TGF-β1对胎儿晶状体上皮细胞增殖的作用

目的 探讨转化生长因子－β1（transforming growth factor-β1,TGF－β1)对胎儿晶状体上皮细胞增殖的作用。方法 用SP免疫对48例人胎儿不同胎龄晶状体上皮细胞进行细胞增殖核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA),TGF－β1免疫组织化学染色。结果 PCNA，TGF－β1在人胎儿不同胎龄晶状体上皮细胞均表达；免疫阳笥细胞随着胎龄的增加而减少。PCNA阳性细胞核为桔黄色或棕黄色；TGF－β1阳性细胞浆为桔黄色或棕黄色的颗粒状或斑块状；经相关分析：TGF－β1与PCNA呈正相关。结论 PCNA，TGF－β1在人胎儿不同胎龄晶状体上皮细胞均有表达；TGF－β1与PCNA呈正相关，具有促进晶状体上皮细胞增殖的作用。     

细胞增殖与凋亡在胎儿晶状体发育中的意义

目的 观察人胎儿不同发育阶段晶状体上皮细胞凋亡（APO）,以及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达特征,并探讨细胞增殖与凋亡在胎儿晶状体发育中的关系。方法 用原位末端标记法,检测了10～32周人胎儿晶状体上皮细胞凋亡阳性表达率,用SP免疫细胞化学技术检测了同期人胎儿晶状体上皮细胞PCNA阳性表达率。结果 PCNA和APO在人胎儿不同胎龄晶状体上皮细胞均有不同程度的表达,阳性细胞核为桔黄色或棕黄色。在胎儿晶状体发育的早期（10～12周）细胞增殖阳性率明显高于凋亡,晶状体上皮细胞以增殖为主;在胎儿晶状体发育的中期（16～28周）细胞凋亡阳性率明显高于增殖,晶状体上皮细胞凋亡占优势;在晶状体发育的晚期（32周）,细胞增殖与凋亡活动均较弱。结果 细胞凋亡与增殖行为在胎儿晶状体发育的整个过程中普遍存在,协同参与了调控胎儿晶状体正常发育过程。     

bcl-2基因和增殖细胞核抗原在人晶状体上皮细胞中的表达

目的：观察正常胚胎、儿童和老年人晶体上皮细胞中bcl-2基因和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuchlear antigen,PCNA)的表达状况,探讨其与晶状体上皮细胞增殖潜能的关系。方法采用免疫组织化学染色法光谱下检测胚胎组（胎龄5－10个月）、儿童组（7个月至13岁）及老年组（＞50岁）晶状体上皮细胞中bcl-2基因和PCNA的表达状况。结果：bcl-2基因和PCNA在胚胎组和儿童组晶状体上皮细胞中表达的阳性率显著高于老年组（P＜0．01）,且以晶状体赤道部明显,结论日 状体上皮细胞的增殖潜能以及后发性白内障的发生与晶状体上皮细胞内bcl-2基因及PCNA的表达有关。     

人工角膜植入术后EGF和bFGF局部应用的实验研究

目的 在兔眼局部应用上皮生长因子(EGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，观察对人工角膜植入术后植床角膜的影响。方法 于PMMA襻状支架人工角膜植入兔眼后，结膜下注射EGF或bFGF，术后1月取植床角膜制作石蜡切片，应用免疫组织化学技术ABC法，检测植床角膜组织增生细胞核抗原(PCNA)的表达情况及细胞凋亡情况；并检测c—myc基因的表达情况。结果 bFGF组植床角膜基质细胞可见PCNA阳性表达；EGF组植床角膜上皮细胞及基质细胞均可见PCNA阳性表达；对照组未见PCNA表达；各组植床角膜基质及上皮细胞均可见c—myc基因表达，角膜内皮细胞未见表达；各组均未见阳性凋亡细胞。结论 EGF和bFGF对人工角膜植入兔眼后植床角膜组织细胞的增生过程有促进作用，对减少人工角膜植入术后并发症，提高成功率有积极意义。     

老年性白内障合并2型糖尿病患者晶状体上皮细胞转化生长因子β表达及其与晚期糖基化终末产物的相关性

目的研究转化生长因子p（transforminggrowthfactor—β,TGF—β）在老年性白内障合并2型糖尿病患者中的表达变化及其可能的作用机制,为进一步阐明老年性白内障合并2型糖尿病患者发病的分子机制提供实验数据。方法分别采用点杂交和实时荧光聚合酶链反应方法定量检测和分析老年性白内障患者及老年性白内障合并2型糖尿病患者晶状体前囊膜上皮细胞中TGF-β蛋白、mRNA表达水平。免疫荧光方法观察晚期糖基化终末产物（advanced glycation endoproducts,AGEs）对体外培养人晶状体上皮细胞TGF-β表达的影响。结果与老年性白内障患者相比,老年性白内障合并2型糖尿病患者晶状体前囊膜上皮细胞中TGF-β（TGF-β／2／3）蛋白表达增加（P〈0．05）,mRNA表达变化分别为TGF—β1升高（P〈0．05）,TGF—β2降低（P〈0．01）,TGF-β3未见显著改变（P〉0．05）。AGEs与晶状体上皮细胞共培养后,细胞表面TGF—β（TGF-β1／2／3）表达上调。结论TGF—β在老年性白内障合并2型糖尿病患者晶状体上皮细胞中的表达上调。AEGs可诱导晶状体上皮细胞TGF—β表达上调。（中国眼耳鼻喉科杂志,2010,10：212514）     

转化生长因子β受体在不同年龄大鼠晶状体上皮细胞中的表达

目的探讨转化生长因子β（transforming growth factor-β，TGF—β）受体在不同年龄SD大鼠晶状体上皮细胞中的表达变化及意义。方法按1、3、6个月鼠龄分为3组。采用晶状体前囊膜铺片方式。应用荧光免疫组化技术进行TGF—β受体TGF-βR1和TGF-βR2的荧光免疫组化染色，检测其蛋白水平的表达：采用剥取晶状体囊膜组织方法。应用RT—PCR技术检测TGF—βR1和TGF—βR2在转录水平的表达。结果在蛋白水平，TGF-βR1和TGF—βR2于1个月鼠龄组表达最强．IOD分别为478001±44417和778338±62596；3个月鼠龄组表达减弱。分别为360343±33196和360343±33196：6个月鼠龄组表达最弱。分别为225858±23483和274648±29801，组间差异有显著性（P〈0．05）。在转录水平，TGF—βR1和TGF-βR2mRNA表达量在1个月龄组分别为3．0±0．9和3．4±1．1；3个月龄组分别为2．1±0．6和2．6±0．8；6个月龄组分别为1．3±0．3和1．6±0．5．随着年龄的增加而减弱（P〈0．05）。结论大鼠晶状体上皮细胞中TGF—βR1和TGF-βR2的表达随年龄的增长而减弱，提示对TGF—β的敏感性与年龄呈负相关。     

转化生长因子β诱导晶状体上皮细胞凋亡

目的 探讨转化生长因子β（ＰＧＦ－β）对体外培养的牛眼晶状体上皮细胞凋亡的作用。方法 ＭＴＴ法测定细胞经不同浓度ＴＧＦ－β作用后的增殖情况；以ＴＵＮＥＬ技术研究ＴＧＦ－β作用不同时间后细胞凋亡的变化。结果 ＴＧＦ－β可显著抑制晶状体上皮细胞的增殖，抑制率高达３５％。原位凋亡测定显示ＴＧＦ－β作用３０ｍｉｎ至８小时可明显诱导晶体上皮细胞凋亡，阳性细胞核由边缘着色逐渐变为整个核均匀 以。结论 转化生长     

正常角膜缘组织中与血管生成相关的生长因子及其受体的表达

目的：探查正常人角膜缘组织里与血管生成相关的生长因子及其受体的分布。方法：用冰冻切片和链亲合素过氧化物酶染色系统，选择一组兔抗人多克隆抗体，即：血管内皮生长因子（VEGF），碱性成纤维细胞生长因子（bFGF），血小板源性生长因子（PDGF－A）和转化生长因子－β1（TGF－β1）及其受体对11例角膜移植供体材料的角膜缘组织进行了检查。结果：VEGF，bFGF,PDGF-A和TGF－β14种生长因子仅在1或2例标本中不表达外，在大部分标本中表达阳性。4种生长因子的受体在角膜缘上皮，基底膜，上皮下组织和角膜组织内阳性表达分别是：VEGF9例，7例，10例和8例；bFGF8例，9例，9例和8例，PDGF5例，4例，10例和7例；TGF－β13例，0例，11例和6例。结论：在正常角膜缘组织中，存在VEGF，bFGF ,PDGF-A和TGF－β1及其受体，可能在维持正常的角膜功能和调节角膜缘组织的生长和增殖中起着重要作用。     

慢病毒介导的TGFβ-R2shRNA抑制人LECs细胞TGFβ—R2的表达

目的：观察转化生长因子β-R2特异性短发夹 RNA （ shRNA ）对人晶状体上皮细胞TGFβ-R2表达的影响。 方法：根据小干扰RNA （ siRNA ）的设计原则,针对转化生长因子β-受体2基因序列特征构建特异性 shRNA （ RNAi ）载体,与TGFβ-R2过表达载体共转染293 T细胞,经Western blot筛选出有效RNAi载体后,进行扩增、纯化、滴度测定,并转染培养的人LECs , qPCR 检测TGFβ-R2 siRNA慢病毒载体对TGFβ-R2 mRNA表达的影响。 结果：经Western blot 筛选,TGFβ-R2/GV115RNAi＃1对目的基因的表达敲减效果最明显,慢病毒包装,滴度为8E＋8 TU/mL,感染人LECs细胞后,对TGFβ-R2基因有显著的敲减效果,达到78．1％（P＜0．05）。 结论：TGFβ-R2 RNAi载体构建成功,并且能抑制人晶状体上皮细胞TGFβ-R2 mRNA的表达。     

转化生长因子—β对角膜上皮细胞体外生长的调节作用

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一种多功能多肽，对许多类型细胞的增殖和分化，以及组织的创伤修复反应具有重要的调节作用。本实验观察了ＴＧＦ－β及其联合表皮生长因子（ＥＧＦ）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对离体兔角膜上皮细胞生长影响。结果显示：ＴＧＦ－β可降低剂量相关的上皮细胞的增殖能力：ＥＧＦ和ｂＦＧＦ可显著刺激上皮的增殖；ＴＧＦ－β可部分地对抗ＥＧＦ和ｂＦＧＦ的作用。提示：ＴＧＦ－β对角膜上     

生长因子与角膜内皮细胞

角膜内皮细胞是维持角膜透明的关键细胞成分,角膜内皮细胞密度降低和形态异常可导致内皮细胞功能失代偿而降低视力。在伤口愈合过程中,生长因子可增加角膜内皮细胞密度槿刺激内皮细胞再生,促进伤口愈合。肽类生长因子影响着多种细胞生理过程,包括细胞增殖,分化,移行和存活。     

糖尿病视网膜病变FGF、EGF、TNF水平及其临床意义

用放射免疫法对20例糖尿病视网膜病变(DR)患者、20例糖尿病眼底正常者(DM)和20名健康者(C组)进行了成纤维细胞生长因子(FGF)、上皮细胞生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子(TNF)的测定。结果表明：DM组和DR组的FGF、EGF和TNF均高于C组(P<0.05～0.01)；单纯型DR与DM组的FGF、EGF和TNF差异无显著性；增殖型DR的FGF、EGF和TNF显著高于单纯型组，FGF、EGF和TNF有随着DR的进展而逐渐升高的趋势。提示DR的发生、发展与FGF、EGF和TNF升高有关。 (中华眼底病杂志，1995，11：232-234）     

Growth factors in the anterior segment: role in tissue maintenance, wound healing and ocular pathology

A number of growth factors and their associated receptors, including epidermal growth factor, transforming growth factor-beta, keratinocyte growth factor, hepatocyte growth factor, fibroblast growth factor and platelet-derived growth factor have been detected in the anterior segment of the eye. On binding to cellular receptors, these factors activate signalling cascades, which regulate functions including mitosis, differentiation, motility and apoptosis. Production of growth factors by corneal cells and their presence in the tear fluid and aqueous humour is essential for maintenance and renewal of normal tissue in the anterior eye and the prevention of undesirable immune or angiogenic reactions. Growth factors also play a vital role in corneal wound healing, mediating the proliferation of epithelial and stromal tissue and affecting the remodelling of the extracellular matrix (ECM). These functions depend on a complex interplay between growth factors of different types, the ECM, and regulatory mechanisms of the affected cells. Imbalances may lead to deficient wound healing and various ocular pathologies, including edema, neovascularization and glaucoma. Growth factors may be targeted in therapeutic ophthalmic applications, through exogenous application or selective inhibition, and may be used to elicit specific cellular responses to ophthalmic materials. A thorough understanding of the mechanism and function of growth factors and their actions in the complex environment of the anterior eye is required for these purposes. Growth factors, their function and mechanisms of action as well as the interplay between different growth factors based on recent in vitro and in vivo studies are presented.     

圆锥角膜组织中EGF和bFGF变化免疫组织化学的研究

目的 观察正常人及圆锥角膜中表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)的表达，探讨EGF和hFGF在圆锥角膜中的变化。方法 采用免疫组织化学SABC法检测角膜组织中EGF、bFGF的表达，结果 在圆锥角膜上皮层、Bowman层和内皮层有EGF表达，EGF比正常角膜的表达强；在圆锥角膜的上皮层、实质层和内皮层可见bFGF的阳性表达，圆锥角膜的基质瘢痕区bFGF有较强的阳性表达。结论 圆锥角膜组织中EGF水平增高，促进上皮细胞和基质细胞的DNA合成，从而使组织愈合。bFGF表达增强可以促进角膜上皮、基质细胞和内皮细胞的增殖。     

水蛭素对血小板源性生长因子及受体的影响

目的 通过观察水蛭素对血小板源性生长因子(PDGF)及受体(PDGF-R)的影响,深入探讨水蛭素防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)形成的机制。方法 利用穿孔性眼外伤的动物模型,分别给予10U/ml和20U/ml的水蛭素于玻璃体腔内,用酶联免疫法(ELISA)测定玻璃体中PDGF的含量,用免疫组织化学法观察玻璃体腔内细胞增殖相关抗原(Ki-67)、白介素1β转换酶(interlukin 1-β converting enzyme,ICE)和PDGFR的表达。结果 造模后3d和28dPDGF的检测结果显示生理盐水对照组(434.88±56,75,457.17±74.39)与剂量Ⅰ组之间(285.95±54.04,322.50±106.93)差异有显著性(P<0.01);PDGF-R的检测结果显示生理盐水对照组(147.82±14.95,141.05±19.03)与剂量Ⅰ组(87.27±20.80,2.57±16.75)和剂量Ⅱ组(97.67±11.37,68.26±5.6)之间差异有显著性(P<0.01);ICE的检测结果显示生理盐水对照组(38.51±3.04,39.74±3.78)与剂量Ⅰ组(57.01±10.02,57.61±9.04)和剂量Ⅱ组(56.22±4.95,57.45±8.25)之间差异有显著性(P<0.01)。Ki-67检测结果显示造模后28d生理盐水对照组(127.83±128.72)与剂量Ⅰ组(51.67±18.61)和剂量Ⅱ组(51.50±31.55)之间差异有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论 水蛭素通过抑制PDGF的分泌和PDGF-R的激活而抑制玻璃体腔内细胞的     

孔源性视网膜脱离视网膜下液和前房液中VEGF及PDGF含量测定

目的研究血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)和血小板源性生长因子(platelet-derivedgrowthfactor,PDGF)在视网膜下液(subretinal fluid,SRF)和前房液(anterior chamber fluid,ACF)中的含量,并观察其对增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreo-retinopathy,PVR)形成的影响。方法用ELISA测定63例孔源性视网膜脱离患者SRF和ACF的VEGF和PDGF的含量。结果孔源性视网膜脱离患者SRF和ACF中含有VEGF和PDGF;其含量随患者眼部病情的加重而增加;VEGF和PDGF含量在SRF中成相关关系,在ACF中亦成相关关系;同一患者的VEGF在SRF和ACF中成相关关系,PDGF亦是。结论VEGF和PDGF在PVR的发生发展过程中起了一定的作用,且VEGF和PDGF具有协同效应。     

PDGF抗体和VEGF抗体预防增生性玻璃体视网膜病变

目的评价血小板源性生长因子（PDGF）抗体和血管内皮生长因子（VEGF）抗体对实验性增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的预防作用。方法将兔制成PVR模型，将一定浓度的PDGF抗体、VEGF抗体及BSS液分别在当时及第7d注入兔眼的玻璃体腔，每日观察兔眼情况，处死兔子做眼病理切片及免疫组织化学染色。结果间接检眼镜观察可见对照组与实验组均出现视网膜脱离。玻璃体腔内注药后第21d、28dPVR分级实验组与对照组差异有统计学意义（P〈0．05），在制作动物模型时直接注入和第7d时注入差异无统计学意义（P〉0．05）。病理检查所见与间接检眼镜所见相符。免疫组织化学染色计算阳性细胞百分率，亦得出相同结果。结论玻璃体腔内注入PDGF抗体、VEGF抗体均可预防PVR的进展，注药时间对于PVR的发展无明显影响。     

碱性成纤维细胞生长因子与转化生长因子β在近视眼巩膜中作用的研究进展

近视是世界最常见眼病之一,其发病机制尚不完全清楚。有研究发现,细胞生长因子与近视的发生发展密切相关,其中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与转化生长因子β（TGF-β）作为关键的信号分子可以通过调控巩膜细胞外基质的合成与降解参与近视眼巩膜重塑,但具体转导途径和机制还不十分清楚。现就bFGF和TGF-β在近视眼巩膜中的表达及其调控巩膜重塑的可能机制进行综述。     

Platelet derived growth factor and fibroblast growth factor basic levels in the vitreous of patients with vitreoretinal disorders

AIM—To determine the potential role of basic fibroblast growth factor (bFGF) and platelet derived growth factor (PDGF) in the pathogenesis of proliferative vitreoretinopathy (PVR).
METHODS—An enzyme linked immunosorbent assay technique was used to determine the quantities of bFGF and PDGF in 38 vitreous samples taken from patients undergoing trans pars plana vitrectomy (PPV) for a variety of vitreoretinal disorders.
RESULTS—bFGF levels ranged from undetectable to 318.7 pg/ml. The mean concentration was 27.57 pg/ml. PDGF levels ranged from undetectable to 160 pg/ml, the mean concentration being 40.06 pg/ml. Eight of 13 patients with clinical evidence of retinal detachment (RD) and PVR had significantly elevated bFGF concentrations, whereas only one of 11 patients with RD and no PVR had detectable bFGF; seven of eight patients with RD and PVR had elevated PDGF concentrations in the vitreous, whereas all 10 patients with RD and no PVR had no detectable vitreous PDGF. Eight patients with vitreous haemorrhage had raised PDGF concentrations, and the levels were particularly high (>120 pg/ml) in those two patients with active neovascularisation. Two out of nine patients with vitreous haemorrhage had raised bFGF levels.
CONCLUSIONS—bFGF and PDGF concentrations are elevated in PVR even in the absence of vitreous haemorrhage, and not in patients with RD uncomplicated by PVR. This observation suggests that both cytokines may be involved in the pathogenesis of PVR.

Keywords: basic fibroblast growth factor; platelet derived growth factor; proliferative vitreoretinopathy     

胎盘生长因子在早产儿视网膜病变纤维血管膜中的表达

目的　研究胎盘生长因子（ｐｌａｃｅｎｔａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＬＧＦ）在早产儿视网膜病变（ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｆｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ,ＲＯＰ）纤维血管膜的血管内皮细胞、周细胞、巨噬细胞和胶质细胞中的表达和分布。方法　玻璃体切割术中取ＲＯＰ患者视网膜表面纤维血管膜保存备用,冰冻切片,ＨＥ染色、免疫组织化学染色和免疫荧光染色观察ＰＬＧＦ在纤维血管膜上的表达和分布。结果　ＨＥ染色及免疫组织化学染色结果显示ＰＬＧＦ在纤维血管膜中可见阳性表达。免疫荧光双标记法实验结果显示纤维血管膜的ＰＬＧＦ可能由血管内皮细胞、周细胞、巨噬细胞和胶质细胞表达。结论　ＰＬＧＦ可能参与了ＲＯＰ的发病过程,ＰＬＧＦ在ＲＯＰ发病中的作用及其分子机制需要进一步研究。