丹酚酸B脂化乳的制备及其稳定性研究

目的制备丹酚酸B脂化乳,并考察其在人工胃肠液中的稳定性。方法制备丹酚酸B脂化乳粒、脂化乳。采用紫外分光光度法测定并比较脂化乳粒、脂化乳中丹酚酸B在人工胃液和人工肠液中的变化。结果不同制剂中丹酚酸B在人工胃液中的量均有所降低,但脂化乳和脂化乳粒均较水溶液中丹酚酸B的量高,3 h后丹酚酸B水溶液中药物的量分别较脂化乳、脂化乳粒少19.3%、6.4%。不同制剂中丹酚酸B在人工肠液中的量均有所降低,但脂化乳、脂化乳粒均较水溶液中丹酚酸B的量高,6 h后丹酚酸B水溶液中药物的量分别较脂化乳、脂化乳粒少32.7%、5.3%。结论丹酚酸B脂化乳、脂化乳粒均能提高人工胃、肠液中所包载药物的稳定性;且脂化乳效果优于脂化乳粒。     

丹参酮ⅡA自微乳制剂在大鼠体内血药浓度测定

目的建立大鼠血浆中丹参酮ⅡA浓度的测定方法,考察丹参酮ⅡA自微乳制剂的药动学特征。方法采用乙腈沉淀蛋白进行血浆预处理,以HPLC测定给药后大鼠血浆中丹参酮ⅡA的浓度。色谱柱为Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm,5.0μm）,流动相为乙腈-0.01 mol.L-1枸橼酸水溶液（80∶20）,流速1.0 mL.min^-1,检测波长：270 nm,柱温25℃。比较丹参酮ⅡA自微乳制剂组和混悬液组大鼠血药浓度曲线的差异。结果丹参酮ⅡA在0.102－8.2 mg.L^-1内线性关系良好（r=0.998 6）,绝对回收率为77.5%-85.6%,相对回收率为88.3%-96.8%,日内和日间精密度RSD均小于15%。丹参酮ⅡA自微乳制剂比丹参酮ⅡA混悬液的AUC值高约2.5倍。结论本法可以准确、灵敏地测定大鼠血浆中丹参酮ⅡA的浓度。将丹参酮ⅡA制成自微乳制剂,能提高其生物利用度。     

丹参酮ⅡA自微乳制剂在大鼠体内血药浓度测定

目的 建立大鼠血浆中丹参酮ⅡA浓度的测定方法,考察丹参酮ⅡA自微乳制剂的药动学特征。方法 采用乙腈沉淀蛋白进行血浆预处理,以HPLC测定给药后大鼠血浆中丹参酮Ⅱ_A的浓度。色谱柱为Kromasil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5.0 μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L^-1枸橼酸水溶液(80∶20),流速1.0 mL·min^-1,检测波长：270 nm,柱温25 ℃。比较丹参酮Ⅱ_A自微乳制剂组和混悬液组大鼠血药浓度曲线的差异。结果 丹参酮Ⅱ_A在0.102~8.2 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.998 6),绝对回收率为77.5%~85.6%,相对回收率为88.3%~96.8%,日内和日间精密度RSD均小于15%。丹参酮Ⅱ_A自微乳制剂比丹参酮Ⅱ_A混悬液的AUC值高约2.5倍。结论 本法可以准确、灵敏地测定大鼠血浆中丹参酮Ⅱ_A的浓度。将丹参酮Ⅱ_A制成自微乳制剂,能提高其生物利用度。     

丹参酮ⅡA纳米囊的释放度研究

目的研究丹参酮ⅡA纳米囊在人工肠液中释放度,为研究其体内吸收奠定基础。方法利用透析袋,采用小杯法,转速100r/min,以人工肠液为溶出介质,HPLC法测定丹参酮ⅡA浓度,计算累积溶出百分率,用DDSolver软件对溶出曲线进行多种数学模型拟合,计算溶出参数。结果在人工肠液中丹参酮ⅡA纳米囊的平均滞留时间Td均长于原料药丹参酮ⅡA。原料药与丹参酮ⅡA纳米囊的体外释放差异较为显著(P<0.05),有可比性。结论丹参酮ⅡA纳米囊具有延迟丹参酮ⅡA释放的作用。     

甘草次酸脂化乳的质量评价指标探讨

目的:为甘草次酸脂化乳的质量评价提供参考指标。方法:采用冷冻透射电子显微镜检测甘草次酸脂化乳粒子形态,激光纳米粒度仪测定其粒径、多分散系数(PDI)及电位情况;采用超高效液相色谱法测定其中有效成分甘草次酸的载药量;在30℃下放置10 d考察该制剂的稳定性。结果:制备的甘草次酸脂化乳轮廓清晰、结构完整、呈类圆形、排列紧密;平均粒径为(245.2±4.29)nm,PDI为(0.054±0.01),平均电位为(-6.25±0.54)m V;甘草次酸的载药量平均值为(1.25±0.09)mg/m L;质量浓度为0.82 mg/m L的样品在10 d内稳定性良好。结论:粒径、电位、载药量、稳定性可作为甘草次酸脂化乳的评价指标。     

单唾液酸四己糖神经节苷脂在模拟人体胃肠环境中稳定性研究

目的考察单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)在模拟人工胃肠环境中的稳定性。方法采用HPLC分别测定GM1在稀盐酸溶液、人工胃液以及在pH=6.8的磷酸盐缓冲液、人工肠液中8 h内的稳定性。结果 GM1(浓度100 mg·L~(-1)),在稀盐酸溶液及pH=6.8的磷酸盐缓冲液中连续孵育8 h测定的百分含量分别为(98.70±9.32)%、(97.65±4.76)%;在人工胃液及人工肠液中其连续孵育8 h测定的百分含量分别为(97.42±6.18)%、(100.91±5.50)%。结论 GM1(浓度100 mg·L~(-1))在模拟人工胃肠环境中以37℃恒温孵育8 h后稳定性良好。     

盐酸美金刚胺前药MeN-1和MeN -2在人工胃肠液中的稳定性研究

考察盐酸美金刚胺前药MeN -1和MeN -2在人工胃肠液中的稳定性.方法采用HPLC法测定盐酸美金刚胺前药MeN -1和MeN -2在人工胃液和人工肠液中的浓度,并比较两者的稳定性.结果MeN -1在人工胃液中孵育3h后,其相对含量为90％,但在人工肠液中降至约70％;而MeN -2在人工胃肠液中孵育1h后,其相对含...     

不同加入量亲水性/疏水性纳米二氧化硅对甘草次酸脂化乳稳定性的影响研究

目的:研究不同加入量亲水性/疏水性纳米二氧化硅(nSiO_2)对甘草次酸脂化乳稳定性的影响。方法:取甘草次酸脂化乳4 m L,分别加入0.5%、1.0%、1.5%(m/m,下同)亲水性nSiO_2和0.4%、0.7%、1.0%疏水性nSiO_2,30℃水浴孵育2 h,同时以同批次甘草次酸脂化乳为空白对照。处理后在电镜下观察形态,并测定吸光度值,根据吸光度值计算稳定参数(K_E);根据K_E值对nSiO_2的加入量进行优化,制备3批制剂进行验证试验。结果:电镜下观察,球形结构为甘草次酸脂化乳,包裹在其表面的白色环状(包裹完全)或半环状结构(未包裹完全)为nSiO_2。加入0.5%、1.0%、1.5%亲水性nSiO_2的产品K_E分别为4.66%、5.01%、-2.08%,加入0.4%、0.7%、1.0%疏水性nSiO_2的产品K_E分别为3.02%、4.51%、7.24%;优化的加入量为亲水性nSiO_20.2%、0.3%、0.4%,疏水性nSiO_20.1%、0.2%、0.3%,K_E依次为6.19%、3.05%、7.84%,8.42%、2.41%、2.93%。最优加入量为0.3%亲水性nSiO_2、0.2%疏水性nSiO_2;验证试验中3批制剂均在此加入量时稳定性最佳。结论:亲水性或疏水性nSiO_2均可提高甘草次酸脂化乳的稳定性,且以0.3%、0.2%加入量为佳。     

乳块消颗粒质控方法的研究

目的建立乳块消颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中橘叶、地龙进行定性鉴别;采用薄层扫描法对样品中主要成分丹参酮ⅡA进行含量测定。结果在薄层色谱中以地龙、橘叶对照药材为对照能较好地鉴别出制剂中的地龙、橘叶;薄层扫描法能准确测定出制剂中丹参酮ⅡA的含量,丹参酮ⅡA在0.41~2.4μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9987,平均加样回收率为96.5%,RSD为2.21%。结论此方法简单可行,能快速准确地对乳块消颗粒进行鉴别和含量测定。     

解毒止泻结肠缓释微丸释放度的方法学研究

目的建立解毒止泻结肠缓释微丸释放度的检查方法并进行方法学验证。方法采用高效液相色谱法测定制剂中槲皮素的含量,参照《中国药典》2010年版的规定研究本制剂的释放度检查方法并进行方法学验证。结果依次在人工胃液、人工肠液、人工结肠液中对微丸进行释放度考察,人工胃液2 h不释放,人工肠液3 h内释放在15%以内,人工结肠液5 h释放完全。结论该法简单、灵敏、准确,可有效监控本品的质量。     

丹参酮IIA通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路对食管癌细胞放疗敏感性的影响

目的 研究丹参酮II_A对人食管癌细胞放疗敏感性的影响，并基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路探讨其潜在机制。方法 以人食管癌Eca-109细胞为受试细胞，分别采用不同浓度丹参酮II_A和不同放射剂量处理Eca-109细胞，48 h后MTT法检测细胞增殖活力，计算丹参酮II_A半数抑制浓度（IC₅₀）和放射的IC₅₀，分别作为后续实验丹参酮II_A浓度和放射剂量。取对数生长期Eca-109细胞，设对照组、丹参酮II_A组、放射组、丹参酮II_A＋放射组、丹参酮II_A＋放射＋PI3K抑制剂（LY294002）组。通过平板克隆实验、MTT法、流式细胞术、荧光质粒转染法检测细胞克隆形成能力、增殖活力、凋亡率和自噬状况，RT-PCR、Western blotting法检测细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路相关mRNA和蛋白表达。结果 丹参酮Ⅱ_A和放射对人食管癌Eca-109细胞增殖活力的抑制作用均呈现剂量相关性，丹参酮II_A IC₅₀为8.75 mmol/L，放射量IC₅₀为4.63 Gy。与对照组相比，丹参酮II_A组、放射组、丹参酮II_A＋放射组、丹参酮II_A＋放射＋LY294002组细胞克隆形成能力和增殖活力明显降低，凋亡率和自噬体数量明显升高（P＜0.05）；PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白表达量明显降低（P＜0.05）；Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、LC3-I、LC3-II蛋白表达量及Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3/Caspase-3、LC3-II/LC3-I明显升高（P＜0.05）。与丹参酮II_A组或放射组相比，丹参酮II_A＋放射组和丹参酮II_A＋放射＋LY294002组对各检测指标的调控作用明显增强（P＜0.05）。与丹参酮II_A＋放射组相比，丹参酮II_A＋放射＋LY294002组对各指标的调控作用明显增强（P＜0.05）。结论 丹参酮II_A可能通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路，抑制细胞增殖并促进其凋亡与自噬，进而增强人食管癌细胞放疗敏感性。     

Tanshinone IIA elicited vasodilation in rat coronary arteriole: Roles of nitric oxide and potassium channels

Salvia miltiorrhiza has been widely used in the treatment of various cardiovascular diseases due to its ability to improve coronary microcirculation and increase coronary blood flow. Tanshinone II_A, the major active lipophilic ingredient responsible for the beneficial actions of Salvia miltiorrhiza, was shown to induce vasodilation in coronary arteries. But its effects on coronary arterioles remain unknown. The purpose of this study was to investigate the effects of tanshinone II_A on isolated rat coronary arteriole and the underlying mechanisms. Coronary arterioles were carefully dissected, cannulated and pressurized. Tanshinone II_A-elicited vascular inner diameter change was recorded by a computerized diameter tracking system. To investigate the mechanisms governing the vasodilative effects of tanshinone II_A, the roles of endothelium, endothelium-derived vasoactive factors and potassium channels were assessed respectively. Endothelium denudation, inhibition of nitric oxide synthase (NOS), inhibition of the cytochrome P450 epoxygenase, and blockade of the large conductance calcium(Ca²⁺)-activated potassium channels (BKca) significantly decreased the vasodilation elicited by Tanshinone II_A. The results indicated that tanshinone II_A induces an endothelium-dependent vasodilation in coronary arterioles; nitric oxide (NO) and cytochrome P450 metabolites contribute to the vasodilation; activation of BKca channels plays an important role in the vasodilation.     

基于网络药理学和分子对接的丹参酮IIA治疗糖尿病肾病的机制研究

目的 基于网络药理学和分子对接的方法研究丹参酮II_A治疗糖尿病肾病的分子的机制。方法 利用Swiss Target Prediction、TCMSP、PharmMapper、GeneCards平台预测丹参酮II_A的作用靶点,从OMIM、DrugBank、TTD、GeneCards数据库中筛选获得糖尿病肾病的相关靶点。将得到的丹参酮II_A的作用靶点与疾病靶点取交集得到潜在靶点,构建蛋白质相互作用（PPI）网络,并通过网络拓扑分析筛选核心靶点。采用Metascape平台分析对交集靶点进行基因本体（GO）功能富集分析与京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。最后运用AutoDock Vina 1.1.2对丹参酮II_A和核心靶点之间进行分子对接验证。结果 共筛选出96个丹参酮II_A调控糖尿病肾病的潜在靶点,通过网络拓扑分析中的度（degree）值筛选出白蛋白（ALB）、蛋白激酶B1（AKT1）、白细胞介素-6（IL-6）、血管内皮生长因子（VEGFA）、肿瘤坏死因子（TNF）、肿瘤蛋白p53（TP53）、丝裂原激活蛋白激酶8（MAPK8）、胱天蛋白酶3（CASP3）8个核心靶点;GO富集分析筛选出活性氧代谢过程、细胞迁移的正向调节、氧化应激反应、细胞死亡的正向调节等20个生物学过程,KEGG富集筛选出流体剪切应力和动脉粥样硬化通路、肿瘤坏死因子信号通路、叉头转录因子（FoxO）信号通路、VEGF等20条通路。分子对接验证结果显示,核心靶点与丹参酮II_A之间均有良好的结合活性。结论 本研究表明丹参酮II_A可能通过多靶点、多通路调控糖尿病肾病。     

超微粉碎对七厘散主要活性成分在模拟胃肠环境中稳定性的影响

目的:研究微粉碎对七厘散主要活性成分血竭素和羟基红花黄色素A(HSYA)在模拟胃肠道环境中稳定性的影响。方法:将七厘散细粉或七厘散微粉分别置于人工胃液和人工肠液中,定时测定两种粉体中血竭素及HSYA的剩余量。结果:在研究时间6 h内,与初始含量相比,七厘散细粉和微粉中血竭素在人工胃液和人工肠液中的剩余量、HSYA在人工肠液中的剩余量均没有发生显著变化。在人工胃液中,与七厘散细粉相比,七厘散微粉中HSYA剩余量发生显著性变化的时间较晚,且降解速率更慢。结论:在人工胃液中,对七厘散进行超微粉碎之后没有加剧HSYA的不稳定性,超微粉碎对七厘散中HSYA具有保护作用。     

地龙湿法超微粉碎提取物在模拟胃肠环境中的降解研究

研究地龙湿法超微粉碎提取物在模拟胃肠环境中的降解情况。采用调整溶液pH及膜生物反应器原理两种方法终止酶解反应、Bradford法检测地龙蛋白浓度变化情况、SDS-PAGE凝胶电泳法检测地龙蛋白的降解情况、HPLC方法检测地龙小分子物质降解情况。结果表明, 地龙蛋白在人工胃液中发生完全降解; 在人工肠液中, 高分子量蛋白发生较大程度降解, 而低分子量蛋白未发现明显降解。地龙小分子物质在人工胃液中未发生明显降解; 在人工肠液中出现明显降解, 并且出现了新的小分子物质。地龙湿法超微粉碎提取物在体内发挥药效作用的物质可能是已降解后的多肽、氨基酸及可稳定存在于肠液环境的小分子物质。     

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液联合贝那普利治疗原发性高血压的疗效观察

目的探究丹参酮ⅡA磺酸钠注射液联合贝那普利治疗原发性高血压的临床效果。方法选取2011年9月—2014年9月上海市杨浦区五角场镇社区卫生服务中心收治的原发性高血压患者80例,随机分为对照组和治疗组,每组40例。对照组患者每天8:00口服盐酸贝那普利片,10 mg/次,1次/d。治疗组静脉注射丹参酮ⅡA磺酸钠注射液60 mg/次,以0.9%氯化钠注射液250 m L稀释,1次/d;同时口服盐酸贝那普利片,用法用量同对照组。两组均连续治疗2周后评价临床疗效。结果治疗后,对照组和治疗组总有效率分别为72.5%、90.0%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组收缩压、舒张压、胆固醇、三酰甘油较同组治疗前显著降低,高密度脂蛋白胆固醇显著升高,同组治疗前后差异具有统计学意义(P0.05);治疗组的改善程度优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论丹参酮ⅡA磺酸钠注射液联合贝那普利治疗原发性高血压具有较好的临床疗效,能够明显降低患者的血压和血脂水平,值得临床推广应用。     

抗分枝杆菌活性成分——丹参酮的胆汁排泄与肝内转化

大鼠由十二指肠给丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮及丹参的乙醇粗提物(总酮)后,药物可由胆汁排出。在胆汁中的含量采用高效液相色谱法测定。实验发现给总酮组胆汁中丹参酮Ⅱ_A的排出量为丹参酮Ⅱ_A组排出量的5～10倍。在给隐丹参酮组,发现隐丹参酮在肝内可能转化为丹参酮Ⅱ_A用抑菌指标亦可在肝内检出抗分枝杆菌607的活性成分。     

基于HPLC多指标成分定量联合OPLS-DA、EW-TOPSIS法的天丹通络胶囊质量评价研究

目的 对天丹通络胶囊进行质量评价研究。方法 采用HPLC法测定天丹通络胶囊中天麻素、巴利森苷E、巴利森苷、奇壬醇、豨莶苷、豨莶精醇、洋川芎内酯H、洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、丹参素、丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A，结合正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）法和熵权优劣解距离（EW-TOPSIS）法对天丹通络胶囊产品质量优劣进行评价。结果 天麻素、巴利森苷E、巴利森苷、奇壬醇、豨莶苷、豨莶精醇、洋川芎内酯H、洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、丹参素钠、丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A的平均回收率分别为98.77%、99.45%、100.05%、96.94%、97.99%、98.43%、98.08%、97.90%、98.90%、97.86%、100.14%、96.97%、99.32%，RSD值分别为1.09%、1.32%、0.63%、1.43%、1.51%、1.30%、1.57%、0.83%、1.64%、0.94%、0.70%、1.41%、1.37%。15批天丹通络胶囊样品明显分成3类。丹酚酸B、巴利森苷、豨莶苷、巴利森苷E、天麻素和洋川芎内酯A可以作为影响天丹通络胶囊产品质量的关键成分。EW-TOPSIS分析法可确定15批天丹通络胶囊样品质量优劣综合排序。结论 所建立方法操作便捷，结果准确可靠，为提升天丹通络胶囊的整体质量控制方法提供了参考和借鉴。     

原子吸收分光光度法测定炮制朱砂中可溶性汞含量

本文采用原子吸收分光光度计测定炮制朱砂在人工肠液和人工胃液中可溶性汞的含量。本方法灵敏度高，重出性好，平均回收率为１０２．２７％（ｎ＝６），ＲＳＤ＝３．１９％。应用本方法对贵州，湖南和北京等厂家及医院所使用的朱砂进行了测定，结果表明：朱砂中的中溶性汞盐主要是在人工胃液中溶解，在人工肠液中溶解极少。朱砂炮制方法不同。可溶性汞盐的含量也不同，球磨法高，水飞法低。