海南广藿香试管内芽分化与愈伤组织诱导研究

目的选择海南广藿香的最佳芽分化和愈伤组织诱导培养基。方法利用海南广藿香的叶柄、茎尖和带节茎段进行组织培养芽分化试验,并对上述材料进行愈伤组织诱导培养基选择试验。结果在芽分化培养基中,MS＋3-吲哚丁酸（IBA）1．0mg／L＋6-苄基腺嘌呤（6-BA）0．6mg／L培养基能够较好地诱导茎尖和带节茎端长出新芽,诱导率分别为94．3％和94．6％;在愈伤组织诱导培养基中,MS＋萘乙酸（NAA）0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L培养基能较好地诱导海南广藿香叶柄和带节茎段产生愈伤组织,诱导率分别为80．0％和100％。结论海南广藿香的最佳芽分化和愈伤组织诱导培养基分别为Ms＋IBA1．0mg／L＋6-BA0．6mg／L和Ms＋NAA0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L。     

同源四倍体桔梗组培技术的优化研究

为了建立优良同源四倍体桔梗的快速繁殖和离体保存技术，采用均匀设计和正交设计以添加不同激素的MS培养基为基本培养基进行筛选和优化。结果表明：同源四倍体桔梗最佳丛生芽培养基为MS＋BA（6-苄基嘌呤）0．6mg／L＋NAA（萘乙酸）0．4mg／L＋RTCA（病毒唑）3．0mg／L，丛生芽增殖系数可达到9．13。最佳壮苗培养基为：MS＋BA0．2mg／L＋IAA（吲哚乙酸）0．1mg／L＋PP333（多效唑）0．2mg／L＋RTCA3．0mg／L。最佳生根培养基为：1／2MS＋IAA0．7mg／L＋AC（活性炭）0．2mg／L＋ABT（生根粉）0．2mg／L，生根率可达100％。最适室温离体保存条件为：1／4MS＋蔗糖30mg／L＋甘露醇30mg／L＋PP3331．0mg／L＋BA0．3mg／L＋IAA0．1mg／L＋RTCA3．0mg／L，保存150d时存活率仍可达到59．2％，同时恢复生长快，遗传稳定性好。本研究为优良同源四倍体桔梗的推广应用和优良种质离体保存、减少遗传变异提供了技术依据。     

川麦冬脱病毒和组织培养技术的研究

采用茎尖分生组织培养技术，获得了川麦冬的脱病毒试管苗。通过川麦冬组织培养技术的正交试验及优化筛选，筛选出最佳的培养基组成，用于脱病毒苗的快速繁殖。建立了川麦冬根尖染色体鉴定的最佳条件。结果表明，川麦冬最适繁殖培养基MS＋BA（6-卞基腺嘌呤）2．0mg／L＋NAA（萘乙酸）0．5mg／L；川麦冬最佳诱导愈伤培养基：MS＋BA1．5mg／L＋IAA（吲哚乙酸）0．1mg／L＋2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）1．0mg／L；通过在培养基中添加不同浓度生长素，得到适合川麦冬的生根培养基：1／2MS＋IAA0．5mg／L＋ABT0．5mg／L。染色体鉴定结果表明：川麦冬的染色体为2n=68。     

白及幼根组织培养技术研究

目的：为白及组培快繁寻求最佳部位及最佳培养基配比。方法：研究不同激素浓度和配比对白及不同外植体诱导分化、增殖及生根的影响。结果：幼根最容易诱导出丛生芽,其最佳培养基为1/2MS＋1.0 mg·L-16-BA＋2.0 mg·L-1 NAA;丛生芽增殖最佳培养基为MS＋1.0 mg·L-16-BA＋0.05 mg·L-1 NAA;生根培养基以1/2MS＋0.5 mg·L-1 NAA为最佳。结论：建立了白及组培快繁体系。     

杭白菊同源四倍体的诱导和鉴定

采用正交试验设计方法，进行了杭白菊试管苗快速繁殖技术的优化，同时进行了组织培养条件下杭白菊同源四倍体诱导与鉴定技术的研究。结果表明，诱导愈伤组织的最优外植体为叶片，最适培养基为MS＋KT（激动素）2．0mg／L＋NAA（萘乙酸）0．2mg／L；确定了杭白菊最佳繁殖培养基为MS＋BA（6-苄基嘌呤）0．2mg／L＋IAA（吲哚乙酸）0．05mg／L＋NAA0．2mg／L；最佳生根培养基为1／2MS＋IAA0．2n堰／L＋ABT（生根粉）0．3mg／L。在诱导四倍体的试验中，秋水仙碱浓度对存活率有显著影响，诱导杭白菊同源四倍体的最佳条件是在2％二甲基亚砜和浓度为0．2％的秋水仙碱中浸泡36h，诱导率高达13．33％。通过根尖细胞染色体鉴定，共获得11个同源四倍体株系。     

白花除虫菊组织培养研究

通过除虫菊组织培养技术的正交试验及优化筛选，建立了除虫菊最适繁殖培养基：MS＋BA0．3mg／L＋NAA0．2mg／L；通过在培养基中添加不同浓度生长素，得到适合除虫菊的生根培养基：1／2MS＋IAA0．2mg／L＋ABT0．1mg／L。建立了除虫菊根尖染色体鉴定的最佳条件。染色体鉴定结果表明：白花除虫菊的染色体为2n=18。为除虫菊的种质保存和优良品种的选育工作奠定了基础。     

脱病毒生姜同源四倍体的诱导和鉴定

采用组织培养技术，运用正交试验设计，进行了脱病毒生姜试管苗快速繁殖技术的优化和多倍体的诱导与鉴定，并对试管苗进行了生理生化指标的考察。结果表明MS＋BA（6-苄氨基嘌呤）2．0mg／L＋NAA（α-萘乙酸）0．1mg／L＋KT（激动素）1．0mg／L的培养基组成最适合于丛生芽的繁殖，MS＋BA0．2mg／L＋NAA1．0mg／L＋KT0．1mg／L的培养基组成最适合于生姜根的生长。多倍体诱导试验表明，秋水仙碱浸泡生姜芽12h的诱导率最高。并且发现检测的多倍体生姜试管苗的蛋白含量升高，SOD酶活升高，POD酶活升高，APX酶活升高，叶绿素含量升高，预示多倍体可能具有较好的生长势，对提高生姜的产量有利。     

蒙古黄芪组织培养及同源四倍体的诱导与鉴定

通过蒙古黄芪组织培养技术的正交试验，确定了蒙古黄芪最佳繁殖培养基：MS＋BA0．6mg／L＋IAA0．2mg／L＋PP3330．2mg／L；叶作为诱导愈伤组织的外植体优于茎，最适培养基：MS＋BA2．0mg／L＋KT1．0mg／L＋NAA0．5mg／L；最佳生根培养基：1／2MS＋IAA0．5mg／L＋IBA2．0mg／L＋ABT2．0mg／L。建立了蒙古黄芪快速繁殖体系；在无菌条件下利用秋水仙碱诱导蒙古黄芪，获得62个染色体加倍遗传稳定的变异试管苗株系，通过试管苗根尖染色体鉴定，对诱导获得的蒙古黄芪染色体加倍株系进行初步筛选，为进一步获得蒙古黄芪优良品系奠定基础。     

高山红景天的组织培养与快速繁殖

分别以高山红景天的幼茎和幼叶作为外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素配比对高山红景天愈伤组织的诱导、继代、生根的影响,以建立其快速繁殖体系.结果表明,幼茎是最佳的外植体,愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导率达83.3％;不定芽诱导和增殖的最佳培养基为MS +6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,诱导率和增殖率较高,达72％,且产生的不定芽数量较多,为3～4个;生根培养基以MS+IAA 0.5mg/L为最好,生根率100％,而且幼苗长势旺盛,能够满足高山红景天工厂化快速繁殖的要求.     

林荫银莲花不定芽增殖培养基的优化

为提高林荫银莲花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)不定芽繁殖系数,对其组培快繁体系进行优化。以林荫银莲花无菌苗为外植体,研究了培养基中激素、碳源、添加物和矿质元素钙等组分对其不定芽增殖和生长状况的影响,得出最佳的不定芽增殖培养基配方。以1/2 Ca浓度MS为固体培养基,激素为1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,蔗糖或食用白糖30 g/L,水解酪蛋白为添加物,浓度为750 mg/L,培养30 d后繁殖系数可达4.01,大幅提高了不定芽的增殖速度和质量,为工厂化生产林荫银莲花种苗奠定了基础。     

杜仲带腋芽茎段组织培养的研究

目的研究不同培养条件下杜仲带腋芽茎段愈伤组织的诱导和生长情况,以及腋芽的生长情况。方法以带腋芽的杜仲茎段为外植体,设计9种不同的培养基配方,为了防止褐化,在23.4℃下培养箱中暗培养,30 d后调查出愈率及腋芽的生长情况。结果 NAA浓度从0.05~0.5 mg.L-1,随着浓度增加,腋芽生长受抑制;6-BA浓度从0.3~1.0 mg.L-1,随着浓度增加,愈伤组织块增大,达到1.0 mg.L-1时愈伤组织的生长受到抑制;本实验中最佳的杜仲愈伤组织诱导和生长培养基配方为6号培养基:B5+0.5 mg.L-1NAA+0.3 mg.L-16-BA。腋芽生长最佳培养基配方为4号培养基:B5+0.05 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-16-BA。结论本试验的结果对杜仲的生物技术利用有一定的参考价值。     

莫邪菊的离体培养研究初报

目的 为建立莫邪菊的离体培养体系.方法 以成熟果实中的种子为外植体,探讨不同生长调节剂对离体培养中愈伤组织诱导、不定芽的分化和试管苗生根的影响.结果 培养基配方为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA0.2 mg/L时,种子破壳萌发率为70%,胚轴处愈伤组织诱导率为100%;MS+6-BA 2.0 mg/L为合适的丛生芽诱导和增殖培养基配方;培养基为MS0时生根率为95%,生根效果好且配方简单,移栽的试管苗成活率可达95%.结论 该试验建立的离体培养体系可用于莫邪菊的离体培养.     

凹叶厚朴愈伤组织的诱导及其有效成分含量的比较

目的:研究凹叶厚朴愈伤组织的诱导、生长情况并比较愈伤组织内有效成分的含量。方法:采用单因素比较、正交设计试验,研究影响凹叶厚朴愈伤组织诱导和生长的各种因素;采用高效液相色谱法测定不同来源愈伤组织内有效成分的含量。结果:外植体脱分化形成愈伤组织的能力,以顶芽及茎段最好,雌蕊次之;愈伤组织诱导的最适培养基为B5+NAA0.1mg.L-1+6-BA1.0mg.L-1,而B5+NAA0.5mg.L-1+6-BA4.0mg.L-1对愈伤组织生长促进作用明显。以WPM为基本培养基诱导愈伤组织,继代后厚朴酚与和厚朴酚含量的总和可达0.1679%~0.2344%,但愈伤组织诱导率低,为33.08%~48.65%;培养条件为MS+NAA0.5mg.L-1+6-BA1.0mg.L-1时,愈伤组织诱导率为62.12%,继代后2酚总量为0.1686%。结论:本试验结果对凹叶厚朴愈伤组织的诱导及高产细胞系的筛选具有一定的参考价值。     

荷花玉兰组织培养的研究

采用正交设计法考察了４种植物激素对诱导荷花玉兰愈伤组织产生的影响,筛选出最佳的植物激素配比为：ＭＳ培养基＋２,４－Ｄ（２,４－二氯苯氧乙酸,４ｍｇ／Ｌ）＋６－ＢＡ（６－苄基氨基嘌呤,１ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（ａ－萘乙酸,４ｍｇ／Ｌ）;找到最适外植体为花托和叶芽,对比了不同外植体形成愈伤组织的时间、形态和质地的差异。     

地丁草组织培养及无性系建立的研究

目的:为满足人们栽培对种苗的需要,并保护野生资源.方法:以地丁革不同外植体为材料,进行了愈伤组织诱导与分化、不定芽生根和试管苗生根继代培养研究,建立起地丁革的无性系.结果:MS+ NH4H2PO420 mg·L-1+BA0.2 mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+ NAA 0.8～1.0mg·L-1是愈伤组织继代扩...     

培养条件对三叶青愈伤组织生长及总黄酮含量的影响

研究培养条件对三叶青愈伤组织生长及黄酮积累的影响,建立用愈伤组织生产三叶青黄酮的方法。以三叶青的叶诱导产生的愈伤组织为材料,分别采用单因素实验、正交实验的方法比较了不同光照周期、不同有机添加物、不同前体、3种基础培养基、不同6-BA与NAA浓度的培养条件下愈伤组织生长的情况及黄酮含量。用愈伤组织生产三叶青黄酮可采用两步培养法来进行:先在促进愈伤组织生长的最佳处理组合条件:12 h/d间断性光照、MS+3.0 mg/L6-BA+2.0 mg/L NAA+2 g/L蛋白胨下培养30 d,再转入最利于黄酮积累的处理组合:连续光照、B5+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+40 mg/L苯丙氨酸下培养20 d。采用该方法培养的愈伤组织中总黄酮最大浓度可以达到28.4±3.9 mg/g DW。采用愈伤组织培养方式生产三叶青黄酮,不仅可以大大地缩短生产周期,而且培养物中的总黄酮含量也明显高于原植株叶片,接近于根茎中的黄酮含量,具有较大的可行性。