人源抗HBsAg抗体Fab段在酵母中的表达

目的探索抗体在毕赤酵母中表达的可能性.方法首先构建既可在体外构建多拷贝、又可于体内筛选多拷贝的分泌型酵母表达载体-pD89,在此基础上插入抗乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)人源抗体Fab段的基因,电转化后,经G418筛选,得到阳性重组克隆.结果聚丙烯凝脉电泳(SDS-PAGE)检测证明,甲醇诱导后,阳性重组克隆可分泌表达分子量约50 KD的蛋白,免疫印迹实验证实,该蛋白为人源抗体Fab段.结论ELISA结果显示,表达的Fab段能够与HBsAg结合.     

Anti-β_2-GPⅠ抗体ELISA检测方法的建立及在RSA患者的临床应用

目的:应用重组人β2-糖蛋白Ⅰ(recombinant humanβ2-glycoproteinⅠ,rhβ2-GPⅠ),建立检测抗β2-GⅠ抗体(anti-β2-GPⅠantibody,anti-β2-GPⅠ)的ELISA方法,将其用于临床反复自然流产(recurrent spontaneousabortionRSA)患者的检测。方法:应用SDS-PAGE、ELISA、Western Blot方法鉴定制备的rhβ2-GPⅠ蛋白,以制备的rhβ2-GPⅠ蛋白作为包被抗原,建立ELISA检测方法,对RSA患者血清进行检测。结果:SDS-PAGE结果显示在34KD处的蛋白带与理论大小相当,westblot和ELISA实验结果显示多克隆抗体能够与其特异性结合;应用制备的rhβ2-GPⅠ蛋白建立了检测anti-β2-GPⅠ抗体的ELISA方法,实验结果与商品化的进口试剂盒无差异。结论:制备的rhβ2-GPⅠ蛋白具有很好的抗原性,可用于临床anti-β-GPⅠ抗体的检测,为临床RSA患者的检测提供了一种新的检测试剂盒。     

神奇的自身脂肪移植术——自身脂肪组织移植在美容外科中的应用

美容外科在很多时候需要充填和植入一些材料方能达到效果,这些材料通常有三大类:一、硅胶类,以液体硅胶隆乳和固定硅胶隆鼻为代表;二、生物蛋白及衍生物,如伊凡露、爱贝芙、胶原蛋白等;三、高科技产品,如美国的高泰克斯等膨体材料,其可作为一种网状物质为人体组织的介入提供一个基础支持。这些植入材料总的来说其安全性是很高的,但因个体差异,少数人会发生排异反应,如隆乳后乳房硬化,隆鼻后局部红肿等。用自身脂肪组织的细胞来进行美容外科方面的填充和移植,     

人胰岛素生长因子1的原核表达及其单克隆抗体的制备

目的原核表达、纯化人胰岛素样生长因子1（hIGF-I）,并制备其单克隆抗体（mAb）。方法通过RT-PCR方法从人体肝脏组织中扩增得到hIGF-I基因片段,构建重组原核表达质粒pET-28a（＋）/hIGF-I,在大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。将表达蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾脏和小鼠杂交瘤细胞融合制备针对hIGF-I的特异性单克隆抗体。结果成功表达出了hIGF-I蛋白。SDS-PAGE电泳显示所表达蛋白质的相对分子量（Mr）大小约为18 KD。获得了1株能够稳定表达抗hIGF-I抗体的杂交瘤细胞株（8F2）,其分泌的mAb的IgG亚类（型）为IgG2b,ELISA检测,对应腹水mAb的效价分别为1∶7.5×10^5。Western-blot结果显示抗hIGF-I mAb具有良好的特异性。结论成功制备了抗hIGF-I mAb,为进一步研究IGF-I在肿瘤治疗中的作用提供了有力的工具。     

亲和层析法纯化系统性红斑狼疮特异性 60 KD Ro/SSA抗原

目的：建立亲和层析法纯化Ro／SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法：从猪脾提ENA(可提取核抗原)，以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60 KD SSA抗体阳性的病人的血清，制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果：60 KD SSA抗体阳性标准血清ELISA检测为阳性，Sm和RNP、Jo-1、Scl-70的标准抗血清为阴性。结论：该方法可获得高纯度的抗原，可用于ELISA检测等目的。     

电致动高分子材料在生物医学领域的应用

资料表明,2002年全球生物相容性材料和终端产品市场已从2000年的230亿美元增长至500亿美元,平均年增长率达50%。医用高分子材料是高分子学科与生物材料学科发展最快、最引人注目的领域。除了在医学仪器与医疗器械的设计与加工过程中作为一种基础材料外,医用高分子材料还被广泛用于一次性医疗用品、假肢、软组织填充剂、医用胶黏剂、整形美容、药物载体等,其市场销售额已超过200亿美元。目前,临床上以可降解性的高分子材料为主,例如PLA、PLGA、胶原、透明质酸、甲壳糖等。这些材料具有优良的生物可降解性,安全无毒,植入人体后与周围组织有…     

点带石斑鱼过敏原分离、鉴定与纯化

目的 对点带石斑鱼的主要过敏原进行分离、鉴定与纯化.方法 通过十二烷基硫酸钠-聚丙炳酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离点带石斑鱼的蛋白质组份,采用免疫印迹(western-blotting)方法鉴定过敏原,通过离子交换层析对主要过敏原进行初步纯化.结果 SDS-PAGE结果显示,点带石斑鱼粗提液含有13条蛋白带,含量高的有8条,分子量分别为43,34,28,25,22,17,15,9 kD;westem-blotting显示,对点带石斑鱼过敏患者的阳性混合血清能与其中4个蛋白条带起反应,分子量分别为34,28,24,22 kD.离子交换层析可初步纯化出22 kD的过敏原蛋白.结论初步分离得到分子量为22 kD的点带石斑鱼主要过敏原,为临床诊断和治疗鱼类过敏性疾病提供理论依据.     

注射隆乳术后继发乳腺脓肿患者的护理

聚丙烯酰胺水凝胶曾一度作为软组织填充材料,用于乳房整形术,但部分病例可能继发哺乳期急性乳腺炎或乳腺脓肿,给患者带来极大的痛苦.     

鲤鱼主要变应原的分离、鉴定与纯化

目的 对常见的食物过敏原鲤鱼进行特异性抗原成分的分离、鉴定和纯化，为临床诊断及治疗鲤鱼过敏症提供理论依据。方法 通过磷酸盐缓冲溶液进行提取、用十二烷基硫酸钠．聚丙烯胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离出多种蛋白组分并测定其分子量；采用蛋白印迹技术（Western-blotting）鉴定其变应原并通过DE52离子交换层析对鲤鱼变应原进行初步纯化，进一步经凝胶过滤层析对变应原混合组分进行纯化。结果 SDS-PAGE分离出14种蛋白组分，其中主带有9条，分子量分别为5，46，36，34，26，25，23，20，16kDa。Western—blitting结果显示，鲤鱼的主要变应原及次要变应原的分子量是42，36kDa的变应原组分。结论 鲤鱼主要特异性变应原为42和36kDa的蛋白质，为临床诊断和治疗鱼类过敏性疾病提供标准化的廊原尊定了基础．     

人畸胎瘤衍化生长因子原核表达载体的构建及表达

目的:构建人畸胎瘤衍化生长因子(teratocarcinoma-derived growth factor-1,TDGF-1)原核表达载体,进一步探讨其生物学作用及机制。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,利用TDGF-1特异性引物通过RT-PCR方法扩增TDGF-1 cDNA,克隆入pHB载体中,构建重组载体pHB-TDGF-1。将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,并通过SDS-PAGE及免疫印迹法对表达产物进行鉴定。结果:酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;SDS-PAGE及免疫印迹结果显示,所构建的重组载体可在大肠杆菌中高效表达TDGF-1。结论:该研究成功构建了人TDGF-1原核表达载体,并能够在大肠杆菌中有效表达TDGF-1,为进一步研究TDGF-1的生物学功能及其机制奠定了基础。     

间日疟原虫、食蟹猴疟原虫和伯氏疟原虫的可溶性抗原蛋白质印渍分析

分别采间日疟（ＰＶ）患者、食蟹猴疟原虫（ＰＣ）感染恒河猴和伯氏疟原虫感染小鼠的原虫血制备的可溶性抗原，经ＳＯＳ－ＰＡＧＥ，分离出８、４、５条主带，经８株ＭｃＡｂ作蛋白印渍分析，结果ＭＣＡｂ９１ＰＶ１１—１３仅与ＰＶ抗原上分子量为１１４ＫＤ和７２ＫＤ的两种蛋白起反应，而９１ＰＣ３—４能和ＰＶ抗原上１５３ＫＤ、１４７ＫＤ及ＰＣ抗原上１４９ＫＤ反应，９１ＰＣ４—４能与ＰＶ抗原上７２ＫＤ，ＰＣ抗原上７４ＫＤ及人红细胞蛋白的８０ＫＤ反应。表明９１ＡＶ１１—３是较为成功的ＭｃＡｂ。     

Determination of dioxins in human hair: Estimation of external and internal exposure to dioxins

Objectives To clarify the origin of dioxin and related compounds (dioxins) in human hair, we determined the amounts of adsorbed dioxins in human hair, and the distribution of 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) in rats. Methods Human hair specimens, packed in a glass column, were exposed to ambient air that was introduced into the column with an air pump for 24 h. Rats were administered TCDD by gavage at doses of 0.2, 0.8, and 1.6 μg/kg body weight. Four weeks after TCDD administration, hair from the back, serum, and adipose tissue were removed under diethyl ether anesthesia. The amounts of dioxins in these samples were analyzed by high resolution gas chromatography with mass spectroscopy. Results Exposure of the hair specimens to ambient air for one day increased the total toxic equivalent (TEQ) value by 51%. In TCDD-treated rats, the amount of TCDD in hair increased in a dose-dependent manner, and showed a significant positive correlation with that in adipose tissue. Conclusions Human hair was found to retain dioxins by both internal and external exposure, and the contribution of external exposure was estimated to be about 40% of the TEQ.     

人发角蛋白人工腱材料体外生物容性的实验研究

目的研究人发角蛋白人工腱材料(HHKAT)的体外生物相容性。方法在体外培养的人胚腱细胞(HETC)中加入不同浓度的HHKAT浸泡液(100％、50％、10％)，培养1、3、5、7d，通过倒置显微镜，HETCI型胶原的表达，HHKAT与HEIC的复合生长情况及超微结构的观察等方法，了解HHKAT对HETC的生长及超微结构的影响。结果不同浓度HHKAT浸泡液对HEIC的形态、Ⅰ型胶原的表达及超微结构无抑制作用，并能与HHKAT粘附生长。结论HHKAT具有良好的生物相容性。     

微孔多聚糖止血球组织吸收实验研究

目的：观察将微孔多聚糖止血球喷洒于新西兰兔软组织创面后组织吸收和创面修复的情况。方法：将新西兰兔麻醉后于一侧后腿肌肉丰富区域剃毛建模,形成一条长约4 cm、深约1 cm的软组织创面,将1~2 g微孔多聚糖止血球均匀喷洒于创面,记录止血时间。分别在24、48、72 h和7 d,剪开手术部位的皮肤,观察组织吸收和创面修复情况。结果：软组织创面止血时间为（13.67±1.78）s,止血显效率为91.67%,有效率为100%。24、48、72 h止血球由粉状逐渐变为糊状凝胶黏附于创面,止血球与肌肉的接触创面表面发红,有少量炎性细胞渗出,7 d时完全吸收,肌细胞未见明显变化,创面未见水肿、渗出及溃烂,与正常对照组无明显差异。结论：微孔多聚糖止血球应用于软组织出血创面,止血效果好、吸收完全,是一种理想的止血材料。     

Surface roughness of composite filling materials.

Seven commercial composite filling materials were studied as regards 1) differences in their ability to take a smooth polish as measured by an electronic roughness gauge and 2) their relative loss in smoothness due to toothbrushing. A series of test formulations indicated that polishability and ability to retain a good polish are interrelated and are functions of filler particle size and filler hardness. Optimization in the filler particles from the point of view of polishability also results in improved wear resistance to toothbrushing.     

元素平衡医学食疗和艾滋病防治

艾滋病是由艾滋病病毒即“人类免疫缺陷病毒”（human immunodeficiency virus,HIV）感染引起的一种传染病,临床病名为获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodenciency syndrome,AIDS）,简称为“艾滋病”。主要是经性接触或血液、血液制品传播,侵犯免疫系统,临床表现为全球性迅速传播、发病缓慢,为后天获得性免疫缺陷,导致各种机会性感染及恶性肿瘤,目前尚无有效治愈方法,其死亡率极高,在非洲某些国家有国家民族灭亡之危险,在目前是全球60亿人的最大流行性温疫,人类第四杀手,在非洲是第一杀手。元素平衡医学食疗：是以元素平衡为核心在原子、分子生物学基础上,用食物疗法防治艾滋病。笔者分析患者头发35种元素含量与正常人比较,发现艾滋病患者与系统性红斑狼疮（SLE）、癌症患者头发检验结果相类似。笔者用元素医学食疗法、试治4例艾滋病患者获得非常成功的效果,第一例食疗一个月,病人各种病状消失、体重增加5KG,体质恢复,食疗56天血象检查原不正常都转变为正常结果,CD。细胞恢复到正常范围,食疗中病人吃饭好、睡觉好、有力气、有精神,不再脱发,且无痛苦、无任何毒副作用。     

元素平衡医学食疗和艾滋病防治

艾滋病是由艾滋病病毒即“人类免疫缺陷病毒”[human immunodefjcjencyvirus,HIV]感染引起的一种传染病,临床病名为获得性免疫缺陷综合征[acquired immunodeficiency syndrome,AIDS],简称为“艾滋病”。主要是经性接触或m液、m液制品传播,侵犯免疫系统,临床表现为全球性迅速传播、发病缓慢,为后天获得性免疫缺陷,导致各种机会性感染及恶性肿瘤,目前尚无有效治愈方法,其死亡率极高,在非洲某些国家有国家民族灭亡之危险,在目前是全球60亿人的最大流行性温疫,人类第四杀手,在非洲是第一杀手。元素平衡医学食疗：是以元素平衡为核心在原子、分子生物学基础上,用食物疗法防治艾滋病。笔者分析患者头发35种元素含量与正常人比较,发现艾滋病患者与系统性红斑狼疮[SLE]、癌症患者头发检验结果相类似。笔者用元素医学食疗法、试治4例艾滋病患者获得非常成功的效果,第一例食疗一个月,病人各种病状消失、体重增加5kg,体质恢复,食疗56天血象检查原不正常都转变为正常结果,CD4细胞恢复到正常范围,食疗中病人吃饭好、睡觉好、有力气、有精神,不再脱发,且无痛苦、无任何毒副作用。……     

Detection of Ethanol Consumption by ELISA Assay Measurement of Acetaldehyde Adducts in Murine Hair

Acetaldehyde (AA), a principal metabolite of ethanol, reacts with proteins to form protein–AA adducts in vivo and in vitro. We studied three different protein–AA adducts produced in vitro, as well as hair keratin–AA adducts from ethanol-fed and/or cocaine-injected mice. An enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was developed that detected the stable protein–AA adducts in protein isolated from hair. Cocaine injection had little effect on hair AA adduct formation. The indirect ELISA assay showed significantly increased levels of keratin–AA adducts in hair from mice fed ethanol for 8 weeks. Hair collection was noninvasive and the AA–protein adducts were stable. Therefore, this indirect ELISA assay could be further developed as a biochemical parameter for alcoholism in the clinical setting.     

Tanner staging of secondary sexual characteristics and body composition, blood pressure, and insulin in black girls

OBJECTIVE: To assess Tanner staging (breast and pubic hair development) and its relationship to measures of body composition, blood pressure, and fasting insulin and glucose in young black girls. RESEARCH METHODS AND PROCEDURES: Subjects were 138 black girls, 8 to 12 years of age, recruited from elementary schools in low socioeconomic status neighborhoods. Exclusion criteria included the presence of any acute/chronic medical conditions. Pubertal stages were assessed by one of two pediatricians and analyzed individually, as well as with a composite index (prepubertal, pubertal/premenarcheal, or pubertal/menarcheal). Glucose and insulin were measured after a 12-hour fast. Measures of body composition included height, weight, BMI, waist and hip circumferences, fat mass, fat-free soft tissue, bone mineral density (DXA), and visceral adipose tissue (magnetic resonance imaging). Resting systolic and diastolic blood pressure were measured by Dinamap. RESULTS: With age in the model, breast development explained significant proportions of the variance in height, weight, fat-free soft tissue, bone mineral density, and insulin. Adding pubic hair development or menarche to those models did not significantly increase the proportion of variance that was explained by breast development. Furthermore, using a composite index of pubertal staging explained a smaller proportion of the variance compared with breast development alone. DISCUSSION: Combined with age, breast development was a better predictor of body composition and fasting insulin than was pubic hair development or a composite index of pubertal staging.     

LA辅助促排卵对金黄地鼠子宫内膜分泌与合成蛋白的影响

对模仿人类体外受精(IVF)的动物模型金黄地鼠(hamster)的子宫内膜蛋白分泌及合成进行研究。结果表明:蛋白的分子量迁移在31～66KD,但蛋白电泳照片示在Leuprolide Acetate(LA)组其蛋白带密度明显低于孕马血清促性腺激素(PMSG)组;而新合成蛋白分析示在低分子和中分子量(31KD和45KD)LA组却明显高于PMSG组。且LA组分泌及合成蛋白均与无促排卵组(对照组)相似。该资料提示:使用LA(GnRHa类)促排卵使子宫内膜分泌趋向生理化是IVF高受孕率的机理之一,而子宫内膜蛋白分泌及合成受控于促排卵药物的种类。