特异性乙型肝炎病毒X基因反义核酸体外抗病毒作用

为了观察互补于乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因的三段硫代反义核酸（ＡＳＯＮ）体外抗病毒作用，采用ＥＬＩＳＡ和ＰＡＰ－ＥＬＩＳＡ法检测ＡＳＯＮ作用前后２，２，１５细胞上清中乙型肝炎病毒表面抗原、ｅ抗原及Ｘ抗原（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｘＡｇ）含量变化及细胞原位杂交检测细胞内ＨＢＶＤＮＡ含量变化。结果表明，三段ＡＳＯＮ均可抑制ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｘＡｇ的表达，其抑制率分别为８０．６５％、６２．７６％和７８．０７％；细胞内ＨＢＶＤＮＡ也明显减少。据此认为，ＨＢｘＡｇ表达量下降可能系ＡＳＯＮ序列特异性封闭作用所致，而ＨＢ－ｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ表达量以及ＨＢＶＤＮＡ含量降低，可能是通过ＨＢｘＡｇ对ＨＢＶＤＮＡ启动子的反式激活功能降低而实现的。     

肝舒胶囊在体外细胞培养中抗HBV活性的研究

目的：研究肝舒胶囊在２．２．１５细胞培养中抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用。方法：用２．２．１５细胞体外培养,对肝舒胶囊抗ＨＢＶ活性进行评价。结果：肝舒胶囊５ｇ／Ｌ加药后４ｄ对２．２．１５细胞ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的抑制率为５１．１６％和７４．８３％,在加药后第８天抑制作用达高峰,对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的抑制率分别为７５．７２％和８０．０２％。     

小儿乙型肝炎血清,病理及免疫病理分析

本文通过检测１５例小儿病毒性肝炎患者血清ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ标志及肝组织内ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ发现ＨＡＶ和ＨＣＶ标志全部阴性，ＨＢＶ标志全部阳性。１５例ＨＢＶ感染中，血清ＨＢＶＤＮＡ阳性１１例。其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）９例，ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｂ（＋）２例。综合血清其它的感染指标与肝脏病理及免疫病理的变化对１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病例作了重要分析。进一步证实ＨＢｅＡｇ为临     

HDV感染与HBV血清标志物的关系

目的分析ＨＤＶ感染与ＨＢＶ血清标志物的关系方法选ＨＢＶ血清标志物阳性患者，同时进行ＨＤＶ感染的检测．供血员做正常对照．ＨＤＶ感染和ＨＢＶ血清标志物皆用相应酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）．结果２８９例ＨＢＶ血清标志物阳性患者中，有４０例ＨＤＶ感染阳性，阳性率为１３８％．在ＨＢＳＡｂ（＋）组，无ＨＤＶ感染阳性者检出；在ＨＢＳＡｇ（＋）或ＨＢＣＡｂ（＋）或ＨＢｅＡｂ（＋）组患者中，ＨＤＶ感染阳性率分别达１７６％，１８８％、２５２％，明显高于ＨＢｅＡｇ（＋）组（１０９％）；并且ＨＤＶ感染阳性率在ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｂ（＋）患者中，高达２６２％，明显高于ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｇ（＋）者（１０９％）．结论①ＨＤＶ感染性率在ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｂ（＋）患者中高于ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｇ（＋）患者．②ＨＤＶ感染阳性率与ＨＢＶ复制的速度和数量不全相关．     

HBV感染者血清HBeAg/IC和HBV DNA间的关系

资料与方法：ＨＢＶ感染者１１７例,正常对照２０例,研究对象排除其它肝炎病毒感染,半年内未经抗病毒及免疫治疗。采用ＥＬＩＳＡ及Ｎａｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法分别检测ＨＢＶ感染者血清中ＨＢｅＡｇ／免疫复合物（ＩＣ）和ＨＢＶ ＤＮＡ。 结果：１１７例ＨＢＶ感染者血清中共检出ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性２３例,ＨＢＶＤＮＡ阳性 ５５例, ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性者中 ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９１．３％（２１／２３例）,而ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性的９４例中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性３４例,阳性率为３６．２％,两组差异有非常显著性,ｘ２＝８．１５…     

慢性乙型肝炎和肝硬化中乙型肝炎病毒X抗原表达的分析

用基因工程技术由大肠杆菌合成重组乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ抗原（ＨＢｘＡｇ）并制备兔抗－ＨＢｘＩｇＧ以检测ＨＢｘＡｇ，合成一对以ＨＢＶＸ基因序列为模板的引物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增ＨＢＶＤＮＡ。免疫组织化学和血清学方法分别用以分析肝病患者肝组织中的ＨＢｘＡｇ和血清标本中的ＨＢｘＡｇ、抗－ＨＢｘ。发现ＨＢｘＡｇ在慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）患者肝组织中检出率为７２．７％，在肝炎后肝硬化（ＬＣ）中为９２．６％，而乙型肝炎核心抗原（ＨＢｃＡｇ）在ＬＣ中检出率为４７．８％。在ＣＡＨ、慢性迁延性肝炎和ＬＣ的血清中ＨＢｘＡｇ的阳性率分别为４４．４％、６６．６％和３３．３％，与ＨＢｅＡｇ的阳性率相似，而且在这些ＨＢｘＡｇ阳性的血清中可检出ＨＢＶＤＮＡ的存在，ＨＢｘＡｇ的表达与ＨＢＶ复制紧密相关，ＨＢｘＡｇ可能是一慢性ＨＢＶ感染的重要标志物。     

肝病患者丁肝病毒感染标志物检测及其临床意义

从１１７例肝病患者因清中检出２４例丁肝病毒（ＨＤＶ）感染者，总感染率为２０．５％。发现慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）者的ＨＤＶ感染率明显高于生肝炎（ＡＨ）；ＨＤＶ感染乾的ＨＢｓＡｇ均为阳性；乙肝病毒（ＨＢＶ）复制指标阳性者的ＨＤＶ感染指标阳性率显著高于ＨＢＶ复制有性者。提示：（１）ＨＤＶ感染可加重病情，使病情慢性化。（２）ＨＢｓＡｇ与ＨＤＶ密切相关。（３）ＨＤＶ感染似有促进ＨＢＶ复制的作用。     

乙型肝炎患者血清Pre-S-2抗原的意义

目的研究ＰｒｅＳ２抗原与乙型肝炎患者ＨＢＶ标记的关系．方法血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例及健康献血者２０例，血清用ＲＩＡ法检测ＰｒｅＳ２抗原及用ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ．结果血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性（１００％）；血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例，ＰｒｅＳ２抗原３０例阳性（６３８％），１７例阴性（３６２％），ＨＢＶＤＮＡ３２例阳性（６８１％），１５例阴性（３１９％），ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性２８例（５９６％），均阴性１４例（３００％）．健康献血者２０例，ＰｒｅＳ２抗原阳性１例（５０％），阴性１９例（９５０％），ＨＢＶＤＮＡ阳性２例（１００％），阴性１８例（８００％），ＰｒｅＳ２抗原及ＨＢＶＤＮＡ均阳性０例（０％），均阴性１８例（８００％）．结论ＰｒｅＳ２抗原可作为预测慢性乙型肝炎患者病情活动与传染的标志．     

树Qu实验感染乙型肝炎病毒的再评价

目的 评价乙肝病毒（ＨＢＶ）实验感染树Ｑｕ的稳定性与实用性。方法 用含ＨＢＶ的２．２．１５细胞或乙肝患者混合血清以不同剂量，经不同途径接种６０只健康树Ｑｕ，观察其临床表现，检测血清ＡＬＴ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶ－ＤＮＡ，肝组织行ＨＥ及免疫组织化学染色。结果 部分树Ｑｕ出现一过性食欲不振、稀便；６０只树Ｑｕ不同时粗ＡＬＴ水平均在正常范围；８只树ＱｕＨＢＶ标志物一过性阳性；肝组织未见类似于人乙     

肝细胞癌患者肝组织中丙型肝炎病毒抗原的定位研究

用过氧化物酶与抗过氧化物酶（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织中的丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＶＡｇ）和ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ。结果显示：ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检出率分别为２８．８％，７５．３％和２６．０％，ＨＣＶＡｇ阳性的肝细胞多呈散在分布，ＨＣＶ染色颗粒既可见于细胞浆也可见于细胞核，ＨＣＶＡｇ的检出与ＨＢＶ的感染态多显著相关，提示，ＨＣＶ可在ＨＣＣ患者的肝细胞中表达，Ｈ     

不同基因区反义寡核苷酸抑制乙型肝炎病毒基因表达的比较

目的探讨反义寡核苷酸（ＡＳＯＮ）特异性抗病毒作用。方法在ＨｅｐＧ２２．２．１５细胞中观察了４段１６聚针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因不同功能区的ＡＳＯＮ对病毒复制的抑制作用。结果ＡＳＯＮ能显著抑制ＨＢＶ基因的抗原表达（Ｐ＜０．００１），在Ｓ基因区设计的ＡＳＯＮ对ＨＢｓＡｇ的抑制作用明显优于Ｃ基因区的ＡＳＯＮ（Ｐ＜０．０５）。反之，在Ｃ基因区设计的ＡＳＯＮ对ＨＢｅＡｇ的抑制作用又明显优于Ｓ和Ｐｒｅ－Ｓ２基因区的ＡＳＯＮ（Ｐ＜０．０１）。４段ＡＳＯＮ的联合用药并不能增强其对ＨＢＶ的抑制作用。结论ＡＳＯＮ可能成为一种有开发潜力的抗病毒药物。     

树鼩实验感染乙型肝炎病毒的再评价

目的评价乙肝病毒（ＨＢＶ）实验感染树的稳定性与实用性。方法用含ＨＢＶ的２．２．１５细胞或乙肝患者混合血清以不同剂量、经不同途径接种６０只健康树。观察其临床表现，检测血清ＡＬＴ、ＨＢｓＡｇ．ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶ－ＤＮＡ。肝组织行ＨＥ及免疫组织化学染色，结果部分树出现一过性食欲不振、稀便；６０只树不同时相ＡＬＡ水平均在正常范围；８只树ＨＢＶ标志物一过性阳性；肝组织未见类似于人乙型肝炎的典型病理改变；免疫组织化学染色为阴性。结论树不能持续稳定感染ＨＢＶ     

血清HBeAg阴性与HBeAg/IC及A1896变异的关系

目的探讨血清ＨＢｅＡｇ阴性（双抗体夹心法）与ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形成及ＨＢＶ变异株Ａ１８９６的关系，评价ＨＢｅＡｇ／ＩＣ检测的临床意义．方法单克隆抗ＨＢｅ固相ＥＬＩＳＡ检测血清中ＨＢｅＡｇ／ＩＣ；套式多聚酶链反应检测ＨＢＶＤＮＡ；３＇碱基特异多聚酶链反应判断Ａ１８９６变异；ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ，研究对象为１１７例慢性ＨＢＶ感染者，２０例健康对照统计处理采用卡方检验．结果ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ检出率明显高于ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性血清，Ｐ＜０００１（９１３％ｖｓ３６２％）；２９份ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性血清中仅５例（１７２％）检出Ａ１８９６，而且其中２例与野毒株（Ｇ１８９６）混合感染并伴ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性．２９份中１７份（５８７％）为ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性的Ｇ１８９６感染；血清抗ＨＢｅ阳性组Ａ１８９６检出率高于抗ＨＢｅ阴性组，Ｐ＜００５（２５％ｖｓ３２％）．结论ＨＢｅＡｇ／ＩＣ为ＨＢＶ活跃复制指标；临床ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性患者仍多数为Ｇ１８９６感染，ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形致双抗体夹心法不能检出ＨＢｅＡｇ；抗ＨＢｅ应答可能为促使前Ｃ变异的重要因素     

拉米夫定治疗HBeAg阴性的慢性HBV感染近期临床观察

观察和评价拉米夫定治疗ＨＢｅＡｇ阴性慢性ＨＢＶ感染的近期疗效。ＨＢｅＡｇ阴性／ＨＢＶ ＤＮＡ阳性的慢性ＨＢｖ感染者２６例（包括１１例乙肝肝硬化），ＨＢｅＡｇ阳性／ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性的慢性ＨＢＶ感染者３０例（包括１０例乙肝肝硬化），均以拉米夫定治疗６个月后进行疗效评价，并继续观察５－１６个月。两组的ＡＬＴ／ＡＳＴ复常率分别为８４．７％／８８．５％和８６．７％／８６．７％（Ｐ＞０．０５），肝硬化患者Ｃｈｉｌｄ－Ｐｕｇｈ积分均明显下降，ＨＢＶ　ＤＮＡ全部阴转。ＨＢｅＡｇ阳性组３例发生ＹＭＤＤ变异，ＨＢｅＡｇ阴性组无１例变异。拉米夫定对于ＨＢｅＡｇ阴性／ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性者，同样是十分安全有效的抗病毒治疗药物。ＨＢｅＡｇ阴性者的耐药发生率可能低于ＨＢｅＡｇ阳性者。     

CPH肝组织,血清HBV与血清HBV标志物不同状态的相关性探讨

目的和方法：经肝活检诊断为慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）５１例，均做ＰＣＲ、斑点杂交进行肝组织、血清ＨＢＶＤＮＡ检测，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测了ＨＢＶ血清标志物。结果，ＨＢＶＤＮＡ检出率依次为肝组织ＰＣＲ９４１％（４８／５１）、血清ＰＣＲ９２２％（４７／５１）和肝组织斑点杂交９０２％（４６／５１）。三者之间无显著差异（χ２＝０４９５，Ｐ＞００５）。各项血清标志物总检出率ＨＢｓＡｇ３７２％（１９／５１），ＨＢｅＡｇ３３３％（１７／５１）和抗－ＨＢｅ２１５％（１１／１５），显著低于ＰＣＲ和斑点杂交ＨＢＶＤＮＡ的检出率（χ２＝３０．９，Ｐ＜０００５）。在抗－ＨＢｅ（＋）的１１例患者中１０例检出肝组织和血清ＨＢＶＤＮＡ，８例抗－ＨＢｓ（＋）患者，６例肝组织及血清ＰＣＲＨＢＶＤＮＡ阳性，结论：表明抗－ＨＢｅ（＋）及／或抗－ＨＢｓ（＋）不能代表ＨＢＶ复制停止或被清除，并且肝脏病变可仍然存在     

乙型肝炎表面抗原阳性血吸虫病患者 HDV 感染的血清学及预后调查

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测１２３例乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性的各期血吸虫病患者及５０例ＨＢｓＡｇ阳性的非血吸虫病对照人群血清丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）标志物，用斑点杂交检测晚期血吸虫病（晚血，ＡＳ）患者ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果表明，ＨＢｓＡｇ阳性的晚血患者ＨＤＶ标志物（ＨＤＶ－Ｍ）检出率１４．５％，显著高于急性血吸虫病（急血）、慢性血吸虫病（慢血）患者（２．５％）及对照人群（２．０％）（Ｐ＜０．０５）。随访观察发现，ＨＢＶ／ＨＤＶ双重感染的晚血患者病死率４０％，显著高于单纯ＨＢＶ感染的晚血患者（８．５％，Ｐ＜０．０５），提示晚血患者是ＨＤＶ感染的易感人群，ＨＤＶ感染是ＨＢｓＡｇ阳性晚血患者病情加重或恶化的一个重要原因，ＨＢＶ／ＨＤＶ双重感染与晚血患者死亡密切相关。     

海藻硫酸多糖抗乙型肝炎病毒的实验研究

１．材料与方法：海藻硫酸多糖（ＳＰＳ）是自制的一种天然硫酸酯多糖。在ＨＢＶ基因转染的人肝癌细胞系 ２．２．１５细胞中，观察ＳＰＳ在对ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ的抑制作用，以齐多夫定和灵芝多糖作为对照药物。选用鸭肝炎动物模型，以阿昔洛韦为阳性对照，观察ＳＰＳ对ＤＨＢＶ感染鸭血清ＤＨＢＶ ＤＮＡ水平的抑制作用。 ２．结果：ＳＰＳ在 ２．２．１５细胞培养中对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的分泌有明显抑制作用，随着ＳＰＳ浓度的增高，对ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ表达的抑制作用增强，最高抑制率分别为７０．１％±４．２％（ＩＣ５…     

新生儿与儿童乙肝,丙肝病毒感染的临床观察

对３３９例住院分娩新生儿及其父母和１６５６例非肝病患儿进行了血清乙肝五项（ＨＢＶＭ）和抗－ＨＣＶ测定。发现产妇感染乙肝病毒（ＨＢＶ）进行ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｇ阳性才胎儿宫内感染的危险性最大，其中５例“大三阳”产发所生婴儿中有４例（８０％）ＨＢｓＡｇ阳性；３例父亲和２例婴儿ＨＢｓＡｇ阳性者中，有２例父亲和１例婴儿ＨＶＢ－ＤＮＡ阳性。非肝病患者ＨＢＶ感染率达２４．１％，其中ＨＢｓＡｇ阳性率随年龄增长而     

硫代磷酸反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒抗原表达的体外抑制作用

目的 研究硫代磷酸反义寡核苷酸（Ｓ－ＡＳＯＮ）的抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用。方法 作者以２．２．１５细胞作为研究对象，在ＨＢＶ基因Ｓ区和Ｃ区的翻译起始位点设计合成了２段１６聚Ｓ－ＡＳＯＮｓ，采用酶联免疫吸附试验检测了培养细胞上清中表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）的分泌情况。结果 当Ｓ－ＡＳＯＮ浓度为每天２μｍｏｌ／Ｌ时，对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的抑制率可分别达到８８％和７５％，而无关     

乙型肝炎病毒基因组S区编码产物的检测及临床意义

为了进一步明确 ＨＢＶ基因组 Ｓ区编码产物对乙型病毒性肝炎诊断的临床价值，用双抗体夹心 ＥＬＩＳＡ法检测 ９０份乙型病毒性肝炎患者血清标本ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、Ｐｒｅ－Ｓ１和 Ｐｒｅ－Ｓ２，并与 ＨＢＶＭ及 ＨＢＶＤＮＡ ＰＣＲ进行对比分析。结果以抗 ＨＢｃ、ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、ＨＢＶＤＮＡ（ＰＣＲ）及 Ｐｒｅ－Ｓ２的阳性检出率为最高，分别为８７．８％、７３．３％、７２．２％和６４．４％，以ＨＢＶＤＮＡ作为ＨＢＶ感染的金标准，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；其中ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ的符合率最高，分别为 ７６．７ ％和 ７４．７ ％；ＭＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ具有高度相关性。ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ做为早期诊断ＨＢＶ感染及判断是否具有传染性方面，是一项非常重要的血清学指标，Ｐｒｅ－Ｓ２也可作为ＨＢＶ复制活跃的标志之一，用于急慢性肝炎的预后判断．