成年与幼年猪半月板损伤愈合的体外实验

背景：幼年半月板损伤后的愈合能力要优于成年半月板,以往认为是由于幼年半月板血运较成年半月板丰富。目的：通过在体外器官培养模型中观察成年及幼年猪半月板损伤界面愈合的差异,探讨半月板损伤愈合的机制。方法：6月龄成年猪、1月龄幼年猪处死后取双侧膝关节内、外侧半月板,每组32份标本,建立全层纵裂模型。标本行体外器官培养,培养0,2,4,6周后观察纵裂界面愈合情况并半定量评分。结果与结论：成年组培养6周后,2份标本有少量修复组织产生。幼年组培养2周后,3份标本已有少量修复组织产生;4周后所有标本有修复反应,其中3份有桥接;6周后5份标本裂隙消失,其余3份有桥接。培养4,6周后,幼年组组织学半定量得分高于成年组（P〈0.05）;幼年组除0周与2周以外,其余各时间点比较差异均有显著性意义（P〈0.05）。说明体外器官培养模型排除了血运、滑膜、细胞因子等的影响,幼年半月板愈合优于成年半月板是由于其内在愈合能力强于成年半月板。     

组织工程软骨修复兔半月板损伤

背景半月板游离缘为无血运区,损伤不易自然愈合,需要在一定的条件促进下产生纤维组织愈合.目的采用组织工程软骨与纤维蛋白黏合剂治疗半月板无血运区的损伤,并进行的效果比较.设计随机分组,空白对照实验.单位深圳市第二人民医院动物实验室.对象①选择生后3～5 d青紫兰兔10只用于纤维软骨细胞的提取.②选择健康成年青紫兰兔36只,随机分为3组,空白对照组、纤维蛋白黏合剂治疗组和组织工程软骨组,每组12只.方法实验于2003-09/2004-03深圳市第二人民医院动物实验室完成.将10只生后3～5 d幼兔处死后提取纤维软骨细胞进行培养,制成软骨细胞含量约为12×108 L-1的组织工程软骨.将36只成年兔造成半月板(0.7×0 3)cm全层裂伤的无血运区损伤模型.空白对照组裂伤不用任何填塞处理,纤维蛋白黏合剂治疗组用纤维蛋白黏合剂注入裂口,组织工程软骨组用组织工程软骨注入裂口.3组动物分别于术后2,6,12周各处死4只,每次每组取8个半月板,行大体形态观察和组织学检查.主要观察指标兔半月板损伤模型标本大体形态观察和组织学检查.结果36只兔均进入结果分析.①兔半月板损伤模型标本大体观察结果空白对照组半月板损伤裂口均未愈合,未见组织填充;纤维蛋白黏合剂组及组织工程软骨组的全部半月板伤口均已被组织填充.②兔半月板损伤模型标本组织学检查结果空白对照组术后2～12周裂口边缘无软骨细胞增殖;纤维蛋白黏合剂组术后12周,缺损边缘有较多的成纤维细胞样细胞,与邻近组织连接较紧密,形成瘢痕组织愈合;组织工程软骨组术后12周,缺损处可见软骨陷窝及软骨囊,软骨细胞成团状.结论组织工程软骨在受体内可成活,可形成纤维软骨样愈合,形成软骨细胞特有的生物学标志,但修复的组织与邻近正常半月板组织及正常软骨的胶原排列有明显差异.     

多孔型丝素蛋白/羟基磷灰石复合骨髓间充质干细胞修复兔半月板无血运区软骨损伤

背景:随着组织工程的兴起,半月板无血运区损伤的修复可能性显著地提高,但单一的支架材料均不能符合理想支架的要求,有一定的局限性。目的:观察丝素蛋白/羟基磷灰石复合骨髓间充质干细胞修复兔半月板无血运区软骨损伤的效果。方法:体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,并定向诱导成纤维软骨细胞,与丝素蛋白/羟基磷灰石复合培养。42只构建半月板无血运区软骨损伤模型成功的大白兔随机抽签法均分为3组,复合材料组植入骨髓间充质干细胞-丝素蛋白/羟基磷灰石复合物;单纯材料组植入丝素蛋白/羟基磷灰石;对照组不行任何干预。结果与结论:复合材料组大体观察损伤被修复组织填充,8~12周效果逐渐改善,与正常半月板组织相似,优于其他两组;组织学检查显示8周时出现软骨囊和排列紊乱的胶原纤维,12周时完全修复了半月板损伤区,表现为纤维软骨样组织愈合;单纯材料组部分修复了半月板损伤区,呈瘢痕愈合,对照组未见软骨修复。MRI检查显示复合材料组修复效果较好;说明丝素蛋白/羟基磷灰石复合骨髓间充质干细胞可有效地修复半月板无血运区缺损。丝素蛋白/羟基磷灰石材料作为半月板软骨组织工程支架材料的良好生物相容性。     

组织工程软骨修复兔半月板损伤

背景：半月板游离缘为无血运区，损伤不易自然愈合，需要在一定的条件促进下产生纤维组织愈合。目的：采用组织工程软骨与纤维蛋白黏合剂治疗半月板无血运区的损伤，并进行的效果比较。设计：随机分组，空白对照实验。单位：深圳市第二人民医院动物实验室。对象：①选择生后3～5d青紫兰兔10只用于纤维软骨细胞的提取。②选择健康成年青紫兰兔36只，随机分为3组，空白对照组、纤维蛋白黏合剂治疗组和组织工程软骨组，每组12只。方法：实验于2003—09／2004—03深圳市第二人民医院动物实验室完成。将10只生后3～5d幼免处死后提取纤维软骨细胞进行培养，制成软骨细胞含量约为12&;#215;10^8L^-1的组织工程软骨。将36只成年兔造成半月板(0．7&;#215;0．3)cm全层裂伤的无血运区损伤模型。空白对照组裂伤不用任何填塞处理，纤维蛋白黏合剂治疗组用纤维蛋白黏合剂注入裂口，组织工程软骨组用组织工程软骨注入裂口。3组动物分别于术后2，6，12周各处死4只，每次每组取8个半月板，行大体形态观察和组织学检查。主要观察指标：兔半月板损伤模型标本大体形态观察和组织学检查。结果：36只兔均进入结果分析。①兔半月板损伤模型标本大体观察结果：空白对照组半月板损伤裂口均未愈合，未见组织填充；纤维蛋白黏合剂组及组织工程软骨组的全部半月板伤口均已被组织填充。②兔半月板损伤模型标本组织学检查结果：空白对照组术后2～12周裂口边缘无软骨细胞增殖；纤维蛋白黏合剂组术后12周，缺损边缘有较多的成纤维细胞样细胞，与邻近组织连接较紧密，形成瘢痕组织愈合；组织工程软骨组术后12周，缺损处可见软骨陷窝及软骨囊，软骨细胞成团状。结论：组织工程软骨在受体内可成活，可形成纤维软骨样愈合，形成软骨细胞特有的生物学标志，但修复的组织与邻近正常半月板组织及正常软骨的胶原排列有明显差异。     

重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合材料修复兔半月板无血运区软骨损伤

背景：单独应用重组碱性成纤维细胞生长因子对无血运区半月板损伤的愈合无明显影响,考虑主要与其在体内易被吸收和降解等有关。近年来Ⅰ型胶原作为生物性载体的应用逐渐增多。目的：观察重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合材料修复兔半月板软骨损伤的效果。方法：选用健康新西兰大白兔36只,首先在兔半月板上造成统一的无血运区损伤模型。随机分为空白对照组、重组碱性成纤维细胞生长因子组和重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组。术后2,6,12周分批处死实验动物,进行大体形态观察和组织学检查。结果与结论：重组碱性成纤维细胞生长因子组对无血运区损伤愈合无明显影响,但对半月板边缘滑膜中成纤维细胞有明显的促增殖作用;重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组表现为纤维软骨样组织愈合,但其愈合组织与正常半月板组织仍有差异。结果表明应用重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合型材料治疗半月板无血运区的损伤是一种有效的治疗方法。     

重组碱性成纤维细胞生长因子/I型胶原复合材料修复兔半月板无血运区软骨损伤

背景:单独应用重组碱性成纤维细胞生长因子对无血运区半月板损伤的愈合无明显影响,考虑主要与其在体内易被吸收和降解等有关.近年来Ⅰ型胶原作为生物性载体的应用逐渐增多.目的:观察重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合材料修复兔半月板软骨损伤的效果.方法:选用健康新西兰大白兔36只,首先在兔半月板上造成统一的无血运区损伤模型.随机分为空白对照组、重组碱性成纤维细胞生长因子组和重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组.术后2,6,12周分批处死实验动物,进行大体形态观察和组织学检查.结果与结论:重组碱性成纤维细胞生长因子组对无血运区损伤愈合无明显影响,但对半月板边缘滑膜中成纤维细胞有明显的促增殖作用;重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组表现为纤维软骨样组织愈合,但其愈合组织与正常半月板组织仍有差异.结果表明应用重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合型材料治疗半月板无血运区的损伤是一种有效的治疗方法.     

Ⅰ型胶原-TGF-β1-纤维蛋白胶复合材料对兔半月板损伤修复作用的实验研究

目的探讨Ⅰ型胶原-转化生长因子-β1(Transform growth factor,TGF-β1)-纤维蛋白胶复合材料修复兔半月板无血运区损伤的临床效果。方法选取健康新西兰大白兔60只,在半月板损伤造模的基础上随机分为损伤对照组(A组)、TGF-β1组(B组)、Ⅰ型胶原-纤维蛋白胶组(C组)和Ⅰ型胶原-TGF-β1-纤维蛋白胶组(D组)。A组不做处理,C组与D组于关节腔内分别一次性注入Ⅰ型胶原-生物蛋白胶复合物、Ⅰ型胶原-TGF-β1-纤维蛋白胶复合材料至填充物与半月板表面相平为止;B组于关节腔内连续注射3周TGF-β1。术后2周、4周、12周分批处死动物,进行形态学观察和组织学检查。结果形态学观察发现,损伤后各组新西兰大白兔的半月板组织形态变小,颜色微黄,质地较硬,脆性增加。组织学检查发现,B组对半月板无血运区损伤的愈合无明显影响,仅对半月板边缘滑膜中的成纤维细胞有明显的促进作用;C组半月板伤口较术前小,表面稍凹陷,愈合组织与邻近半月板组织结合紧密;D组半月板表现为纤维软骨样愈合,但愈合部分与正常半月板仍有差异。A组、B组、C组,在4周、12周时与D组愈合情况比较差异有统计学意义(P0.05)。结论采用Ⅰ型胶原-TGF-β1-生物蛋白胶复合材料对半月板无血运区损伤治疗是非缝合技术治疗半月板损伤的一种可靠手段。     

血管内皮细胞生长因子与半月板白区修复中新生血管的长入

背景：血管内皮细胞生长因子的研究集中于对皮肤坏死、肌腱的修复作用,对半月板的影响研究甚少。目的：观察血管内皮细胞生长因子能否促进血管向损伤半月板的白区生长及半月板白区愈合。方法：将新西兰大白兔24只随机选择左后肢或右后肢作为实验组,另一条后肢作为对照组,均建立半月板后角损伤模型,实验组关节内注射血管内皮细胞生长因子。术后1,3,6,12周切除半月板,制作切片进行大体和组织学观察。结果与结论：术后1周,实验组较对照组血管增生,成纤维细胞丰富,并且有透明软骨细胞出现。术后3周,实验组的软骨层明显较对照组厚。术后12周,实验组软骨层出现成骨基质和成骨细胞。结果提示术后早期,血管内皮细胞生长因子促进了血管的发生,从而促进损伤区的修复;但晚期随血管的长入,促进了软骨内化骨,损伤了已修复的软骨层。     

血管内皮细胞生长因子与半月板白区修复中新生血管的长入

背景:血管内皮细胞生长因子的研究集中于对皮肤坏死、肌腱的修复作用,对半月板的影响研究甚少.目的:观察血管内皮细胞生长因子能否促进血管向损伤半月板的白区生长及半月板白区愈合.方法:将新西兰大白兔24只随机选择左后肢或右后肢作为实验组,另一条后肢作为对照组,均建立半月板后角损伤模型,实验组关节内注射血管内皮细胞生长因子.术后1,3,6,12周切除半月板,制作切片进行大体和组织学观察.结果与结论:术后1周,实验组较对照组血管增生,成纤维细胞丰富,并且有透明软骨细胞出现.术后3周,实验组的软骨层明显较对照组厚.术后12周,实验组软骨层出现成骨基质和成骨细胞.结果提示术后早期,血管内皮细胞生长因子促进了血管的发生,从而促进损伤区的修复;但晚期随血管的长入,促进了软骨内化骨,损伤了已修复的软骨层.     

坐骨神经损伤后不同年龄大鼠脊髓组织中bcl-xl基因的表达及变化

目的:凋亡可能为大鼠坐骨神经损伤所致脊髓神经细胞损害的一种重要病理改变,而bcl-xl基因有抗细胞凋亡的作用,为此观察坐骨神经损伤后不同年龄大鼠脊髓组织中bcl-xl表达变化。方法:幼年、成年、老年Wistar大鼠各144只,各年龄组大鼠分别随机分为对照组(18只)和实验组(126只)。实验组切除2mm右侧坐骨神经,用硅胶管连接近、远侧神经残端,硅胶管内注入生理盐水15μL。实验组和对照组分为术后1,3d,1,2,4,8,12周组。利用免疫组织化学、West-ernblotting检测脊髓bcl-xl的分布与表达强度变化,流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果:对照组脊髓凋亡细胞成年及老年<3%、幼年>3%,实验组伤侧脊髓老年及幼年组于伤后3d,成年组于伤后1周凋亡细胞百分率升高,幼年及成年组凋亡细胞百分率2周达高峰(P<0.05或0.01),8,12周凋亡细胞百分率逐渐下降,老年凋亡细胞百分率高水平持续至伤后12周。与同龄对照组及未伤侧比较,各年龄对照组损伤后3d,1,2周,伤侧bcl-xl表达减弱(P<0.05),伤后4周恢复正常,老年组8周,幼年及成年组8周,12周bcl-xl表达较未伤侧及对照组显著增高(P<0.05或0.01)。各年龄组未伤侧与对照组比较,bcl-xl、凋亡细胞百分率差异无显著性意义(P>0.05)。结论:坐骨神经损伤后早期各年龄组神经元bcl-xl表达减弱,后期可通过     

物理疗法促进髌骨-髌腱结合部损伤早期恢复的实验研究

目的探讨低强度脉冲超声刺激（LIPUS）和功能性电刺激（FES）对兔髌骨-髌腱结合部（BTJ）损伤愈合的影响。方法18周龄成年雌性新西兰兔63只，建立髌骨部分切除模型，随机分为超声组、复合组和对照组。超声组在术后3d开始为期6周的LIPUS治疗，复合组在术后1—4周给予LIPUS治疗，在5～12周给予FES治疗。通过组织学染色观察BTJ纤维软骨移行带的修复，并进行生物力学测试，以评价其疗效。结果（1）组织学结果显示，超声组和复合组术后6周在截骨界面均有大量新骨生成，BTJ可见大量新生软骨细胞；术后12周纤维软骨带初步形成；术后18周可见具有过渡结构的纤维软骨带。对照组术后6周纤维母细胞增生，无新骨形成；术后18周出现大量新生软骨细胞，但缺乏纤维软骨带的过渡结构。（2）术后6，12和18周的力学测量结果显示，各组BTJ随时间的推移而逐渐改建，3个时间点超声组、复合组的极限拉应力均明显高于对照组（P〈0．05）。结论LIPUS和FES可使骨、软骨等多种细胞增生，通过促进新骨形成及重建纤维软骨带的过渡结构，从而加快骨-肌腱结合部位的早期恢复。     

A comparative study of bone to bone repair and bone to tendon healing in patella-patellar tendon complex in rabbits

OBJECTIVES: To study the healing quality of bone to bone and bone to tendon repair in a patella-patellar tendon complex. DESIGN: In vivo animal experiment in 60 mature 32-week-old female rabbits. BACKGROUND: Injuries of patella-patellar tendon complex are not uncommon. However, no studies are available to compare the healing quality between bone to bone and bone to tendon surgical reconstructions used for repair of patella-patellar tendon complex. METHODS: A standard transverse osteotomy was performed at the distal one-third of patella of one hindlimb. Both patellar fragments were reattached for bone to bone group while the patellar tendon was reattached to the remaining patella after removing the distal one-third of patella for bone to tendon group. Patella-patellar tendon complex was harvested at 8, 12 and 24 weeks postoperatively for biomechanical and histological evaluations, with n=8 and n=2 at each healing time points in both groups. The contralateral knee served as a control. RESULTS: No significant differences in the failure loads were found between two groups. However, greater ultimate stress was found in bone to bone group as compared with bone to tendon group at week 8 and 24 (both P<0.05). On average, the ultimate stress of the bone to tendon and bone to bone group only reached 20.6(4.2)% and 28.6(6.7)% of the control values at week 24, respectively. The discrepancy between findings in failure load and failure stress might be explained by an overall larger cross-sectional area of the healing interface in bone to tendon group as compared with bone to bone group. Histology revealed that the bone to bone healing was via endochondral ossification at the healing interface. In bone to tendon group, extensive scar tissue was formed to overbridge the healing interface and remodeled with healing over time. The structural integration at the tendon and bony healing interface was poor and no typical intermitted fibrocartilage zone as seen in normal bone to tendon junction was formed. CONCLUSION: Failure load of bone to bone and bone to tendon healing interface did not differ during repair of patella-patellar tendon complex. However, the healing interface of bone to bone repair in terms of material properties as reflected by failure stress was superior to that of the bone to tendon healing. RELEVANCE: The findings of this experimental study may suggest that the anatomical reconstruction of patella-patellar tendon complex injury may be the primary concern in decision making for selecting either bone to bone or bone to tendon repair. However whenever possible, to initial fracture (bone-to-bone) fixation for ensuring better and predictable repair at the healing interface.     

肌骨超声引导下PRP技术应用于半月板损伤术后康复效果评价

目的探讨应用肌骨超声引导下富血小板血浆(PRP)技术联合康复训练对半月板损伤关节镜术后的临床疗效评价。方法选取2018年1月至10月在某院行半月板损伤关节镜手术的患者38例进行研究,按照随机数表法分成两组,两组患者均接受入院后术前床边健康与康复宣教,对照组予以关节镜手术前后的常规护理,早期常规康复锻炼,观察组在常规护理与康复的基础上术后予以在肌骨超声引导下的PRP注射并早期进入康复科训练,PRP注射于术后2周开始,1次/周,连续4次。比较两组患者在治疗前、术后6周、术后12周的Lysholm评分、视觉模拟评分法(VAS)评分及两组患者膝功能恢复评分。结果两组患者治疗前、术后6周、术后12周的Lysholm评分分别为观察组(55.7±16.2)分、(95.7±3.6)分、(96.4±3.3)分;对照组(52.3±14.1)分、(72.3±4.1)分、(74.5±6.8)分。VAS评分分别为观察组(5.4±1.7)分、(2.4±1.9)分、(1.6±0.5)分;对照组(5.6±2.8)分、(3.6±2.8)分、(3.2±1.6)分,均较术前改善(P<0.05)。两组患者膝关节功能恢复观察组评分明显高于对照组(P<0.05)。结论膝关节半月板损伤术后在肌骨超声引导下注射PRP定位更加准确,对半月板病变的愈合效果更加明显,且结合早期的正规康复训练,更能有效促进膝关节功能恢复,其操作安全,无并发症,可改善患者的生活质量。     

前交叉韧带切断兔外侧半月板中白细胞介素1β的表达

背景:研究证明,膝关节前交叉韧带切断后,白细胞介素1β是关节软骨退变中一个重要的调控因子,然而白细胞介素1β在外侧半月板退变中有何作用,未见文献报道.目的:观察兔前交叉韧带切断后外侧半月板中白细胞介素1β阳性表达率的变化并探讨其意义.方法:6月龄雄性新西兰大白兔48只,将兔膝关节配对为实验侧和对照侧造模.实验侧行前交叉韧带切断手术,制作兔前交叉韧带断裂模型;对照侧显露前交叉韧带但不行切断.造模后第1,3,6,8周,分别麻醉下随机处死兔12只.进行大体观察和外侧半月板组织学退变评分,免疫组织化学检测白细胞介素1β阳性表达率.结果与结论:前交叉韧带切断后,随时间延长,实验侧外侧半月板组织学退变评分逐渐增高,实验侧各时间组织学退变评分显著高于对照组(P<0.05).各时间点实验侧白细胞介素1β阳性表达率均较对照组增高(P<0.05);第3,6周实验侧白细胞介素1β表达阳性率高于第1,8周(P<0.05),第8周高于第1周(P< 0.05).结果表明,兔前交叉韧带切断后实验侧白细胞介素1β阳性表达率增高,提示自细胞介素1β参与了外侧半月板组织的退变.白细胞介素1β阳性表达率降低并不表示外侧半月板组织退变结束.     

自体施万细胞神经膜管移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究

目的探讨自体施万细胞神经膜管（SCNC）移植对脊髓半横断损伤的修复作用。方法成鼠30只，随机分3组：1O只造模后行SCNC移植（A组）；10只造模但不移植（B组）；10只不造模也不移植作正常对照组（C组）。下段胸髓半切法造模。术后8周每周行动物行为测试和斜板试验；术后6周测定皮层体感诱发电位（CSEP）；术后8周行组织学观察及计算机图像分析。结果A组、C组可测出CSEP波形，B组未测出。行为测试、斜板试验及图像分析A组、C组与B组差异显著，A组与C组之间斜板试验有显著差异。A组通过脊髓损伤处的再生神经纤维数量明显多于B组。结论自体施万细胞神经膜管移植有助于引导再生轴突生长通过，对损伤脊髓再生有较明显的促进作用。     

关节镜下修复重建前交叉韧带合并半月板损伤的临床效果分析

目的探讨关节镜下修复重建前交叉韧带(ACL)合并半月板损伤的临床效果。方法选取ACL合并半月板损伤患者40例,分为实验组(同时修复ACL以及半月板),对照组(修复半月板),分别观察两组患者各自的术前术后的Lysholm评分,以及两组患者术后的Lysholm评分。观察两组患者术后半月板愈合率以及2年后半月板再手术率的比较。结果两组患者术后Lysholm评分均高于术前,但实验组患者术后Lysholm评分高于对照组。实验组术后愈合率高于对照组,2年后半月板再手术率低于对照组。结论关节镜下同时修复重建ACL和半月板损伤,可以提高治愈率,有利于术后患者康复,并且远期效果明显,值得推广。