.

Methods: A rat model of radicular pain was produced by infiltrating the L5 intervertebral foramen with 60 [mu]l of a hemostatic matrix (SURGIFLO (TM); Johnson & Johnson, Somerville, NJ) resulting in chronic compression of lumbar dorsal root ganglion. Thermal hyperalgesia and mechanical allodynia were measured with or without epidural treatment with triamcinolone. Western blot was used to assess the expression of the NR1 subunit of the N-methyl-d-aspartate receptor and inhibitory factor [kappa][beta]-[alpha], an inflammatory marker, within the affected L5 dorsal root ganglion and spinal cord dorsal horn.

Results: Chronic compression of lumbar dorsal root ganglion resulted in: (1) persistent mechanical allodynia and thermal hyperalgesia up to 4 or 5 postoperative weeks and (2) up-regulation of the N-methyl-d-aspartate receptor and inhibitory factor [kappa][beta]-[alpha] within the ipsilateral L5 dorsal root ganglion and spinal cord dorsal horn. Epidural administration of triamcinolone (6.25-100 [mu]g) on postoperative day 3 dose-dependently attenuated both thermal hyperalgesia and mechanical allodynia in rats with chronic compression of lumbar dorsal root ganglion.     

Comparison of neuropathic pain induced by the application of normal and mechanically compressed nucleus pulposus to lumbar nerve roots in the rat.

We studied whether applying nucleus pulposus tissue, obtained from tail intervertebral discs that had been subjected to chronic mechanical compression, to the lumbar nerve roots produces hyperalgesia, which is thought to be a pain-related behavior in the rat. An Ilizarov-type apparatus was used for immobilization and chronically applied compression of the rat tail for eight weeks. Three weeks after application of extracted nucleus pulposus tissue on the lumbar nerve roots, motor function, sensitivity to noxious mechanical stimuli was measured. Eight weeks after application of the apparatus, the instrumented vertebrae were resected and sections were stained with hematoxylin and eosin to evaluate degeneration of the intervertebral disc. Mechanical hyperalgesia observed in rats treated with the compressed nucleus pulposus tissue was greater and of longer duration than in the rats treated with normal and non-compressed discs. The nucleus pulposus in the instrumented vertebrae showed some histological degeneration. In conclusion, chronic mechanical compression of nucleus pulposus, which resulted in degeneration to some extent, enhanced mechanical hyperalgesia, which was induced by application of nucleus pulposus on the nerve root in the rat. Degenerative intervertebral discs might induce more significant pain than normal intervertebral discs.     

实验性髓核突出诱致神经根性疼痛机理的探讨

目的 探索单纯自体髓核组织放置于神经根邻近,并与神经根接触后对大鼠后爪机械刺激痛觉敏感性的影响。方法 取大鼠自体尾椎髓核组织无压迫下置于腰4和腰5神经根旁并与神经根相接触,术后不同的时间点观察大鼠双侧后爪机械刺激敏感性的变化;同时采用HE染色方法观察髓核组织和神经根的变化。结果 无明显机械压迫情况下,自体髓核组织与神经根接触后可诱导大鼠术侧后爪出现明显的机械性痛觉敏感性的升高;HE染色显示髓核组织发生了明显的炎性改变,邻近神经根出现空泡变性。结论 髓核组织自身介导的炎症反应可能参与机械性痛觉敏感性的发生。除机械因素外,突出髓核组织发生的炎症反应也可能是腰椎间盘突出所致坐骨神经痛的原因。     

周围神经旁移植自体髓核对大鼠疼痛行为的影响

目的　探讨髓核在坐骨神经痛发病机制中的作用。方法　选择 16只SD雄性大鼠随机分为两组 ,分别将自体尾椎髓核混悬液注射到腰椎硬膜外腔或坐骨神经周围。测定其后肢机械刺激缩爪阈值。结果　在没有明显机械压迫下 ,腰椎硬膜外腔的髓核使大鼠后肢产生明显的痛觉过敏反应 ,坐骨神经旁的髓核不能使大鼠产生上述变化。结论　与髓核相关的炎症的介质是引起坐骨神经痛的原因之一 ,神经根缺乏神经外膜保护是引起疼痛的解剖学基础。     

一氧化氮在神经根性疼痛中的作用

目的：探索一氧化氮(NO)在髓核突出所致的神经根性疼痛中的作用。方法：取大鼠自体尾椎髓核无压迫下放置在L4和L5神经根表面，分别在术后3d及1、2、3、4周时观察大鼠后足机械刺激和热刺激敏感性的变化，并用免疫组化方法对移植髓核中的一氧化氮合酶(NOS)进行检测．探索NO在疼痛中的作用：结果：在无明显机械压迫情况下，大鼠腰神经根上放置自体髓核可产生痛觉过敏，移植髓核组织中NOS染色阳性一结论：髓核自身是引起腰腿痛的重要原因，NO可能参与疼痛的产生.     

前列腺素E2在突出腰椎间盘中的表达及其与坐骨神经痛的关系

目的探讨前列腺素(PG)E2在突出腰椎间盘组织中的表达及其在坐骨神经痛发病机制中的作用。方法 42个突出椎间盘标本取自42例腰椎间盘突出并有坐骨神经放射性疼痛症状的手术治疗患者,其中膨隆型12例,破裂型15例,游离型15例,取材部位为紧贴神经根突入椎管的椎间盘组织(A部位)和椎间隙内残存的椎间盘组织(B部位)。术前采用视觉模拟评分(VAS)对所有患者坐骨神经痛严重程度进行评分。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PGE2含量。结果 A部位PGE2含量自膨隆型、破裂型至游离型逐渐升高,差异有显著性(P<0.01);A部位PGE2含量高于B部位(P<0.01);PGE2含量与患者坐骨神经痛VAS评分存在明显相关性(r=0.848,P<0.01)。结论 PGE2参与了腰椎间盘退变、突出的发病机制,PGE2含量与坐骨神经痛程度呈正相关性。