饮水氯化消毒副产物氯仿和一溴二氯甲烷对斑马鱼胚胎发育的毒性作用

[目的]研究饮水氯化消毒副产物中主要成分氯仿（CHCl3）和一溴二氯甲烷（BDCM）对斑马鱼（zebrafish,danio rerio）胚胎发育的毒性效应。[方法]采用斑马鱼胚胎发育技术,分别用不同质量浓度的CHCl3和BDCM对受精后Oh（0hpf）和24h（24hpf）的斑马鱼胚胎进行染毒。在染毒后4、8、12、16、24、48h进行胚胎活体摄影,并分别计算CHCl3及BDCM对斑马鱼胚胎染毒后24h和48h的半数致死浓度（LC50）和半数致畸效应浓度（EC50）。[结果]0hpf斑马鱼胚胎CHCl3和BDCM的LC50分别为0．814mg／L和1．945mg／L。24hpf胚胎CHCl3和BDCM染毒的LC50分别为1．076mg／L和2．676mg／L。斑马鱼胚胎对CHCl3最敏感的致畸毒理学终点为48h无心律和心胞囊肿,其0hpf斑马鱼胚胎试验发现,48h无心律和心胞囊肿的EC50分别为0．39mg／L和0．35mg／L;而24hpf斑马鱼胚胎试验发现,48h无心律和心胞囊肿的EC50分别为0．77mg／L和0．63mg／L。对BDCM最敏感的致畸毒理学终点也是48h无心律和心胞囊肿,与CHCl3相似,但在0hpf斑马鱼胚胎试验中上述两项指标的EC50分别为0．81mg／L和0．72mg／L,在24hpf斑马鱼胚胎试验中分别为3．52mg／L和3．17mg／L。[结论]CHCl,和BDCM对0hpf斑马鱼胚胎的毒性均大于对24hpf胚胎的毒性;CHCl3的发育毒性大于BDCM。斑马鱼胚胎对CHCl3和BDCM致畸效应最敏感的终点为48h无心律和心胞囊肿。     

斑马鱼胚胎发育中适宜的毒理学指标分析

[目的]观察实验动物斑马鱼胚胎发育的全过程，并分析用于胚胎毒性试验适宜的毒理学指标。[方法]选取以雌雄比为1：2的健康亲鱼让其自行交配，用解剖镜进行全过程的观察，并拍摄整个斑马鱼胚胎发育过程。[结果]斑马鱼胚胎发育可以分为卵裂期、囊胚期、原肠胚期、分裂期、成形期和孵化期6个时期。[结论]从中选择了5个科学、合适的胚胎发育观察阶段及适宜的毒性评估终点以供毒理学研究参考。     

二恶英及其类似物检测技术进展

二恶英是一类氯代含氧三环芳烃类化合物,包括多氯代二苯并二恶英PCDD和多氯代二苯并呋喃PCDF,其中PCDD有75个异构体,PCDF有135种.在这210种化合物中,有17种(2,3,7,8位全部被氯原子取代的)被认为是对人类健康有巨大的危害.其中2,3,7,8-四氯代二苯并-对-二恶英(2,3,7,8-TCDD)是目前已知化合物中毒性最大的,是氰化钾的50～100倍[1].从二恶英的毒理学来看,它不仅具有致癌性,而且具有免疫和生殖毒性,作为内分泌干扰物可能造成男性雌性化.其主要表现为致死作用和废物综合症、胸腺萎缩、氯痤疮、肝毒性、免疫毒性、生殖毒性、发育毒性和致畸性、致癌性[2,3].     

用吸附管采集分析室内空气中的卤代烃

[目的]探讨用Carbotrap300型采样管采集分析室内空气中19种卤代烃的线性和精密度。[方法]用Carbotrap300型采样管采集室内空气中的挥发性有机物，用热解吸／气质联用法进行分析。[结果]在吸附量为5--40ng的范围内，19种卤代烃线性回归的相关系数为0．994-1．000。3-氯-1-丙烯、二氯甲烷和1，1-二氯乙烷的采样管DP合格率为28．6％～57．1％，其他16种卤代烃为71．4％～100％。3-氯-1-丙烯、二氯甲烷、1，1-二氯乙烷、1，1，1-三氯乙烷和四氯化碳的采样管DVP合格率为0％～57．1％，其他14种化合物为71．4％～100％。[结论]以EPA的评价标准衡量，Carbotrap300型采样管适合于采集分析室内空气中氯仿、1，2-二氯乙烷、1，1，2-三氯乙烷、1，1，2，2-四氯乙烷、三氯乙烯、四氯乙烯、1，2-二氯丙烷、1，3-二氯丙烷、1，2-二溴乙烷、氯苯、邻二氯苯、间二氯苯、对二氯苯、1，2，4-三氯苯等14种卤代烃。     

对二氯苯的毒物动力学研究概况

对二氯苯（paradichlorobenzene，PDCB）是一种具有高度脂溶性和一定水溶性的氯代芳香烃类化合物，可穿过包括胎盘屏障和血脑屏障在内的各种生物膜。早在50年代国外即陆续开展了PDCB的毒理学研究，特别是1987年国际癌症研究机构（IAR）根据美国国家毒理学规划署（NTP）的动物实验研究结果将PDCB确定为可能的人类致癌物以来，对PDCB的毒性和致癌性又进行了大量的毒理学实验研究，但对PDCB的毒物动力学研究一直很少。本文仅就PDCB的毒物代谢动力学研究情况做一简要概述。1吸收大量毒理学研究结果表明，PDCB主要经呼吸道和消化道…     

农利灵对斑马鱼胚胎发育的毒性

[目的]探讨农用杀菌剂农利灵（vinclozolin）对斑马鱼（Brachydanio rerio）的胚胎发育毒性及其机制。[方法]采用水浴染毒法，将受精后2h（hours post fertilization，hpf）内的斑马鱼卵分别暴露于浓度为12．5、25、50、100μg／mL的农利灵，作为4个染毒组，同时设置溶剂（DMSO）对照组、10μg／mL睾酮（testosterone）组及10μg／mL睾酮＋50μg／mL农利灵混合组。通过死亡率、孵化时间、发育畸形等指标评价农利灵的胚胎发育毒性。[结果]农利灵染毒组的胚胎死亡率分别为52．6％、68．4％、85．0％、100．0％，明显高于溶剂对照组（10．0％），P〈0．01，并呈剂量-效应关系。比较孵化时间，12．5μg／mL农利灵染毒组高于溶剂对照组（t=4．077，P〈0．05）。 10μg／mL睾酮＋50μg／mL农利灵混合组的死亡率为51．2％，低于50μg/mL农利灵染毒组的死亡率85．0％（X^2=6．53，P〈0．05）。此外，在农利灵染毒组观察到脊柱弯曲、心包囊肿等发育畸形，其畸形与睾酮染毒组所观察到的畸形相似。[结论]农利灵可延迟斑马鱼的胚胎发育、具有胚胎致死毒性和致畸毒性，其毒性至少有部分是来源于抗雄性激素样作用。     

二噁对人体危害的研究进展

二噁 (dioxin)是氯代含氧三环芳烃类化合物,它不是人为的产物,因其无任何实际用途.二噁是一种毒性极强的特殊有机化合物,包括多氯代二苯并二噁 (PCDDs)、多氯代二苯呋哺(PCDFs)和多氯代联苯(PCBs)等.氯取代的数量和位置决定了异构体的数量,诸如PCDDs有75个异构体,PCDFs有135个异构体.其中以2、3、7、8位氯取代的异构体毒性最大,称为TCDD(2、3、7、8-tetrachlorodibenzo-para-dioxin),是目前世界上已知的毒性最强的人类一级致癌物[1,2]. 二噁极具亲脂性及化学稳定性.当其进入环境或生物体内时,会产生蓄积并危及人体健康.二噁在土壤中降解的半衰期为12年,在空气中光化学分解的半衰期为8.3天,在人体内的半衰期平均为7年[1].     

铜绿对大鼠的急性毒性作用

[目的]探讨铜绿对大鼠的急性毒性，计算其半数致死剂量（LD50）。[方法]选用90只健康成年SD大鼠，雌雄各半，染毒剂量依次为0、217．3、325．9、488．9、625．0、733．3、1100．0、1250．0和1775．0mg／kg。经口24h内3次灌胃染毒，观察14d，记录大鼠的毒性反应和死亡数，以改良寇式法计算LD50，并进行肝、胃、肾病理学检查。[结果]染毒后不同时间，大鼠自由活动减少，摄食和饮水下降，出现腹泻等症状。铜绿的LD50及95％可信区间（95％CI）为732．82（870．96-615．18）mg／kg。病理学检查发现存活动物均出现肝细胞浊肿、坏死等。在本次实验剂量下，铜绿未引起胃和肾脏的病理改变。[结论]铜绿的毒性属于低毒．肝脏为铜绿的急性毒性靶器官。     

对二氯苯染毒雄性小鼠体细胞与生殖细胞染色体畸变分析

[目的 ]研究对二氯苯的遗传毒性作用。 [方法 ] 40只雄性昆明种小鼠随机分成 5组 ,每组 8只。实验组小鼠连续 5d分别以 180 0、90 0、45 0mg/kg剂量对二氯苯经口灌胃 ,阴性对照组小鼠以等量花生油灌胃 ,阳性对照组小鼠以40mg/kg剂量环磷酰胺腹腔注射。末次染毒 2 4h后处死动物 ,分析骨髓细胞以及精原细胞与初级精母细胞染色体畸变率。 [结果 ]对二氯苯各剂量染毒组雄性小鼠骨髓细胞以及精原细胞和初级精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较均无统计学显著性增高 (P >0 0 5 ) ,各剂量染毒组初级精母细胞常染色体早熟分离发生率与阴性对照组比较也均无统计学显著性差异 (P >0 0 5 ) ,但高剂量染毒组初级精母细胞性染色体早熟分离发生率非常显著高于阴性对照组 (P <0 0 1)。[结论 ]在本实验剂量下未观察到对二氯苯对骨髓细胞染色体结构畸变的诱发作用 ,但一定剂量对二氯苯可能对初级精母细胞性染色体早熟分离有一定的影响     

Aroclor1254对斑马鱼胚胎发育、肝脏组织结构及其卵黄蛋白原基因的影响

[目的]使用脊椎动物模型斑马鱼评价Aroclor1254对斑马鱼胚胎发育、肝脏组织结构以及卵黄蛋白原（vtg）基因表达的影响,为Aroclor1254的毒性效应研究提供基础数据,以期选择Aroclor1254污染的敏感指标,进行早期污染监测和预警。[方法]将斑马鱼及其胚胎暴露在不同浓度的Aroclor1254溶液中,运用斑马鱼胚胎发育技术和组织病理观察法以及实时定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Aroclor1254对斑马鱼胚胎发育的影响、形态学的改变和卵黄蛋白原（vtg）基因的表达。[结果]斑马鱼胚胎试验显示,3．3、6．5、10．0mg／L Aroclor1254等均可诱导肝变性、肝脏发育不全,其中3.3mg／L Aroclor1254诱导斑马鱼卵黄部分变性,6．5、10．0mg／L Aroclor1254诱导斑马鱼卵黄大部分或者全部变性。肝脏组织病理观察发现,2．0、10．0、50．0μg/L Aroclor1254肝细胞肿大,胞质疏松,空泡明显增加,细胞质中可见脂沉积。vtgmRNA的表达在Aroelor1254暴露的斑马鱼个体中产生了显著的改变,雌鱼中表达普遍呈抑制趋势,其中以2．0μg／L抑制现象最明显,而在雄鱼中该剂量组vtg表达量被显著诱导。[结论]研究表明Aroclor1254对斑马鱼及其胚胎具有毒性效应,肝脏是产生毒性效应的重要靶器官。     

The acute and chronic toxicity of ten chlorinated organic compounds to the American flagfish (Jordanella floridae)

The acute toxicity (96-hr median lethal concentrations (LC50s) of ten chlorinated isomers of benzene, phenol, ethane, and ethylene to the American flagfish (Jordanella floridae) were determined in both static and flowthrough systems. Chronic toxicity to embryo-larval fish was also estimated from hatching success and post-hatch survival as well as fry growth rates and survival. Maximum acceptable toxicant concentrations (MATC) were estimated where possible. In general, for both acute and chronic toxicity tests, the order of increasing relative toxicity based on the water-borne exposure concentrations was: chloroethanes, chloroethylenes, chlorobenzenes, and chlorophenols. Within groups, more highly chlorinated isomers were usually more toxic. The presence of suspended or colloidal 1,2,4,5-tetrachlorobenzene was observed in acute toxicity testing and affected toxicity estimates.     

百草枯对斑马鱼的生理指标和胚胎发育影响

[目的]探讨百草枯(paraquat,PQ)对斑马鱼(zebrafish,Danio rerio)的生理指标和胚胎发育影响,并确定其最大未观察到有害作用浓度(NOAEC).[方法]参照经济合作与发展组织(OECD)推荐的方法,采用百草枯急性暴露试验、亚急性暴露试验及胚胎发育毒性试验进行研究.斑马鱼及其胚胎通过水环境暴露...     

亚致死性浓度的二噁英在斑马鱼胚胎中所致的毒性反应

[目的]观察亚致死性浓度的二噁英（TCDD）对斑马鱼胚胎发育的毒性作用。[方法]将72hpf（受精后小时）斑马鱼胚胎暴露于渐升的TCDD亚致死性浓度下,观察累积死亡率、心功能及颌软骨发育的变化,与对照组比较。[结果]10pg／ml及25pg／ml的TCDD浓度所导致的两周内的累积死亡率与对照组类似。然而在胚胎内这两种浓度的TCDD均能导致急性及亚急性心脏毒性。暴露在这两种浓度TCDD下与对照组相比,在毒物处理后的12h、1d、2d及1周后胚胎均表现出心每搏输出量及心输出量的显著降低。最显著的发现是72hpf胚胎在10pg／ml的TCDD处理后1周表现出显著的每搏输出量及心输出量降低,伴轻微的心包积液。[结果]该研究表明较低浓度的二噁英污染对野生鱼类能造成威胁,而亚致死性浓度的TCDD对胚胎的颌骨发育无影响。     

深海鱼油毒理学安全性评价

目的对深海鱼油进行毒理学安全性评价,为其食用安全性提供科学依据。方法采用急性经口毒性试验,遗传毒性试验和30 d喂养试验进行检测评价。结果深海鱼油对两种性别的大、小鼠经口急性毒性最大耐受量(MTD)均大于15.0 g/kg;Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验结果均为阴性;30 d喂养试验也未见明显的毒性作用。结论深海鱼油为无毒级,无遗传毒性,是一种安全的保健食品。     

In silico技术对三聚氰胺及其类似物的人体暴露风险评价

目的 将国外先进的in silico技术应用于毒性评价实践中,探讨三聚氰胺及其类似物的毒性作用途径并评价其人体暴露风险。方法 采用国外先进的QSAR（quantitative structure activity relationship）测试模块,对三聚氰胺及其类似物的皮肤接触过敏性、人体感觉刺激性以及眼刺激性分别进行了预测和评价,并针对其人体感觉刺激性预测结果,计算三聚氰胺、三聚氰酸和三聚氰酸-酰胺的无可观察效应水平（no-observed—effect—level,NOEL）值。结果 皮肤接触过敏性的可能性为环丙氨嗪（灭蝇胺）（97％）〉三聚氰胺（80％）〉三聚氰酸-酰胺（75％）-三聚氰酸二酰胺（75％）〉三聚氰酸（18％）。感觉刺激性的可能性为三聚氰酸（88％）-三聚氰酸-酰胺（88％）〉三聚氰胺（22％）-三聚氰酸二酰胺（22％）-环丙氨嗪（灭蝇胺）（22％）。眼刺激性的可能性均为23％左右。针对感觉刺激性作用途径,NOEL值为三聚氰胺（60ppm）〉三聚氰酸（2．7ppm）-三聚氰酸-酰胺（2．7ppm）。结论 三聚氰胺及其类似物可能存在感觉刺激性和皮肤接触过敏性等作用途径。而且针对感觉刺激性作用途径,三聚氰酸和三聚氰酸-酰胺的NOEL值远低于三聚氰胺,提示其风险较高,需要引起注意。NOEL数值不仅为科学上对三聚氰胺以及类似物进行定量风险评价提供了依据,也为日常工作和生活中对三聚氰胺及其类似物的风险管理和监督控制提供了参考。     

Inhibition of RNA synthesis by benzene metabolites and their covalent binding to DNA in rabbit bone marrow mitochondria in vitro

Mitoplasts from rabbit bone marrow cells in vitro incubated with benzene metabolites showed a concentration-dependent inhibition of mitochondrial RNA synthesis. The 50% molar inhibitory concentration for each metabolite was determined to be p-benzoquinone, 2 X 10(-6); phenol, 2.5 X 10(-5); hydroquinone, 5 X 10(-5); catechol, 2 X 10(-3); benzene, 1.6 X 10(-2). Activated metabolites of radiolabeled benzene covalently bound to mitochondrial DNA in vitro. Labeled deoxynucleosides, enzymatically produced from DNA isolated from mitoplasts prelabeled in DNA with [3H]dGTP and exposed to [14C]benzene in vitro, were chromatographed on a Sephadex LH-20 column to obtain deoxynucleoside-adducts. The elution profiles indicated that mtDNA contained seven deoxyguanosine-adducts. A similar experiment in which the mtDNA was prelabeled with [3H]dATP indicated that two deoxyadenosine-adducts of mtDNA were formed from benzene in vitro. Tentative identification of several deoxyguanosine-adducts indicates that p-benzoquinone, hydroquinone, phenol, and 1,2,4-benzenetriol produced from benzene form adducts with guanine.     

A novel contact assay for testing genotoxicity of chemicals and whole sediments in zebrafish embryos

Broad consensus exists that whole-sediment exposure protocols represent the most realistic scenario to simulate in situ exposure conditions. So far, however, several endpoints including genotoxicity in vertebrate-based systems could be tested only after transfer of particle-bound substances into the aqueous phase. The present study was carried out to develop a protocol for generating a suspension of single cells from sediment-exposed zebrafish embryos that is suitable for detecting particle-bound genotoxicity in the alkaline single cell gel electrophoresis (comet assay). In this solid-phase genotoxicity assay, a whole-body cell suspension derived from zebrafish embryos exposed to native (whole) sediments is assayed in the comet assay. Several chemical and mechanical isolation procedures were compared to optimize cell yield and minimize DNA damage by the method itself. If compared to collagenase isolation, mechanical cell dissociation gave less DNA damage; trypsinization resulted in similarly low DNA damage but significantly lower cell yield. In order to test the optimized protocol, effects of well-known genotoxicants (4-nitroquinoline-N-oxide, nitrofurantoin, hydrogen peroxide, benzo[a]pyrene) and of two sediments from the upper Rhine River (Germany) on zebrafish embryos were investigated. Results documented clear-cut genotoxicity for all four substances and for one of the two whole-sediment samples. An ultraviolet (UV) light exposure of whole embryos and primary cultures from embryos elucidated only minor effects for the whole embryos compared to the primary cells. Consequently, UV irradiation cannot be suggested as a positive control in intact zebrafish embryos. In conclusion, the newly developed sediment contact assay can be recommended for the detection of both single substances but also the bioavailable fraction of the total hazard potential of sediments.     

室内空气中对二氯苯卫生标准的研究

目的制定室内空气中对二氯苯卫生标准。方法将KM小鼠随机分为雌、雄2组,进行急性经口半数致死量(LD50)试验和蓄积毒性试验。采用Wistar大鼠进行急性经呼吸道半数致死浓度(LC50)试验(急性吸入染毒2h),并进行了亚急性吸入毒性试验和遗传毒性试验(14、28d)。采用新西兰大白兔进行皮肤、眼刺激试验。在卧室衣柜内悬挂对二氯苯防虫饼104g,在卫生间放置对二氯苯除臭剂100、120g,在书房的2只书橱内各放置52g对二氯苯防霉剂,测定正常使用情况下空气中浓度,每日1次,共测定6d。结果雌性小鼠对二氯苯原药急性经口LD50为5129mg／kg,雄性小鼠LD50为5012mg／kg,雌、雄动物混合计算时,二者均为低毒级,弱蓄积性。对二氯苯原药和制剂大鼠急性经呼吸道LC50分别大于12．8、11．99g／m^3,均属于低毒级,亚急性吸入染毒(0-528mg／m^3)14d和28d未见肝、肾、脾脏异常的病理改变,未见体重改变。新西兰大白兔皮肤、眼一次性刺激为阴性,皮肤长时间反复作用具有刺激性。正常使用情况下,卧室空气中对二氯苯浓度为0．14-0．3mg／m^3,卫生间、书房空气中对二氯苯浓度≤0．3mg／m^3。结论参照国外对二氯苯的容许限值及有关标准、法规、建议及室内外环境数据等相关资料进行综合分析研究,提出室内空气中对二氯苯日平均最高容许浓度为1．0mg／m^3。