血小板糖蛋白ＧＰⅡb和ＧＰⅢa在人类肾小球疾病中的变化及作用

目的：本实验观察外周血小板膜上ＧＰⅡb、ＧＰⅢa在各种肾小球疾病中不同肾功能状态及透析与否中血浆vWF变化。Ａ组：１８例肾功能正常组；Ｂ组：１０例肾衰竭非透析组：Ｃ组：２０例肾衰竭透析组；另设Ｄ组：２０例无肾脏疾病正常对照。结果：外周血小板膜上ＧＰⅡb、ＧＰⅢa、Ｐ－１４０在Ａ组明显升高，Ｂ、Ｃ组明显下降，vWF在Ａ、Ｂ、Ｃ组均明显增加。结论：ＧＰⅡb、ＧＰⅢa与肾小球疾病中凝血功能紊乱有关，可能与血小板在肾脏的致病作用相关。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期血小板活化与感染性炎症的关系

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease, AECOPD)患者血小板活化膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa、GMP-140的变化及其与感染性炎症的关系.方法 用三色全血流式细胞术测定44例AECOPD患者及44例缓解期患者外周血中血小板GPⅡb/Ⅲa、GMP-140的表达水平, 并检测患者高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,与40例健康对照者比较.结果 AECOPD组GPⅡb/Ⅲa、GMP-140、hs-CRP分别为(68.73±7.87)%、(43.36±7.92)%、(8.52±5.71)mg/L,均明显高于缓解期组[(51.86±7.59)%、(33.63±7.63)%、(4.85±2.39)mg/L]及健康对照组[(48.73±5.55)%、(30.63±4.09)%、(4.38±2.41)mg/L](P均 <0.001).AECOPD组GPⅡb/Ⅲa与hs-CRP呈正相关(r=0.55,P <0.005),GMP-140与hs-CRP呈正相关(r=0.49,P <0.005).结论 AECOPD患者血小板明显活化,血小板活化与感染性炎症反应之间关系密切,活化血小板对AECOPD患者炎症反应起一定作用.     

氟比洛芬酯用于髋关节置换术超前镇痛的效果及对血小板活化的影响

目的观察氟比洛芬酯用于髋关节置换术超前镇痛的效果及对血小板活化的影响。方法选取60例行髋关节置换术患者,随机分成3组,每组各20例,分别为:氟比洛芬酯超前镇痛组(A组),氟比洛芬酯术后镇痛组(B组),对照组(C组)。3组患者术毕均用芬太尼术后静脉自控镇痛(PCIA)。采用视觉模拟评分法评价3组患者术后镇痛效果;采用流式细胞仪检测T0(麻醉前)、T1:(手术结束后2小时)、T2:(手术结束后4小时)、T3:(手术结束后24小时)、T4:(手术结束后48小时)时GPⅡb/Ⅲa与GMP-140的表达。结果 VAS评分:A组相似文献   

术前急性高容量血液稀释对食管癌根治术中患者血小板活化的影响

研究拟观察术前急性高容量血液稀释(AHH)对食管癌根治术中患者血小板膜血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)、GPⅡb/Ⅲa及血管性血友病因子(vWF)表达的影响。资料与方法择期行食管癌根治术的患者40例,ASAⅠ或Ⅱ级,年龄35-65岁,体重50-80kg,心、肺、肝、肾、凝血及止血功能均     

vWF及GPIb在慢性肾脏疾病中变化及作用

目的研究假性血管血友病因子（vWF）及血小板膜糖蛋白Ib（GPIb）在慢性肾脏疾病（CKD）不同阶段的变化及意义。方法87例患者按病因及CKD不同阶段分为5组，A组：CKD1期，肾小球肾炎组，17例；B组：CKD1期，原发性肾病综合征组，14例；C组：CKD1期，继发性肾病组，18例；D组：CKD2～4期，慢性肾衰组，18例；E组：CKD5期，慢性肾衰透析组，20例。酶联免疫吸附检测法测定GPIb、双抗体夹心固相酶免疫测定血浆vWF。结果vWF、GPIb在A、B、C、D、E组均明显增高，以B、C组尤为突出；与凝血状况正相关。结论vWF水平可同时反应内皮细胞受损及凝血状态，在肾小球疾病发展中可能有重要意义。     

抑肽酶对血小板膜糖蛋白功能的影响

目的：探讨抑肽酶对心转流（CPB）期间血小板功能的保护作用。方法：选择20例先天性心脏病房,室间隔缺损在CPB下行心内修补术的病人,随机分为对照组（不加抑肽酶）和抑肽酶组（加抑肽酶200万KIU）,每组10例,分别测定不同时间点的血小板计数和血小板膜糖蛋白GP Ⅰb,GPⅡb-Ⅲa的表达。结果：与对照组相比,抑肽酶组血小板计数和血小板膜糖蛋白GPⅠb,GPⅡb-Ⅲa的表达减少明显减轻（P＜0．05）,术后出血也明显减少,结论：抑肽酶在体外循环期间可抑制血小板计数和血小板膜糖蛋白GPIb和GPⅡb-Ⅲa的减少,对血小板功能具有保护作用。     

明胶溶液和右旋糖酐对血小板膜糖蛋白受体和纤维蛋白原的影响

目的 观察输注明胶溶液和右旋糖酐后对血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)和纤维蛋白原(Fbg)的影响以及相互关系.方法 在硬膜外阻滞下行胆囊切除术的病人105例,随机分为四组,术中分别输注生理盐水30ml/kg、右旋糖酐-7030ml/kg、尿联明胶30ml/kg及改良明胶30ml/kg.于输注前、输注后2h及3h采集静脉血,分别测定GPⅡb/Ⅲa和Fbg及血小板最大凝集率(MAR).结果 四组Fbg在输注2h和3h后明显低于输注前(P＜0.05).右旋糖酐组输注液体3h后GPⅡb/Ⅲa与输注前比较有显著降低(P＜0.01),与其它三组比较也显著降低(P＜0.01),生理盐水组输注液体3h后MAR显著升高(P＜0.01),右旋糖酐组也显著的降低(P＜0.01).结论 改良明胶和尿联明胶在临床上可能比右旋糖酐使用更大的量而不造成出血倾向,胶体液较晶体液在术中更能稳定血小板,有助于止血功能的稳定.     

不同胶体溶液急性高容血液稀释对结肠癌根治术患者围术期GPⅡb/Ⅲa、P-选择素表达的影响

目的观察羟乙基淀粉(HES)溶液和琥珀酰明胶(GEL)溶液急性高容血液稀释(AHHD)对结肠癌患者围术期血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa(GPⅡb／Ⅲa)、P-选择素表达的影响。方法择期在全身麻醉下行结肠癌根治术患者60例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为3组(n=20):术前以15 ml·kg-1剂量分别在30min内经颈内静脉输注HES溶液(组Ⅰ)、GEL溶液(组Ⅱ)或乳酸钠林格氏(RL)溶液(组Ⅲ)。抽取静脉血标本,采用流式细胞仪测定AHHD前即刻(T0)、手术开始后30 min(T1)、手术开始后2 h(T2)和术毕1 h(T3)GPⅡb／Ⅲa与P-选择素的表达。结果与T0比较,组ⅠT1、T2和T3时GPⅡb／Ⅲa和P-选择素表达均降低;组Ⅱ,T1、T2时GPⅡb／Ⅲa和P-选择素表达降低,T3时GPⅡb／Ⅲa表达降低;组ⅢT1、T3时P-选择素表达增强(P<0．05)。与组Ⅱ比较,组ⅠT3时GPⅡb／Ⅲa表达降低;与组Ⅲ比较,组Ⅰ与组ⅡT1、T2和T3时GPⅡb／Ⅲa和P-选择素表达降低(P<0．05)。结论术前采用HES溶液或GEL溶液AHHD能抑制结肠癌根治术患者围术期血小板的过度活化,对防止肿瘤细胞转移和术后深静脉血栓形成可能有一定作用。     

手术创伤对血小板粘附功能的影响

目的探讨手术创伤的大小及时间长短对血小板粘附功能的影响.方法择期胆囊切除术全麻病人30例,随机分为LC组及OC组.两组病人均于全麻后分别采集静脉血10ml,并于手术开始后1h、2h各采血10ml,分别制备贫血小板血浆和富血小板血浆,测定GPⅠ/Ⅰx、vWF、PAdT.结果GPⅠb/Ⅰx、vWF、PAdT麻醉后手术前均无显著性差异.手术中PAdTLC组明显低于OC组(P＜0.05).GPⅠb/ⅠxOC组明显高于LC组(P＜0.01),且随时间延长,OC组亦显著高于LC组(P＜0.01).vWF以LC组减少显著(P＜0.05),两组均在手术开始后2h降低明显.结论手术中GPⅠb/Ⅰx、vWF、PAdT的升高与降低均与创伤大小有关.     

从scFv噬菌体抗体库中筛选抗GPⅡ b/Ⅲa单链抗体

目的 从scFv噬菌体库中获取人源化特异性Anti-GPⅡb/Ⅲa单克隆scFv抗体.方法 对Tomlinson I+J scFv文库进行3次淘洗,富集特异性的抗GPⅡb/Ⅲa抗体.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和双脱氧终止法基因测序及同源性对比,检测出人源化的抗GPⅡb/Ⅲa单克隆抗体.结果　在3次淘洗后,得到了抗GPⅡb/Ⅲa单克隆噬菌体抗体,阳性克隆的获取率在95.6%以上;ELISA和基因测序筛选出25种不同的全长抗GPⅡb/Ⅲa噬菌体抗体,这些基因序列与人免疫球蛋白可变区基因同源性达到89%以上;分泌性抗体ELISA检测提示这些抗体顺利表达了蛋白并特异性结合GPⅡb/Ⅲa,其中15种scFv对GPⅡb/Ⅲa有更强的阳性反应.结论　人源化的特异性抗-GPⅡb/Ⅲa scFv能通过噬菌体展示技术快速有效地获得.

Abstract：

Objective To screen monoclonal anti-GP Ⅱ b/Ⅲ a antibodies from scFv phage libraries and obtain specific monoclonal anti-GP Ⅱ b/Ⅲ a scFv. Methods Specific anti-GP Ⅱ b/Ⅲ a scFv antibodies were enriched by three rounds of selection from Tomlinson Ⅰ + J libraries. By using polyclonal and monoclonal phage enzyme linked immunosorbent assay ( ELISA) and gene sequencing by bideoxy chain termination, full-length specific monoclonal anti-GP Ⅱ b/Ⅲ a antibodies were picked out and their gene sequences were obtained. Results Twenty-five different full-length monoclonal scFv phage fragments were obtained after three rounds of panning and their gene sequences were identified, and positive rate of monoclones was above 95.6%; homology comparison with variable regions of human immunoglobulin gene showed the similarity was above 89%; the result of soluble scFv ELISA showed that these specific scFv could be expressed smoothly, and 15 full-length monoclonal scFv antibodies were stronger positive than the other in these scFv. Conclusion Antibody phage display was a rapid and effective method to obtain Anti-GP Ⅱ b/Ⅲ a scFv fragements.     

6%羟乙基淀粉130/0.4对不同血型子宫肌瘤切除患者凝血功能的影响

目的 观察6%羟乙基淀粉130/0.4急性高容量血液稀释(AHH)对不同血型的子宫肌瘤切除患者凝血功能的影响.方法 选择ASA Ⅰ或Ⅱ级择期妇科手术患者60例,按血型分为O型组(O组)、A型组(A组)、B型组(B组)、AB型组(AB组).全麻诱导后快速输注6%羟乙基淀粉130/0.4 20 ml/kg.术中连续监测MAP、HR和尿量;分别于AHH前(T0)、AHH后20 min(T1)、40min(T2)、80 min(T3)采集静脉血进行凝血活酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、Willebrand因子(vWF)、Ⅷ因子活动度(FⅧ:C)、纤维蛋白原(FIB)、血小板膜糖蛋白(GpⅡb/Ⅲa)和血栓弹力描记图(TEG)的测定.结果 四组患者AHH前后血流动力学稳定.T1、T2时O组APTT均长于A、B、AB组(P＜0.05).T1～T3时四组vWF、FⅧ:C、FIB、GpⅡb/Ⅲa均明显低于T0时(P＜0.01);T1、T2时O组患者vWF、FⅧ:C和GpⅡb/Ⅲa活性显著低于A、B、AB组(P＜0.01).四组患者TGE的凝血时间(K)和反应时间(R)均有轻微延长,T1～T3时O组a角小于A、B、AB组,但四组a角都在正常范围.结论 6%羟乙基淀粉130/0.4急性高容量血液稀释对O型血子宫肌瘤切除患者凝血功能的影响大于其他血型组.     

氟比洛芬酯联合芬太尼用于老年骨科患者术后镇痛对血小板活化的影响

目的观察氟比洛芬酯联合芬太尼用于老年骨科患者术后自控静脉镇痛（PCIA）对血小板活化的影响。方法选取老年骨科患者60例,麻醉方法均采用静吸复合全麻,术后使用一次性微量镇痛泵镇痛,随机分成3组,每组20例,分别为：氟比洛芬酯组（A组）,芬太尼组（B组）,氟比洛芬酯复合芬太尼组（C组）。记录术后48小时镇痛泵按压次数．采用视觉模拟评分法评价3组患者镇痛效果;记录术后24小时切口负压引流量的多少;采用流式细胞仪检测GPⅡb／ma与GMP-140的表达。结果术后2小时B组疼痛视觉模拟评分高于A、C组,（P〈0．05）4小时之后3组之间VAS评分无统计学差异。镇痛满意度C组较A、B组高,（P〈0．05）。C组的PCIA按压次数少于A、B组,（P〈0．05）。术后24小时切口负压引流量,3组之间无统计学差异;与T0比较,A、C组在T1时的GⅡb／Ⅲa与GMP一140表达明显增加（P〈0．05）;与T0比较,B组在T1,T2、T3时的GPIIb／ma与GMP-140表达明显增加（P〈0．05）。A、C组在T2、T3、T4时的GPUb／IHa与GMP-140表达明显低于B组（P〈0．05）。结论老年骨科患者术后应用氟比洛芬酯联合芬太尼术后镇痛效果确切,并能有效抑制血小板GPⅡb／IIa复合物与GMP-140的过度表达。     

不同羟乙基淀粉急性高容量血液稀释对大面积烧伤患者围术期凝血功能的影响

目的 评价羟乙基淀粉130/0.4(HES 130/0.4)与羟乙基淀粉200/0.5(HES 200/0.5)急性高容量血液稀释(AHH)对大面积烧伤患者围术期凝血功能的影响.方法 拟行早期切痂术的大面积烧伤患者40例,年龄18～49岁,ASAⅡ级,随机分为HES 200/0.5组(HES 200组)与HES 130/0.4组(HES 130组),每组20例,另选20名健康志愿者为正常对照组(C组).麻醉诱导开始时HES 200组和HES 130组经30 min分别静脉输注HES 200/0.5、HES 130/0.4 15 ml/kg,行AHH,C组不予任何处理.于麻醉诱导前(T0)、AHH结束即刻(T1)、AHH后1 h(T2)、术后1 h(T3)时采用流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)、CD62P的表达水平,采用血栓弹力图描记仪测定以下指标:反应时间(R).凝血时间(K)、α角、最大振幅(MA)和凝血指数(CI).结果 与C组比较,HES 200组和HES 130组血小板GPⅡb/Ⅲa、CD62P表达上调,R、K缩短,α角、MA、CI增大(P<0.05);与HES 200组比较,HES 130组血小板GPⅡb/Ⅲa、CD62P表达上调,R缩短,α角、MA和CI增大(P<0.05);与T0时比较,HES 200组AHH后血小板GPⅡb/Ⅲa、CD62P表达下调,R、K延长,α角、MA、CI减小(P<0.05),HES 130组R、K延长,α角、CI减小(P<0.05),MA和血小板GPⅡb/Ⅲa、CD62P差异无统计学意义(P>0.05).结论 HES 200/0.5 AHH可抑制大面积烧伤患者围术期血小板过度活化,其减轻血液高凝状态的效应强于HES 130/0.4.     

原发性系膜增生性肾炎患者血小板活化状态的研究

目的 探讨血小板活化标志物：血小板膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa,CD41／CD61)及P-选择素(GMP140,CD62P)与人类原发性系膜增生性肾炎的关系。方法 采用流式细胞技术对35例原发性系膜增生性肾小球肾炎患者及激素治疗半年后的部分患者,检测其血中CD41、CD61、CD62P表达。结果 系膜增生性肾小球肾炎患者,血清CD62P显著高于正常人,而激素治疗半年后上述3项指标明显低于正常,且活化部份凝血活酶时间,纤维蛋白原显著高于正常。结论 CD41、CD61、CD62P介导了肾内血小板活化、聚集、炎症反应过程,与系膜增生性肾小球肾炎的发病密切相关。     

血小板数量和功能在肝缺血-再灌注过程中的变化

目的 观察兔肝缺血-再灌注过程中血小板数量、功能及膜蛋白的变化。方法 20只大耳白兔行氯胺酮麻醉，气管切开插管控制呼吸。夹闭肝门30min后恢复灌注造成肝缺血-再灌注模型，于缺血前、肝缺血25min、再灌注后5和10min由颈动脉采血，测血小板数量、粘附率、最大聚集率，用竞争性酶联免疫法测定各时点血小板糖蛋白Ⅰb、Ⅱb、Ⅲa(GPⅠb、Ⅱb、Ⅲa)和颗粒膜蛋白-140(GMP-140)数量。结果 血小板数量、粘附率、聚集率各时相点和缺血前相比均显著降低；GPⅠb数量在各时点和缺血前相比明显减少；各时点GPⅡb数量和缺血前相比，有显著下降趋势；GPⅢa数量在再灌注后5、10min和缺血前及肝缺血25min相比有显著下降趋势；GMP-140变化呈显著上升趋势；肝脏窦状隙电镜观察，大量血小板积聚和脱颗粒。结论 肝缺血-再灌注过程中，血小板数量减少，血小板积聚于肝窦状隙并大量脱颗粒，其粘附、聚集功能下降。     

大鼠肢体缺血再灌注早期血栓前状态的研究

目的探讨大鼠急性下肢缺血再灌注早期血栓的形成情况。方法将大鼠随机分为假手术组、下肢缺血再灌注组两组。夹闭大鼠股动脉并用张力带绑扎下肢，建立急性下肢缺血再灌注大鼠模型。观察急性下肢缺血再灌注大鼠血小板膜糖蛋白GPⅡb／Ⅲa和血管内皮细胞血栓调节蛋白（thrombomoclulin，TM）的表达。结果缺血再灌注组大鼠血小板膜糖蛋白GPⅡb／Ⅲa表达高于假手术组（P〈0．05）；缺血再灌注组大鼠血管内皮TM表达低于假手术组（P〈0．05）。结论急性下肢缺血再灌注可能导致大鼠血栓前状态的形成。     

人工胶体液用于急性高容量血液稀释对凝血功能的影响

目的评价不同人工胶体液进行急性高容量血液稀释（AHH）时对凝血功能的影响。方法20例ASAⅠ～Ⅱ级择期手术的良性疾病患者，随机均分为6％羟乙基淀粉组（HES组）和4％琥珀酰明胶组（MFG组）。全麻后输入HES（200／0．5）或MFG，20ml／kg，（25±5）min内输完。分别于AHH前后，由静脉取血检测血常规、凝血酶原时间（PT）、部分激活凝血活酶时间（APTT）、Ⅷ因子活动度（Ⅷ：C）、血管性血友病因子（vWF）、纤维蛋白原（FIB）、血小板膜糖蛋白（GpⅡb／Ⅲa）和血栓弹力描记图（TEG）。同时监测HR、MAP和CVP。结果（1）两组患者AHH后的Hct都降低至30％左右，达到中度血液稀释。（2）两组患者AHH前后血流动力学稳定。（3）与AHH前相比，AHH后两组患者PT、APTT均明显延长，HES组的Ⅷ：C明显下降；两组患者vWF和FIB均明显下降；GPⅡb／Ⅲa无明显变化；两组患者TEG均有凝m功能受损的表现。结论HES和MFG对vWF和（或）Ⅷ因子有抑制作用，APTT的明显延长和TEG的凝血功能受损可能与这一抑制作用有关。AHH后除APTT外各凝血参数均在正常范围内。     

抑肽酶对体外循环中血小板膜糖蛋白的影响

本研究拟利用流式细胞技术观察体外循环中抑肽酶对血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa(GPⅡb、Ⅲa)表达的影响,以探讨抑肽酶作用的分子生物学机制。资料及方法选择30例先天性房缺或/并室缺患儿,年龄在3～15岁,体重12～28 kg,心功能Ⅰ～Ⅱ级,男14例,女16例,随机分为两组:对照组和抑肽酶组。术前用药均为肌注哌替啶1mg/kg、氟哌利多0.1 mg/kg、东莨菪碱0.01 mg/kg,入室后静脉     

不同透析频率对维持性血液透析患者残余肾功能的影响

目的 研究不同透析频率对维持性血液透析患者的残余肾功能的影响.方法 根据透析方案的不同将53例慢性肾功能衰竭维持性血液透析患者分为3组.A组:19例,每周透析3次;B组:15例,每周透析2次;C组:19例,每2周透析3次.1年后分别标记为A1组、B1组、C1组.检测各组患者的残余肾功能.结果 A组、B组、C组患者残余肾功能分别为(6.5±1.7)ml/min、(7.0±2.2)ml/min、(6.0±2.4)ml/min.A1组、B1组、C1组残余肾功能分别为(2.7±1.5)ml/min、(3.3±1.8)ml/min、(4.1±2.6)ml/min.透析1年后,A组、B组、C组患者残余肾功能比较差异均有统计学意义(t分别=9.605、8.393、12.026,P均＜0.01);A1组与C1组比较差异也有统计学意义(t=2.416,P＜0.05).C组残余肾功能下降最少.结论 透析频度影响维持性血液透析患者残余肾功能的下降速度,血液透析频率较低(每2周透析3次)的患者残余肾功能的下降速度低于每周透析3次患者.     

明胶溶液和右旋糖酐对血小板膜糖蛋白受体和纤维蛋白质的 …

目的观察输注明胶溶液和右旋糖酐后对血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa(GPⅡb／Ⅲa)和纤维蛋白原(Fbg)的影响以及相互关系。方法在硬膜外阻滞下行胆囊切除术的病人105例,随机分为四组,术中分别输注生理盐水30ml／kg、右旋糖酐-7030ml/kg、尿联明胶30ml/kg及改良明胶30ml/kg。于输注前、输注后2h及3h采集静脉血,分别测定GPⅡb/Ⅲa和Fbg及血小板最大凝集率(MAR)。结果四组Fbg在输注2h和3h后明显低于输注前(P<0．05)。右旋糖酐组输注液体3h后GPⅡb/Ⅲa与输注前比较有显著降低(P<0．01),与其它三组比较也显著降低(P<0．01),生理盐水组输注液体3h后MAR显著升高(P<0．01),右旋糖酐组也显著的降低(P<0．01)。结论改良明胶和尿联明胶在临床上可能比右旋糖酐使用更大的量而不造成出血倾向,胶体液较晶体液在术中更能稳定血小板,有助于止血功能的稳定。