单克隆抗体

单克隆抗体的局限性与常规抗血清相比,单克隆抗体(McAb)是只对一个表位特异的,并具有一种抗体的结合特性和生物学特性。虽然交叉反应发生率比常规抗血清明显减少,但仍可发生交叉     

脑膜炎球菌运铁蛋白结合蛋白1和2能诱生杀伤脑膜炎球菌的杀菌抗体

当脑膜炎球菌在体内和限铁条件下生长时,能表达脑膜炎球菌铁调节外膜蛋白,包括运铁蛋白结合蛋白1和2(Tbpl和Tbp2).Tbp是人运铁蛋白的高特异性受体,在人类和动物中有免疫原性,并且暴露于细菌表面.因此菌苗研制者试图将TbP掺入到脑膜炎球菌外膜菌苗中去.作者用SD株的纯化Tbp1/Tbp2复合物制备家免和小鼠抗SD株Tbp的多克隆单特异性抗血清,结果显示,此抗血清在免疫印迹中与不同血清群、型和亚型的异源菌株的Tbp1和/Tbp2间存在不同程度的交叉反     

兔抗乐果抗血清制备的初步实验研究

目的:对制备兔抗乐果抗血清进行初步研究。方法:采用生产乐果的中间体硫磷酯与1,4-二氨基丁烷反应合成乐果半抗原,利用碳二亚胺法,将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和包被原。将合成的免疫原免疫新西兰白兔6次,制备抗乐果的抗血清。用间接ELISA检测抗血清的效价,用间接竞争ELISA检测与其他结构类似物的交叉反应率。结果:通过偶联,获得免疫原和包被原,半抗原与BSA和OVA的偶联比分别为13∶1和11∶1。免疫原免疫新西兰白兔获得的抗乐果抗血清效价分别为1∶256和1∶128;与氧化乐果的交叉反应率为23%,与其他所测结构类似的农药交叉反应率均小于2%。结论:通过免疫原免疫新西兰白兔,获得抗乐果的抗血清,但其抗血清效价较低,与制备检测试剂盒的要求尚存在较大的差距。     

毛花洋地黄中异羟基洋地黄毒甙的放射免疫分析

作者采用临床上应用的商品狄戈辛抗血清进行RIA测定,研究二年生毛花洋地黄叶中地高辛含量。几个品系的毛花洋地黄种子均在法国收集,播于赫尔辛基大学植物系温室,试验前五周移至野外。用专门的镊子在叶上取直径3mm的圆片(称叶单位)立即放进盛有5ml80%乙醇的有盖试管中,于74℃培养4小时,然后用TRIS缓冲液准确稀释。经试验,作者认为商品抗血清对狄戈辛高度特异,而对其它最重要的化合物的交叉反应百分比也较Weiler     

重组保护性幽门螺杆菌抗原的分离

幽门螺杆菌 (Hp)抗原可保护小鼠免受猫螺杆菌 (Hf)感染的事实表明 ,这两种细菌有交叉保护抗原 ,业已证明脲酶 (Ure)是 Hf和 Hp的交叉保护分子。为了进一步确定交叉反应和交叉保护性抗原 ,作者用一临床分离株 (Hp92 1 0 2 3株 )作为 DNA供体在 λZAP表达载体中构建基因文库 ;同时从口服 Hf超声粉碎物 霍乱毒素 (CT)的小鼠制备抗血清筛选基因文库。结果得到 5 0个不同信号强度的阳性克隆。回收纯化阳性克隆 ,经体内切割 ,从 λZAP表达载体中获得含有相应 HpDNA的 p BK- CMV质粒 ,以进一步研究克隆 DNA及其编码蛋白的特征。经十二…     

4种血清型肺炎球菌免疫血清的制备及质控研究

目的:自制6A型、6B型、19A型、19F型肺炎球菌免疫血清并检测其质量,为肺炎球菌疫苗多糖含量的测定提供优质检验试剂。方法:(1)制备6A型、6B型、19A型、19F型肺炎球菌免疫血清：用6A型、6B型、19A型、19F型肺炎球菌菌株制备免疫原,按照免疫程序接种日本大耳白兔,将符合规定的免疫血清分装保存。(2)检测6A型、6B型、19A型、19F型肺炎球菌免疫血清：采用速率散射比浊法和ELISA法进行检测。通过外标法确定肺炎球菌免疫血清工作浓度,利用交叉反应对免疫血清进行特异性分析,将初步筛查出有交叉反应的免疫血清进行吸收后利用血清交叉实验进行再次筛查;使用ELISA法对自制与丹麦国家血清研究所(Statens Serum Institut, SSI)生产的肺炎球菌免疫血清的抗体滴度进行检测并对比;最后筛查出与C多糖具有交叉反应的免疫血清并进行吸收。结果:初步筛查出6A型、6B型免疫血清有交叉反应,19A型、19F型免疫血清有交叉反应,经吸收后成功去除交叉反应且反应曲线范围(多糖含量为0.75～2.0μg·mL^-1)线性良好(r>0.985),利用ELIS...     

ELISA与免疫沉淀反应对脑膜炎球菌血清型分型的比较和证明其血清型的多形性

作者对11株B群脑膜炎球菌血清型的兔抗血清作了检定,并研究了交叉反应性和血清学多样性。用ELxsA与ouehterlon:免疫沉淀法对同一抗原可获得不同的效价,前     

抗血吸虫药物—硝硫氰胺的放射免疫测定

本文报告了抗血吸虫药硝硫氰胺(7505)的放射免疫测定法。以7505与卵清白蛋白或猪IgG结合作抗原以免疫家兔;¹³¹I标记BSA-7505作标记抗原;并采用聚乙二醇(PEG)为分离剂。测定范围为0.64～400 ng,重复性良好。PEG的分离效果与双抗体法一致。4只家兔经一次胃饲7505(120 mg/kg体重)后,各兔血中7505浓度的变化趋势基本一致。给药后第2～3天时血中7505浓度达高峰,结果与胃饲³H-7505测定³H放射性的类似。同时并对14种7505的衍化物作了放射免疫交叉反应试验,试图探索其与结构及实验性疗效的关系。结果表明,交叉反应出现于具有基本结构的各化合物,倘改变两苯环间的则与7505的抗血清无交叉反应。交叉反应与药效的初筛结果不同,后者当两苯环间的改为-O-并不受到影响。根据交叉反应的结构特征,7505抗血清同样可应用于若干7505衍化物的定量测定。     

小肠结肠炎耶氏菌各型间共同凝集抗原

目前国内供应的小肠结肠炎耶氏菌各型免疫血清特异性不高,可与许多型菌株呈凝集反应(玻片凝集和试管凝集均有出现),影响了菌株的正确鉴定。为此,我们使用加热和不加热抗原制备免疫血清,与加热和不加热抗原进行凝集试验,发现小肠结肠炎耶氏菌各种血清型间有一种共同凝集抗原,系由加热菌体表现出来的,经注射家兔,大多数菌株均能产生共同凝集抗体,用任何一型有交叉反应的抗原均可吸收尽,但不能吸收型特异的 O 抗原。所以,此种共同凝集抗原与型特异的 O 抗原不同,在加热抗原之间或不加热抗原之间,最容易发生。因此,小肠结肠炎耶氏菌免疫血清应当用无共同型特异的 O 抗原的菌株吸收,方可使用。     

治疗用绿脓杆菌抗血清的制备、检定及应用

本文报道多价绿脓杆菌抗血清的制备、检定及应用,并证明能有效地治疗和预防绿脓杆菌感染的播散。作者按照Meitert-Meitert方法,对用于制备免疫血清的绿脓杆菌菌株进行血清分     

应用过氧化物酶抗过氧化物酶染色的灶点减少方法进行登革热和日本脑炎病毒的中和试验

登革出血热(DEN)和日本脑炎(JE)是东南亚地区常见的病毒疾病。它们的血清学诊断通常使用血凝抑制(HI)试验,因为4个型的DEN病毒和JE病毒之间有交叉反应,这就给实际应用带来一定困难。作者报告了一种较快速的方法,应用过氧化物酶抗     

蛇毒降纤酶多克隆抗体的制备及其某些性质

为制备长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶的多克隆抗体 ,以期获得酶免疫测定所需的反应试剂 ,供药剂学的研究应用。经免疫兔获得高效价的抗长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶的抗血清 ,以环状沉淀反应、琼脂免疫双扩散 ,以及酶联免疫吸附法 ,验证了产生的抗体。免疫双扩散及ELISA测定的结果表明 ,长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶与日本克栓酶有着不同的抗原决定簇结构。 3只兔的抗血清以 1∶7 2万的倍数稀释时 ,其在ELISA测定中的光密度 (OD4 90nm)仍比空白对照高出 0 2以上 ,具有较高效价 ;该抗体与精制蝮蛇抗栓酶有一定的交叉反应 (比率为 0 0 2 4) ,与江浙蝮蛇蛇毒粗品及日本克栓酶间的交叉反应微小 (比率小于 0 0 0 1) ,具有较好特异性     

生药中的霉菌

霉菌污染及其毒性的估计作者考查了246种生药霉菌污染的情况。每克生药中霉菌数为100以下的占10％,100～14,000个占66％,10,000个以上占24％。从50种生药中分离属于23个属的208种霉菌菌株。曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、毛霉属(Mucor)、根霉属(Rhizopus)和枝霉属(Thamnidium)在所检出的霉菌中占优势。检查曲霉属菌株和青霉属菌株是因为它们能够产生黄曲霉毒素     

桑青枯病病原细菌的鉴定

根据对桑青枯病原细菌的个体形态、培养性状、生理特佳、生化反应、血清学特性、寄主范围等方面的试验研究结果,我们认为该菌与花生青枯病菌和番茄青枯病菌(青枯假单胞菌,Pseudomonas solanacearum(Smith)Smith)基本相同。从寄主范围还可以认为桑青枯病菌属于青枯假单胞菌小种1(Ps.Solanacearum Race 1).     

由伤寒杆菌分离的具有甘露糖受体样活性的不含O、H及Vi的免疫保护性抗原成分

作者应用伤寒杆菌TY6S株,经1.5MNaCl冲洗,并在5～20％蔗糖中经密度梯度超速离心,获得一种不含O、H及Vi抗原的P组分。用它免疫家兔产生的抗血清对于受到致死剂量有毒菌株攻击的鸡胚具有保护作用。纯化的P组分含80％蛋白质和少量中性碳水化合物和脂质。在中性碳水化合物中,     

口服BS-WC和WC霍乱死菌苗的抗原成分的交叉免疫电泳分析

霍乱毒素B亚单位(BS)是有效的口服免疫原,灭活的全菌体(WC)中的脂多糖(LPS)是主要的保护性菌体抗原。作者采用交叉免疫电泳法(XIE)对BS-WC混合菌苗和WC菌苗中的抗原成分进行了分析。作者用BS-WC和WC菌苗提取物及相应的抗血清作为实验材料,用01群霍乱弧菌菌     

肺炎球菌结合疫苗诱生的抗6A和6B型肺炎球菌多糖抗体的交叉反应性

6A和 6 B型肺炎球菌均是感染的重要原因 ,它们的多糖 (PS)有相当多的化学相同性 ,一般推测它们能诱生交叉反应性抗体 ,而且一种血清型免疫接种能预防其交叉反应型。因为 6 B型的水解稳定性优于 6 A型 ,所以 ,目前的商业或实验用肺炎球菌疫苗均以6 B作为 6型的唯一代表。为了确定结合疫苗是否确能诱生抗 6 A型功能性交叉反应性抗体 ,作者在肺炎球菌结合疫苗免疫婴儿中评估了抗 6 A和 6 B型 Ig G抗体的浓度和调理吞噬活性 (OPA)。分别用含有 6 B型的七价肺炎球菌结合疫苗 Pnc CRM、四价结合疫苗Pnc D或四价结合疫苗 Pnc T连续 2次接…     

降纤酶定性及半定量检测方法Ⅰ.点-免疫结合测定法

以降纤酶为抗原，降纤酶特异抗血清为抗体，应用碱性磷酸酶免疫斑点法，对降纤酶制剂进行特异性定性及半定量检测，最低检出量１０ｎｇ。与凝血酶无交叉反应，也不受赋形剂干扰。且可直接用于蛇毒液中降纤酶含量测定。     

金黄色葡萄球菌Cowan菌株用于诊断流感的进一步研究

本文作者对早期报告的利用致敏葡萄球菌鉴定流感病毒的方法进行了标化。此法基于某些金黄色葡萄球菌菌株(如Cowan Ⅰ型株)的细胞壁含有一种蛋白质能与IgG血清球蛋白结合,而不影响抗体位置,所以结合在该细菌细胞壁上的抗体仍能与相应抗原发生反应,致使IgG包被(致敏)的细菌凝集。     

胰岛素酶联免疫测定法的研究快速制备高质量胰岛素抗血清(Ⅰ)

本文报告制备胰岛素抗血清的新方法。每只免疫动物的胰岛素用量为200～300μg.免疫时间60天。经放射免疫分析,10株抗血清的50%B/T稀释度均大于1:10万,最高者达1:26万。用计算机进行Scatchard分析,10株抗血清的Ka_1均大于1.5×10~(12)L/M,Ka_2均小于4×10~(?)L/M。[Ab~·]_1,在0.5～1.6×10~(-12)M/L之间,[Ab~°]_2均大于1×10~(-11)M/L。10株抗血清与前胰岛素、胰多肽和胰高血糖素进行放免分析,均无交叉反应。