扁塑藤素对胃癌细胞MGC803及SGC7901增殖和凋亡的影响

目的:研究扁塑藤素对胃癌MGC803和SGC7901细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法:体外培养MGC803和SGC7901细胞,细胞接受0-50μmol/L药物处理之后,采用CCK-8实验、Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测及细胞周期检测实验研究扁塑藤素对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响;采用罗丹明123测定细胞线粒体跨膜电位变化,最后采用Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关x蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)表达水平.同时用人胃癌细胞系MGC803进行裸鼠成瘤实验,观察扁塑藤素对裸鼠成瘤的影响.结果:扁塑藤素可以抑制MGC803和SGC7901细胞增殖,其IC_(50)值分别为8.5μmol/L和12.6μmol/L;Annexin V-FITC/PI双染实验显示随着药物浓度的增加,出现凋亡的细胞明显增加;细胞周期实验显示扁塑藤素可以诱导MGC803细胞出现G_1期阻滞;细胞经过药物处理后,细胞线粒体跨膜电位明显下降.Western blot实验显示随着药物浓度的增加,细胞中Bax蛋白表达水平上升,Bcl-2蛋白表达水平下降,呈现一定的浓度依赖性.裸鼠成瘤实验显示,扁塑藤素可以抑制裸鼠种植瘤的生长.结论:扁塑藤素能显著抑制胃癌MGC803和SGC7901细胞增殖并诱导其凋亡,认为扁塑藤素可能通过增强线粒体通透性来诱导细胞凋亡.     

蟾蜍灵联合奥沙利铂对胃癌MGC803细胞增殖抑制及凋亡的影响

目的 研究蟾蜍灵联合奥沙利铂诱导人胃癌细胞株MG C803凋亡及对凋亡因子Bax、Bcl-2的影响.方法 应用MTr法检测不同浓度蟾蜍灵及奥沙利铂单药及联合对胃癌细胞MGC803增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡和周期阻滞;Western印迹法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达.结果 (1)蟾蜍灵及奥沙利铂单药均抑制MGC803细胞增殖,呈剂量时间依赖效应,且联合用药的细胞增殖抑制率高于单药组,差异有统计学意义.24、48 h及72 h联合指数(CI)分别为0.693、0.596、0.481;(2)药物作用细胞24h,流式细胞仪检测10 nmol/L蟾蜍灵及10 μg/ml奥沙利铂凋亡率分别为2.9％及4.3％,联合用药组为14.13％,与单药组对比有统计学差异;(3)Western印迹结果显示,蟾蜍灵、奥沙利铂单用于胃癌细胞24h后,Bax及Bcl-2表达无明显变化,而联合组Bax蛋白表达上调到对照组145.94％,Bcl-2蛋白下调到对照组57.14％.结论 蟾蜍灵联合奥沙利铂协同诱导胃癌MGC803细胞凋亡,且可能与下调Bcl-2、上调Bax蛋白有关.     

姜黄素对人胃癌MGC803的体外抑制作用

[目的]观察姜黄素对人胃癌MGC803细胞的生长抑制作用,观察药物作用时间浓度的关系并探究其诱导凋亡的机制。[方法]MTT法建立细胞剂量效应、时间效应曲线;caspase 3、caspase 9活性检测试剂盒及Western Blot实验分别检测caspase 3、caspase 9活性变化情况和Bax、Bcl-2蛋白表达情况。[结果]姜黄素对人胃癌MGC803细胞有明显的剂量-时间依赖效应;姜黄素干预后,caspase 3、caspase 9活性明显升高;Bcl-2蛋白水平显著下降,Bax蛋白表达明显升高。[结论]姜黄素在体外对人胃癌MGC803细胞的增殖具有抑制作用,其促凋亡可能是通过调控Bax、Bcl-2、caspase 3、caspase 9蛋白来实现的。     

中药槐耳诱导人胃癌细胞MGC803凋亡的实验研究

[目的]探讨槐耳、顺铂对人胃癌细胞株MGC803细胞增殖和凋亡的影响以及槐耳诱导人胃癌MGC803细胞凋亡的机制。[方法]以不同浓度的槐耳、顺铂以及联合用药分别作用于体外培养的人胃癌细胞MGC803,MTT法检测MGC803凋亡的情况,倒置显微镜观察其形态的变化,流式细胞术检测早期细胞凋亡情况;Western blot法检测槐耳处理24h后基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达情况。[结果]MTT实验显示槐耳及顺铂均可抑制MGC803细胞的生长,呈时间及浓度依赖性;流式细胞仪可检测到MGC803细胞凋亡率明显增加,呈时间及浓度依赖性;槐耳能降低MGC803细胞中MMP-2蛋白的表达水平,并呈浓度依赖性。[结论]槐耳可在体外抑制人胃癌细胞MGC803的生长,并促进它的凋亡,且机制可能与抑制MMP-2的表达有关。联合使用槐耳和化疗药物可能会更有效发挥槐耳抗肿瘤增值的作用。     

槐耳对人胃癌细胞MGC803增殖和凋亡的影响

[目的]观察中药槐耳对胃癌细胞株MGC803增殖和凋亡的影响.[方法]以不同浓度的槐耳（4、8、16、32、64 mg/ml）分别作用于体外培养的人胃癌细胞MGC803,通过MTT法、划痕实验等检测槐耳对MGC803细胞增殖和迁移的作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果]MTT实验显示槐耳可抑制MGC803细胞的生长,呈时间及浓度依赖性;显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状;划痕实验显示,4、8 mg/ml槐耳分别作用MGC803细胞,划痕愈合明显慢于对照组,呈剂量依赖关系;流式细胞仪可检测到MGC803细胞凋亡率明显增加,呈时间及浓度依赖性.[结论]槐耳可抑制人胃癌MGC803细胞的迁移,且能通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制人胃癌细胞MGC803的生长.     

沉默EZH2基因对胃癌细胞增殖及凋亡的影响

[目的]探讨沉默胃癌细胞株MGC803中的EZH2基因对细胞增殖及凋亡的影响。[方法]采用siRNA沉默胃癌细胞中的EZH2基因并用qRT-PCR及western blot验证沉默效率;MTT法评估细胞增殖情况,运用western blot分析凋亡蛋白相关蛋白Bcl-2及Bax的表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡变化。[结果]胃癌细胞中的EZH2基因被成功沉默;沉默组细胞的增殖情况较正常组和阴性对照组明显降低(P0.05),而凋亡率相对于其他2组明显升高(P0.05);沉默组中Bcl-2蛋白的表达量降低而Bax蛋白表达显著升高(P0.05)。[结论]沉默胃癌细胞中的EZH2基因能抑制该肿瘤细胞的增殖并促进其凋亡。     

保护性自噬对5-FU诱导的胃癌细胞凋亡的抑制作用

目的:明确5-FU处理胃癌MGC803细胞后自噬的存在,并探讨自噬在5-FU诱导凋亡中的作用.方法:5-FU处理胃癌MGC803细胞.MTT检测细胞增殖能力.流式细胞术检测细胞凋亡.Western blot检测蛋白表达.荧光显微镜观察自噬的发生.结果:0.1-1000mg/L的5-FU作用MGC803细胞48h,抑制细...     

热疗联合表柔比星对胃癌MGC803细胞的体外抑制及凋亡的影响

目的 观察表柔比星(EPI)温热化疗对人胃癌MGC803细胞的体外抑制及凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 采用四氮甲唑蓝(MTT)法确定作用48 h抑制率为50%的药物浓度作为实验的工作浓度.以48 h的IC50的药物浓度进行化疗或与热疗的联合,热疗选择温度为43℃,体外作用于MGC803细胞,实验分四组:对照组(C)、热疗组(H)、化疗组(D)、热化疗组(HD).MTT法检测各处理组对肿瘤细胞增殖的抑制作用;应用RT-PCR观察各处理组诱导MGC803细胞凋亡的作用及对Caspase-3和Bcl-2表达变化的影响.结果 单纯热疗和化疗对MGC803细胞系均有抑制作用(P<0.05);EPI温热化疗可明显增强EPI对MGC803细胞的抑制作用(P<0.05);与对照组比,热疗组、化疗组及热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高,各组之间均有差异(P<0.05);Bcl-2表达下调、Caspase-3表达上调,各组之间均有差异(P<0.05).Caspase-3与Bcl-2蛋白的表达呈明显负相关(r=-0.990,n=12),细胞凋亡率与Bcl-2蛋白表达负相关(r=-0.924,n=12),而与Caspase-3蛋白表达正相关(r=0.891,n=12).结论 EPI联合热疗能显著抑制MGC803细胞生长并诱导细胞凋亡,可能与下调Bcl-2,上调Caspase-3的表达及二者相互作用有关.     

β-榄香烯对胃癌MGC803细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察β-榄香烯对胃癌MGC803细胞凋亡的影响,并探讨其机制c用不同浓度β-榄香烯作用于MGC803 24～48 h,MTT法检测细胞活力,流式细胞术测算细胞凋亡率,Western blot法检测MGC803中的磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）及总ERK。结果随着药物浓度增加,细胞存活率逐渐降低（P均〈0.05）,细胞凋亡率明显增高（P均〈0.05）;随着药物浓度增加、作用时间延长,MGC803中p-ERK表达量显著下降（P均〈0.05）。结论β-榄香烯可诱导胃癌MGC803凋亡,其机制可能与抑制细胞ERK通路活性有关。     

Ki-67与BcL-2、Bax抗原在良性前列腺增生中的表达及意义

Ki-67是一种存在于增殖细胞核内的非组蛋白性核蛋白,与细胞增殖密切相关[1].Bcl-2基因家族是调节细胞凋亡的重要基因家族.Bcl-2、Bax是Bcl-2家族极其重要的成员.Bcl-2基因对细胞凋亡具有明显的抑制作用,Bax蛋白具有对抗Bcl-2蛋白抑制细胞凋亡的作用,Bcl-2与Bax的比例是决定细胞凋亡的关键因素[2].本文采用免疫组化法研究Ki-67与Bcl-2、Bax抗原在正常及增生前列腺组织中的表达,探讨其在前列腺增生中表达的意义.     

沉默miR-345联合5-FU对胃癌MGC803细胞增殖能力及凋亡的影响

目的 观察沉默miR-345联合5-FU对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响。方法 采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803以沉默miR-345表达。应用40μg/ml 5-FU单独处理胃癌细胞MGC803或联合miR-345沉默组,克隆形成实验观察细胞的增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果 脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803可以抑制miR-345的表达;细胞克隆形成实验显示,反义miR-345+5-FU联合组与单独5-FU处理组相比,克隆形成率[(4.29±0.83)%vs(7.68±0.34)%]显著降低(P0.01);流式细胞凋亡检测表明,反义miR-345+5-FU联合组细胞凋亡率显著高于反义miR-345组、5-FU组(P0.01)。结论 沉默miR-345联合5-FU能抑制5-FU对MGC803细胞增殖能力,并促进其凋亡。     

獐牙菜苦苷对大鼠胆汁淤积性肝损伤肝纤维化的抑制作用

目的:探讨獐牙菜苦苷对大鼠胆汁淤积性肝损伤肝纤维化进程的影响.方法:30只♂幼年SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、空白治疗模型组(n=10)及獐牙菜苦苷治疗组(n=10),利用改良ANIT法构建大鼠胆汁淤积性肝损伤及肝纤维化模型,造模期间给予獐牙菜苦苷治疗.实验终点以大鼠肝功能指标、肝纤维化血清学指标、肝组织纤维化指标、肝纤维化病理学指标等以判定獐牙菜苦苷的治疗效果,并利用Western blot法检测大鼠肝脏膜转运蛋白Mrp3、Mrp4的表达水平变化.结果:与空白治疗模型组相比,獐牙菜苦苷治疗组大鼠肝功能指标包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、碱性磷酸酶及谷氨酰转肽酶,肝纤维指标包括血清透明质酸、层黏连蛋白、Ⅳ胶原及Ⅲ型前胶原,肝组织纤维化指标肝组织羟脯氨酸含量,病理学指标包括炎症活动度及纤维化程度SSS计分等均有显著改善.Western blot检测结果提示獐牙菜苦苷可显著提高模型大鼠肝脏膜转运蛋白Mrp3、Mrp4的表达水平.结论:獐牙菜苦苷可抑制大鼠胆汁淤积性肝损伤肝纤维化进程.     

柚皮苷通过调控ARHI基因表达对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响

目的研究柚皮苷是否通过调控ARHI基因表达影响结肠癌细胞的增殖和凋亡。方法采用不同浓度的柚皮苷处理结肠癌细胞SW620,MTT法检测细胞增殖,免疫印迹实验(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、ARHI蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR(qRT-PCR)检测ARHI mRNA表达。在SW620细胞中转染pcDNA-ARHI,或转染si-ARHI,并使用柚皮苷处理,观察其对细胞增殖和凋亡的影响。结果与对照组比较,柚皮苷明显增加SW620细胞的增殖抑制率、凋亡率、p21、Bax蛋白表达量、ARHI mRNA和ARHI蛋白表达量,显著降低CyclinD1、Bcl-2蛋白水平,均呈浓度依赖性(P0.05)。ARHI过表达明显增加SW620细胞的抑制率、凋亡率、p21、Bax蛋白表达量,显著降低CyclinD1和Bcl-2蛋白水平(P0.05)。抑制ARHI表达逆转了柚皮苷对SW620细胞增殖抑制率、凋亡率、p21、Bax蛋白表达的促进作用,及对CyclinD1和Bcl-2蛋白表达的抑制作用。结论柚皮苷通过上调ARHI基因的表达,抑制结肠癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡。     

敲低长链非编码RNA LOXL1- AS1表达对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的探讨敲低长链非编码RNA LOXL1-AS1表达对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测不同胃癌细胞株(AGS、BGC823、NCI-N87、MGC803和SGC7901)和正常胃黏膜细胞株GES-1中LOXL1-AS1表达情况;选取LOXL1-AS1表达水平最高的胃癌BGC823细胞系,建立LOXL1-AS1敲低模型,实验分为sh-LOXL1-AS1组和sh-NC组,分别转染LOXL1-AS1靶向shRNA和scramble shRNA,qRT-PCR法验证干扰效率,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt表达。结果 qRT-PCR结果显示,与正常胃黏膜细胞GES-1相比,胃癌细胞株中LOXL1-AS1表达水平均显著升高(P0.05)。与sh-NC组比较,sh-LOXL1-AS1组LOXL1-AS1表达水平显著降低(P0.05),细胞增殖率显著降低(P0.05),细胞凋亡率显著升高(P0.05),细胞Bcl-2、p-PI3K和p-Akt表达显著降低,Bax表达显著升高(P0.05)。结论敲低LOXL1-AS1表达可抑制胃癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,继而调控凋亡相关蛋白表达,启动细胞凋亡程序有关。     

外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导人胃癌MKN-28细胞凋亡的影响

目的:探讨外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法:通过脂质体将重组FHIT基因PRC/CMV质粒和空载体转染到人胃癌细胞MKN-28,Western blot法检测外源性FHIT蛋白的表达;使用不同浓度的长春新碱分别处理各组细胞,MTT法分析细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡:Western blot法检测细胞Bcl-2和Bax的表达.结果:转染FHIT基因后,MKN-28细胞检测到FHIT蛋白的表达;长春新碱处理48 h后,转染FHIT基因组细胞、转染空载体组细胞及未转染组细胞的凋亡率分别是30.967%±2.122%、11.033%±1.724%、10.733%±1.021%,转染FHIT基因组细胞凋亡更明显(F=142.045,P<0.05);转染FHIT基因组细胞经长春新碱处理后Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加.结论:外源性FHIT基因表达可以增强长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡,其机制可能与凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达有关.     

Ki—67与BcL—2、Bax抗原性良性前列腺增生中的表达及意义

Ki- 67是一种存在于增殖细胞核内的非组蛋白性核蛋白 ,与细胞增殖密切相关[1] 。Bcl- 2基因家族是调节细胞凋亡的重要基因家族。Bcl- 2、Bax是 Bcl- 2家族极其重要的成员。Bcl- 2基因对细胞凋亡具有明显的抑制作用 ,Bax蛋白具有对抗 Bcl- 2蛋白抑制细胞凋亡的作用 ,Bcl- 2与 Bax的比例是决定细胞凋亡的关键因素[2 ] 。本文采用免疫组化法研究 Ki- 67与Bcl- 2、Bax抗原在正常及增生前列腺组织中的表达 ,探讨其在前列腺增生中表达的意义。1　资料与方法1 .1　一般资料　正常前列腺 ( NP)组织标本 1 0例来自尸体供肾者 ,年龄 2 1～ 2 7岁…     

五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的作用及机制

目的探讨五味子多糖对裸鼠胶质瘤细胞的诱导凋亡作用的机制。方法体外提取和原代培养裸鼠胶质瘤细胞,将浓度为0、200、400和800μg/ml的五味子多糖作用于裸鼠胶质瘤细胞中培养48 h后,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测其上清液中Bax和Bcl-2的蛋白表达;细胞免疫组织化学法观察五味子多糖作用后裸鼠胶质瘤细胞Bax和Bcl-2阳性表达率。结果不同浓度五味子多糖作用细胞后,细胞培养上清中Bcl-2蛋白表达水平均下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),Bax/Bcl-2值均升高(P<0.01)。细胞免疫组化结果显示,400和800μg/ml多糖组Bax阳性表达率明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。400和800μg/ml多糖组Bcl-2阳性表达率下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的机制可能是通过上调Bax/Bcl-2比值,使促凋亡因素占优势,从而使胶质瘤细胞发生凋亡。     

奥曲肽诱导体外培养人胃癌细胞MGC-803凋亡的研究

目的研究不同浓度，不同作用时间奥曲肽（Oct）对体外培养胃癌细胞MGC-803的作用及可能机制．方法采用MTT比色法检测Oct对体外培养胃癌细胞生长的抑制作用．用DNA断片法和流式细胞仪观察了Oct对胃癌细胞凋亡的影响，扫描电镜和透射电镜同时显示了凋亡细胞的形态学特征．结果MTT比色法测得Oct对胃癌细胞增殖有明显的抑制作用，呈剂量相关性Oct能有效地诱导人胃癌细胞MGC-803凋亡．经Oct处理12h～48h的胃癌细胞，DNA琼脂糖电泳呈现典型的梯形条带（Ladder），电镜和流式细胞仪（FcM）检测出现典型凋亡特征结论Oct对胃癌MGC-803细胞生长增殖有抑制作用；能有效地诱导人胃癌细胞MGC－803凋亡；是潜在的抗癌剂     

顺铂对胃癌细胞Bax和Bcl-2表达的影响

目的通过研究顺铂对人胃癌BGC-823细胞Bax和Bcl-2的影响,探讨顺铂对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法用化疗药物顺铂以不同浓度、不同时间处理对数期生长的人胃癌BGC-823细胞,采用MTT法检测顺铂对BGC-823细胞增殖抑制率的影响,采用免疫印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测Bax及Bcl-2蛋白和mRNA的表达。结果顺铂对人胃癌细胞BGC-823生长增殖具有明显抑制作用,其效应成浓度和时间依赖性（P〈0．05）。不同浓度的顺铂处理BGC-823细胞24小时后,Bax蛋白和mRNA水平成浓度依赖性增加（P〈0．05）,而Bcl-2蛋白和mRNA水平成浓度依赖性减少。结论经顺铂处理的人胃癌BGC一823细胞,不论是在转录水平还是在翻译水平均上调了Bax的表达,同时使Bcl-2表达下调,此途径可能为顺铂所诱导肿瘤细胞凋亡的机制之一。     

蟾蜍毒素对人胃癌细胞凋亡的诱导机制

目的:研究蟾蜍毒素诱导人胃癌细胞MGC803凋亡及对凋亡因子Livin、caspase-3的影响.方法:应用MTT法检测10、20、40、80、160nmol/L蟾蜍毒素对胃癌细胞MGC803增殖抑制作用:瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态学的变化;流式细胞术分析周期阻滞和细胞凋亡;Western blot法检测Livin...