16SrRNA基因快速测序法鉴定3种常见病原微生物

目的改良传统Sanger测序技术,建立16S r RNA快速测序法,并应用于常见病原微生物的鉴定。方法以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌标准菌株为实验对象,建立16S r RNA快速测序鉴定方法。再以自医院分离的,已经传统生化方法鉴定的铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌各30株进行方法验证。结果采用本方法进行细菌鉴定,可以正确、快速鉴定所有3种标准菌株。临床样品中,所有金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌均可获得与传统生化方法完全一致的带定结果,而在30株大肠埃希菌中,只有8株(占26.7%)被鉴定为大肠埃希氏菌,有10株(占33.3%)被鉴定为宋氏志贺菌,12株(占40%)被鉴定为痢疾志贺菌。结论本方法适用于铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的快速准确鉴定,对大肠埃希菌则不完全适用。     

糖尿病足合并冠心病病原菌检出及其长期生存状况

目的 分析不同细菌感染糖尿病足合并冠心病患者的长期生存状况。方法 回顾性分析2016年12月-2020年12月宁夏回族自治区人民医院收治的348例糖尿病足合并冠心病患者的临床资料。分析感染病原菌分布,比较不同细菌感染患者的感染程度和随访3年内的病情结局。结果 348例患者病足溃疡标本共分离出454株病原菌,其中261例(75.00%)为单一感染,常见感染病原菌为金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌。金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌单一感染患者Wagner分级中3级及以上的占比分别为49.02%、86.84%、73.68%、83.87%,粪肠球菌、铜绿假单胞菌单一感染患者的感染程度较重,金黄色葡萄球菌单一感染患者的感染程度较轻。随访3年,金黄色葡萄球菌单一感染患者的溃疡愈合率最高,其小截肢、大截肢、心脏事件和病死率相对较低;大肠埃希菌患者的溃疡愈合率最低、患者病死率相对较高。结论 粪肠球菌、铜绿假单胞菌感染糖尿病足合并冠心病患者的感染程度较重;金黄色葡萄球菌感染程度较轻,患者3年内溃疡愈合率最高,病死率最低;大肠埃希菌患者3年内溃疡愈合率最低,2年内病死率最高。     

对羟基苯甲酸酯类防腐剂的抑菌效果评价

目的了解对羟基苯甲酸酯类防腐剂的抑菌效果,以及化妆品中分离菌株对其的抵抗性。方法采用最小抑菌浓度法(MIC),测试对羟基苯甲酸酯类防腐剂对标准菌株铜绿假单胞菌(ATCC9027)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠埃希菌(ATCC8739)和化妆品中分离菌株的抑菌效果。结果对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯4种防腐剂在《化妆品卫生规范》规定的限用剂量范围内,能有效的抑制铜绿假单胞菌(ATCC9027)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠埃希菌(ATCC8739)和化妆品中分离出的菌株。结论对羟基苯甲酸酯类防腐剂具有较好的抑菌效果,但对化妆品中分离的铜绿假单胞菌和大肠埃希菌的最小抑菌浓度提高。     

纳米银体外抑菌效果的试验观察

目的探讨不同浓度的纳米银溶液对细菌和真菌的抑菌作用。方法采用抑菌环试验及最低抑菌浓度试验对不同浓度的纳米银溶液抑制细菌及真菌的效果进行观察。结果抑菌环结果显示,含≥5mg/L的纳米银溶液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌有抑菌作用,含≥10mg/L的纳米银溶液对白色假丝酵母菌有抑菌作用;纳米银溶液对白色假丝酵母菌的最低抑菌浓度为10mg/L,对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的最低抑菌浓度为5mg/L。结论较小浓度的纳米银溶液对细菌及真菌有较好的抑菌作用。     

血水草生物碱及其血根碱抑菌作用的研究

目的观察血水草生物碱（Eomecon chionantha Alkaloids,ECA）及其血根碱（Sanguinarine,SAN）的抑菌作用。方法以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌为受试菌,采用琼脂打孔扩散法和琼脂平板稀释法,研究ECA及SAN的抑菌作用。结果 ECA和SAN可抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的生长,而对铜绿假单胞菌无抑制作用;ECA对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的最低抑菌浓度（MIC）分别为40、160、40μg/ml;SAN对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的MIC分别为40、80、40μg/ml。结论 ECA和SAN对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌具有较强的抑菌效果,对铜绿假单胞菌没有明显的抑制作用。     

6984份血培养中病原菌的分布及耐药性

目的 研究医院6年血培养中常见病原菌的种类分布及耐药情况,为临床治疗菌血症提供依据.方法 血培养及鉴定采用BacT/Alert 120、3D 240自动血液分析系统和ATB Expression自动细菌鉴定仪,药敏试验采用K-B纸片扩散法,应用WHONET5.4软件对结果统计分析.结果 6984份血培养中分离出病原菌866株,阳性率为12.4%,其中革兰阴性杆菌占49.2%,革兰阳性菌占42.7%.真菌占8.1%;凝同酶阴性葡萄球菌占分离菌首位,其次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌和粪肠球菌等;碳青酶烯类对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌抗菌活性最强,而对铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌抗菌活性明显降低;革兰阳性球菌对精肽类和利奈唑胺抗菌药物高度敏感.结论 引起菌血症的病原菌种类复杂,临床应根据病原菌变化及耐药性及时调整抗菌药物用药.     

男女患者尿路感染病原菌的分析与探讨

目的探讨男女患者尿路感染病原菌的流行特征,为临床治疗和合理制订尿路感染防控措施提供依据。方法采用回顾性分析对2013年6月-2015年5月尿路感染患者检出的病原菌情况进行调查分析。结果 1 182株分离菌株中,男性患者512株(占43.3%),女性患者670株(占56.7%)。其中男性病原菌组成主要是大肠埃希菌(54.7%)、表皮葡萄球菌(13.1%)、粪肠球菌(7.6%)、屎肠球菌(7.6%)、铜绿假单胞菌(5.5%);女性病原菌组成依次是大肠埃希菌(62.4%)、真菌(11.6%)、屎肠球菌(8.8%)、粪肠球菌(7.3%)。男性患者医院内长居菌铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌明显多于女性患者。结论肠道菌群是男、女尿路感染的主要病原菌,男性病原菌组成比女性复杂,应切实采取综合措施进行干预。     

临床标本细菌分布及耐药性分析

目的了解细菌分布变迁及耐药情况。方法使用K-B纸片法进行药物敏感性试验。结果临床标本检出的阳性率为44.87%,菌株以痰、尿液和分泌物标本分离为主要来源,铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和不动杆菌属为常见菌;MRSA和MRCNS对临床药物的耐药率远比MSSA和MSCNS高,屎肠球菌对药物的敏感性普遍比粪肠球菌低,肠杆菌科细菌对亚胺培南的耐药性较低,产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率依次为23.9%、25.4%,铜绿假单胞菌对抗菌药物都表现出较高的耐药性。结论革兰阳性球菌有上升趋势,细菌的耐药性和抗菌药物的广泛使用有密切关系。     

尿路感染的病原菌分布与耐药性分析

目的 分析2006-2010年医院尿路感染病原菌的构成及耐药谱的动态变化,以指导临床医师合理应用抗菌药物.方法 收集2006年1月-2010年12月临床分离的尿液标本,细菌鉴定及药敏试验采用全自动细菌生化分析仪(VITEK-2 Compact);根据CLSI 2010年标准,利用WHONET5.6软件分析病原菌的分布及耐药情况.结果 共分离出病原菌1945株,其中革兰阴性菌1179株,占60.6％,革兰阳性菌483株,占24.8％,真菌283株,占14.6％;检出的前几位病原菌依次为大肠埃希菌、屎肠球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、白色假丝酵母菌、粪肠球菌和凝固酶阴性葡萄球菌;主要分布于肾内科(16.9％)、干部科(14.5％)、内分泌科(12.2％)、重症监护病房(6.3％)、呼吸科(6.1％)和泌尿外科病房(6.1％);屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药率均高于粪肠球菌;屎肠球菌对万古霉素耐药率为16.3％;金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林菌株检出率分别为65.6％和77.4％,未发现葡萄球菌属对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺的耐药菌株;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的检出率分别为58.8％和38.6％;发现1株大肠埃希菌和2株肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药菌株;多药耐药(MDR)的铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌分别占13.8％和43.2％.结论 大肠埃希菌为泌尿系感染的主要病原菌;女性患者明显高于男性;真菌引起的尿路感染有明显上升的趋势;过去常用于治疗泌尿系感染的喹诺酮类抗菌药物,耐药性较高,临床应根据药敏试验结果,合理选择抗菌药物.     

2009-2015年泌尿系感染病原菌种类构成及耐药性变迁

目的了解泌尿系感染常见病原菌分布及耐药性,为临床抗菌药物使用及医院感染控制提供可靠依据。方法收集医院2009年1月-2015年12月分离的泌尿系感染病原菌4296株,采用Microscan Walkway 40分析系统和VITEK-2compact全自动药敏鉴定分析仪对菌株进行鉴定及药敏试验,并对结果进行分析。结果 4296株病原菌中,革兰阴性菌2476株占57.64%,革兰阳性菌1169株占27.21%,真菌651株占15.15%;分离率占前五位的分别为大肠埃希菌1098株(25.56%)、屎肠球菌570株(13.27%)、肺炎克雷伯菌380株(8.85%)、铜绿假单胞菌349株(8.12%),粪肠球菌300株(6.98%);碳青霉烯类对大肠埃希菌保持了较好的抗菌活性,但对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌出现了较高的耐药性,其耐药率分别为2.0%、41.2%、39.47%;屎肠球菌对各种抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌,耐万古霉素的屎肠球菌和粪肠球菌检出率分别为38.9%、3.3%。结论医院泌尿系感染病原菌以革兰阴性菌为主,细菌耐药性监测能够对临床合理使用抗菌药物提供依据。     

鱼腥草营养液升白细胞作用的研究

为探讨鱼腥草(Houttuynia Cordata Thunb)的升白细胞作用.采用灌胃鱼腥草液后分别用6Gy的X线和腹腔注射环磷酰胺.观察小鼠白细胞总数和淋巴细胞变化.白细胞总数,与对照组比较,灌喂鱼腥草液0.4ml组照后第3～26天,灌喂0.2ml组照后第20,26天均有明显升高;淋巴细胞.0.4ml组照后第1～20天,0.2ml组照后第3,12～26天均有明显升高.环磷酰胺试验.白细胞总数,与未灌组比较.灌喂鱼腥草液中剂量组第7天,高、中剂量组第10天均有明显升高.表明鱼腥草液对X线照射和环磷酰胺所致小鼠的白细胞减少,有较好的恢复作用.     

鱼腥草与茵陈多糖提取物的抗菌活性

从鱼腥草与茵陈中提取水溶性多糖,利用圆形纸片法对7种常见的食品腐败菌进行了抗菌试验。结果表明:鱼腥草与茵陈多糖提取物显示了一定程度的抗细菌与抗真菌活性,抗细菌活性比抗真菌活性大,鱼腥草多糖提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为5mg/ml。     

三种药用植物内生真菌抗菌活性菌株的筛选

目的 筛选具有抗多种植物病原真菌活性的药用植物内生真菌菌株.方法 以常见的植物病原真菌包括灰葡萄孢( Botrytis cinerea)、尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)、终极腐霉(Pythium ultimum)与立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)菌株为指示菌,对分离自天南星、多花黄精、银杏三种药用植物的73株内生真菌菌株进行抗菌活性筛选.结果 共有20株菌株对至少一种指示菌有抑制活性,占总菌株数的27.4％;其中天南星内生真菌ZJCWF006茎点霉Phoma sp.、多花黄精内生真菌ZJCY610变灰青霉Penicillium canescens与银杏内生真菌TMSFI69团青霉Penicillium commune对四种指示菌均有较强抑制活性.结论 药用植物内生真菌对植物病原菌有较高抑制活性.     

产毒串珠镰刀菌rDNA及其间区序列的比较研究

目的研究中国产毒串珠镰刀菌与水稻枯萎病赤霉群的系统发育关系。方法对4株ATCC典型菌株和12株从中国不同地域、不同样品中分离的串珠镰刀菌进行了rDNA及其间区序列ITS1和ITS2的测定分析,绘制了系统发育进化树及同源树,并在DNA数据库中注册。通过与美国、南非等地区的菌株进行序列分析比较,阐述不同国家、地区产毒串珠镰刀菌的分布特点及rDNA间区序列与产毒基因的相关性。结果中国伏马菌素产毒基因阳性株的rDNA间区ITS2可变区为I型,与南非分离的串珠镰刀菌伏马菌素产毒株结果一致。不产伏马菌素的串珠镰刀菌分离株,ITS2可变区为II型。2株胶孢镰刀菌SD197-fmv047和SD207-fmv049为非伏马菌素产毒株,ITS2可变区即非I型,也非II型,且其序列与尖孢镰刀菌高度同源。结论结果对进一步研究水稻枯萎病赤霉群的系统发育关系提供新的、可靠的理论依据和技术支撑。     

牛角瓜花的抑菌活性研究

目的以牛角瓜花为实验材料,对其抑菌活性进行研究。方法以索氏提取法得到牛角瓜花的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇的粗提物,并选择白色念珠菌等6种真菌和金黄色葡萄球菌等7种细菌,采用纸片琼脂扩散法对不同溶剂粗提物进行抑菌活性测定。结果牛角瓜花的石油醚粗提物对黄曲霉、枯草芽孢杆菌和尖孢镰刀菌表现出优秀的抑菌效果,抑菌圈直径分别为13.37、12.81、12.25 mm,均优于阳性对照氟康唑和两性霉素B的抑菌活性;氯仿粗提物对枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌和白色念珠菌表现出良好的抑菌活性,抑菌圈直径分别为11.73、11.10、10.84 mm;乙酸乙酯和甲醇粗提物的抑菌效果较弱,乙酸乙酯粗提物对黄曲霉的抑菌圈直径为12.81 mm,甲醇粗提物对黑曲霉的抑菌圈直径为9.90 mm,且两种粗提物对其他供试菌有较弱或无抑菌效果。结论牛角瓜花中的化学成分在不同溶剂中的溶解性不同,使得4种溶剂粗提物的抑菌能力存在差异。     

Phytochemical and antimicrobial study of an antidiabetic plant: Scoparia dulcis L

The antimicrobial and antifungal effects of different concentrations of chloroform/methanol fractions of Scoparia dulcis were investigated. The isolated fractions were tested against different bacteria like Salmonella typhii, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, and Proteus vulgaris and fungal strains such as Alternaria macrospora, Candida albicans, Aspergillus niger, and Fusarium oxysporum. The isolated fractions exhibited significant antimicrobial and antifungal activity against all the tested organisms compared with respective reference drugs. The isolated fractions of S. dulcis showed properties like antimicrobial and antifungal activities that will enable researchers in turn to look for application-oriented principles.     

串珠镰刀菌伏马菌素产毒基因及毒力的测定

目的研究我国串珠镰刀菌分离株伏马菌素产毒性与其生物合成酶基因fum5的关系。方法对不同省区、不同粮食样品中分离的29株串珠镰刀菌进行了产毒基因的测定,对其中18株产毒基因阳性株进行了伏马菌素生物合成,并用高效液相色谱法进行了毒素测定。结果26株为fum5基因阳性。除1株仅产生低水平的伏马菌素FB1外,其他菌株都产生不同水平的伏马菌素FB1、FB2和FB3,产毒量范围分别为0．41～140．20mg／kg、0．06～14．30mg／kg和0．30～58．00mg／kg。从芝麻中分离并鉴定了1株串珠镰刀菌伏马菌素强产毒株,分别产生高水平的伏马菌素FB1、FB2和FB3,产毒量分别达到128．84、11．80和14．88mg／kg。结论我国串珠镰刀菌分离株产生伏马菌素的能力与其生物合成酶基因rum5有密切关系。串珠镰刀菌可以污染芝麻并产生高水平的伏马菌素。     

ICP-MS测定鱼腥草中32种元素

采用微波消解-ICP-MS法测定鱼腥草中32种常量与微量元素。研究结果表明:鱼腥草的常量元素中Ca元素含量高达7183.500μg/g,其次是Mg、P、Al、Na和K;必需微量元素中Fe元素含量最高,达1552.500μg/g,其次为Mn、Zn、Cr、Cu和Ni等元素。实验结果为研究鱼腥草功效与元素关系提供了数据支持。     

眼部丝状真菌感染的诊断与致病菌分离鉴定

目的 分析眼部丝状真菌感染致病菌的种类和致病特征。方法 对13例眼部丝关真菌感染患者的临床资料进行分析和致病菌分离鉴定，对眼部丝状真菌感染的致病菌、发病原因、早期诊断方法、丝状真菌与酵母菌眼部感染特征进行分析。结果 13例患者中11例为真菌性角膜溃疡，2例为真菌性眼内炎；13例15眼标本真菌培养均为丝状真菌，其中痂病镰刀菌2例、烟曲霉2例、谢瓦曲霉1例、黄曲霉1例、链格孢霉1例、尖端单孢子菌1例、总关毛霉1例、链霉菌1例。结论 眼部丝状真菌感染仍以镨刀菌、曲霉为主，但有明显的多样化趋势；确定诊断须真菌检查，早期是预后良好的关键。     

Effect of different polarities leaves crude extracts of Omani juniperus excels on antioxidant,antimicrobial and cytotoxic activities and their biochemical screening

ObjectiveTo prepare different polarities leave crude extracts of Juniperus excels (J. excels) and to determine their phytochemical screening, antioxidant, antimicrobial and cytotoxic activities.MethodsThe phytochemical screening of different crude extracts was determined by well-established methods. The antioxidant activity was determined by free radical scavenging (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, DPPH) method. The antimicrobial activity was evaluated by agar disc diffusion method and cytotoxic activity was determined through brine shrimp lethality assay.ResultsThe phytochemical tests showed that alkaloids, flavonoids, saponins, steroide, triterpenoids and tannins are present in all leave crude extracts except chloroform crude extract do not contain tannins. The antioxidant results of crude extracts were found to be in the order of hydro alcoholic > chloroform> ethyl acetate >hexane. All leave crude extracts showed moderate antibacterial against gram positive and gram negative food borne pathogen bacteria. The cytotoxicity results revealed that hexane and chloroform extracts have killed all the shrimp larvae at the concentration of 500 μg/mL.ConclusionMore in-vivo and in-vitro studies along with detailed phytochemical investigations are needed in order to potentially use this plant in the prevention and therapies of some oxidative damage related diseases.