5＇-磷酸胞苷体外抗氧化作用的研究

近年来的研究表明，5＇-核苷酸具有提高免疫力、促生长、抗氧化、促进机体损伤修复、减少细胞凋亡、减轻炎性反应等功能。但关于5’-核苷酸的抗氧化作用机制尚无系统研究。本研究分析体外条件下5’-磷酸胞苷（5’-CMP）的清除活性氧能力及其对氧化损伤小鼠脾细胞的修复作用，旨在阐明其可能的作用机制。     

5'-核苷酸抗疲劳作用研究

[目的]研究5'-核苷酸抗疲劳作用。[方法]160只SPF级雄性ICR小鼠,随机分为4组,设立空白对照组、5'-核苷酸低、中、高剂量组(分别为0.04g/kg.bw、0.16g/kg.bw和0.64g/kg.bw)。30d后,测定各组小鼠负重游泳时间、血清尿素氮、肝糖原、血乳酸等指标。[结果]5'-核苷酸中、高剂量组均可显著延长小鼠负重游泳时间(P﹤0.05),并减少小鼠不负重游泳前及游泳后0min和20min3个时间点血乳酸测定曲线下的面积(P﹤0.05);5'-核苷酸各剂量组均可显著降低小鼠不负重游泳90min后血清尿素氮水平(P﹤0.05)。[结论]5'-核苷酸具有缓解体力疲劳功能。     

营养

052284 葡多酚对大鼠DNA氧化损伤的防护作用研究；052285 绿茶、乌龙茶、红茶的茶多糖组成、抗氧化及降血糖作用研究；052286 茶多酚影响同型半胱氨酸对内皮细胞的作用；052287 连翘叶茶抗氧化抗衰老作用的实验研究；052288 视黄酸对人胸腺细胞成熟分化影响及其作用机制；     

ERCC2/XPD基因缺失对短波紫外线所致CHO细胞DNA损伤修复的影响

目的探讨核苷酸切除修复交叉互补基因2(excision repair cross complementation group 2/Xeroderma pigmentosum D,ERCC2/XPD)在短波紫外线(UVC)所致细胞DNA损伤与修复过程中的作用。方法采用中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)野生型AA8及ERCC2蛋白表达缺失型UV5构建细胞对照模型。MTT法比较两种细胞经UVC处理后细胞抑制率的差别;彗星试验与Rad51免疫荧光试验检测经不同照射强度的UVC处理后修复1、3、6和24 h,不同细胞对UVC所致DNA损伤修复能力的差异。结果与野生型AA8相比,UV5对UVC所致DNA损伤更加敏感,细胞存活率降低(P0.05)。彗星试验和Rad51免疫荧光试验结果显示,UV5细胞DNA损伤程度较AA8严重,并且修复UVC所致DNA损伤的能力降低(P0.05)。结论 ERCC2/XPD基因缺失细胞DNA损伤修复能力下降,说明ERCC2/XPD修复酶在UVC所致DNA损伤的切除修复过程中发挥重要作用。     

活性氧、线粒体膜电位在亚砷酸钠诱导凋亡中作用

有研究表明,砷可以引起机体内砷致机体脂质过氧化的产生及抗氧化能力降低,从而造成机体的氧化损伤[1-2].而肝脏是砷主要累及的靶组织[3],但砷对肝细胞的作用特点研究较少.研究提示,活性氧(ROS)和线粒体膜电位(△豰)在细胞凋亡中发挥着重要作用[4-5].为了进一步探讨砷对肝细胞的凋亡作用机制,本研究采用流式细胞仪检测细胞凋亡率和胞浆中ROS、△豰水平,并探讨ROs和△豰在NaAsO2诱导L-02肝细胞凋亡过程中的作用.     

活性氧在4-HPR诱导膀胱癌细胞T24凋亡中的作用

目的研究4-HPR诱导的膀胱癌细胞凋亡，探讨DNA氧化损伤与修复在其中的作用。方法以4-HPR处理T24细胞后，检测其生长抑制情况，用荧光分光光度计检测细胞内活性氧(ROS)含量，用流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况，用Western blot法检测DNA修复蛋白XRCC1的表达。结果4-HPR能诱导细胞发生凋亡，2．5、5．0、10．0μmol／L4-HPR引起的凋亡率分别达到1．8％、4．0％和10．5％，在此过程中伴随着细胞内ROS水平升高(最高达到3倍)，并使DNA修复蛋白XRCC1的表达下降，使caspase-3激活。抗氧化物质维生素C能有效地抑制4-HPR引起的ROS升高，并能部分抑制其引起的细胞生长抑制、凋亡及XRCC1蛋白表达的下降。结论ROS的生成并造成DNA损伤可能是4-HPR诱导膀胱癌细胞凋亡的主要机制。     

2,2'',4,4''-四溴联苯醚和2,2'',4,4'',5-五氯联苯联合作用的细胞遗传毒性

目的 研究2,2',4,4'-四溴联苯醚(2,2',4,4'-tetrabromodiphenyl ethers,PBDE-47)和2,2',4,4',5-五氯联苯(2,2',4,4',5-hexachlorobiphenyl,PCB153)联合作用的细胞遗传毒性.方法 体外培养的SH-SY5Y细胞暴露于2、4、8mol/LPBDE-47或(和)5mol/LPCB153 24 h后,采用噻唑盐(MTT)、单细胞凝胶电泳、胞质分裂阻滞以及SDS-KCl沉淀法分别检测细胞活力、DNA损伤、微核和DNA-蛋白交联(DPC)形成情况.结果 与单独PBDE-47染毒组比较,各联合染毒组核分裂指数(NDI)明显下降,微核率、微核细胞率和DPC明显增加,Olive尾矩增大,尾部DNA百分率升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).≥4 mol/L PBDE-47+5 mol/L PCB153联合染毒细胞存活率明显低于相应剂量的PBDE-47和PCB153单独染毒组,差异有统计学意义(P＜0.05).≥2mol/LPBDE-47+5mol/L PCB153联合染毒组微核率、微核细胞率、DPC均明显高于PCB153单独染毒组;≥4 mol/L PBDE-47+5 mol/L PCB153联合染毒组细胞NDI低于PCB153单独染毒组;Olive尾矩和尾部DNA百分率仅8 μmol/L PBDE-47+5μmol/LPCB153联合染毒组高于PCB153单独染毒组,差异均有统计学意义(P＜0.05).析因分析显示,两者在抑制细胞存活、诱导DNA损伤、微核和DPC形成等方面存在交互作用,差异有统计学意义(P＜0.01),表现为协同作用方式.结论 一定剂量的PBDE-47与PCB153联合可抑制细胞存活,诱导DNA损伤、微核和DPC形成,呈现细胞遗传毒性,两者联合作用类型为协同作用.     

2，2'，4，4'-四溴联苯醚对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞胞内游离钙离子浓度的影响

目的 研究2,2',4,4'-四溴联苯醚（2,2',4,4'-tetrabromodiphenyl ethers,PBDE-47）对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的影响。方法 取对数生长期的SH-SY5Y细胞,分别染毒终浓度为0（溶剂对照）、1、5、10 μmol/L的PBDE-4...     

槲皮素衍生物HPS5对酒精诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨槲皮素衍生物HPS5对酒精导致的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法酒精诱导PC12细胞建立模型,MTT法检测细胞的抑制率,比较治疗后乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH)的水平,Western-Blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果与模型组比较,25、50、100 mmol/L HPS5能显著下调酒精对PC12细胞增殖的抑制作用[(28.87±2.34)%、(16.49±2.13)%、(10.31±1.17)%],减少LDH的漏出[(36.47±3.29)、(31.67±3.25)、(29.34±2.87)U/L],降低MDA水平[(1.89±0.14)、(1.61±0.51)、(1.48±0.41)nmol/mg],升高GSH[(81.25±8.33)、(92.14±9.34)、(96.24±11.24)mg/g]、SOD[(3.26±0.69)、(4.17±0.68)、(4.24±0.71)NU/mg]的水平,下调Bax蛋白[(0.31±0.03)、(0.29±0.03)、(0.27±0.03)]表达,升高Bcl-2蛋白[(0.34±0.01)、(0.31±0.02)、(0.28±0.02)]表达水平。尤其中高剂量组更加明显,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 HPS5对酒精诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,增强细胞的抗氧化能力以及上调Bcl-2和下调Bax蛋白的表达可能是其作用的机制之一。     

锰的神经毒性机制探讨

目的通过染毒人神经母细胞瘤细胞(SH—SY5Y)探讨锰致细胞的氧化损伤，为进一步研究锰的神经毒性机制提供科学依据。方法分别用0．00，0．25，0．50，0．75mmol／L的锰化合物染毒细胞24h，检测锰染毒的细胞中的抗氧化酶活力，包括超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH—Px)、过氧化氢酶(CAT)活力和抗氧化剂谷胱苷肽(GSH)；用荧光分光光度计检测染锰细胞膜微粘度；用单细胞电泳检测细胞DNA链断裂情况；用0．50mmol／L锰染毒细胞24，48h，采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果锰染毒各组细胞抗氧化酶活力和抗氧化剂含量均有不同程度的降低，脂质过氧化产物丙二醛(MDA)有所升高；染锰细胞膜微粘度升高；锰染毒细胞各级彗星细胞数不同损伤程度增多，并与染锰浓度呈正相关；锰染毒24，48h的细胞，均出现明显的凋亡峰，细胞周期的分布也发生改变，S期细胞增多。结论锰可导致细胞处于氧化应激态和细胞损伤，这可能是锰的神经毒作用机制之一。