血清冲胆汁酸酶法测定及其临床应用

为了建立酶法测定血清叫胆汁酸的方法并评价其临床应用价值，对试剂配方和测定条件进行优化实验，并作临床观察。结果，本法灵敏度：５０μｍｏｌ／Ｌ Ａ５００ｎｍ为０．１，线性为０－２００μｍｏｌ／Ｌ精密度；总ＣＶ〈６．０％，批内ＣＶ〈３．０％。本法和日本一化试剂的比较：Ｙ＝０．９７３Ｘ＋２．７２，ｒ＝０．９９６３。     

偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

匀相法直接测定血清低密度脂蛋白胆固醇

目的 探讨匀相法直接测定血清低密度脂蛋白胆固醇的价值。方法 用９７０７Ａ ＬＤＬ－ｃ试剂盒及ＢＥＣＫＭＡＮ ＣＸ７自动生化分析仪直接测定血清ＬＤＬ－ｃ含量。 结果（１）批内变异ＣＶ％为．５５２％￣０．８０５％,批间变异ＣＶ％〈１％;（２）线性关系良好,直线范围可达４．９５９ｍｍｏｌ／Ｌ;（３）经与聚乙烯硫酸沉淀（ｐｖｓ）法测定对照３０例,ｒ＝０．９４１,Ｐ〈０．０５,呈显著相关,回归方程为Ｙ＝０．     

连续监测法测定胆红素氧化酶

为了建立连续监测法测定胆红素氧化酶活性的方法。该文以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ为缓冲体系，酶促反应的最适ｐＨ为８．２，底物浓度为３４μｍｏｌ／Ｌ，胆红素的最大吸收波长在４４０ｎｍ，摩尔吸光系数为５．６３×１０＾４Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１；在最佳条件下测定ＢＯＤ的线性范围是０－８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ〈３．８１％，批间ＣＶ〈４．６７％。     

血清NAG活性测定及其在病毒性肝炎诊断中的初步探讨

应用新色原２－氯－４－硝基酚－Ｎ－乙酰－β－Ｄ－氨基葡萄糖苷（ＣＮＰ－ＮＡＣ）为底物建立了血清ＮＡＧ的速炫法测定，并应用于肝病的临床诊断，收到良好的效果，此反应的最适ＰＨ为５．０；底物浓度为２．０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＣＮＰ当ＰＨ为５．０时的最大吸收峰在４０５ｎｍ；在底物溶液中加入适当的ＴｒｉｔｏｎＸ－１００（０．１％）可以提高反应的灵敏度，批纳ＣＶ〈３．６０％，批间ＣＶ〈６．９７％。当地正常参考值范围是     

利用人多能干细胞来源的神经管模型探究丙戊酸钠的 致畸机制

摘要：目的 利用人多能干细胞来源的体外神经管模型探索丙戊酸钠（ＶＰＡ）导致神经管畸形的疾病发生机制。方法 悬浮 培养人多能干细胞并进行体外神经诱导，通过免疫荧光染色法检测多能性标志物八聚体结合转录因子 ４（Ｏｃｔ ４），神经特性标 志物成对框基因 ６（ＰＡＸ６），Ｅ－钙黏蛋白（ＥＣＡＤ）、Ｎ－钙黏蛋白（ＮＣＡＤ），细胞骨架标志物 Ｆ－肌动蛋白（Ｆ ａｃｔｉｎ）和极性标志物 蛋白激酶 λ（ＰＫＣλ）等指标的表达水平以验证体外神经管模型；采用 ＶＰＡ 的药物作用试验对各实验组（ＶＰＡ ０． １、１ 和 １０ μｍｏｌ ／ Ｌ组）及对照组进行进一步的验证。结果 免疫荧光染色法检测结果表明，多能性标志物 ＯＣＴ４ 的表达水平减少；神 经特性标志物 ＰＡＸ６ 的表达水平增加；ＥＣＡＤ 与 ＮＣＡＤ 的表达模式存在时空转变；Ｆ ａｃｔｉｎ 和 ＰＫＣλ 均集中表达于细胞顶部；对 照组、ＶＰＡ ０．１、１ 和 １０ μｍｏｌ ／ Ｌ 组的细胞直径分别为（９０．８１±０．８８）μｍ、（８７．１４±１．３５）μｍ、（７７．１９±１．３４）μｍ 和（７５．６３±０．８６） μｍ，ＶＰＡ １０ μｍｏｌ ／ Ｌ及 １ μｍｏｌ ／ Ｌ 组与对照组之间差异均具有统计学意义（Ｐ 均＜０．０５）；ＶＰＡ １ μｍｏｌ ／ Ｌ 组中 Ｆ ａｃｔｉｎ 和 ＰＫＣλ 的 表达均未聚集在细胞顶面。结论 成功建立人多能干细胞来源的体外神经管模型；ＶＰＡ 对体外神经管具有呈剂量依赖性的 生长抑制作用；ＶＰＡ 通过影响细胞骨架功能和细胞极化导致 ｌｕｍｅｎ 形成失败，是其导致神经管畸形的潜在疾病发生机制。     

高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液相色谱测定孕妇尿内总雌三醇的方法，尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ３，蒸于乙醚，残留物用流动相重组，标本成分用Ｃ８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１．２％－１．５％批间ＣＶ分别为２．３％和４．０％本法在４．３３－１３８．７１μｍｏｌ／Ｌ（１．２５－４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．８μｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

血清钙甲基麝香草酚蓝显色EDTA褪色测定法

一种能扣除样本空白的血清外比色测定法，基本步骤为钙与甲基麝香草酚蓝反应生成蓝色化合物，测定吸光度（Ａ１），加入ＥＤＴＡ后再测定吸光度（Ａ２）。吸光度降低值与钙离子浓度成正比。本法线性范围为０－４．４ｍｏｌ＝Ｌ批内ＣＶ１．２－１．８％（ｎ＝１０）批间ＣＶ２．１－２．５％（ｎ＝１４）；回收率１００．３％，求得 （Ｘ）与Ｒｏｃｈｅ公司产的同类试剂盒（Ｙ）间的相关系数为０．９９５，Ｙ＝０．９６Ｘ＋０．０６     

简便,灵敏的天冬氨酸转氨酶同工酶电泳法

以醋纤薄膜为载体，半胱氨酸亚磺酸为氨基供体，ｍ－ＰＭＳ和ＭＴＴ为显色剂，电泳分离天冬氨酸转氨酶同工酶ｍ－ＡＳＴ和Ｃ－ＡＳＴ。灵敏度达２．２Ｕ／Ｌ，批内重复性７．５Ｕ／Ｌ（ｎ＝１０）ＣＶ＝９．５％；２１．４Ｕ／Ｕ（ｎ＝１０）ＣＶ＝８．４％。用１４０Ｕ／Ｌｍ－ＡＳＴ作倍化稀释考核其线性，结果为Ｙ＝０．０８５２９＋０．９９６２Ｘ（理论值），ｒ＝０．９９９７。与Ｔｅｒａｎｉｓｈｉ法比较，Ｙ＝１．７５５８＋０．８３１１Ｘ（本法），ｒ＝０．８９４０。     

导数同步荧光法测定血清色氨酸

为了排除酷氨酸、苯丙氨酸对荧光法测定色氨酸的干扰，建立了色氨酸导数－同步荧光测定法。结果表明，当△λ为９０ｎｍ时，色氨酸的一个阶导数－同步荧光峰在２８５ｎｍ时不受酪氨酸、苯丙氨酸的干扰；色氨酸浓度在０～４００μｍｏｌ／Ｌ与导数－同步荧光值成线性，Ｙ＝０．２８７Ｘ±０．０９６，ｒ＝０．９９９；批内、批间ＣＶ分别为２．５７％、３．４２％；回收率９３．８％～９７．２％；血红蛋白含量在０．２５～５．０ｇ／     

偶氮胂Ⅲ比色法测定血清（浆）钙

对偶氮肿Ⅲ（ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ）比色法测定血清（浆）钙的方法学作了系统研究。结果表明：反应混合液的吸收光谱呈Ｍ型，两个吸收峰分别为６００ｎｍ和６５０～６６０ｎｍ，但以６６０ｎｍ为适。试剂中ＡｒｓｅｎａｚｏＩＩＩ的最适浓度为１５０μｎｏｌ／Ｌ，试剂空白Ａ（吸光度曾称光密度ＯＤ）受ｐＨ的影响，当ｐＨ为７．０　时Ａ值最低。本法批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．８％～２．９６％、３．１５％～３．３７％，平均回收率为９９．３％，线性高达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１７Ａ。本法Ｙ与ＥＤＴＡ自动滴定法Ｘ比较：Ｙ＝１．００５９Ｘ－０．０１４１，ｒ＝０．９９８５、Ｐ＜０．００１、ｎ＝２０。Ｍｇ￣（２＋）、Ｃｕ￣（２＋）、Ｆｅ￣（２＋）、Ｚｎ￣（２＋），Ｈｂ、Ｂｉｌ均不干扰测定。     

单一试剂光度法测定血清锌

目的　建立简便、灵敏、试剂稳定性好的分光光度法测定血清锌。方法　在表面活性剂 Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ１００ 存在下,用２（５溴２吡啶偶氮）５二乙氨基酚（５ Ｂｒ Ｐ Ａ Ｄ Ａ Ｐ） 作显色剂测定血清锌。结果　该方法显色络合物最大吸收波长为５５８ ｎｍ ,线性范围达４６ μｍｏｌ／ Ｌ,表观摩尔吸光数为１２９ ×１０５ Ｌ·ｍｏｌ－ １·ｃｍ － １ 。回收率为９８３ ％ ～１０１６ ％ ,批内变异系数（ Ｃ Ｖ） 和批间变异系数分别为２４ ％ 与３４ ％ ,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性, Ｙ＝ １０１８ Ｘ－ ０２６６ｒ＝ ０９９８ ５ , Ｐ＞ ００５ ;５６ 例健康人血清锌含量为１０３７ ～２４６９ μｍｏｌ Ｌ（珋ｘ ±２ｓ） 。结论　该法具有快速、简便、灵敏可靠等优点,适合临床应用。     

硝酸盐还原酶测定血清和尿中硝酸盐浓度

目的 建立一氧化氮间接测定方法，方法 硝酸盐还原酶还原硝酸盐（ＮＯ＾－３）至亚硝酸盐（ＮＯ＾－３）过程中所消耗ＮＡＤＰＨ量与ＮＯ＾－３浓度呈正比，用３４０ｎｍ处ＮＡＤＰＨ吸光度下降值推荐ＮＯ＾－３的存在量。结果 血清ＮＯ＾－３浓度为５７．４９±３．５７μｍｏｌ／Ｌ时，批内变异系数（ＣＶ）＝６．２１％，批间ＣＶ＝８．７５％，５０μｍｏｌ／Ｌ和１００μｍｏｌ／ＬＫＮＯ３标准其回收率分别为９７．０２％和     

化学氧化法测定血清直接胆红素试剂的研制

利用过硫酸钾为氧化剂,在含有稳定剂的Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ缓冲液条件下,仅使血清中结合胆红素被氧化,以此作直接胆红素测定,本法与改良Ｊ－Ｇ法（Ｘ１）和胆红素酶法（Ｘ２）的直接胆红素测定相关良好,分别Ｙ＝１．０４７Ｘ１＋１．１２０,ｒ＝０．９８９６;Ｙ＝１．０３９Ｘ２＋１．５６７,ｒ＝０．９８３１。线性为０～３５０μｍｏｌ／Ｌ,低、中、高血清标本的ＣＶ值批内为３．４２％、３．２６％;２．０４％２．０４％批间为４．９７％;３．８４％,３．１８％,平均回收率１０５．６％,血红蛋白,维生素Ｃ干扰不明显,结论：化学氧化法测定结果的准确性和精密度均条例临床要求。     

三氧化二砷对骨髓增生异常综合征粒单系细胞体外作用的研究

为了探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）粒单系细胞的体外作用,用半固体、液体培养及ＡＰＡＡＰ法检测不同浓度Ａｓ２Ｏ３对２４例ＭＤＳ患ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＤ３３,ＣＤ１５,ｂｃｌ－２表达的影响,结果发现,Ａｓ２Ｏ３随着浓度的增加对ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用增强;０．３８８μｍｏｌ／Ｌ时对丛的抑制大于集落,其中低危组７０．７８％对３４．０５％,高危组８６．７６％对６５．８６％（Ｐ〈０．０１）;０．１９４μｍｏｌ－Ｌ时使低危组丛减少,而使集落增加,高危组丛减少,集落不变。高浓度（１．９４μｍｏｌ／Ｌ）时ＣＤ３３与ＣＤ１５表达降低,ｂｃｌ－２表达减少,细胞出现核染色质固缩,低浓度（０．１９４μｍｏｌ／Ｌ）时低危组ＣＤ３３减少,ＣＤ１５增加,高危组ＣＤ３３减少,ＣＤ１５不变,ｂｃｌ－２减少,且出现上述细胞     

神经肽Y放射免疫试剂盒的研制

目的 实验研究神经肽Ｙ测定在诊断心血管及胃肠系统疾病的生理病理学意义。方法 以神经肽Ｙ－甲状腺球蛋白联接物为免疫原，注射家兔获得闹质量抗体，建立了神经肽Ｙ ＲＩＡ方法，并组装试剂盒。结果 本回收率平均为９８％，批内批间ＣＶ分别为〈６．５％和〈１１．０％，最小检出值〈３３ｎｇ／Ｌ，反应最佳条件为０．０５ｍｏｌ／Ｌ ＰＨ８．６巴比妥缓冲液。测定２８例正常兴血浆ＮＰＹ为１４５．１±４４．１ｐｇ／ｍｌ。结     

过硫酸钾氧化胆红素比色法的实验研究

本文对过硫酸钾氧化总胆红素比色法的实验作了系统性研究。结果表明：瓜液中过硫酸钾芭为１１．７７ｍｍｏｌ／Ｌ,线性可达６１２．５μ ｍｏｌ／Ｌ,批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）分别为０．７２％和２．４４％,平均回收率为９９．８％。本法（Ｙ）与改良Ｊ－Ｇ法（Ｘ）结果比较：ｒ＝０．９９５４,Ｙ＝０．９５４０Ｘ＋０．１４６５。溶血（１２．０ｇ／Ｌ血红蛋白）,脂血（８．４ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯）,维生素Ｃ（１     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批内不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０．９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５６μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９５）。     

高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法

基于选择性抑制法的原理，通过对聚阴离子和表面活性剂的筛选实验，以及试剂配方和实验条件优化实验，建立了直接测定高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）的方法。本法的线性范围达３．９ｍｍｏｌ／Ｌ，批内ＣＶ为１．４５％～２．０２％；总ＣＶＯ １．７１％～３．１４％，和ＴＰＡ法比较：Ｙ＝０．９９２３Ｘ＋０．０５２，ｒ＝０．０９８３４，ｎ＝６６。加入ＨＤＬ组份的回收率为１００．１％，本法的特异性好，加入ＬＤＬ－Ｃ达     

血清结合胆红素的酶法测定

目的 建立用胆红素氧化酶（ＢＯＤ）作为催化剂，选择性地测定血清结合胆红素（ＣＢ）的新方法。方法 测定条件为：０．１ｍｏｌ／Ｌ甘氨酸缓冲液、ｐＨ１０．０，ＢＯＤ活性０．５～０．８Ｕ／反应管，反应时间２分钟。结果 线性至少可达到２２０μｍｏｌ／Ｌ；精密度为批内ＣＶ１．７１～３．９８％、批间ＣＶ８．０～９．７２％；正常参考值范围为０～３．１４μｍｏｌ／Ｌ；与偶氮法所测结果相关性较好。结论 本文所建立的Ｃ