细胞凋亡控基因p53、bcl-2、c-myc在大肠腺癌-癌序列中的表达

目的 研究细胞凋亡的调控基因p53、bcl-2、c-myc在大肠粘膜癌变中的作用。方法 利用免疫组织化学SP法对30例大肠腺瘤(伴轻、中、重度异型增生各10例)和30例大肠癌的活检组织标本分别进行p53、bcl-2、c-myc蛋白表达的检测,同时采用15例正常大肠粘膜作为对照。结果 (1)正常黏膜、腺瘤和腺癌的p53蛋白表达率为6.7％、40%和73.3%。三组间有显著的差异(P均<0.05)。(2)正常粘膜、腺瘤和腺癌的bcl-2蛋白表达率分别为20％、73.3％和63.3%。腺瘤和腺癌组均高于正常对照组(P均<0.01),腺癌与腺癌组间差异不显著(P>0.05)。(3)正常粘膜、腺癌和腺癌的c-myc蛋白表达率分别为26.7%、60%和76.7%。腺瘤和腺癌组均高于正常对照组(P<均0.05),腺瘤与腺癌组间差异不显著(P>0.05)。结论 (1)bcl-2基因可能通过对细胞凋亡的抑制而在大肠的早期发生作用。(2)p53基因突变在腺瘤化为腺癌的过程中起作用。(3)c-myc基因的表达与细胞增生和肿瘤发生可能关。     

p16蛋白在甲状腺肿瘤细胞中的表达及与p63的关系

目的研究甲状腺肿瘤组织中抑癌基因产物p16蛋白的表达,探讨p16、p63蛋白在甲状腺良恶性肿瘤中的相关性。方法 采用免疫组织化学Envision法检测60例甲状腺肿瘤标本细胞中p16蛋白的表达。结果 60例甲状腺肿瘤中p16蛋白阳性表达率为46.7％(28/60)。其中30例腺瘤中p16蛋白阳性表达率为60.0％(18/30),其中30例腺癌中为33.3％(10/30),腺瘤和腺癌组间比较差异有显著性(P<0.05);此外,甲状腺肿瘤中p63蛋白的表达与p16蛋白的表达在腺瘤和腺癌组均呈正相关(P<0.001)。结论 p16蛋白表达的缺失参与了甲状腺肿瘤的发生,抑癌基因p16、p63共同参与了甲状腺肿瘤的发生、发展,其发生过程可能存在p16、p63蛋白的协同作用,其异常表达对诊断甲状腺恶性肿瘤有一定的参考意义。     

甲状腺肿瘤细胞中P53、P63蛋白表达的比较研究

目的探讨P5 3和P6 3蛋白在甲状腺肿瘤各型细胞中的表达情况 ,并观察它们的相似及差异性。方法采用免疫组织化学 (EnvisionTM)法检测 6 0例甲状腺肿瘤中P5 3和P6 3蛋白的表达。结果P5 3蛋白在甲状腺腺瘤及腺癌中的阳性表达率分别为 0 0 0 % (0 /30 )和 2 0 0 % % (6 /30 ) ,两者比较差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;P6 3蛋白在甲状腺腺瘤及腺癌中的阳性表达率分别为 4 6 7% (14 /30 )和 2 0 0 % (6 /30 ) ,两者比较差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;P5 3在甲状腺乳头状腺瘤及滤泡状腺瘤中均不表达 ,而在甲状腺乳头状腺癌及滤泡状腺癌中的阳性表达率分别为 13.3% (2 /15 )和 33.3% (5 /15 ) ;P6 3蛋白在甲状腺乳头状腺瘤及滤泡状腺瘤中的阳性表达率分别为 6 0 .0 % (9/15 )和 33.3% (5 /15 ) ,而在甲状腺乳头状腺癌及滤泡状腺癌中的阳性表达率均为 2 0 .0 % (3/15 )。结论P5 3和P6 3蛋白在甲状腺肿瘤细胞中表达的差异 ,可能提示P5 3和P6 3蛋白在肿瘤抑制和组织发育中起着不同的作用。     

大肠癌及腺瘤中caspase-3和bcl-2的表达及临床意义

为探讨大肠腺瘤和大肠癌中 bcl-2和 caspase-3基因的蛋白表达及其与临床病理指标的可能关系 ,采用免疫组织化学 S-P方法检测 15例正常大肠粘膜、3 9例大肠腺瘤和 62例大肠腺癌标本中 bcl-2和 caspase-3的表达。结果显示 ,在正常大肠粘膜、腺瘤和腺癌中bcl-2和 caspase-3的阳性表达率分别为 2 6.7% ( 4 /15 )、86.7% ( 13 /15 ) ,5 9.0 % ( 2 3 /3 9)、5 6.4% ( 2 2 /3 9) ,77.4% ( 4 8/62 )、45 .2 % ( 2 8/62 ) ;腺瘤和腺癌分别与正常大肠粘膜比较 bcl-2和 caspase-3的表达差异均有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;bcl-2和 caspase-3的蛋白表达均与大肠癌组织学类型、淋巴结转移和 Dukes分期无明显相关 ,而与组织学分级和术后 5年生存率有明显相关性 ( P<0 .0 5 )     

肿瘤转移抑制基因KISS-1在甲状腺癌组织中表达和预后的研究

目的检测KISS-1蛋白、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及Ki67在甲状腺癌中的表达,探讨4者在甲状腺癌发生发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测10例正常甲状腺组织、12例结节性甲状腺肿,13例甲状腺腺瘤,68例甲状腺癌组织KISS-1蛋白、MMP-2、MMP-9及Ki-67的表达,分析4者在不同临床病理特征中表达的意义及它们之间的相关性。结果甲状腺癌组KISS-1蛋白阳性表达率(37%)明显低于正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤组(分别为100%、83%、62%,P<0.01),并且KISS-1蛋白低表达与甲状腺癌的临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05),与甲状腺癌患者的年龄、病理类型无关(P>0.05)。甲状腺癌组和结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤组MMP-2阳性表达率(分别为78%,54%、67%)明显高于正常甲状腺组(10%,P<0.01),并且MMP-2高表达与甲状腺癌的临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05),与甲状腺癌患者的年龄、病理学类型无关(P>0.05)。甲状腺癌组和结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤组MMP-9阳性表达率(分别为82%,69%、58%)明显高于正常甲状腺组(20%,P<0.01),并且MMP-9高表达与甲状腺癌的临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05),与甲状腺癌患者的年龄、病理学类型无关(P>0.05)。甲状腺癌组Ki67阳性表达率(88%)明显高于正常甲状腺组和结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤组(10%、31%、42%;P<0.01),并且Ki67高表达与甲状腺癌的临床分期有关(P<0.05),与甲状腺癌患者的年龄、病理学类型和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 KISS-1蛋白、MMP-2、MMP-9及Ki-67与甲状腺癌的发生发展有关,联合检测4者的表达可能作为评估甲状腺癌预后和指导临床靶向治疗的重要指标。     

凋亡及增殖因子在输卵管妊娠与早期妊娠蜕膜及绒毛中的表达

目的从细胞凋亡及增殖的角度探讨输卵管妊娠破裂的发生机制。方法对30例子宫肌瘤合并正常早孕切除子宫病例和40例输卵管妊娠破裂病例的胚胎植入部位绒毛与蜕膜组织进行研究。常规光镜观察细胞形态学变化;用DNA缺口原位未端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;免疫组织化学S-P法检测bcl-2/bax基因蛋白表达率比值、Ki-67在细胞中的表达;结果常规光镜观察细胞形态在输卵管妊娠绒毛与正常早孕绒毛滋养细胞形态差异无统计学意义,而蜕膜细胞在输卵管妊娠发育较正常宫内妊娠为差;输卵管妊娠组织的细胞滋养细胞、合体滋养细胞中均可检出细胞凋亡,凋亡指数(AI)分别为(10.3±1.4)%,(11.3±2.4)%;而蜕膜组织的细胞凋亡较绒毛少见,AI为(9.8±1.2)%。但三者间细胞凋亡水平无相关关系(P>0.05)。输卵管组绒毛与蜕膜细胞凋亡均比早孕组少见,尤以合体滋养细胞中的凋亡为主,细胞滋养细胞和合体滋养细胞的AI分别为(7.3±1.2)%(P<0.05)、(8.1±1.4)%(P<0.05);而蜕膜组织的凋亡较早孕组明显增多,AI高达(38.2%±2.6)%(P<0.01)。早孕组绒毛蜕膜间细胞凋亡水平差异不显著(P>0.05);输卵管组蜕膜细胞凋亡水平明显高于绒毛,二者差异有统计学意义(P<0.01)。输卵管绒毛组比早孕组绒毛凋亡较低,而输卵管蜕膜组较早孕组蜕膜凋亡增高,但2种组织细胞凋亡无直线相关关系。正常早孕绒毛和蜕膜组织的bcl-2/bax比值分别为0.90±0.34,1.02±0.21,二者间差异无统计学意义(P>0.05),输卵管组绒毛和蜕膜组织的bcl-2/bax比值分别为1.05±0.19,0.43±0.22,二者间差异有统计学意义(P<0.05),与早孕组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。早孕绒毛与蜕膜细胞增殖显著,增殖指数(PI)分别为(70.7±1.3)%、(90.4±2.2)%;而在输卵管妊娠绒毛增殖显著,PI为(69.9±2.2)%,与早孕绒毛增殖相比差异无统计学意义,蜕膜增值较差,PI(29.4±1.9)%,与早孕蜕膜相差异有统计学意义(P<0.01)。结论 bcl-2和bax蛋白在人早孕过程中及异位妊娠中参与了绒毛滋养层及蜕膜细胞的凋亡机制,bcl-2和bax蛋白与增殖因子共同在绒毛的发生、发育、胎盘形成和组织结构改建及功能完善等方面发挥着重要作用。凋亡参与了异位妊娠破裂的发生,在早孕绒毛与输卵管妊娠绒毛其增殖特性是相似的,绒毛的过度侵袭与其增殖特性无关;从分子水平为输卵管妊娠破裂提供了重要的理论依据。     

YAP在结直肠腺癌组织中的表达及意义

目的检测YAP在人结直肠腺癌中的表达,探讨其与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系及意义。方法应用免疫组织化学Polymer conjugate方法对10例正常结直肠组织、10例癌旁组织、20例结直肠息肉、40例结直肠腺瘤和80例结直肠腺癌组织进行YAP检测,并采用DNA末端原位标记染色法(TUNEL)检测肿瘤组织的细胞凋亡情况。结果免疫组织化学结果显示YAP主要在结直肠腺上皮组织的细胞核中表达。10例正常结直肠组织YAP阳性表达率为0,10例癌旁组织为0,80例结直肠腺癌组织中YAP的表达阳性率为63%,而结直肠息肉和腺瘤的YAP表达阳性率分别为5%、33%。5组间的差异有统计学意义(P<0.05)。在结直肠腺瘤组中,轻、中、重度非典型增生3组YAP表达之间的差异有统计学意义(P<0.05)。YAP的表达与结直肠腺癌的分化程度之间的差异有统计学意义(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小等之间比较差异无统计学意义。结直肠腺癌组织中YAP的表达水平与凋亡率呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 YAP参与结直肠腺癌的发生发展,可以作为此病的早期诊断指标。     

宫颈鳞状细胞癌组织中Bcl-2与血管内皮生长因子的表达及相关性

目的探讨凋亡抑制基因Bcl-2与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达,以及二者表达与宫颈鳞状细胞癌中生物学行为的相关性。方法分别对45例宫颈鳞状细胞癌中组织、34例CIN组织和10例正常宫颈组织,采用免疫组织化学法检测Bcl-2的表达,免疫蛋白印迹(Western Blotting)法检测VEGF蛋白的表达,并采用DNA原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数(AI)。结果 Bcl-2和VEGF蛋白在45例宫颈鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为51.11%和62.22%,均显著高于CIN组织(11.76%和5.88%)(P<0.05);而在正常宫颈组织二者均无表达。同时,Bcl-2在VEGF表达阳性的宫颈鳞状细胞癌组织中呈高度表达,Bcl-2和VEGF的表达密切相关(χ2=5.148,P<0.05)。结论提示Bcl-2可能参与宫颈鳞状细胞癌的发生和发展;Bcl-2可能通过上调VEGF的表达而促进宫颈鳞状细胞癌的转移,同时VEGF也可能通过诱导Bcl-2的表达而抑制肿瘤细胞的凋亡。     

干扰素-γ对HT29结肠癌细胞株癌基因表达的影响

目的观察干扰素(IFN)-γ对结肠癌细胞HT29增殖的影响,并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测凋亡,并定量检测对癌基因蛋白表达的影响。结果浓度≥100U/ml的IFN-γ能抑制HT29细胞增殖,作用呈时间依赖性,在24、48、72h抑制率分别为13%、32%、44%;流式细胞仪检测表明IFN-γ可诱导细胞凋亡,降低癌基因蛋白c-myc、bcl-2表达而促进bax表达(P<0.01)。结论IFN-γ对HT29细胞的抑制作用可能是通过抑制癌基因蛋白c-myc、bcl-2表达,促进bax表达而诱导了凋亡,及产生细胞周期阻滞。     

缺氧诱导因子-2α在胃癌组织中的表达及与肿瘤细胞凋亡的关系

目的检测胃癌组织中缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、肿瘤细胞凋亡率及凋亡基因生存素(Survivin)、Bcl-2、p53的表达,分析HIF-2α与胃癌细胞凋亡的关系,并探讨临床意义。方法免疫组化染色(SP)法检测38例胃癌组织(其中30例有癌旁组织)标本癌旁组织石蜡标本HIF-2α、Survivin、Bcl-2、p53的表达情况;TUNEL法检测胃癌细胞的凋亡情况并计算凋亡指数(AI)。结果胃癌组织中HIF-2α、Survivin、Bcl-2、p53阳性表达率分别为84.21%(32/38)、76.32%(29/38)、73.68%(28/38)、52.63%(20/38),癌旁组织中四种蛋白阳性率则分别为30.00%(9/30)、33.33%(10/30)、36.67%(11/30)、40.00%(12/30)。HIF-2α、Survivin、Bcl-2在胃癌组织中表达强度高于癌旁组织(P<0.05),而p53在胃癌组织中表达与癌旁组织差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL结果显示HIF-2α强表达组的胃癌细胞凋亡指数明显高于HIF-2α弱表达组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,肿瘤组织中HIF-2α与Survivin、Bcl-2表达分别存在正相关关系(P<0.05),Survivin与Bcl-2表达有正相关关系(P<0.05)。结论 HIF-2α在胃癌组织中表达增强,HIF-2α可能通过调节凋亡基因Survivin、Bcl-2表达而促进胃癌细胞的凋亡抵抗能力。     

甲状腺癌中p33ING1、ER、PR和c-erbB-2的表达及意义

目的:探讨抑癌基因p33ING1、雌激素受体(ER)、孕酮受体(PR)和癌基因c-erbB-2蛋白在甲状腺癌组织中的表达.方法:应用免疫组化SP法检测甲状腺腺瘤(TA)和腺癌(TC)中p33ING1、ER、PR和c-erbB-2的表达,分析其与肿瘤临床病理特征之间的关系.结果:p33ING1、ER、PR和c-erbB-2的阳性表达率在40例腺瘤中分别为76.5%、35.0%、40.0%和5.0%;在45例腺癌中分别为41.2%、57.8%、64.4%和46.7%,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).p33ING1、ER、PR与c-erbB-2呈负相关(r分别为-0.218、-0.221、-0.213,均P＜0.05).结论:p33ING1、ER、PR和c-erbB-2蛋白可能共同参与甲状腺癌的发生发展,是预测甲状腺癌预后的有效指标.     

凋亡相关基因bcl—2和bax在结肠肿瘤的表达及意义

用免疫组织化学方法观察３９例结肠癌凋亡相关基因ｂｃｌ－２和ｂａｘ的表达，以１７例结肠腺瘤作为对照。结果显示：ｖｃｌ－２和ｂａｘ在结肠癌和结肠腺瘤的表达率分别为３３．３３％，１．０３％，３０．７７％和４１．１８％，２３．５３％，４１．１８％，结肠癌和结肠腺瘤中ｂｃｌ－２和ｂａｘ表达率比较均无显著性差异。     

c-myc、bcl-2基因表达和蝌蚪提取液抗早幼粒细胞白血病作用的研究

目的 研究蝌蚪提取液(T871)抗早幼粒细胞白血病(APL)的作用及其过程中c-myc、bcl-2癌基因表达的变化。方法 利用细胞生长曲线、形态学观察、流式细胞仪、TUNEL法及原位mRNA杂交和完整细胞原位斑点印迹技术，观察T871抗人APL细胞系(HL-60)细胞的作用及其过程中c-myc、bcl-2癌基因表达的变化。结果 T871能抑制HL-60细胞增殖，并出现细胞凋亡的形态学特征，流式细胞仪及TUNEL法检测结果显示凋亡细胞百分数比对照组显增加，并伴有癌基因c-myc、bel-2mRNA表达的下调。结论 T871可抑制HL-60细胞的增殖同时诱导其凋亡，且c-myc、bcl-2癌基因可能参与了此过程。     

Immunohistochemical study of apoptosis-related Bcl-2 protein and its correlation with proliferation indices (Ki67, PCNA), tumor suppressor genes (p53, pRb), the oncogene c-erbB-2, sex steroid hormone receptors and other clinicopathological features, in normal, hyperplastic and neoplastic endometrium

The bcl-2 gene codes for a protein which functions to inhibit apoptotic cell death, that involves an intrinsic normal cell death program. Bcl-2 overexpression was originally described in a follicular lymphoma, but more recently bcl-2 expression has been observed in a variety of other human neoplasms. Variation in the frequency of apoptosis in hormone-sensitive tissues, such as the endometrium, is known to occur as a result of hormonal changes in both physiological and pathological circumstances. In this study we examined bcl-2 protein expression in a total of 170 samples of endometrial tissues (18 proliferative endometrium, 14 secretory endometrium, 35 adenomatous hyperplasia and 103 carcinomas). The results were compared with p53, pRb and c-erbB-2 proteins expression, estrogen and progesterone receptors status, with the proliferative activity and with clinicopathological features. The expression of bcl-2 protein was lower in the group of carcinomas, when compared with the cases of adenomatous hyperplasia (p < 0.0001), normal proliferative (p < 0.0001) and secretory endometrium (p = 0.07). In normal proliferative endometrium bcl-2 expression was correlated with PCNA (p = 0.026) and in secretory endometrium it was correlated with ER status (p = 0.042). In hyperplasias, bcl-2 was correlated with PCNA (p = 0.019) and the PR (p = 0.007) expression. In carcinomas, decreased bcl-2 expression was associated with increased tumor grade (p = 0.04). A positive relationship between bcl-2 expression and pRb, as well as PCNA score (p = 0.014 and p = 0.001, respectively), was also found. These results indicate that bcl-2 expression may play a role in the inhibition of apoptosis in endometrial carcinoma and its expression seems to be associated with tumor differentiation and cell proliferation.     

姜黄素对痴呆模型小鼠学习记忆能力的改善作用及对细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素对痴呆模型小鼠学习记忆能力的改善作用和对脑细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响。方法选用自然快速脑老化小鼠为研究对象,随机将SAMP8脑老化小鼠分为模型组、姜黄素治疗组和盐酸多奈哌齐对照组,将SAMR1小鼠作为正常对照组。采用行为学方法评价各组小鼠治疗前后的学习记忆能力变化,TUNEL法检测海马与皮层的细胞凋亡率,免疫细胞化学法测定细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达情况。结果姜黄素能够明显改善自然快速脑老化小鼠的学习记忆能力,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);姜黄素治疗组小鼠海马和皮层的细胞凋亡数减少,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);凋亡相关蛋白bcl-2表达升高,bax表达降低,并且bcl-2/bax比值升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素对痴呆模型小鼠的学习记忆能力具有一定的改善作用,其作用机制可能与其调节凋亡相关蛋白bcl-2与bax的表达有关。     

Di-(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP) increases Bcl-2/Bax ratio and modifies c-myc expression in Syrian hamster embryo (SHE) cells

The objective of this work was to study the anti-apoptotic properties of the non-genotoxic rodent carcinogen, di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP) in Syrian hamster embryo (SHE) cells. We demonstrated that a 24 h pre-treatment of SHE cells with 50 microM DEHP inhibited apoptosis triggered by growth factors deprivation. The RNA expression levels of the regulator genes involved in the apoptotic pathway, bcl-2, bax and of c-myc were measured using Western blotting and RT-PCR. We showed that a 24 h treatment of SHE cells with 50 microM DEHP increased (P < 0.05) the bcl-2 expression, while c-myc expression was decreased. No effect on bax expression was observed in the range of 10-50 microM. The defective regulation of apoptosis caused by DEHP treatment could contribute to its carcinogenicity.     

bcl—2,P^53在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨ｂｃｌ－２、Ｐ＾５３在乳腺癌中的表达及其意义。方法：应用免疫组化Ｓ－Ｐ法检测７０例乳腺癌及２０例乳腺良性病变中ｂｃｌ－２和Ｐ＾５３的表达,结果：ｂｃｌ－２与Ｐ＾５３表达之间差异有显著性,呈负相关（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２和Ｐ＾５３表达与组织学分级有关（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２表达随分级增加阳性率降低,Ｐ＾５３表达与腑窝淋巴转移有关（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２表达与腑窝淋巴结转移无关（Ｐ〉０．０５）,结论：ｂｃｌ－２表达与淋巴结转移无关,其阳性表达可反映肿瘤属分化好或属早期阶段。Ｐ＾５３表达与淋巴结转移呈正相关。