首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 93 毫秒
1.
目的 研究电离辐射对小鼠胸腺细胞及脾细胞中p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响。方法 采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果 时效实验证实 ,2 0GyX射线全身照射后 8,2 4及 48h ,胸腺细胞p16蛋白表达显著增高 (分别P <0 0 5、P <0 0 1及P <0 0 5) ;照射后 2 4h ,脾细胞p16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5)。然而 ,照射后 8~ 2 4h ,胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5~P <0 0 1) ;照射后 8~ 72h ,脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5~P <0 0 1)。量效实验证实 ,1 0 ,2 0及 4 0Gy全身照射后 2 4h ,胸腺细胞及脾细胞p16蛋白表达均显著增高 (P <0 0 5~P <0 0 1)。然而 ,2 0Gy照射后胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5) ;0 5~ 6 0Gy照射后脾细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5~P <0 0 1)。研究还发现 ,胸腺细胞及脾细胞中CyclinD1蛋白表达于照射后均明显降低。结论 电离辐射可诱导胸腺细胞及脾细胞中p16蛋白表达增高。p16 CyclinD1 CDK4通路可能在X射线诱导胸腺细胞G1期阻滞中起重要作用  相似文献   

2.
目的 :以60 Coγ射线为参比射线 ,研究裂变中子诱导小鼠胸腺细胞凋亡的时间效应 ,并初步探讨其分子机制。方法 :用形态学观察、DNA电泳、流式细胞仪 (FCM )分析及二苯胺 (DPA)法检测细胞凋亡 ;用斑点杂交方法检测 p53与bcl 2的基因表达。 结果 :小鼠经裂变中子 2 .5Gy照射后 2~ 2 4h ,在各时间点上均检测到胸腺细胞DNA梯状条带 ,利用光镜与电镜观察到具有典型凋亡特征的胸腺细胞 ;以DPA法、FCM分析与形态观察计数测定的结果 ,绘制时间效应曲线 ,发现胸腺细胞凋亡比例随着照射时间的延长而增加 ,在 6h前上升较快 ,8~ 10h达到峰值 ,12h后开始下降 ,2 4h较 4~ 12h明显降低 (P <0 .0 5) ,但略高于正常水平。γ射线 5.0Gy照射后 ,胸腺细胞凋亡比例随时间的变化规律与之相似 ,但在 6h之前增加较缓 ;此外 ,在照后 2 4h检测不到DNA梯状条带。裂变中子 2 .5Gy照射后 ,小鼠胸腺细胞 p53基因表达水平在 2、4、12、2 4h均比未照射组有显著增加 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;bcl 2基因表达水平均比未照射组明显降低 (P <0 .0 1)。结论 :裂变中子 2 .5Gy照射小鼠可诱导其胸腺细胞凋亡 ,且与γ射线 5.0Gy照射有类似的时相性 ,但裂变中子诱导的胸腺细胞凋亡比γ射线增加快、持续时间长 ,表明裂变中子对小鼠免疫系统损伤较  相似文献   

3.
电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响   总被引:5,自引:4,他引:1       下载免费PDF全文
目的 研究电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的影响。方法 采用Northernblot检测p16mRNA水平的变化 ;采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测p16蛋白表达的变化。结果 研究证实 ,2 0Gy照射后 2~ 2 4h ,胸腺细胞p16mRNA水平明显增高 ,8~ 4 8hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5~P <0 0 1) ;照射后 2~ 8h脾细胞p16mRNA水平明显增高 ,2 4hp16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5 )。研究还证实 ,0 5~ 6 0Gy照射后 ,胸腺细胞p16mRNA水平呈剂量依赖性增高 ,p16蛋白表达在 1 0~ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5~P <0 0 1) ;脾细胞p16mRNA水平亦增高 ,但增幅远低于胸腺细胞 ,p16蛋白表达在 1 0~ 4 0Gy组显著增高 (P <0 0 5~P <0 0 1)。结论 电离辐射可诱导p16基因转录及蛋白表达增高 ,其增高幅度表现出一定的细胞异质性。  相似文献   

4.
目的 探讨血管再狭窄防治中 β射线对血管内皮细胞的影响。 方法 培养人脐静脉内皮细胞接受 β射线照射 2 5 ,5 0 ,10和 2 0Gy后 ,以MTT比色法分析细胞增殖反应 ,采用透射电镜进行超微结构观察和使用流式细胞仪进行DNA倍体分析以及凋亡率分析。结果 经 2 5 ,5 0 ,10和2 0Gy照射后 ,血管内皮细胞的生长呈剂量依赖性抑制 ,与对照组比较抑制率分别为 5 % (P <0 0 1)、5 % (P <0 0 1)、7% (P <0 0 1)、11% (P <0 0 1) ;透射电镜未发现典型的凋亡征象 ;流式细胞仪检查未发现DNA降解的凋亡峰 ,各实验组和对照组的凋亡率均 <4 4 % ,差异无显著性 ;DNA倍体分析发现对照组G2 /M期细胞数百分率为 13% ,各照射组依次为 17% (P <0 0 1)、2 4 % (P <0 0 1)、2 9%(P <0 0 1)、32 % (P <0 0 1) ,差异有非常显著性。G0 /G1 期对照组为 76 % ,各照射组依次为 74 %(P <0 0 5 )、70 % (P <0 0 1)、6 4 % (P <0 0 1)、6 2 % (P <0 0 1)。S期对照组为 11% ,各剂量组依次为9% (P >0 0 5 )、6 % (P <0 0 1)、7% (P <0 0 1)、5 % (P <0 0 1)。结论  2 5 ,5 0 ,10和 2 0Gyβ射线照射后 ,内皮细胞的生长呈剂量依赖性抑制 ,细胞周期阻滞明显 ,但对内皮细胞凋亡无显著影响。  相似文献   

5.
目的 研究建立重离子束1 2 C6 + 照射人离体血诱发淋巴细胞微核的剂量 效应曲线。方法 用地面加速器产生的重离子1 2 C6 + (平均LET为 36 70keV μm) ,不同吸收剂量、不同吸收剂量率照射离体人血 ,用CB微核法观察双核淋巴细胞中的微核。结果 在 0~ 6Gy吸收剂量范围内 ,淋巴细胞微核率随吸收剂量的增加而增加 ,拟合的最佳方程为Y =6 6 5 0 9×D0 .85。结论 1 2 C6 + 照射人离体血诱发淋巴细胞微核在 0~ 6Gy吸收剂量范围内呈幂函数关系。  相似文献   

6.
目的 采用实时定量PCR技术,检测人外周血淋巴细胞DNA损伤反应相关基因表达对X射线全身照射的反应,为探索新型辐射生物标志物奠定基础.方法 以吸收剂量为0、1、2、3、4、5 Gy X射线照射正常人外周血,在照射后4和24 h,应用实时定量PCR法,对淋巴细胞细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制物蛋白1a(Cdknla)、生长阻滞和DNA损伤基因45a(Gadd45α)基因的表达变化进行检测.应用胞质分裂阻滞微核法(CB微核法),检测淋巴细胞微核率变化.结果 Cdknla基因在人外周血淋巴细胞受到1~5 Gy照射后4和24 h,其相对表达量均较对照组显著性升高,至4 Gy达到峰值,5 Gy后不再继续增加.Cdknla基因表达与照射剂量呈线性相关(r=0.946、0.975,P<0.05).Gadd45ct基因在1~5 Gy照后4和24 h,其相对表达量均呈剂量依赖性升高,且照射后4 h的表达高于24 h(r=0.936、0.797,P<0.05).CB微核法中,在1~5 Gy X射线照射后4和24 h,各剂量组淋巴细胞微核率均显著增多,呈现良好的线性关系(r=0.990、0.984,P<0.05).结论 辐射使Cdknla基因和Gadd45α基因表达上调,表现出较好的剂量线性关系,有可能成为研制新型辐射生物剂量计的候选基因.
Abstract:
Objective To detect the expression of DNA damage response genes induced by radiation in human peripheral blood lymphocyte,and to explore the new biomarkers of radiation.Methods The human peripheral blood cells were irradiated to X-rays at different doses of 0,1,2,3,4,and 5 Gy.The quantitative real.time qPCR wag used to detect the expressions of cyclin-dependent kinase inhibitor l a gene(Cdknl a)and growth arrest and DNA damage inducible gene(Gadd45a)in lymphoeytes at 4 and 24 h post-irradiation,respectively.The method of CB mieronucleus was used to determine the change of micronucleus ratio.Results The expression of Cdknl a in peripheral blood lymphocytes wag increased significantly at 4 and 24 h post-irradiation to 0-5 Gy.reached the peak at 4 Gy and began to decrease at 5 Gy,which showed a dose-dependent manner(r=0.946,0.975,P<0.05).Similarly,the expression of Gadd45α in human peripheral blood lymphocytes was also increased significantly at 4 and 24 h post-irradiation to 0-5 Gy in a dose-dependent manner,while the expression of Gadd45a at 4 h wag higher than that at 24 h(r=0.936,0.797,P<0.05).The ratio of micronuclei wag increased significantly at 4 and 24 h post-irradiation to 0-5 Gy(r=0.990,0.984,P<0.05).Conciusions Cdknl a and Gadd45α expression could be increaged significandy at 4 and 24 h post-irradiation to 0-5 Gy,showing a good linear relationship.which might be candidate for radiation biological dosimeter.  相似文献   

7.
电离辐射可以若干方式影响淋巴组织和造血组织中脱氧核糖蛋白的结构,导致DNA和一部份组蛋白丧失。文献资料中关于照射后组蛋白的变化结果很不一致。为了澄清这一问题,作者研究了大鼠受不同剂量(0.96,2.87,5.74,9.57Gy)X线一次全身照射后3小时1~4天胸腺细胞核的DNA和组蛋白浓度及蛋白各组分含量的变化。结果表明:(1)胸腺重量减少与剂量大小有依赖关系。照后24小时和最大剂量(9.57Gy)照后6小时重量明显减少。0.96和2.87Gy照射后,胸腺重量分别于第2、3天回升。9.57Gy照射时,动  相似文献   

8.
目的 :在充氧的水溶液中 ,研究精胺、精脒及腐胺对γ射线诱发 DNA碱基降解的防护作用。方法 :15 0 Gyγ射线照射小牛胸腺 DNA的充氧水溶液(含 0 .0 1~ 1m mol/ L 多胺或 0~ 30 mm ol/ L 二甲亚砜 ,DMSO) ,用高效液相色谱 -电化学法检测溶液中 8- Oxod Guo(8-氧 - 7,8二氢 - 2′-脱氧鸟苷 )和 5 - OHd Cyd(5 -羟基脱氧胞苷 )的产额 ,其分别是羟自由基 (· OH)介导 d Guo(2′-脱氧鸟苷 )和 d Cyd(2′-脱氧胞苷 )氧化的对应标志物。DMSO能高效率地抑制 · OH。 2 5 0 0 Gy和 5 0 Gyγ射线分别照射 d Ado(2′-脱氧腺苷 ,1m mol/ …  相似文献   

9.
目的 :电离辐射对男性生殖腺的远期效应可能是引起精源干细胞损伤。因此 ,研究了γ射线和中子的单次和分割照射对小鼠精原干细胞的相对生物效应 (RBE)。方法 :选 8~ 12周龄雄性 NMRI小鼠 ,每一剂量和每一时间组用 4只 ,2 0只作对照 ,用 6 0 Coγ射线 10 c Gy~ 15 Gy(剂量率 5 0 c Gy/ min)或 14Me V中子 10 c Gy~ 7Gy(剂量率 10~2 0 c Gy/ min)单次或分隔两个等分间隔 2 4h照射小鼠体后部位。每只小鼠处死后取出睾丸 ,睾丸细胞 DNA用 5 μmol/ L4′,6 -二脒基 - 2 -苯基吲哚盐酸 (DAPI)染色 ,用 PAS 流式细胞仪测得典型的睾…  相似文献   

10.
目的 比较研究中子及γ射线照射对肠黏膜免疫组织损伤的病理特点及淋巴细胞凋亡情况。方法 经不同剂量的中子及γ射线照射350只BALB/c小鼠,于照后6h、12h、1~5d、7d、14d、21d及28d活杀取全肠,经光镜、电镜和原位末端标记等技术研究肠黏膜免疫组织的病理变化及淋巴细胞死亡方式。结果 中子照后肠免疫组织的基本病变为淋巴细胞变性、凋亡、坏死及数目减少,中子4.0及5.5y照射后未见明显再生,2.5Gy组则见再生修复现象,且呈剂量相关性;中子2.5Gy照后6h~3d,黏膜内及下淋巴组织中淋巴细胞逐渐减少,核固缩及大量核碎片形成,3d时淋巴组织中仅残留间质细胞,隐窝细胞见再生。5d时淋巴组织始见增生,至照后21d基本恢复至正常水平。γ射线照射后基本病变与中子类似,5.5Gy组见再生恢复,而12.0Gy组未见明显再生。原位末端标记显示各照射组于照射后6h肠黏膜免疫组织中凋亡的淋巴细胞明显增加,尤以中子4.0Gy和了射线12.0Gy更为明显。结论 2.5~5.5Gy中子及5.5~12.OGyγ射线照射均可致明显肠壁淋巴组织损伤,且在相同剂量下,中子对免疫组织损伤重于γ射线;免疫组织损伤重,且恢复慢;4.0Gy以上中子照射多见淋巴细胞坏死,而5.5~12.0Gyγ射线则以凋亡为主。  相似文献   

11.
环境放射性监测中基于γ谱分析的事件识别   总被引:3,自引:2,他引:1       下载免费PDF全文
目的 论述了如何利用环境放射性监测中基于γ能谱分析的数据进行核事件识别和判断的方法。方法 利用γ能谱分析获得环境样品中特征放射性核素的方法,可以判断核事件的类型;利用于体与母体,或者任意两个特征放射性核素的话度比推算核事件的发生时间和装科,并对环境放射性监测工作中的样品采集和测量系统提出具体的要求。结果 通过与既往环境放射性监测结果的回顾研究和对苏联切尔诺贝利核事故监测结果的分析证明,利用笔者提出的方法推测的事件性质与实际情况相吻合。结论 利用特征放射性核素判断核事件的类型和利用于母体放射性核素的活度比推算核事件的发生时间的方法是可靠的。  相似文献   

12.
高能电子线皮肤辐射损伤动物模型的超微病理学研究   总被引:13,自引:3,他引:10       下载免费PDF全文
目的 通过动物模型研究高能电子线皮肤辐射损伤产生延迟性坏死和溃疡难以愈合的病理改变和机理,为进一步临床研究打下基础。方法 本实验以SD大鼠作为实验对象,以直线加速器产生的4MeV的电子线照射臀部皮肤制作皮肤放射损伤模型。实验动物分5Gy、15Gy、30Gy、45Gy4个剂量组,一次性照射后2个月作病理学肉眼、光镜、电镜观察。结果 5Gy组光镜形态改变不明显,电镜下可见棘细胞肿胀,基底细胞核固缩,核膜下染色质边集,血管内皮细胞肿胀,部分细胞核固缩,管腔狭小,皮下胶原纤维断裂水肿:15G6y组棘细胞和基底细胞肿胀明显,基底细胞胞浆内张力微丝、桥粒、半桥粒显著减少,血管内皮和毛囊上皮细胞变性;30Gy组电镜下棘细胞、基底细胞核固缩、水肿明显。y组3周时可见皮肤溃疡形成,电镜见基底细胞层有凋亡细胞和凋亡小体形成,基底膜  相似文献   

13.
钚内污染者外科截肢放化分析及活度测量   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 为探讨钚在国人体内的滞留与分布,对一例20年前遭钚事故污染(左手伤部可溶性钚摄入量约为77 ̄130Bq)者因肘部发生恶性纤维组织瘤而截下的右上臂进行了放化分析。方法 将手臂按解剖部位横向锯切成8段,再将骨和软组织剥离,分别进行灰化,离子交换、电沉积制样并进行α能谱分析和活度测量。结果 在整个手臂中共测得^239Pu含量为68.5mBq,a能谱分析证实手臂组织中钚的谱峰与^239Pu标准源一致  相似文献   

14.
致伤前后不同时间照射对大鼠伤口愈合的影响规律   总被引:4,自引:3,他引:1  
目的 观察致伤前后不同时间照射对大鼠伤口愈合的影响规律。方法 采用大体及光镜观察、免疫组化(显示Ⅲ型胶原)和原位杂交等方法,动态观察致伤前后不同时间照射对大鼠伤口愈合影响的病理变化过程。结果 伤前2d至伤后7d照射增能延迟伤口愈合,其中以伤后即刻照射影响量显著,其余依次为伤后3d、伤前2d及伤后7d照射。结论 不同时间辐射大鼠伤口愈合的影响程度不同。  相似文献   

15.
目的 观察1 0 3Pd放射性支架对兔腹主动脉中膜平滑肌细胞凋亡相关基因Bcl 2及BaxmRNA表达的影响 ,探讨其防治血管成形术后再狭窄的作用机理。方法 将雄性新西兰大白兔 5 0只随机分为普通支架组及1 0 3Pd放射性支架组 ,设正常对照。分别于术后 3、7、14、2 8和 5 6d取材 ,进行病理形态学研究 ,并用原位杂交的方法测定血管中膜平滑肌细胞中Bcl 2mRNA及BaxmRNA的表达。结果 光镜下发现 ,放射性支架组管腔狭窄程度明显低于普通支架组 ,术后第 5 6天最显著(P <0 0 1)。与对照组比较 ,术后 3~ 2 8d普通支架组与放射性支架组Bcl 2mRNA表达均明显增加 ,而放射性支架组的表达则较普通支架组降低 (P <0 0 1)。BaxmRNA的表达 ,术后第 3~ 2 8天两支架组均超过对照组 ,而放射性支架组的表达较普通支架组显著增加 (P <0 0 1)。Bcl 2mRNA与BaxmRNA的比值显示 ,普通支架组术后第 3、14和 2 8天均大于对照组 (P <0 0 1) ,放射性支架组虽也大于对照组 ,但无统计学差异 (P >0 0 5 )。术后第 3~ 2 8天 ,放射性支架组的比值均小于普通支架组(P <0 0 5 )。结论 1 0 3Pd放射性支架增加细胞凋亡的BaxmRNA表达 ,减少抑制细胞凋亡的Bcl 2mRNA表达 ,使凋亡细胞比例增加 ,降低再狭窄的发生  相似文献   

16.
31例中国人主要器官组织中42种元素浓度和含量研究   总被引:17,自引:5,他引:12       下载免费PDF全文
目的 测定中国成年男子主要器官组织中元素浓度和估算其含量,为确定中国参考人相应参数提供依据,为微量元素和健康关系研究提供我国当前资料。方法 在我国不同膳食类型的4省市(河北、山西、上海和四川)采集31例急死正常成年男子尸体肌肉、肋骨、肝、肾、肺和甲状腺样品,有用NAA、ICP-MS、ICP-AES、多种AAS技术和必要质控措施共测定42种元素浓度,并按中国参考人器官组织重量估算了这些元素相应含量。结果 获得了31例中国成年男子甲状腺中I、其他5种器官组织中40种元素和肋骨中Li的浓度及相应组织含量估算值。结论 本研究除更新了我国15种元素相应资料外,首次获得27种元素在这些器官组织中浓度和含量资料,为确定中国和亚洲参考人相应参数提供较为系统的依据。还就我国本次结果与近年国内文献值和对ICRP参考人相应参数最新国际估算值的比较,元素在这些器官组织中浓度的相对分布和地区差异进行了讨论。  相似文献   

17.
目的 研究γ射线照射后C5 7小鼠骨髓中CD34 细胞的数量变化规律及其意义。方法 流式细胞仪测定CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例 ;AnnexinV FITC试剂盒检测骨髓细胞的凋亡 ;细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果 ①CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例随照射剂量的加大而降低 ,在 5 5Gy照射后 14d内小鼠CD34 细胞的减少表现为持续性 ;②小鼠照射后6h骨髓细胞凋亡率最高 ,以 5 5Gy照射组最为明显 ;③ 5 5Gy照射后小鼠骨髓细胞周期紊乱。 结论 γ射线损伤骨髓中的干祖细胞 ,造成骨髓中干祖细胞的数量减少 ,其途径之一是诱导骨髓细胞凋亡。  相似文献   

18.
目的 探讨内源性IL-3基因表达在骨髓辐射损伤后修复中的作用。方法 5.5Gy^60Coγ射线全身照射78只LACA小鼠,于照射后4周内分批活杀,将骨髓进行HE染色,并进行内源性IL-3基因表达的免疫组化、原位杂交和原位反转录PCR检测。结果 照射后4周内小鼠骨髓出现明显损伤及损伤后重建现象。免疫组化观察IL-3于修复期造血细胞浆内明显增多,尤以照后21天其量达高峰,而高位杂交则显示其mRNA于照  相似文献   

19.
目的:探讨EGFR、Bax、Rb在高能电子线大鼠皮肤辐射损伤中的作用及机理,为临床治疗提供线索。方法:运用免疫化技术SP法检测EGFR、Bax、Rb在40例高能电子线大鼠皮肤辐射损伤模型中的表达,分析它们与照射剂量之间的关系。结果:(1)EGFR在40例照射的大鼠中,5、15、30、45Gy组阳性表达率分别为20%、40%、70%、100%;各照射剂组间有显著相关性(P<0.05)。(2)Bax在40例照射的大鼠中,5、15、30、45Gy组阳性表达率分别为30%、30%、70%、70%;各照射剂量组同Bax蛋白阳性表达无相关性,但有趋势性(P<0.05)。(3)Rb在40例照射的大鼠中5、15、30、45Gy组阳性表达率分别为30%、20%、40%、30%;各照射剂量组间Rb阳性表达无线性趋势性(P>0.05)。(4)本实验对40例各照射剂量组实验对象研究发现Bax^ /Rb^ 共有9例,EGFR^ /Rb^ /Bax^ 共有5例,均无共同阳性趋势。结论:实验表明电离辐射能增加大鼠皮肤组织中EGFR、Bax、Rb蛋白的表达;EGFR、Bax蛋白的表达可能与照射剂量有关;EGFR能促进细胞的增殖与Bax,Rb蛋白促细胞凋亡共同作用下,参与3放射性皮肤损伤的形成。  相似文献   

20.
γ射线照射与吸入苯、甲苯加CO的复合效应研究   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的 探索γ射线、苯、甲苯和CO同时作用时的生物效应规律, 并分析各因素之间的交互作用性质(拮抗、相加或协同).方法 用家兔90只分成9组, 其中一组为对照组, 按L8(27)正交表设计进行4因素二水平的8组实验。各因素的两种暴露水平分别是:γ射线为0.0075和0.0375Gy/d;苯为40±15和(182±33)mg/m3;甲苯为90±30和(407±68)mg/m3;CO为(93±4)和(278±8)mg/m3.暴露实验在密闭舱内进行, 每天2h,每周5d,持续8周。对实验结果用方差分析和组间比较进行了处理。。结果 (1)γ射线、苯和甲苯都能诱发外周血淋巴细胞染色体畸变、微核、姐妹染色单体互换(SCE)以及骨髓细胞染色体畸变, 但CO对上述各项指标均无明显单独作用。(2)4个因素的综合作用与4个因素单独作用产生的效应总和的比值ω对淋巴细胞的双着丝点加环、无着丝粒、畸变细胞、总畸变、微核及SCEs/C分别为2.16、1.58、2.07、2.67、1.25和1.18,对畸形精子率则高达5.97.各因素之间呈明显的协同作用。但苯和γ射线对淋巴细胞无着丝粒有明显拮抗作用。(3)4个因素都引起睾丸重量指数降低;γ射线、甲苯和CO都能引起精子数减少和畸形精子率增高;。结论 γ射线、苯和甲苯对诱发某些生物效应具有很显着的。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号