VEGF,p53,P21WAF/CIP1和C-myc蛋白表达与肝细胞癌预后关系的研究

目的：探讨肝细胞癌（HCC）中VEGF,p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白表达的情况及其与肝癌预后的关系。方法：用MaxvisionTM免疫组化法,检测61例HCC组织及其中52例癌旁组织VEGF,突变型p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白的表达,观察相应的临床病理指标并进行统计学分析。结果：61例肝癌标本中,VEGF,p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白阳性表达率分别为60.7%(37/61),39.3%(24/61),21.3%(13/61)和39.3%（24/61）;52例癌旁组织中上述4种蛋白阳性表达率依次为：38.5%(20/52),0%(0/52),5.8%(3/52)和59.6%（31/52）。两种组织中4种蛋白阳性表达率差异均有显著性(P<0.05)。肝癌组织中VEGF,p53蛋白表达与肿瘤门静脉癌栓的发生存在明显相关(P<0.05);Kaplan—Meier法生存分析发现VEGF,p53蛋白阳性表达患者肿瘤术后复发时间明显早于阴性表达者;多因素分析显示,肿瘤细胞分化、癌栓形成、VEGF及p53蛋白表达是HCC术后复发的风险因素。结论：肝癌组织中VEGF和p53蛋白的异常表达与肝癌的预后密切相关,可作为肝癌预后判断的参考指标。     

抑癌基因PLAGL1在人肝细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨抑癌基因PLAGL1在人肝细胞癌和癌旁组织中的表达及其意义.方法 随机选取肝细胞癌(HCC)30例和远离癌组织的癌旁组织30例,免疫组织化学分析PLAGL1蛋白表达,分析其意义.培养正常肝细胞株L02和肝癌细胞株HepG2细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其PLAGL1 mRNA表达水平.探讨与肝癌细胞组织中PLAGL1蛋白表达相关性.结果 PLAGL1蛋白在癌旁组织中表达明显强于肝细胞癌组织,2例(7%)肝细胞癌组织中PLAGL1表达成阳性,27例(90%)癌旁组织中表达成阳性,两组之间PLAGL1的表达水平差异有统计学意义(χ2=38.44,P<0.05).RT-PCR结果显示PLAGL1 mRNA在L02细胞中明显高于HepG2细胞.结论 PLAGL1蛋白的表达下调可能与肝细胞癌的发生和发展相关,PLAGL1蛋白表达下降与PLAGL1 mRNA下调相平行.     

EphA2在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义

目的检测原发性肝细胞癌中EphA2的mRNA和蛋白的表达及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术及免疫组织化学方法检测EphA2的mRNA及蛋白在40 例肝癌及相应的癌旁肝组织和10例正常肝脏组织中的表达,并分析其与临床病理特点之间的关系。结果半定量分析显示EphA2 mRNA的表达在肝癌组织(0．836 8±0．205 7)、癌旁肝组织 (0．768 9±0．118 0)和正常肝组织(0．720 8±0．091 0)中的表达差异无统计学意义(P>0．05);从正常组织、癌旁肝组织到肝癌组织,EphA2蛋白的阳性表达率分别为50．0％、57．5％和87．5％。呈递增趋势(X~2=20．21,P<0．01);EphA2蛋白的过表达与肝癌患者的门脉癌栓、卫星灶及淋巴结转移等临床病理因素有关(P<0．05)。结论EphA2蛋白的过表达与肝癌的淋巴结转移、卫星灶的形成和门脉癌栓有密切的联系,提示其在肝癌的侵袭和转移中发挥重要的作用。     

EphA7基因在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨原发性肝细胞癌中EphA7 mRNA的表达及其临床意义.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR法检测EphA7 mRNA在40例肝癌及相应的癌旁肝组织和10例正常肝组织中的表达,并分析其与肝癌临床病理因素之间的关系.结果 40例肝癌组织及相应的癌旁肝组织和10例正常肝组织中均有EphA7 mRNA的表达.实时荧光定量PCR分析显示EphA7 mRNA在肝癌组织(20.0711±32.0232)中的表达显著高于癌旁肝组织(4.5184±9.4738,P＜0.05)和正常肝组织(4.1764±4.7193,P＜0.05),而在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).EphA7 mRNA的过表达与肝癌细胞的分化程度、门静脉癌栓的形成及淋巴结转移等临床病理因素有关(P＜0.05).结论 EphA7的过表达与原发性肝细胞癌的生物学行为密切相关,可能在肝癌的恶性转化、侵袭和转移过程中发挥作用.     

原发性肝细胞癌中EphA7蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨酪氨酸蛋白激酶 EphA7 蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化和 Western blot 方法检测 EphA7 蛋白在40例原发性肝细胞癌及相应的癌旁肝组 织和10例正常肝组织中的表达情况,并分析其与原发性肝细胞癌的临床病理因素之间的关系.结果 EphA7蛋白的表达主要位于原发性肝细胞癌细胞或肝细胞的胞质,以及纤维间隔内的血管内皮细胞.原发性肝细胞癌组织、癌旁肝组织及正常肝组织中均有EphA7蛋白的表达,Western blot分析结果显示EphA7蛋白在肝细胞癌组织(0.58±0.26)中的表达水平高于癌旁肝组织(0.40±0.22,P<0.05)和正常肝组织(0.32±0.16,P<0.05),而在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);EphA7蛋白的表达水平与原发性肝细胞癌细胞的分化程度、门静脉癌栓、淋巴结转移和甲胎蛋白水平等临床病理因素相关(P<0.05).结论 EphA7 蛋白的表达与原发性肝细胞癌的生物学行为密切相关,可能在原发性肝细胞癌的恶性转化、侵袭和转移过程中发挥重要作用.     

Ephrin-A1/Fc融合蛋白对人肝癌细胞系Huh-7生物学特性的影响

目的 探讨Ephritr-A1基因在肝细胞癌发生、发展以及血管生成中的作用.方法 人肝癌细胞系Huh-7分别经Ephrin-A1/Fc融合蛋白和IgG/Fc作用后,MTT法绘制细胞生长曲线,细胞基质黏附实验检测对细胞黏附能力的影响,Transwe11法检测细胞侵袭能力的改变.通过裸鼠移植瘤模型的建立检测Ephrin-A1/Fc融合蛋白对Huh-7细胞体内致瘤能力的影响,并计算瘤体的微血管密度(MVD),判断其对血管生成的影响.结果 Huh-7细胞的黏附率为(131.25±9.57)%,细胞侵袭实验显示Ephrin-A1/Fc融合蛋白作用后,穿过滤膜的细胞数.明显多于IgG/Fc组和空白对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05);裸鼠成瘤实验结果 显示,6周后Ephrin-A1/Fc组裸鼠体积为(186.35±16.24)mm3,其差异均有统计学意义(P<0.05);而瘤体内的MVD值Ephrin-A1/Fc也明显高于IgG/Fc组和空白对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05).Ephrin-A1/Fc融合蛋白对Huh-7细胞并无增殖促进作用(P>0.05).结论 Ephrin-A1基因在肝细胞癌的侵袭及血管生成的过程中发挥重要的作用,因此有望成为肝细胞癌基因治疗新的靶点.     

肝细胞肝癌中生长抑素受体2/5的表达研究

目的观察生长抑素受体(SSTR)-2/5在人原发性肝细胞肝癌及癌旁组织的表达,探讨其临床意义。方法选择2008年2月至2010年7月期间在天津市第一中心医院住院手术治疗的22例肝细胞肝癌患者,切取病理组织,采用免疫组化和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测SSTR-2/5在肝癌及癌旁组织中的表达,并比较其与临床病理参数的关系。结果癌旁组织和肝癌组织中SSTR-2/5均呈阳性表达;肝癌组织SSTR-2/5表达明显低于癌旁肝硬化组织〔SSTR-2mRNA(RQ值):1.89±0.74比2.54±0.80,SSTR-5mRNA(RQ值):3.61±1.66比6.78±4.27;SSTR-2蛋白:68.2%(12/22)比95.5%(21/22),SSTR-2/5蛋白均为95.5%(21/22);均P<0.05〕。全部患者术后平均无瘤生存期为27.3个月,SSTR-2/5高表达组较低表达组无瘤生存期延长(log-rank=4.08,P=0.043)。结论 SSTR低表达预后相对较差,SSTR表达的表征可以被用来作为评估肝癌预后的有用参数。     

Survivin在原发性肝癌组织中的表达及与MVD的关系

目的 研究原发性肝癌组织中Survivin的表达及其与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,探讨它们之间及其与原发性肝癌临床病理特征的相互关系. 方法 用ABC免疫组化法测定56例原发性肝癌组织及癌旁组织中Survivin的表达水平及MVD. 结果 56例原发性肝癌组织中Survivin的阳性表达率(62.5%)和MVD计数均值[(55.43±6.72)个/HP],明显高于癌旁组织中Survivin的阳性表达率(14.3%)及MVD计数均值[(21.04±3.26)个/HP](P值均<0.05);Survivin的表达情况及MVD与原发性肝癌组织的分化程度、肿瘤有无转移、肿块直径、门静脉、肝静脉癌栓关系密切(P<0.05);原发性肝癌组织中Survivin表达评分与MVD之间存在正相关关系(P<0.01). 结论 Survivin和MVD的表达可能与原发性肝癌的发生、发展及血管生成密切相关.     

Ang2,HIF-1α及VEGF对肝癌血管形成的影响

摘要：目的:探讨促血管生成素2（Ang2）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）与肝细胞癌血管形成的关系。方法:检测52例肝癌组织中Ang2，HIF-1α及VEGF mRNA及蛋白的表达，对共表达的肝癌组织进行微血管计数。结果:RT-PCR 显示,52例肝癌组织中有38例共表达Ang2mRNA，HIF-1αmRNA 和VEGF mRNA，且两两之间呈明显正相关(分别为r=0.783，P<0.01；r=0.427，P<0.05；r=0.433，P<0.05)；免疫组化发现,52例肝癌组织36例共表达Ang2，HIF-1α和VEGF蛋白。共表达Ang2 mRNA，HIF-αmRNA 和VEGF蛋白的38例肝癌组织中,平均微血管数［(45.4±8.90) 个/HP］,明显高于非共表达组［(13.6±3.30)个/HP］（P<0.05)。结论:Ang2，HIF-1α和VEGF与肝癌的新生血管形成有关；肿瘤组织缺氧可能是其始动因素。     

EphA2mRNA和VEGF在肝癌细胞中的表达及其关系

目的探讨肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）细胞中EphA2 mRNA（erythropoietin producing hepatoma cell lines）和VEGF（vascular endothelial growth factor）的表达及其关系。方法用原位杂交的方法检测53例HCC组织及其癌旁组织中EphA2 mRNA表达，并用免疫组织化学的方法检测HCC组织中VEGF的表达。结果53例肝细胞癌组织及癌旁组织中EphA2 mRNA的阳性率分别为86．79％（46／53）和69．81％（37／53），其差异有显著的统计学意义（W=2289．500，P〈0．001）；肝癌组织中VEGF的阳性率为75．47％（40／53），癌旁组织中VEGF的表达为阴性。肝癌组织中EphA2 mRNA和VEGF的表达显示：（1）表达水平与是否患有肝硬化无关；（2）表达水平分别与肝癌的临床病理学Edmondson分级呈明显的正相关（r=0．452，P=0．001；r=0．333，P=0．015）；（3）二者之间的表达水平呈明显的正相关（r=0．425，P=0．002）。结论本实验表明：肝癌细胞中EphA2 mRNA和VEGF呈过量表达；肝癌细胞中EphA2 mRNA和VEGF的表达与肝癌细胞恶性程度以及二者之间密切关联。     

肝细胞癌Period1 表达与预后的关系

目的：探讨Period1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及意义。 方法：用RT-PCR与Western blot法检测30例HCC组织与其癌旁肝组织及5例正常肝组织中Period1 mRNA与蛋白表达;甲基化特异性PCR检测HCC组织与癌旁肝组织中Period1启动子甲基化水平;免疫组化检测67例HCC组织及其癌旁肝组织石蜡切片中Period1蛋白的表达;分析Period1的表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。 结果：HCC组织Period1 mRNA和蛋白的表达水平均较癌旁肝组织与正常肝组织明显降低（均P<0.05）,而两者在癌旁肝组织与正常肝组织间差异无统计学意义（均P>0.05）;HCC组织Period1启动子甲基化水平较其癌旁肝组织明显增高（均P<0.05）。HCC组织石蜡切片中Period1阳性表达率为47.8%,而癌旁肝组织阳性表达率为83.6%,差异有统计学意义（P<0.05）;Period1表达与HCC分化程度、结节数目、有无静脉浸润有关（均P<0.05）;Period1阳性表达HCC患者中位复时间与中位生存时间均明显短于阳性者（均P<0.05）。 结论：Period1在肝癌中表达下调可能与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关;启动子甲基化可能是Period1表达下调的重要机制。     

基质细胞衍生因子-1在人肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达,探讨SDF-1和HCC的临床、病理特点及术后复发的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测SDF-1在41例HCC癌组织、癌旁组织和11例正常肝组织中的表达;分析临床、病理资料,并对上述患者进行随访,根据HCC患者术后复发时间进行生存分析.结果 SDF-1在HCC癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达阳性率分别为68.29%、46.34%、和18.18%(P<0.01).SDF-1表达强度与肿瘤病理分级呈正相关(低分化为66.67%,高分化为43.48%;转移组为52%,未转移组31.25%),差异有统计学意义(P<0.05).SDF-1表达阳性、阴性患者12月内的复发率分别为48.1%和14.3%(P<0.01).结论 SDF-1在HCC中表达上调,SDF-1的高表达在肝癌发生过程中发挥重要作用.SDF-1可作为一种新的判断HCC患者术后复发和预后的指标.     

96序列相似的家庭成员B在肝癌的表达及其临床意义

目的:观察96序列相似的家庭成员B(FAM96B)在肝癌组织及癌旁组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:收集2012年1月至2013年12月期间在中国人民解放军中部战区总医院接受手术治疗的肝癌患者的组织标本及临床病例资料。采用免疫组织化学技术(IHC)、蛋白质印迹法(Western blot)检测FAM96B在96例肝...     

组蛋白去甲基化酶含十字形结构域蛋白-3和核因子-κB高表达与肝细胞癌不良进展和预后的关系

目的观察肝细胞癌中组蛋白去甲基化酶含十字形结构域蛋白-3(JMJD3)和核因子-κB(NF-κB)蛋白水平的表达,探讨两者的相关性及其蛋白表达水平与多个临床病理因素的关系。方法采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测25例新鲜肝细胞癌组织及相对应的癌旁组织中JMJD3和NF-κB信使RNA(mRNA)表达,采用免疫组织化学法检测102例肝细胞癌及相对应的癌旁组织中JMJD3和NF-κB蛋白的表达,分析其与肝细胞癌临床病理特征的关系及上述蛋白的相关性,采用生存分析法(Kaplan-Meier)法来评估JMJD3和NF-κB蛋白的异常表达与肝细胞癌患者生存期之间的关系,Cox回归模型分析JMJD3和NF-κB蛋白的表达和临床病理参数与肝细胞癌预后的关系。结果JMJD3和NF-κB mRNA在肝细胞癌组织中的表达水平均高于癌旁组织(t=-15.130、-15.030,P<0.05),差异有统计学意义,肝细胞癌组织中JMJD3阳性率[87.25%(89/102)]显著高于相应癌旁组织[57.84%(59/102),χ²=22.153,P<0.05],差异有统计学意义,肝细胞癌组织中NF-κB阳性率[83.33%(85/102)]显著高于相应癌旁组织[29.41%(30/102),χ²=55.664,P<0.05],差异有统计学意义。JMJD3和NF-κB表达与甲胎蛋白水平、分化程度、有无脉管癌栓、淋巴结转移及TNM分期明显相关(P<0.05),NF-κB与结节数目明显相关(χ²=5.133,P<0.05),差异有统计学意义。JMJD3蛋白高表达者的生存期高于低表达者(χ²=40.568,P<0.05),差异有统计学意义,NF-κB蛋白高表达者的生存期低于低表达者(χ²=48.803,P<0.05),差异有统计学意义。Spearman相关分析结果显示JMJD3与NF-κB呈正相关(r=0.627,P<0.05)。结论JMJD3和NF-κB在肝细胞癌中的异常表达与肿瘤的浸润、转移及无病生存期明显相关。     

p27和p-ERK1/2在肝细胞癌中的表达及相关性研究

目的 探讨p27和p-ERK1/2在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达、意义及二者间可能的关系.方法 免疫组织化学(S-P)法检测肝癌50例、肝硬化15例及正常肝组织10例中p27和p-ERK1/2的表达.结果 肝癌组织中p27的阳性表达率(42%)明显低于肝硬化(78%)和正常肝组织(90%),表达水平与肿瘤恶性程度、大小、是否广泛转移等有关(P＜0.05);肝癌组织中p-ERK1/2的阳性表达率(36%)显著高于肝硬化(21.5%)和正常肝组织(11.6%),表达与恶性程度、转移等有关;肝癌组织中p27的表达与p-ERK1/2表达呈负相关(rs=-0.4812,P＜0.01).结论 p-ERK1/2基因的激活可以影响p27的表达,二者与肝癌的发生、发展有关.     

肝癌细胞中端粒酶逆转录酶与c-myc表达的关系

目的探讨肝细胞肝癌（HCC）中端粒酶逆转录酶（hTERT）与C—myc蛋白表达情况及其相关性。方法采用免疫组化SP法检测52例HCC癌组织及相应癌旁组织中hTERT与c—myc蛋白表达，并用TRAP—ELISA法检测上述组织中的端粒酶活性。结果HCC组织中hTERT与C—myc蛋白阳性率分别为86．5％（45／52）和78．8％（41／52），它们与相应癌旁组织比较差异有统计学意义（P〈0．01）；HCC癌组织中端粒酶活性阳性率为80．8％（42／52），明显高于相应癌旁组织（15．4％，8／52）；HCC癌组织中端粒酶活性、hTERT及C—myc蛋白阳性表达率两两均呈显著正相关（r=0．761，P〈0．001；r=0．654，P〈0．001；r=0．486，P〈0．001）。结论HCC癌组织中hTERT与C—myc蛋白过度表达，两者相互作用而共同参与肝癌端粒酶活性的调控。