杜仲醇提取物可促进根尖周炎模型大鼠骨组织的愈合

文题释义：杜仲：杜仲是中国传统的中药药材，其具有增加机体免疫性、强身健骨的疗效，研究表明杜仲可以促进成骨细胞的增殖并且可以促进骨组织的愈合。近年来对于杜仲的研究主要集中于其有效成分的提取及分析。 杜仲醇：是杜仲的主要有效成分之一，可以增强关节炎大鼠骨组织的强度，并且具有降血压以及促进伤口愈合的能力。 背景：目前关于杜仲的研究主要集中于其治疗骨关节炎能增强骨组织的愈合能力，但是关于杜仲对根尖周炎骨破坏的修复作用尚未见报道。 目的：探讨杜仲醇提取物对根尖周炎大鼠组织蛋白酶K的影响。 方法：选取24只SD大鼠随机分为根尖周炎组20只及对照组4只，根尖周炎组于右侧下颌第一磨牙开髓后建立根尖周炎模型，对照组不做任何处理。饲养4周后，取根尖周炎组及对照组各4只拍摄MICRO-CT，计算根尖周炎骨破坏量，确认大鼠根尖周炎动物模型构建成功。饲养第5周，将剩余16只根尖周炎大鼠随机分为杜仲醇提取物组及生理盐水组，每组8只，每天灌胃杜仲醇提取物5 mL/kg或等量生理盐水。灌胃4周后，每组取4只大鼠拍摄MICRO-CT，分析杜仲醇提取物对根尖周骨组织的修复能力，另外取4只大鼠采用免疫组化染色观察右下颌第一磨牙牙槽骨组织蛋白酶K的表达。 结果与结论：①MICRO-CT结果显示，对照组骨吸收体积为(0.223±0.009) mm³，根尖周炎组骨吸收体积为(0.945±0.037) mm³，两组骨吸收量比较差异有显著性意义(P=0.00)，说明大鼠根尖周炎模型构建成功；②灌胃4周后，MICRO-CT结果显示杜仲醇提取物组骨吸收体积较灌胃前减小，差异有显著性意义(P < 0.05)；③灌胃4周后，免疫组化结果显示杜仲醇提取物根尖周炎骨破坏标志因子组织蛋白酶K的表达较灌胃前降低，差异有显著性意义(P < 0.05)；④结果表明，杜仲醇提取物可以抑制骨破坏标志因子组织蛋白酶K的表达，并且可以促进大鼠根尖周炎骨组织的愈合。 ORCID: 0000-0001-5450-7016(吴大雷) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程     

杜仲水/醇提取物促进兔脂肪基质干细胞增殖及成骨分化

背景：传统中药杜仲可以促进脂肪间充质干细胞成骨分化。 目的：探讨杜仲水/醇提取物对脂肪基质干细胞的增殖作用和成骨分化影响。 方法：取兔脂肪组织体外培养脂肪基质干细胞,传代3次后进行细胞增殖及成骨诱导分化。分为诱导培养基中分别含有杜仲水/醇提取物 0.2,0.3,0.4,0.5 g/L 4个稀释度,对照组加入等量磷酸盐缓冲液。成骨诱导6 d后进行各组细胞增殖活力的检测和碱性磷酸酶的测定,14 d进行茜素红染色及钙化结节计数。 结果与结论：杜仲水/醇提取物对脂肪基质干细胞的增殖无明显影响,但均可明显刺激上调碱性磷酸酶的活性,相同稀释度下杜仲醇提取物的调节作用大于水提取物,且在0.4~0.5 g/L稀释度下对钙化结节的形成状况和数量有显著促进作用(P < 0.05)。说明杜仲水/醇提取物有促进脂肪基质干细胞向成骨细胞转化的作用,杜仲醇提取物作用优于杜仲水提取物。     

杜仲对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达的影响 水提液与醇提液有区别吗?

背景:以往实验证实杜仲能促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,但对促进成骨分化的分子机制报道很少。目的:观察中药杜仲水/醇提取物对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达的影响方法:盐杜仲2g,分别加蒸馏水或甲醇至15mL,室温振荡1h,静置过夜后,15000r/min离心10min,弃沉淀。水浸上清不经处理即得水提取物;甲醇浸上清经真空浓缩,再加水至15mL溶解剩余物后,得醇提取物水、醇提取物,用0.22μm滤膜过滤后于-20℃保存。取2月龄SD大鼠6只,体外培养至第3代SD大鼠骨髓基质细胞进行杜仲水/醇提取物诱导,诱导物分为1×10-2,1×10-3,1×10-4和1×10-54个稀释度;阴性对照组加入PBS;诱导培养6d。以免疫细胞化学法测定诱导6d的骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达。应用反转录-聚合酶链反应方法测定1×10-3,1×10-4稀释度诱导3d的骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素的基因表达。结果与结论:细胞免疫化学显示,杜仲水/醇提取物对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白的表达均有显著的刺激作用,以1×10-4的稀释度作用最强,且醇提取物的作用大于水提取物;骨保护素的表达却无显著变化。反转录-聚合酶链反应显示,水提取物对诱导3d后大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白的基因表达量显著高于醇提取物,骨保护素未检测出表达。证实杜仲水/醇提取物诱导骨髓基质细胞成骨分化与刺激骨桥蛋白表达相关,与骨保护素无关;水提取物促进骨髓基质细胞骨桥蛋白表达早于醇提取物。     

杜仲诱导大鼠间充质干细胞成骨分化中成骨与成脂相关转录因子的表达

背景:杜仲对骨质疏松具有明显的干预和治疗作用,前期研究发现杜仲能够显著诱导骨髓间充质干细胞成骨分化和抑制成脂分化,而对于学术界广泛认同的成骨和成脂相关转录因子的表达变化还未见报道。目的:观察杜仲诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中成骨和成脂相关转录因子表达的变化。方法:制备杜仲水/醇提取物,诱导培养至第3代的SD大鼠间充质干细胞,提取物按生药2g,定容至15mL体积为原液,诱导时按10-3、10-4倍稀释度稀释。诱导实验分为6组:阴性对照组(加入与诱导物等量的PBS);阳性对照组(诱导物为地塞米松0.01mmol/L,β-甘油磷酸钠10mmol/L,L-抗坏血酸钠50mg/L);杜仲水提取物10-4稀释度诱导组;杜仲水提取物10-3稀释度诱导组;杜仲醇提取物10-4稀释度诱导组;杜仲醇提取物10-3稀释度诱导组,各组于诱导之后的第15天终止培养。RT-PCR和荧光定量PCR方法检测成骨分化转录因子基因Runx2、Osterix和成脂分化转录因子基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白的表达。结果与结论:Runx2除在10-3稀释度水提取物组表达下调,在10-4稀释度醇提取物组上调外,其他各组无显著变化;Osx在各诱导组的表达均明显下调;过氧化物酶体增殖物激活受体γ在各组中无显著变化;脂肪酸结合蛋白在各组均下调。提示杜仲诱导间充质干细胞成骨分化与成脂相关转录因子脂肪酸结合蛋白的表达抑制相关。     

杜仲提取物对运动后小鼠血清尿素氮、肝糖原和血乳酸含量的影响

目的:研究杜仲醇提水溶部位(DT)对小鼠运动及运动后代谢变化的影响。方法:对小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素氮、肝糖原、血乳酸含量进行测定。结果:杜仲醇提水溶部位不影响小鼠正常体重。延长负重游泳时间、降低运动后血清尿素氮含量,增加肝糖原含量,降低血乳酸含量。结论:杜仲醇提水溶部位具有抗疲劳作用。     

斯赤列提取物抑制骨关节炎模型大鼠的异常血管新生

背景：课题组前期研究表明,斯赤列提取物具有促进成骨细胞增殖分化,促进骨折愈合、抗炎、抗氧化等作用,可有效缓解骨关节炎的发展。血管内皮生长因子则为骨关节炎严重程度评价的生物标记物。目的：探讨斯赤列两种提取物(甲醇提取物SAW-ME、二氯甲烷提取物SAW-DCE)对抗骨关节炎血管新生的作用及机制。方法：(1)采用前交叉韧带切断法复制大鼠骨关节炎模型(模型组),分别给予SAW-ME、SAW-DCE干预,并设假手术组为对照。运用免疫组化、免疫荧光等方法检测大鼠关节中血管内皮生长因子A、血清中血管内皮生长因子和软骨下骨H型血管的变化。(2)以血管内皮细胞EA.hy926为研究对象,给予SAW-ME、SAW-DCE干预,MTT法检测对细胞增殖的影响;采用血管内皮生长因子诱导EA.hy926细胞,复制血管新生模型,进行划痕实验、成管实验研究其作用和机制。(3)采用EA.hy926细胞进行转录组测序,分析给予SAW-DCE干预后细胞差异基因及相关功能的特征变化。结果与结论：(1)SAW-ME、SAW-DCE可下调骨关节炎大鼠膝关节软骨中血管内皮生长因子A的表达,减少关节中H型血管的生成;SAW-ME可...     

骨关节炎诱导软骨细胞凋亡和细胞外基质降解的机制

背景:研究发现长链非编码RNA IFNG-AS1在类风湿关节炎中发挥调控作用,但是其在骨关节炎中的作用仍不明确.目的:探究长链非编码RNA IFNG-AS1调控miR-376b-3p/AKT丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)轴对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡和细胞外...     

红姜提取物保护早期膝骨关节炎模型大鼠的关节软骨

背景:研究报道,联合使用姜提取物降低血清促炎细胞因子白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α等水平与膝骨关节炎中软骨损伤的减轻有关。目的:观察红姜提取物灌胃对早期膝骨关节炎大鼠关节软骨保护情况及血清白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和软骨Col2α1 mRNA水平表达的影响,探讨红姜提取物对早期膝骨关节炎大鼠关节软骨保护作用及可能机制。方法:将50只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、红姜低剂量组、红姜高剂量组、阳性对照组,每组各10只。除空白组外,其余40只大鼠膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶0.2 mL+0.03 mol/L的L-半胱氨酸混合溶液,建造膝骨关节炎模型。空白组与模型组常规饲养;红姜低剂量组、红姜高剂量组、阳性对照组分别予50 mg/kg的红姜提取物水溶液、100 mg/kg红姜提取物水溶液、18 mg/kg的塞来昔布胶囊水溶液灌胃,所有干预每日1次,共持续4周。治疗4周后取大鼠膝关节软骨进行番红O-固绿染色,并对关节软骨行Mankin评分,检测血清中白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及软骨中Col2α1 mRNA表达水平。实验方案经广州中医药大学动物实验伦理委员会批准,批准号:20190917002。结果与结论:①膝关节软骨的病理切片显示,模型组及各治疗组均有软骨基质流失,各治疗组Mankin评分均比空白组评分高(P<0.05),比模型组评分低(P<0.05),其中红姜高剂量组与阳性对照组评分差异无显著性意义(P>0.05),均显著低于红姜低剂量组(P<0.05);②血清白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α结果显示,阳性对照组、红姜高剂量组、红姜低剂量组均比空白组表达上调(P<0.05),均比模型组表达下调(P<0.05),且各治疗组间水平阳性对照组<红姜高剂量组<红姜低剂量组(P<0.05);③软骨中Col2α1 mRNA结果显示,空白组与红姜高剂量组、阳性对照组的Col2α1 mRNA表达差异无显著性意义(P>0.05),模型组和红姜低剂量组Col2α1 mRNA表达相较其他3组均显著上调(P<0.05);④结果说明,红姜提取物可能主要通过抑制白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α等炎症因子的表达,达到了保护膝骨关节炎关节软骨作用,从而延缓膝骨关节炎的发展进程;且相对于低剂量组,红姜提取物高剂量组的抗炎效果更好。     

环状RNA circ_0040646靶向抑制miR-188-3p调控膝骨关节炎软骨细胞的增殖、分化和凋亡

背景:环状RNA在越来越多的疾病中发挥重要的调控作用,近期有研究显示环状RNA在膝骨关节炎中存在异常表达,因此研究环状RNA在骨关节炎中的作用对阐明膝骨关节炎的发病机制具有重要作用.目的:探讨circ_0040646调控miR-188-3p对膝骨关节炎软骨细胞增殖、分化和凋亡的影响.方法:采用实时荧光定量PCR检测ci...     

杜仲醇提取物对兔下颌牵张成骨的影响

背景：目前牵张成骨由于治疗周期长、并发症较多成为临床广泛运用的瓶颈,不能满足临床推广需要。 目的：以兔下颌骨牵张动物模型为实验平台,观察全身运用杜仲醇提取物对牵张新骨再生的影响。 方法：24只新西兰大白兔随机均分为对照组及实验组,建立兔下颌单侧牵张模型,牵张速率为每12 h 1 mm。在牵张期2次/d,实验组及对照组分别予以灌胃杜仲醇提取物及等量生理盐水,牵张结束后6周处死动物收集标本行成骨检测。 结果与结论：两组动物牵张间隙内均可观察到新骨生成。牵张成骨结束后6周下颌骨CT图像显示实验组兔牵张间隙舌侧骨皮质生成良好,颊侧骨皮质连续,牵张间隙可见均匀骨质生成桥接;下颌骨核素扫描显示实验组兔下颌骨牵张间隙表现为核浓集,强度明显强于对照组;X射线显示实验组牵张间隙完全桥接,新生成骨质密度均匀,可见上下侧骨皮质形成良好;Micro-CT图像显示实验组骨皮质部分形成较好,骨小梁分布较为均匀,骨小梁明显较对照组粗壮,对照组部分区域仍有囊性变;Micro-CT微结构参数检测显示实验组骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量和连接密度均显著高于对照组;组织学观察显示与对照组比较,实验组牵张间隙中有较为成熟的束状骨,骨小梁方向较为规律。实验结果显示全身运用杜仲醇提取物可有效促进兔下颌快速骨牵张的新骨再生。     

中药露蜂房醇提取物对人红白血病K562细胞的生长抑制及凋亡诱导作用

目的：研究中药露蜂房(Nidus Vespae，NV)醇提取物对K562细胞的作用及其机制。方法：利用^3H-TdR掺入、透射电镜、原位末端标记(TUNEL)技术、免疫组织化学和图象分析等方法。结果：不同浓度NV醇提取物对。K562细胞生长具有明显抑制作用(27％～56％)。NV醇提取物组K562细胞呈典型的凋亡形态学改变，其Bcl-2蛋白表达显著减弱、Bax蛋白表达显著增强。结论：中药NV醇提取物可明显抑制K562细胞增殖，其作用机制可能是通过Bcl-2、Bax的表达，从而诱导白血病细胞凋亡。     

杜仲醇提取物诱导骨髓间充质干细胞成骨分化中的Wnt信号途径

背景：近年来,中药及中药有效部分对骨质疏松的干预和治疗作用的报道较多,但涉及细胞成骨分化调控的信号途径的报道较少。 目的：观察杜仲诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Wnt信号途径相关基因表达的变化。 方法：将第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,接种到6孔培养板中,每孔1×103个细胞,24 h后更换诱导培养基(含体积分数为7.5%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)加1/1 000浓度的杜仲醇提取物)。阴性对照组仍为正常培养基培养。诱导8 h,1 d,3 d和7 d时采用RT-qPCR法测定Wnt信号途径中Fzd和LRP受体系列、β-catenin、核内Wnt调控靶基因系列及Wnt抑制因子(WIF1)等表达变化。 结果与结论：与阴性对照组比较,诱导3 d后Fzd2表达升高11.86倍,Fzd3升高达到2倍;诱导7 d后,Fzd2表达升高5.12倍,Fzd3恢复到正常水平;β-catenin 在诱导3 d时表达升高达2倍;WIF1在诱导3 d和7 d后表达显著下降。结果提示Wnt信号途径可能参与了杜仲促骨髓间充质干细胞成骨分化过程。     

回阳生肌膏提取物对正常皮肤及慢性溃疡创缘成纤维细胞增殖的影响

目的：比较回阳生肌膏提取物对人正常皮肤成纤维细胞（nHFB）及慢性溃疡创缘成纤维细胞（uHFB）增殖的影响。方法:〖HTSS〗组织块法体外培养nHFB及uHFB；采用 Alarmar blue摄入法观察不同浓度回阳生肌膏水提取物、醇提取物对两种细胞增殖的影响；并采用流式细胞仪检测其水提取物、醇提取物对两种细胞细胞周期的影响。结果:回阳生肌膏水提取物、醇提取物分别作用上述两种细胞24 h后，细胞增殖速度均增加。回阳生肌膏醇提物分别在0.027-0.425 mg/L和0.027-0.213 mg/L范围对nHFB和uHFB的增殖有促进作用（P<0.05或P<0.01）；回阳生肌膏水提物分别在0.075-2.400 mg/L和0.150-1.200 mg/L范围对nHFB和uHFB增殖有明显促进（P<0.05或P<0.01）；流式细胞仪检测结果显示，对于nHFB，水提物作用24 h后 S期比例明显上升（Pμ<0.01），G2/M期比例无明显升高，细胞增殖指数（PrI）明显增加（P<0.01），醇提物作用24 h后S期、G2/M期比例均上升（P<0.05），细胞增殖指数（PrI）明显增加（P<0.01）；而对于uHFB，水提物作用24 h后 S期、G2/M比例上升均不显著，但PrI指数有增加（P<0.05），醇提物作用24 h后 S期比例明显上升（P<0.01），G2/M期比例无明显升高，PrI明显增加（P<0.01）。结论：回阳生肌膏无论水提取物、醇提取物皆可不同程度促进nHFB及uHFB的增殖，其醇提物作用更迅速；这种促增殖作用可能是通过调节细胞周期使更多细胞进入S期而实现的。     

银耳蜜环菌醇提取物对心血管系统的药理作用及其毒性作用的研究

银耳蜜环菌醇提取物是银耳(TremellaFuciformis Berk)和蜜环菌[AmillariellaMellea(Vahl.ex Fr.)Karst.]醇提取物的等量混合液(简称银蜜醇提取物),临床试用于防治冠心病有一定疗效,我们对此混合液及单一的银耳醇提取物进行了实验研究。     

丝瓜络多糖对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

目的:分离提纯丝瓜络多糖,观察其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,并探讨其作用机制。方法:采用热水浸提法和DEAE-cellulose柱层析法对丝瓜络多糖进行初步分离和提纯,并对分离组分进行红外光谱分析。运用油红O染色法,观察丝瓜络多糖对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,并通过RT-q PCR观察3T3-L1前脂肪细胞分化时CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorsγ,PPARγ)和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA的表达情况。结果:经DEAE-cellulose柱层析法分离得到2个多糖组分,丝瓜络提取物Ⅰ(RLFⅠ)和丝瓜络提取物Ⅱ(RLFⅡ),红外光谱分析结果表明2个组分均为多糖类物质。RLFⅠ具有显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化及甘油三酯合成的作用(P0.05),RLFⅡ则无显著效应。与对照组相比,RLFⅠ处理组3T3-L1前脂肪细胞C/EBPβ、PPARγ和C/EBPα的mRNA表达水平明显降低(P0.05)。结论:丝瓜络多糖RLFⅠ具有显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的能力,其作用机制可能与下调脂肪细胞分化转录因子C/EBPβ、PPARγ和C/EBPα有关。     

玄参提取物对大鼠血液流变性、凝固性和纤溶活性的影响

目的探讨玄参提取物对大鼠血液流变性、凝固性和纤溶活性的影响.方法观察玄参的石油醚、乙醇、水提取物灌胃12 d后,对大鼠血小板聚集率、血液黏度、血液凝固性、纤维蛋白溶解活性等方面的影响.结果玄参醚、醇、水提取物有显著抑制血小板聚集性、降低PAI-l的作用.结论玄参醚、醇、水提取物有抗血小板聚集、增强纤维蛋白溶解活性作用.     

MMP3在早期骨关节炎模型软骨下骨的表达及其意义

目的: 研究早期骨关节炎软骨下骨基质金属蛋白酶3(MMP3)的表达情况,为阐述其在骨关节炎致病中的重要作用提供依据。方法: 大鼠分为实验组(n=30)和对照组(n=30)。实验组切除右膝内侧半月板并切断内侧副韧带,对照组仅切开关节囊。于术后1、2、4周取右膝关节标本,病理检查验证造模成功后,采用qPCR技术及免疫组化技术从基因水平及蛋白水平全面分析软骨下骨MMP3的表达情况。结果: (1)术后1周,软骨下骨的MMP3在实验组的表达量明显升高,是对照组的8.34倍(P＜0.05);术后2周,MMP3在实验组的表达量也升高,是对照组的4.85倍(P＜0.05),但相对于术后1周,表达量有所下降;术后4周,2组的MMP3表达量无显著差异;(2)术后1周与术后2周,实验组软骨下骨区检测到大量的MMP3阳性细胞,以小单核细胞及多核巨细胞为主,术后4周实验组、对照组及阴性对照组织切片均未检测到MMP3阳性细胞。结论: 软骨下骨MMP3表达在早期骨关节炎致病机制中起了重要作用。     

养阴生津药提取物对大鼠血液流变性、凝固性的影响

目的探讨养阴生津药对大鼠血液流变性、凝固性的影响。方法观察养阴生津药生地黄、石斛、南沙参、天门冬、麦门冬、玄参的石油醚、乙醇、水提取物灌胃给药12d后对大鼠血小板聚集率、血液粘度、血液凝固性等方面的影响。结果生地黄水提、石斛醇提、南沙参醚、醇、水提、麦门冬醚、醇、水提、天门冬醚、醇、水提、玄参醚、醇、水提取物有显著降低大鼠血小板聚集率作用 ;南沙参水提物对PT有非常显著缩短作用 ;石斛醇、水提物对t-PA活性有非常显著增加作用 ;生地黄醚、醇提、石斛醚提、天门冬醇提、玄参醚、醇、水提物对PAI有显著降低作用。生地黄醚、醇、水提物有使t-PA活性显著降低作用。实验药物对全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、细胞压积均无显著影响。结论部分养阴生津药提取物具有特点各异的抑制血小板聚集、抗凝、溶栓作用     

瑞香狼毒甲醇提取物抗瘤免疫机理初探

有报道瑞香狼毒复方或提取物用于恶性肿瘤治疗有一定疗效[1 3 ] ,但有关其抗瘤免疫机理研究资料较少。本文用瑞香狼毒甲醇提取物 ,在体内外对其抗瘤免疫机理进行了初步探讨。1　材料与方法1 1　试剂与动物　瑞香狼毒甲醇提取物 (醇提物 )为白色粉末 ,不能直接水溶 ,用时以少量二甲基亚砜(DMSO)溶解 ,再用完全培养液稀释供细胞培养用或生理盐水稀释供腹腔注射用 ,DMSO终浓度均为1%。KM小鼠 ,18～ 2 2g。1 2　醇提物体外对脾细胞生长的影响　在小鼠脾细胞 (96孔板 ,每孔 5× 10 5个细胞 )中加不同剂量醇提物作为实验孔 ,对照孔加等量完全…     

miR-34a-5p/PLCD3轴调控骨关节炎进展的机制

背景：目前已有针对miRNA/mRNA轴调节骨关节炎疾病进程的分子机制研究。先前生物信息学研究发现具有临床预测价值的mRNA(磷脂酶Cδ3:phospholipase C delta 3,PLCD3)及其靶向miRNA(miR-34a-5p),尚缺实验验证其调控骨关节炎的具体作用及机制。目的：探讨miR-34a-5p/PLCD3轴对骨关节炎进展的调控作用及机制。方法：选择15例膝骨关节炎患者的滑膜为骨关节炎组,同时选择同期因创伤致髌骨骨折行内固定术的15例年轻患者的健康滑膜为对照组,Real-time PCR法检测滑膜中PLCD3及miR-34a-5p的表达。通过细胞转染的方法,将人滑膜关节炎成纤维细胞(human fibroblast like synovial cells-osteoarthritis,HFLS-OA)进行处理,并分为miR-34a-5p模拟物组、pCDH-PLCD3组、miR-34a-5p模拟物+pCDH-PLCD3组、miR-34a-5p抑制剂组、si-PLCD3组、miR-34a-5p抑制剂+si-PLCD3组,通过Real-time PCR法检测PLCD3和...