美国临床实验室标准化委员会2003年版产孢丝状真菌药敏试验方案简介

美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1997年版推出了关于酵母菌的液体培养基稀释法(全量法与微量法)抗真菌药物敏感性试验方案M27-A。该方案准确性高、重复性好，实验室间结果的一致性可以与抗细菌的药物敏感试验相媲美。之后，NCCLS1998年版又提出了关于产孢丝状真菌的抗真菌药敏试验倡导方案M38-P。该方案包括微量液基稀释法与多量液体培养基稀释法，     

评价纸片扩散法检测念珠菌对氟康唑的敏感性及临床应用

美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)于1997年公布了酵母菌肉汤稀释法抗真菌药物敏感性试验参考方法(NC-CLS M27-A),并于2002年进行了修订(NCCLS M27-A2)[1],但该类方法操作繁琐,难以在常规工作中开展.2003年NC-CLS公布了酵母菌纸片扩散法抗真菌药物敏感性试验方案(NCCLS M44-P)[2].我们应用此方案检测了临床标本中分离的136株念珠菌对氟康唑的敏感性,并与微量肉汤稀释法测定结果进行了比较,以评价其结果和临床应用可靠性,报告如下.     

肉汤稀释法酵母菌药物敏感性试验及质量控制介绍

美国临床实验室标准化委员会(NCCLs)于1997年公布了肉汤稀释法酵母菌抗真菌药物敏感性试验参考方法(M27-A),并于2002年进行了修订(M27-A2)[1].下面简要介绍肉汤稀释法酵母菌药物敏感性试验方法及质量控制.     

肉汤稀释法酵母菌药物敏感性试验及质量控制介绍

美国临床实验室标准化委员会(NCCLs)于1997年公布了肉汤稀释法酵母菌抗真菌药物敏感性试验参考方法(M27-A),并于2002年进行了修订(M27-A2)[1]。下面简要介绍肉汤稀释法酵母菌药物敏感性试验方法及质量控制。     

CLSI抗菌药物敏感试验执行标准2007版更新要点

美国临床和实验室标准化协会(Clinical andLaboratory Standards Institute,CLSI;原NCCLS)于2007年1月出版抗菌药物敏感试验执行标准第十七版信息增刊M100-S17,包括纸片扩散法(M2)和需氧菌稀释法(M7)敏感试验文件的所有表格。本文介绍CLSI抗菌药物敏感试验分会对表格所作的重要修改,供临床实验室参考。1表格介绍1.1修改了推荐用于试验和报告的药物。每一方框中所列为几种类似药物,因其解释结果(敏感、中介或耐药)和临床效力颇为相似,故不必每种都做试验。每一方框中,“或”字表示几种相关药物,其交叉耐药性和交叉敏感性几乎完全相…     

大量、微量肉汤稀释法和E-test在氟康唑敏感试验中的比较

由于广谱抗生素在免疫力严重低下的AIDS患者中广泛应用,严重的真菌感染不断增加,应用低毒性的azole类制剂要求体外抗菌药物敏感试验。作者应用E-test、微量肉汤稀释法和美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)关于氟康唑(FCZ)药物敏感试验的参考方法大量肉汤稀释法,对238株临床分离的念株菌和近平滑球拟酵母进行了药物敏感试验。80％MIC抑制终点在孵育48小时后用参考方法大量肉汤稀释法测定,分别在孵育24和48小时后判读MIC。结果微量肉汤稀释法和大量肉汤稀释法比较,所有菌株在孵育24小时和48小时判读MIC有极好的一致性,分别为93％和94％。E-test和大量肉汤稀释法比较,24小时判读MIC终点的符合率分     

体外抗真菌药物敏感试验研究进展

体外抗真菌药物敏感试验（简称真菌药敏）对于真菌感染患者临床治疗中药物的选择、疗效观察以及预后均有很大意义。近年来，有关真菌药敏的研究取得了很大进展，其中肉汤常量稀释试验已被NCCLS作为真菌药敏的推荐方法，遗憾的是至今仍未形成一个统一的标准方法。本文就有关真菌药敏方法学的研究简加介绍。     

NCCLS抗菌药物敏感性试验执行标准第14版信息增刊更新内容介绍

美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)于 2 0 0 4年 1月推出了需氧菌抗菌药物敏感试验执行标准第 14版信息增刊(M10 0 S14 ) ,以取代M10 0 S13(见NCCLS ,Wayne ,Pennsylvania,2 0 0 4 ,2 4 (1) :1 15 9.)。下面简要介绍第 14版信息增刊主要更新内容 ,供临床微生物学实验室工作人员参考。1　革兰阴性菌的主要变化1 1　在表格的介绍中　M7“警告”表中增加“鼠疫耶尔森菌与 β 内酰胺类抗生素组合”。1 2　在抗菌药物推荐分组中　M7中增加“表 1B可能的生物恐怖病原菌在试验和报告时应考虑的抗菌药物推荐分组” ,见表 1。表 1　可能…     

目前真菌药敏试验常用哪些方法?

答 :目前真菌药敏试验常用的固基法有纸片扩散法其中以Ｅ ｔｅｓｔ法较常用 ,可用于酵母样真菌和丝状真菌 ;固基琼脂稀释法只用于部分丝状真菌如皮肤癣菌。液基法包括多量法和微量法 ,两者仅终体积有差别 ,多用于酵母样真菌和产孢的丝状真菌。美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 1 997公布了酵母菌的液体培养基药物敏感试验推荐方案(Ｍ2 7 Ａ) ,1 998年公布了针对产孢丝状真菌药敏试验的Ｍ38 Ｐ方案。上述两个方案规定了酵母菌和产孢丝状菌药敏试验的各个细节 ,被多个实验室采用 ,重复性较好 ,但是还有许多问题需要解决 ,如试验时间…     

评价3种方法检测酵母样真菌对氟康唑敏感性

目的评价3种抗真菌药敏试验检测酵母样真菌对氟康唑敏感性的临床应用研究。方法采用3种方法，即NC—CLS推荐的纸片扩散法、ROSCO纸片扩散法和微量肉汤稀释法（ATBFUNGUS2，法国生物梅里埃），检测107株酵母样真菌对氟康唑的敏感性。结果NCCLS推荐的纸片扩散法与丹麦ROSCO纸片扩散法、ATB FUNGUS2符合程度分别为94．4％、91．6％，均无一种方法敏感或耐药而其他2种方法为耐药或敏感的严重误差。结论ROSCO纸片扩散法和ATBFUN—GUS2对氟康唑的检测结果与NCCLS推荐的纸片扩散法相比符合率好，准确率高，监测的抗真菌药物种类多，更适合在临床中推广应用。     

评价3种体外敏感试验方法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的敏感性

目的 评价3种实验室常用念珠菌体外药敏试验方法在测定氟康唑和伏立康唑对念珠菌的体外活性上的可靠性及实用性.方法 应用美国临床实验室标准化委员会微量肉汤稀释法(NCCLS M27-A2),NCCLS念珠菌纸片扩散法(M44-A),丹麦ROSCO纸片扩散法、法国生物梅里埃公司ATBFUNGUS3药敏试验板条法检测氟康唑和伏立康唑对85株临床分离念珠菌及2株质控菌株的体外抗菌活性.采用SPSS 13.0软件分析结果,比较3种实验室常用药敏试验方法与NCCLS M27-A2微量肉汤稀释法的相关性.结果 3种体外药敏试验方法所得结果分别与M27-A2肉汤微量稀释法进行比较,氟康唑药敏试验结果比对,NCCLS M44-A纸片扩散法一致率为83.5%,ROSCO纸片扩散法一致率为76.4%,ATB FUNGUS 3药敏试验板条法一致率为72.9%;伏立康唑药敏试验结果比对,3种药敏试验方法一致率均为85.9%.结论 在检测氟康唑和伏立康唑对常见念珠菌体外抗菌活性的3种方法所得结果与肉汤稀释法存在一定的差异.对部分菌株(尤其是剂量依赖敏感株)需要进一步应用M27-A2肉汤微量稀释法确定其MIC值.各种体外药敏试验结果与临床体内疗效还需进一步研究.     

浓度梯度法检测系统性抗真菌药物对丝状真菌的抗菌活性

目的通过对丝状真菌的药敏试验，探讨两性霉素B、伊曲康唑和伏立康唑对丝状真菌的体外抗菌活性，从而为临床用药提供依据。方法采用浓度梯度法测试两性霉素B、伊曲康唑和伏立康唑对我院微生物科近两年内从临床送检标本中分离、鉴定并保存的62株丝状真菌的MIC值。结果烟曲霉菌、伏立康唑的最低抑菌浓度（MIC）均值为0．29μg／ml，两性霉素B的MIC均值是1．16μg／ml，伊曲康唑的MIC均值为5．88μg／ml；黄曲霉菌、两性霉素B具有较高的MIC均值（6．39μg／ml），伏立康唑的MIC均值较低，为0．22μg／ml；黑曲霉菌、伊曲康唑具有较高的MIC均值（19．75μg／ml），伏立康唑的MIC均值较低，为0．69μg／ml。对青霉菌，两性霉素B的MIC值较低，伊曲康唑和伏立康唑对3株青霉菌（占50％）的MIC值大于32μg／ml；毛霉菌和根霉菌，3种抗真菌药物均呈耐药倾向。结论3种抗真菌药物对不同丝状真菌的MIC值存在差异，实验室应加强对丝状真菌的鉴定，并积极开展真菌药敏试验以指导临床正确、有效地抗真菌治疗。     

E-test法测定两种抗真菌药物对皮肤癣菌敏感性评价

摘要：目的：评价E-test法测定临床分离的皮肤癣菌对2种抗真菌药物氟康唑、伊曲康唑的体外敏感性的结果。 方法：43株实验菌株包括红色毛癣菌36株,须癣毛癣菌4株,许兰毛癣菌2株,断发毛癣菌1株。分别使用E-test和微量液体培养基稀释法进行药物最低抑菌浓度（MIC）测定。参照2002年NCCLS M38-A文件进行结果判断。 结果：E-test法检测氟康唑的耐药率为13.95%,伊曲康唑耐药率为4.65%;微量培养基稀释法氟康唑的耐药率为9.30%,伊曲康唑耐药率为4.65%。 结论：E-test法可用于皮肤癣菌对氟康唑和伊曲康唑的药物敏感试验,与微量液体培养基稀释法相比存在结果差异,有待进一步研究。     

产孢丝状真菌NCCLS药敏试验方法的应用

美国国家临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 1997年推出了关于酵母菌的液体培养基稀释 (多量法与微量法 )抗真菌药敏试验方案Ｍ2 7 Ａ ,建立了被众多实验室认同的重复性好、准确性较高的标准化体外药敏试验方法。但由于丝状真菌本身的诸多特点如产孢条件难以控制、接种量难以精确量化、孵育时间长等 ,使其试验方法标准化具有一定难度。近年来ＮＣＣＬＳ分会成员以Ｍ2 7 Ａ的微量法为基础进行了多中心广泛深入研究[1 ,2 ] ,于 1998年提出了《产孢丝状真菌的液基稀释抗真菌药敏试验参考方案》(Ｍ38 Ｐ)。该方案在提出了一些建设性意见的…     

美国临床实验室标准化委员会酵母菌纸片扩散法敏感试验2003年版方案介绍

20 0 3年 ,美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)M4 4 P酵母菌纸片扩散法敏感试验方案 ,制定了氟康唑 (floconazole)和沃尔康唑 (voriconazole)质控株的参考范围及氟康唑的抑菌环解释标准。研究证实氟康唑对酵母菌药敏试验有较好的重复性 ,可准确地检测酵母菌对氟康唑的敏感性[1 6] 。制备 0 5号麦氏管菌悬液 ,方法与细菌纸片扩散法相同 ,将酵母菌悬液涂布于含葡萄糖和美蓝的Mueller Hinton(M H)琼脂上 ,35℃孵育 18～ 2 4h。M H琼脂补充葡萄糖和美蓝 ,可促进酵母菌生长并且改善了抑菌环边缘清晰度。补充物可直接加入M H琼脂中或倾注…     

Rosco真菌药敏试验与其他方法的比较研究

目的　对 3种酵母菌药物敏感试验 [E试验法、美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)认可的纸片扩散法、丹麦Rosco纸片扩散法 ]进行比较 ,探讨Rosco的纸片扩散法与其他 2种方法的一致性。方法　对临床分离的 5 2株酵母菌用Rosco纸片扩散法做药敏试验 ,并与E试验及纸片扩散法 (NCCLS认可 )进行对照 ,同时用标准菌株做质控。结果　氟康唑Rosco纸片扩散法与E试验法相符率为 98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ,与NCCLS认可的纸片扩散法相符率为 96 .1 5 % (5 0 / 5 2 )。其他抗真菌药Rosco纸片扩散法与E试验法相符率分别为 :伊曲康唑98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ;酮康唑 98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ;两性霉素B 98.0 8% (5 1 / 5 2 ) ;氟胞嘧啶 96 .1 5 % (5 0 / 5 2 )。经配对 χ2检验 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　Rosco纸片扩散法与E试验法、NCCLS认可的纸片扩散法结果基本一致 ,其方法操作简便、结果直观、价廉、药物选择种类多、准确性好 ,适用于临床实验室常规抗真菌药敏试验     

真菌药敏纸片扩散法实验与应用研究

目的评价氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、酮康唑4种抗真菌药物在萄萄糖美蓝M-H琼脂培养基上进行K-B纸片扩散法药敏试验的可行性。方法应用NCCLS认可的氟康唑纸片扩散法和NCCLS M27-A肉汤稀释法检测氟康唑(FLC)、两性霉素B(AMB)、伊曲康唑(ITC)、酮康唑(KTC)对131株假丝酵母菌的敏感性;用纸片扩散法同时检测2种氟康唑(FLC1:25μg/片;FLC2:15μg/片)纸片的敏感性,对其结果进行比较。结果纸片扩散法中:FLC1与肉汤稀释法符合率为97.71%(128/131);FLC2与肉汤稀释法符合率为96.95%(127/131);AMB、ITC、KTC分别与肉汤稀释法符合率为98.47%(129/131)、98.47%(129/131)、97.71%(128/131)。经Kappa检验,K值分别为:0.8952、0.8681、0.8118、0.8509、0.7190;FLC1、FLC2、AMB、ITC 2种方法一致性优,KTC 2种方法一致性良好。结论葡萄糖美蓝M-H琼脂可代替Shadomy琼脂,适用于常规纸片扩散法真菌药敏试验。     

38例患者感染丝状真菌的临床调查

摘要 目的 了解住院患者感染丝状真菌临床分布特点,为真菌感染防控提供参考。方法 采用回顾性调查方法,对某医院住院患者送检标本丝状真菌检测结果进行调查与分析。结果 调查确认38例丝状真菌感染,有50%菌株分离自痰液标本,表明呼吸道感染占主导;其次是耳内和眼角膜感染,分别占28.95%和13.16%。丝状真菌感染病例主要集中于呼吸科、高干科、眼科及耳鼻喉科。检出的菌种为曲霉菌属和毛霉菌,以及部分链格孢菌和镰刀霉菌等。结论 丝状真菌感染涉及感染部位和病原种类较多,诊治难度大,应加强丝状真菌感染的诊治和防控技术培训。     

2005年CLSI/NCCLS文件M100-S15主要更新内容介绍

美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的抗微生物药物敏感性试验（简称药敏试验）操作方法和判断标准被许多国家和地区所采用。2005年该委员会更名为临床实验室标准研究所（Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI）,目前暂称为CLSI／NCCLS。每年CLSI／NCCLS都会根据研究资料对药敏试验执行标准信息增刊（M100文件）进行修订和更新。本文简要介绍2005年CLSI／NCCLS M100-S15文件中主要更新内容。     

Rosco纸片扩散法检测酵母样真菌对氟康唑药敏试验的评价

目的　Rosco纸片扩散法在酵母样真菌药敏试验中的临床应用评价。方法　应用Rosco纸片扩散法和美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)M 2 7 A大量肉汤稀释法测定临床分离的 76株不同酵母样真菌菌株对氟康唑的药敏状况 ,并以 3株标准菌株作质量控制。结果　两种方法完全符合率是 90 8%未出现一种方法测得的敏感或耐药菌株 ,在用另一种方法检测中为耐药或敏感的严重错误。结论　Rosco纸片扩散法可以代替NCCLSM 2 7 A大量肉汤稀释法在临床推广使用。