4-1BB、CD8在口腔扁平苔藓组织中的表达研究

目的 检测共刺激信号4-1BB及CD8在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)组织中的表达,探讨OLP病损中4-1BB介导CD8⁺ T细胞免疫应答的潜在机制。方法 选取31例OLP患者(糜烂型15例、非糜烂型16例),15例健康成人(对照组)为研究对象,收集其临床及病理资料,采用免疫组织化学法检测局部组织中4-1BB、CD8的表达情况。结果 OLP患者局部组织中4-1BB及CD8的表达高于对照组(P<0.05),且两者表达呈正相关(r=0.389,P<0.05),糜烂型OLP患者中CD8、4-1BB表达高于非糜烂型(P<0.05)。在OLP不同的临床亚组中,VAS评分、REU评分及基底细胞损伤程度均表现出差异(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,CD8与基底细胞损伤程度呈正比(P<0.05),CD8、4-1BB分别与VAS评分、REU评分存在正相关性(P<0.05)。结论 OLP患者局部组织中4-1BB表达升高,其与疾病活动进展程度呈正相关,4-1BB可能通过调控CD8⁺ T细胞参与OLP的发生发展。     

Gli1阳性细胞在牙周组织发育中的时空分布特点及功能研究

目的 利用转基因小鼠探究牙周膜内Gli 阳性（Gli1 ⁺）细胞的表达分布以及Gli1 ⁺细胞在牙周组织发育过程中的作用。方法 收集3、6和8周龄Gli1 ^lacZ/+小鼠下颌骨,通过β-半乳糖苷酶组织化学染色（X-gal染色）观察牙周膜内Gli1 ⁺细胞的时间和空间分布特点。然后,通过注射他莫昔芬诱导3周龄Gli1-Cre ^ERT2/+;R26R ^tdTomato/+小鼠表达红色荧光蛋白tdTomato,对Gli1 ⁺细胞及其子代细胞（tdTomato ⁺细胞）进行动态追踪。结果 3周龄小鼠牙周膜内分布大量Gli1 ⁺细胞,随着年龄的增长,Gli1在牙周膜内的数量逐渐减少（P<0.05）。tdTomato ⁺细胞随着诱导时间的延长,数量逐渐增加（P<0.05）,且逐渐分化成熟为成纤维细胞、牙骨质细胞和骨细胞。结论 牙周膜内Gli1 ⁺细胞具有多向分化的潜能,是牙周组织发育过程中重要的细胞来源。     

敲除Nrf2对4NQO诱导的小鼠舌癌变过程中增殖与分化的影响

目的 研究核因子E2相关因子(Nrf2)在4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的小鼠舌癌发生中对增殖和分化的影响。方法 野生型(WT)与Nrf2基因敲除(Nrf2^-/-)C57BL/6J小鼠各36只,其中阴性对照组10只,饮用纯净水,4NQO组26只,饮用4NQO水溶液(50μg/ml)16周。24周末处死小鼠,取舌组织用于病理学分析、Brdu和免疫组化(IHC)染色。通过生物信息学分析Nrf2与KLF4的相关性。结果 构建了4NQO诱导的小鼠舌癌模型,并发现Nrf2^-/-小鼠的舌癌发生率和Brdu染色的阳性细胞数明显高于WT小鼠。IHC染色显示,Nrf2^-/-小鼠舌组织中分化相关基因KLF4、Loricrin、CK5的表达显著低于WT小鼠。在舌癌和正常组织中Nrf2的表达与KLF4成显著正相关。结论 敲除Nrf2可以促进舌癌发生和细胞增殖,并抑制癌变过程中的细胞分化。     

骨形态发生蛋白2对成牙骨质细胞中硬化蛋白表达调控机理的研究

目的 探索成牙骨质细胞OCCM-30中骨形态发生蛋白2（BMP2）对硬化蛋白（SOST）表达的调控机制。方法 用2种质量浓度的BMP2（50、100 ng·mL^-1）处理成牙骨质OCCM-30细胞3、5、7 d,相同体积的PBS液为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫印迹法检测SOST mRNA和蛋白的表达情况。将OCCM-30细胞分为5组：空白对照组、BMP2组、BMP2+dorsomorphin组、BMP2+SB202190组、BMP2+PD98059组,根据分组分别加入100 ng·mL^-1的BMP2和相应的试剂共培养,于3、5 d时检测SOST mRNA和蛋白的表达情况。结果 100 ng·mL^-1 BMP2对SOST表达的上调作用强于50 ng·mL^-1 BMP2,且有时间依赖性（P<0.05）。BMP2+dorsomorphin组、BMP2+ SB202190组、BMP2+ PD98059组的SOST mRNA水平和蛋白质水平均降低,其中BMP2+dorsomorphin组降低最明显（P<0.05）。结论 成牙骨质细胞中BMP2主要是通过Smad信号通路介导上调SOST的表达。     

低氧状态下骨细胞参与破骨细胞形成的作用机制研究

目的 探究低氧状态下骨细胞对破骨细胞形成的作用及其机制。方法 用去铁胺甲磺酸（DFO）刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测DFO对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;采用DFO处理后的MLO-Y4细胞培养液制备条件培养基诱导RAW264.7细胞分化,行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测;利用实时荧光定量聚合酶链反应、细胞免疫荧光和蛋白质印迹（Western blot）检测DFO作用下MLO-Y4表达低氧诱导因子（HIF）-1α与核因子κB受体活化因子配体（RANKL）的情况;检测HIF-1α siRNA转染对MLO-Y4表达HIF-1α和RANKL的影响。结果 100 μmol·L ^-1 DFO作用24 h时MLO-Y4增殖活性升高,之后随着时间延长细胞增殖活性下降（P<0.01）。加入可溶性RANKL后,低氧组可见破骨细胞形成明显增加（P<0.001）。100 μmol·L ^-1 DFO作用下,HIF-1α mRNA表达稳定,RANKL mRNA的表达随时间明显变化,24 h时最高（P<0.01）;HIF-1α、RANKL蛋白表达升高（P<0.01）。低氧状态下siHIF-1α转染可降低HIF-1α和RANKL的表达（P<0.01）,破骨细胞减少（P<0.01）。结论 低氧状态下MLO-Y4可通过上调HIF-1α的蛋白水平促进RANKL的生成,进而加速RAW264.7细胞向破骨细胞分化。     

低氧状态下骨细胞参与破骨细胞形成的作用机制研究

目的 探究低氧状态下骨细胞对破骨细胞形成的作用及其机制。方法 用去铁胺甲磺酸（DFO）刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测DFO对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;采用DFO处理后的MLO-Y4细胞培养液制备条件培养基诱导RAW264.7细胞分化,行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测;利用实时荧光定量聚合酶链反应、细胞免疫荧光和蛋白质印迹（Western blot）检测DFO作用下MLO-Y4表达低氧诱导因子（HIF）-1α与核因子κB受体活化因子配体（RANKL）的情况;检测HIF-1α siRNA转染对MLO-Y4表达HIF-1α和RANKL的影响。结果 100 μmol·L ^-1 DFO作用24 h时MLO-Y4增殖活性升高,之后随着时间延长细胞增殖活性下降（P<0.01）。加入可溶性RANKL后,低氧组可见破骨细胞形成明显增加（P<0.001）。100 μmol·L ^-1 DFO作用下,HIF-1α mRNA表达稳定,RANKL mRNA的表达随时间明显变化,24 h时最高（P<0.01）;HIF-1α、RANKL蛋白表达升高（P<0.01）。低氧状态下siHIF-1α转染可降低HIF-1α和RANKL的表达（P<0.01）,破骨细胞减少（P<0.01）。结论 低氧状态下MLO-Y4可通过上调HIF-1α的蛋白水平促进RANKL的生成,进而加速RAW264.7细胞向破骨细胞分化。     

体外沉默法尼基转移酶对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响

目的 通过RNA干扰沉默法尼基转移酶（FTase）,探讨沉默FTase对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响及其相关机制。方法 针对FTase设计并构建3条小干扰RNA（siRNA）,转染人舌鳞状细胞癌CAL27和SCC-4细胞（实验组）,同时设置阴性对照组（转染NC-siRNA）和空白对照组（不转染siRNA）。应用实时荧光定量PCR检测各组细胞FTase、HRAS的mRNA表达,根据FTase mRNA的表达量,选取沉默效率最高的FTase-siRNA转染组作为进一步研究的实验组。蛋白质免疫印迹法检测各组细胞FTase、HRAS、p65、p-p65(S536)、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、低氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）的蛋白表达,Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力。结果 与阴性对照组和空白对照组相比,实验组FTase的mRNA和蛋白表达下降（P<0.05）,HRAS的mRNA和蛋白表达无明显变化（P>0.05）,p-p65(S536)、MMP-9、HIF-1α、VEGF蛋白表达下降（P<0.05）,p65蛋白表达无明显变化（P>0.05）;实验组的细胞侵袭和迁移能力降低（P<0.05）。结论 体外沉默舌鳞状细胞癌细胞FTase,可以抑制细胞体外迁移和侵袭能力,为FTase可能作为舌癌治疗的分子靶点提供了一定的理论和实验依据。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激巨噬细胞表达髓样细胞触发受体-1的研究

目的 探索牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg-LPS）刺激的巨噬细胞中髓样细胞触发受体-1（TREM-1）、可溶性TREM-1（sTREM-1）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达,探讨TREM-1与牙周炎发病机制的可能关联。方法 使用豆蔻酰佛波醇乙酯诱导人单核细胞系细胞THP-1分化为巨噬细胞,分别予以0（空白对照）、0.5、1.0 μg·mL ^-1的Pg-LPS刺激,并根据不同时间分组：孵育4、6、12、24 h组。实时定量聚合酶链反应检测巨噬细胞中TREM-1 mRNA的表达,Western blot分析TREM-1蛋白表达的差异,细胞免疫荧光染色检测TREM-1在巨噬细胞中的表达部位,并通过酶联免疫吸附试验对细胞培养液中的sTREM-1及TNF-α进行检测。结果 与空白对照组相比,Pg-LPS刺激巨噬细胞后TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白及细胞培养上清液中的sTREM-1表达均显著增强（P<0.05）;1.0 μg·mL ^-1 Pg-LPS组TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白及细胞培养上清液中的sTREM-1表达量高于0.5 μg·mL ^-1组,且分别从6、4、4 h时间点开始差异具有统计学意义（P<0.05）;细胞免疫荧光染色结果显示,Pg-LPS（1.0 μg·mL ^-1）刺激巨噬细胞24 h后,可见TREM-1蛋白呈阳性染色,且TREM-1的染色部位主要位于巨噬细胞的细胞膜区域;Pg-LPS刺激巨噬细胞后TNF-α的分泌水平升高（P<0.05）,其中1.0 μg·mL ^-1 Pg-LPS组表达量高于0.5 μg·mL ^-1组,且从12 h开始差异具有统计学意义（P<0.05）;0.5 μg·mL ^-1 Pg-LPS刺激巨噬细胞后TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白、sTREM-1间表达呈正相关（r=1,P<0.05）,但与TNF-α表达不存在相关性;在1.0 μg·mL ^-1 Pg-LPS刺激巨噬细胞后检测到了具有统计学意义的sTREM-1与TNF-α表达的正相关性（r=1,P<0.05）。结论 巨噬细胞受到Pg-LPS刺激后可出现Pg-LPS浓度依赖性的TREM-1 mRNA、TREM-1蛋白及细胞培养上清液中的sTREM-1表达上调,且能观测到三者之间表达的正相关性;同时细胞培养上清液中的TNF-α也出现Pg-LPS浓度依赖性的表达上调,在高浓度Pg-LPS（1.0 μg·mL ^-1）刺激下与sTREM-1表达量呈正相关。该结果提示,TREM-1作为促炎受体蛋白,可能通过调节巨噬细胞TNF-α的表达来实现牙周炎发展的促进作用。     

不同培养条件对CD133+原代口腔鳞癌细胞干性维持的影响

目的: 通过将CD133^+/-细胞从原代口腔鳞癌细胞中分离纯化,探索不同培养条件对CD133⁺原代口腔鳞癌细胞的干性维持及生物学特性的影响。方法: 应用CCK-8法检测CD133^+/-细胞亚群体外增殖能力以及对顺铂抵抗耐受能力,利用Transwell法检测顺铂对CD133^+/-细胞亚群侵袭能力的影响。以无血清培养法（含或不含白血病抑制因子LIF）和含血清培养法分别培养CD133⁺细胞亚群,流式细胞仪分析CD133⁺细胞的比例变化。在动物实验模型中验证CD133⁺和CD133^-细胞致瘤能力的差异,最后将移植瘤取出,行H-E染色和免疫组织化学染色。采用SPSS 25.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 与CD133^-细胞亚群相比,CD133⁺细胞具备较强的体外增殖能力（P<0.05）和顺铂化疗耐受能力（P<0.001）。顺铂对CD133^-细胞亚群侵袭能力的影响更强（P<0.01）。无血清培养法更能维持CD133的比例（P<0.05）,无血清培养基是否添加LIF对CD133的比例维持无显著差异（P>0.05）。在裸鼠体内成瘤实验中,CD133⁺细胞亚群以较少的数量级表现出较强的致瘤能力（P<0.05）。结论: 无血清培养法可较好地维持原代口腔鳞癌细胞干细胞特性,添加LIF对原代口腔鳞癌细胞的干性维持无显著影响。     

降钙素基因相关肽通过Hippo通路调控小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的 前期研究发现降钙素基因相关肽（CGRP）能够促进成骨细胞的生物学活性,为了进一步揭示CGRP在骨修复中的作用,检测CGRP对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化的影响,并对Hippo通路在这个过程中的作用进行了初步探讨。方法 在体外诱导培养的BMSCs中加入不同浓度的CGRP,处理48 h后测试碱性磷酸酶（ALP）活性,以筛选的优势浓度;处理7 d后进行茜素红染色,分别检测细胞的分化情况。应用Western blot检测CGRP作用于BMSCs后,Hippo通路核心分子Mst1/2蛋白磷酸化的表达水平;利用Hippo通路抑制剂维替泊芬（Verteporfin）阻断下游Yap信号,逆转录聚合酶链反应检测其对成骨相关因子Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）、Runt相关转录因子2（Runx2）mRNA的表达影响。结果 ALP活性检测结果显示,与空白对照组相比,10^-9、10^-8、10^-7 mol·L^-1浓度范围的CGRP都能显著促进小鼠ALP活性的增加（P<0.05）,以10^-8 mol·L^-1浓度的CGRP为最佳刺激浓度。用10^-8mol·L^-1浓度的CGRP处理后,茜素红染色显示钙化结节明显增多。CGRP能够显著上调p-Mst1/2蛋白的表达（P<0.05）;当运用了抑制剂Verteporfin时,显著降低了CGRP诱导的Runx2、ColⅠ mRNA的表达（P<0.05）。结论 CGRP能够促进小鼠BMSCs的成骨分化,且Hippo信号通路介导了CGRP作用于小鼠BMSCs成骨分化的过程。     

Myeloid-derived suppressor cells contribute to oral cancer progression in 4NQO-treated mice

Oral Diseases (2011) 18 , 67–73 Objective: Abnormal myelopoiesis especially the expansion of myeloid‐derived suppressor cells (MDSCs) is increasingly recognized as an important reason for the escape of tumor from immune surveillance. This study aims to investigate the role of this specific population of cells in oral cancer progression. Materials and Methods: 4‐Nitroquinoline 1‐oxide (4NQO) was used to induce oral cancer in C57BL/6 mice. The tongue mucosa was examined by hematoxylin and eosin staining. The distribution of MDSCs in the spleen and peripheral blood and T cell subsets in the spleen was analyzed by flow cytometry. The expression of MDSCs in the tongue tissues was investigated by immunohistochemical staining, and the expression of arginase‐1 (ARG‐1) and NOS‐2 in the tongue tissues was detected by real‐time PCR. Results: We found that during tumor progression, significantly increased frequency of MDSCs was observed in the spleens and peripheral blood of 4NQO‐treated mice, and the frequency of MDSCs in the spleens was positively correlated with systemic CD3⁺CD8⁺ T cells. Moreover, 4NQO‐treated mice showed significantly higher MDSCs infiltration and ARG‐1 mRNA level in the tumor site. Conclusions: Myeloid‐derived suppressor cells contribute to oral tumor progression and represent a potential target for immunotherapy of oral cancer.     

Two cases of tongue cancer treated with intra- and peri-tumoral injection of recombinant interleukin-2 alone: immunohistochemical considerations to clinical tumor response

SUBJECTS AND METHODS: Two cases with stage II tongue cancer who exhibited different responses to intra-and peri-tumoral administration of rlL-2 alone are presented. Special consideration is given to the relationship between tumor responses to rlL-2 and clinicopatholog-ical and immunohistopathological findings.
RESULTS: The patient who responded completely to treatment showed an exophytic tumor growth pattern, low-grade cancer invasion, and predominant infiltration of CD8⁺ lymphocytes over CD4⁺ lymphocytes in cancer cell nests. The non-responder showed endophytic tumor growth, high-grade cancer invasion, and uniform distribution of both CD4⁺ and CD8⁺ lymphocytes in cancer cell nests.
CONCLUSIONS: Distribution of adequate amounts of T lymphocytes subsets may be necessary in order for good tumor response to biotherapy with rlL-2; other clinical and histopathological variables predicting the effect for cancer chemotherapy remain to be identified.     

康复新液联合大蒜素胶囊治疗儿童复发性口腔溃疡的疗效及对免疫调节的影响

目的: 探讨康复新液联合大蒜素胶囊治疗儿童复发性口腔溃疡（ROU）的疗效及对免疫调节的影响。方法: 采用临床随机对照研究方法,选择2015年3月—2017年3月符合2012版ROU诊断标准的患儿204例,随机分为2组,A组接受大蒜素胶囊口服1 粒/次,3 次/d, 联合使用康复新液10 mL含漱3次/d;B组仅予以康复新液10 mL含漱5 min,3次/d,均治疗2周,对比治疗疗效,治疗前、后溃疡面疼痛程度（VAS评分）、溃疡愈合时间,并比较治疗前、后T细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺水平。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果: A组溃疡愈合时间（3.5±0.6）d、疼痛持续时间（3.1±0.3）d,均显著短于B组（P<0.05）;2组治疗有效率相比（96.08%∶88.24%）,差异具有统计学意义（χ²=6.264,P<0.05）;2组治疗后疼痛程度均明显减轻,A组与B组[（1.1±0.4）∶（3.2±0.6）]之间差异具有统计学意义（P<0.05）;2组治疗后CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均出现上升,CD8⁺显著下降,与治疗前相比均具有统计学差异（P<0.05）;A组治疗后CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平显著高于B组（P<0.05）,CD8⁺显著低于B组（P<0.05）。结论: 康复新液联合大蒜素胶囊可提高ROU疗效,促进患儿口腔局部受损黏膜的修复,增加患儿免疫功能。     

The effect of dental alloys on mouse lymphocyte subpopulations

The aim of the present study was to determine the effect of nickel‐containing alloys on lymphocyte subsets in an experimental setting. Plates of alloys containing nickel (Ceramalloy, Talladium, Cerillium, Rexillium) or gold (Orion) were implanted subcutaneously into mice. The levels of CD4⁺ and CD8⁺ T‐lymphocyte subpopulations and of Smig⁺ B lymphocytes were determined at various intervals following implantation, using monoclonal antibodies and flow cytometry. No changes were detected in the proportion of the lymphocyte subsets tested. One month after implantation, the mean fluorescence intensity of CD4, CD8 or Smig, in the peripheral blood lymphocytes (PBL) of the nickel alloy‐implanted animals, was significantly higher than that prior to this procedure. Only a mild increase in CD4 and CD8 was noted after implantation of the gold alloy. The observed effects are most likely attributable to the surgical trauma, and do not indicate that nickel‐containing dental alloys influence T cell subsets in this murine model.     

口腔鳞癌患者治疗前后免疫功能和肠道菌群变化的临床分析

目的: 研究口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者常规治疗前后肠道菌群和免疫功能变化情况。方法: 选择2020年9月—2021年9月于安徽医科大学第一附属医院进行治疗的28例OSCC患者和10例健康志愿者为研究对象。OSCC患者经评估后给予治疗方案,记录患者治疗前1周和治疗6个月后临床症状、免疫功能和肠道菌群变化。采用GraphPad Prism 9.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 免疫功能检测结果发现,与健康志愿者相比,OSCC患者治疗前外周血中淋巴细胞亚群（包括CD3⁺、CD4⁺、NK、CD4⁺/CD8⁺）和免疫球蛋白（包括IgG、IgA、IgM）水平明显偏低（P<0.05）,血清细胞因子（包括TNF-α、IL-4、IL-6）水平偏高（P<0.05）。经6个月治疗后,OSCC患者免疫功能相较于治疗前有所提高（P<0.05）,血清中促炎因子水平降低（P<0.05）。肠道菌群检测结果发现,与健康志愿者相比,OSCC患者治疗前肠道菌群多样性降低,治疗后,OSCC患者肠道菌群多样性有所恢复。菌群分布门水平上,与健康志愿者相比,OSCC患者治疗前肠道内Epsilonbacteraeota、Proteobacteria和Patescibacteria升高,Verrucomicrobia水平降低（P<0.05）。治疗降低了Epsilonbacteraeota、Proteobacteria和Patescibacteria水平,提高了Verrucomicrobia水平（P<0.05）。短链脂肪酸方面,与健康志愿者相比,OSCC患者治疗前肠道短链脂肪酸（包括乙酸、丙酸和丁酸）含量降低,治疗后,OSCC患者肠道短链脂肪酸含量升高。结论: 常规治疗后能明显提高OSCC患者免疫功能,恢复患者肠道菌群分布,提高肠道短链脂肪酸含量,改善患者健康水平。     

大鼠舌黏膜癌变过程中E-cad、CD44s的表达

目的:探索蛋白E-cad、CD44s在大鼠舌黏膜癌变过程中的表达变化。方法:屏障环境下4NQO饮水法诱导SD大鼠舌黏膜癌变,采用免疫组化法检测82例大鼠舌黏膜标本组织中E-cad、CD44s的表达情况。结果:在大鼠舌黏膜癌变过程中,E-cad表达下降、CD44s表达上升,E-cad、CD44s的表达差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析表明E-cad与CD44s表达呈负相关,相关性有统计学意义(r_s=-0.675,P<0.001)。结论:E-cad和CD44s在舌鳞癌的发生、发展中起了一定的作用, 联合检测E-cad和CD44s的表达可能为临床早期诊断提供新的方法。     

顺铂诱导舌鳞癌细胞发生上皮-间充质转化及获得肿瘤干细胞样特性的实验研究

目的: 建立舌鳞癌顺铂耐药株,观察其是否具有肿瘤干细胞样特性以及是否发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。方法: 使用顺铂梯度浓度递增法构建舌鳞癌顺铂耐药细胞株,通过MTS、流式细胞术和球囊培养对比舌癌顺铂耐药株和其亲本细胞株化疗耐药性及肿瘤干细胞特性的变化,通过qRT-PCR和Western 免疫印迹检测肿瘤干性因子SOX2、OCT4、BMI1和ABCG2的表达,以及舌癌顺铂耐药株和其亲本细胞株中EMT的指标E-cadherin和Vimentin的表达水平,通过Transwell侵袭迁移实验研究侵袭和迁移能力的变化。采用SPSS 17.0 软件包对数据进行统计学处理。结果: 成功构建了2株舌鳞癌顺铂耐药株CAL27-res和SCC9-res,2株细胞对顺铂具有更强的耐药性。与亲本的舌癌细胞CAL27和SCC9相比,CAL27-res和SCC9-res细胞呈现间充质表型, E-cadherin显著下调(P<0.001),Vimentin和N-cadherin显著上调(P<0.001),侵袭、迁移能力显著增强(P<0.001)。同时,CAL27-res和SCC9-res细胞球囊形成能力增强,肿瘤干性因子SOX2、OCT4、BMI1和ABCG2上调(P<0.001),CD44⁺/CD24^-细胞的比例增高(P<0.001)。结论: 顺铂诱导的舌鳞癌耐药细胞发生EMT且获得了肿瘤干细胞样特性。