环磷酰胺对小鼠淋巴细胞的微核和染色体畸变效应

环磷酰胺(CP)作为一种常用抗肿瘤药物,已被临床广泛地应用于对各种肿瘤患者治疗,同时CP也是一种活力较强的诱变剂,七十年代初期,Matter和Schmid利用啮齿类骨髓的有核红细胞和多染性红细胞的微核率评价了CP等6种烷化剂的诱变活力,并建立了微核测定法。随后研究者多半注重了CP对骨髓有核和多染红细胞微核率及染色体畸变率的研究,而CP对淋巴细胞的影响,未见专门的报道。本文以“上生白”封闭群小鼠为实验材料研究了不同剂量的CP对小鼠血、骨髓淋巴细胞转化率、分裂指数、微核率及染色体畸变率的影响。     

桑椹对小鼠骨髓细胞诱发突变的抑制作用

本文用小鼠骨髓细胞微核试验方法和小鼠骨髓细胞染色体畸变试验方法观察了新鲜桑椹汁对环磷酰胺（ＣＰ）诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核和染色体畸变的抑制作用。发现新鲜桑椹汁具有抑制环磷酰胺诱发骨髓微核率和染色体畸变率升高的作用，且有明显的剂量反应关系，相关系数分别为－０．９４和－０．９８。说明新鲜桑椹汁具有一定的抗诱变作用。     

The protective action of the Flastem milkvetch seed extract on the genetic damage in bone marrow lymphocytes induced by mitomycin C in mice

目的:探讨沙苑子提取物(Flastem milkvetch seed extract,FMSE)对丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用.方法:将100只昆明小鼠随机分成5组,每组20只.试验分为正常对照组(生理盐水),模型组(MMC,2.0mg/kg),FMSE低(20 mg/kg)、中(40 mg/kg)、高(80 mg/kg)剂量组.灌胃给药,连续10 d,每天1次.末次灌胃前12h,除正常对照组腹腔注射等体积生理盐水外,其余各组均腹腔注射MMC (2.0 mg/kg).用药结束后,脱颈椎处死小鼠,制备小鼠骨髓细胞悬液,应用彗星电泳、嗜多染红细胞微核形成、骨髓淋巴细胞染色体畸变和有丝分裂指数试验,检测FMSE对MMC所诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用.结果:与正常对照组比较,模型组中MMC单独作用时可造成小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著增加(P均＜0.01),有丝分裂指数显著降低(P＜0.01).而FMSE低、中、高剂量组与MMC联合作用时,与模型组比较,小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著降低(P均＜0.01),有丝分裂指数显著提高(P＜0.01).结论:FMSE对MMC诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤有明显的保护作用.     

海藻多糖对γ-射线诱发的小鼠微核形成率的影响

目的: 观察海藻多糖(PS)的抗辐射效应.方法:观察PS对60Coγ-射线诱发的小鼠外周血淋巴细胞及骨髓嗜多染红细胞微核率的影响.结果:小鼠接受2 Gyγ-射线照射后,外周血淋巴细胞及骨髓嗜多染红细胞微核率明显升高(P＜0.01);20 mg/kg*bw及40mg/kg*bw剂量的PS能使照射小鼠外周血淋巴细胞微核率明显降低(P<0.05); 10 mg/kg*bw、20 mg/kg*bw及40 mg/kg*bw剂量的PS能使照射小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率明显降低(P＜0.05).结论:PS对γ-射线诱发的染色体损伤有明显的保护作用.     

昆明山海棠水抽提物诱发小鼠骨髓细胞非整倍体的研究

以C—有丝分裂效应、微核及染色体结构畸变分析,综合评估了中药昆明山海棠根部水抽提物(THH)在小鼠骨髓细胞中的非整倍体诱发能力。结果表明,THH具有类似于秋水仙素的非整倍体诱发效应:(1)导致骨髓细胞有丝分裂指数、C—有丝分裂细胞频率显著升高,有丝分裂后期频率显著下降;(2)于小鼠骨髓嗜多染红细胞中诱发微核却无染色体断裂效应。提示THH为一种哺乳动物体细胞非整倍体诱发剂。     

沙苑子提取物对丝裂霉素C致小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用

目的:探讨沙苑子提取物(Flastem milkvetch seed extract,FMSE)对丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用。方法:将100只昆明小鼠随机分成5组,每组20只。试验分为正常对照组(生理盐水),模型组(MMC,2.0mg/kg),FMSE低(20mg/kg、中(40mg/kg)、高(80mg/kg)剂量组。灌胃给药,连续10 d,每天1次。末次灌胃前12 h,除正常对照组腹腔注射等体积生理盐水外,其余各组均腹腔注射MMC(2.0 mg/kg)。用药结束后,脱颈椎处死小鼠,制备小鼠骨髓细胞悬液,应用彗星电泳、嗜多染红细胞微核形成、骨髓淋巴细胞染色体畸变和有丝分裂指数试验,检测FMSE对MMC所诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用。结果:与正常对照组比较,模型组中MMC单独作用时可造成小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著增加(P均<0.01),有丝分裂指数显著降低(P<0.01)。而FMSE低、中、高剂量组与MMC联合作用时,与模型组比较,小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著降低(P均<0.01),有丝分裂指数显著提高(P<0.01),。结论:FMSE对MMC诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤有明显的保护作用。     

胎盘免疫调节多肽遗传毒性和抗突变作用的研究

本语文应用体外培养人淋巴细胞并进行微核、染以体畸变的检测以及小鼬有髓微核实验的研究，评价胎盘免疫调节肽遗传毒性和抗突变效应，实验结果表明，胎盘免疫肽可显著抑制培养人淋巴细胞的自发和γ射线诱发的微核形成以及丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）诱发的染色体畸变，并能明显抑制环磷酰胺诱发的小鼠骨髓多染性红细胞微核的增加，揭示了胎盘免疫调节肽具有抗突变作用。     

四物汤抗环磷酰胺诱变作用的研究

目的： 研究四物汤抗环磷酰胺的诱变作用。方法：小鼠骨髓细胞实验中,设四物汤高、中、低剂量组[分别为9.36、4.68、2.34 mg/(kg·d)],环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)阳性对照组和空白对照组,四物汤各组以不同浓度药液给小鼠连续灌胃7 d,阳性对照组和空白对照组灌服等量生理盐水。于第7天灌胃后,四物汤各组和阳性对照组小鼠腹腔注射CP 20 mg/kg,24 h后处死动物,取股骨骨髓细胞制备微核标本和染色体标本。人外周血淋巴细胞实验中,四物汤设高、中、低剂量[分别为3.36、1.68、0.84 g/(kg·d)],以家兔含药血清的形式加入淋巴细胞培养液中,四物汤各组和阳性对照组均在培养液中加入10-5 mg/mL 的CP,空白对照组加入等量生理盐水。培养72 h后收获细胞,制备微核标本和染色体标本。在光镜下观察、计数含微核及染色体畸变的细胞数,计算微核率及染色体畸变率。结果：四物汤3个剂量组在上述测试系统中,与阳性对照组比较,微核率及染色体畸变率均明显降低,差异有统计学意义 (P＜0.01);与空白对照组比较,微核率及染色体畸变率差异均无统计学意义 (P＞0.05)。结论：在本实验条件下,四物汤有明显的抗环磷酰胺诱变的作用。     

香烟烟蒂水浸泡液的致突变作用

目的:探讨香烟烟蒂水浸泡液对雄性小鼠骨髓细胞和睾丸初级精母细胞的遗传毒作用.方法:用香烟烟蒂生理盐水浸泡液为实验材料进行小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验和睾丸初级精母细胞染色体畸变试验.结果:各剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率分别为3.0‰、5.6‰、11.3‰,明显高于阴性对照组(2.0‰),并有明显的剂量-效应关系.各剂量组小鼠睾丸初级精母细胞性染色体单价体(4.6%、5.0%、6.6%)和常染色体单价体(4.4%、8.0%、10.4%)均显著高于阴性对照组(2.4%、2.6%),并有明显的剂量-效应关系,而染色体结构畸变率与对照组差异无显著性.结论:香烟烟蒂水浸泡液引起雄性小鼠骨髓PCE微核率增高,并诱发睾丸初级精母细胞染色体数目畸变.     

盐酸洛美利嗪(KB-2796)致突变性试验研究

目的：评价盐酸洛美利嗪(KB-2796)的致突变性。方法：应用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及体外培养细胞染色体畸变试验,进行了致突变作用研究。结果：各剂量组盐酸洛美利嗪在有无S 9条件下,对TA 97a、TA 98、 TA 100、 TA 102、 TA 1535均无诱发回复突变菌落数增加作用;对CHL细胞染色体无诱发畸变作用;对小鼠骨髓嗜多染红细胞也无诱发微核率增加的作用。 结论： 本实验条件下盐酸洛美利嗪(KB-2796)无致突变作用。     

针灸抗突变效应的实验研究

背景与目的： 以小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及染色体畸变率的变化,研究针灸的抗突变作用。材料与方法：以小鼠为实验动物,以环磷酰胺为诱变剂,分正常对照组,阳性对照组,针灸预防Ⅰ、Ⅱ组,针灸治疗Ⅰ、Ⅱ组,针刺实验组小鼠足三里、艾灸关元穴,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及染色体畸变率的变化。结果： 阳性对照组与正常对照组比较骨髓嗜多染红细胞微核率及染色体畸变率升高,预防各组和治疗各组低于阳性对照组。 结论： 针灸可以拮抗由环磷酰胺诱导的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及染色体畸变率的升高,具有抗突变作用。     

环磷酰胺诱发的染色体损伤与P53基因表达的关系

目的：探讨环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)对染色体损伤与P53基因表达间的关系。　方法：以正常人外周血淋巴细胞为材料,用流式细胞仪检测环磷酰胺对突变型P53基因表达的影响,同时以微核(MN)及姐妹染色单体互换(SCE)为指标,进行致突变研究。　结果：环磷酰胺用药组突变型P53基因表达率为30.81 ％,微核率为8 ‰,姐妹染色单体互换率为9.21±1.08,与对照组比较均有显著差异。　结论：环磷酰胺的致突变作用可能与影响P53的基因的表达有关。     

2-(α-羟基戊基)苯甲酸钾盐的急性毒性和致突变作用研究

目的:研究2-(α-羟基戊基)苯甲酸钾盐(dl-PHPB)的急性毒性及致突变性。方法:急性毒性试验采用Bliss法,昆明小鼠分为5组,每组10只,雌雄各半,分别按256.0、286.3、320.0、357.8、400.0、447.2 mg/kg静脉注射dl-PHPB,观察注射后至给药后14 d动物的毒性反应性质及程度,计算半数致死剂量(LD₅₀)及95%可信限;Ames试验采用平板掺入预培养法,选用鼠伤寒沙门氏菌株TA97、TA98、TA100和TA102,每皿0.5～5 000.0 μg浓度范围内,检测加和不加S9条件下对Ames菌的致突变性;微核试验采用雄性昆明小鼠,分为3组,每组6只,分别按23.3、70、210 mg/kg单次静脉注射dl-PHPB,注射后24 h计数骨髓嗜多染红细胞微核率(MNPCEs);体外染色体畸变试验在加和不加S9条件下,检测11.0~88.0 μg/mL dl-PHPB对CHL细胞染色体畸变率的影响。结果:小鼠静脉注射dl-PHPB后,各剂量动物出现一过性呼吸急促、自发活动减少、俯卧少动等症状,随剂量增加至≥320.0 mg/kg时,部分动物出现濒死症状,并在给药后2~30 min内死亡,死亡率随剂量的增加而增加,256.0~447.2 mg/kg 6个剂量组死亡率依次为0、0、10%、30%、70%、100%。未死亡动物在给药30 min后逐渐恢复正常。14 d观察期期间动物未见其他异常。其LD₅₀为373.3 mg/kg,95%可信限为355.6～392.0 mg/kg;Ames试验结果显示,在每皿0.5～5 000.0 μg浓度范围内未引起4种测试菌株回复突变数增加;微核试验结果显示,dl-PHPB在23.3~210.0 mg/kg范围内,各组动物MNPCEs均低于4‰;CHL细胞体外染色体畸变试验中,dl-PHPB在 11.0～88.0 μg/mL浓度范围内致CHL细胞染色体畸变率<5%。结论:在本实验条件下,小鼠静脉注射dl-PHPB的LD₅₀为373.3 mg/kg,致突变性3项试验均为阴性结果。     

被动吸烟对小鼠遗传毒性和生殖毒性的研究

本文应用实验动物模型,分别研究了被动吸烟对小鼠的遗传毒性、生殖毒性和胚胎毒性的效应。昆明种小鼠随机分成不同的实验组,分别以4. 7g/ m3 、9. 4g/ m3 和18. 8g/ m3 的香烟烟雾浓度染毒,并分期进行上述各项研究。实验结果表明,雄性小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率、骨髓细胞的SCE、早期精细胞微核率、精原细胞染色体畸变率和精子畸形率都随被动吸烟的浓度而上升( P < 0. 05 , P < 0. 01) ;而且两者呈正相关。同时,雌性小鼠的高、中剂量组胎鼠存活率下降,死胎增加,平均身长、尾长和体重减少,骨骼发育不良的个体增加。这些结果表明了被动吸烟有较明显的致畸、致突变效应。     

菁染料五甲川菁的遗传毒性研究

目的： 研究菁染料五甲川菁(Cy5)的遗传毒性,为其安全利用提供科学依据。方法：选用小鼠50只,随机分为阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(环磷酰胺,CP)和Cy5不同剂量试验组(2、20、200 mg/kg)。采用小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、小鼠骨髓染色体畸变试验和Ames试验,检测Cy5的遗传毒性作用。结果：在小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和小鼠骨髓染色体畸变试验中,Cy5各试验组与阴性对照组相比以及各试验组两两之间比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),而各试验阳性对照组与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);Ames试验结果亦呈阴性反应。结论：在本试验条件下,未观察到Cy5对小鼠的遗传毒性作用。     

茶绿色素的致突变作用研究

对中国绿茶提取物茶绿色素的致突变作用进行了研究。结果表明：茶绿色素８００（１／１６ＬＤ５０）ｍｇ／ｋｇ、１６００（１／８ＬＤ５０）ｍｇ／ｋｇ和３２００（１／４ＬＤ５０）ｍｇ／ｋｇ各剂量组小鼠骨髓ＰＣＥ微核率分别为３．６‰,３．２‰,２．６‰,与阴性对照组（２．８‰）比较均无显著性差异;３１２．５μｇ／ｌ皿、１２５０μｇ／皿、５０００μｇ／皿各剂量组ＴＡ９７、ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１０２等测试菌     

59. Protectivc effect of melatonin on genetic damage by chemical mutagen and the influence on cell prolife-ration kenetics

Objective: In this study, we observed the effect of melatonin on the frequency of sister chromatid exchange, micronucleus formation of binuclear cell in lymphocyte from human peripheral blood in vitro, micronucleus formation of mouse bone marrow polycychromatic erythrocyte in vivo, which were induced by chemical mutagen, and lymphocyte proliferation kenetics in vitro. Methods: ① Lymphocytes were cultured in vitro in the presence of 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin, mitomycin C(MMC) (positive control), 0.5% ethanol (negative control)and 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin plus MMC for 72 h at 37℃±1℃. Lymphocytes were examined for the frequence of SCE, mitotic index, cell proliferation cycle, cell cycle ratio and proliferation index. ② Lymphocytes were cultured in vitro in the presence of 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin, mitomycin C(MMC) (positive control), 0.5% ethanol (negative control) and 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin plus MMC for 44 h at 37℃±1℃. Then each culture was given cytochalasin B, which was cultured to 72 h. Binuclear lymphocytes were examined for the micronucleus rate. ③ The mice were administered with 0.1, 1.0,10.0 mg/kg*bw melatonin and distillated water (negative control) respectively for 7 d, then were given melatonin plus cyclophosphamide (CP) (positive control) for 2 d since the eighth day. The rate of micronulclei of mouse bone marrow polycychromatic erythrocyte was examined. Results: ① The frequences of sister chromatid exchange of lymphocytes which were cultured in the presence of 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin compared with negative control exhibited no statistical significance. ② The SCE of cells treated with melatonin plus MMC compared with positive control were markedly decreased. ③ The mitotic indices of lymphocytes cultured in the presence of 0.10,1.00 mmol/L melatonin were lower than negative control. The proliferation index was significant lower than negative control only in the culture exposed to 1.00 mmol/L melatonin. ④ The proliferation cycle of lymphocyte cultured in the presence of 1.00 mmol/L melatonin exhibited an increase in the percent of cells in their first division, and concomitant significant decrease in their third or later division. which were increased in their second division in cells treated with melatonin of three concentration respectively. The ratio between the first and third or later division, between the second and third or later division of lymphocytes exposed to 1.00 mmol/L melatonin were higher than negative control. ⑤ The micronucleus rates of binuclear lymphocytes treated with 0.01,0.10,1.00 mmol/L melatonin plus MMC were lower than positive control, of which the inhibitory rates of micronuclei were 14.37%, 22.17% and 31.34%, respectively. ⑥ The micronucleus rates of mouse bone marrow polycychromatic erythrocytes exposed to 0.1,1.0,10.0 mg/kg*bw melatonin plus CP were lower markedly than positive control, in which it exhibited a significant and concentration－depended decrease, of which the inhibitory rates of micronuclei were 28.89%, 47.73% and 69.96%, respectively. Conclusion: In vitro assay. It seems that melatonin has not only no genotoxic, but also anti-mutagenic effect on lymphocyte. It can inhibit the increase of frequency of SCE in lymphocyte and micronucleus rate of binuclear lymphocyte induced by MMC, and micronucleus rate of mouse bone marrow induced by CP at some concentiations. It can inhibit the lymphocyte proliferation of mitogen stimulated and has some influence on cell proliferation kenetics at higher concentrations (1.00 mmol/L).     

姬松茸菌体多糖对环磷酰胺诱发损伤的拮抗作用

背景与目的： 研究姬松茸菌丝体多糖（Agaricus blazei mycelium polysaccharides,Ab-Mp）对环磷酰胺所造成染色体损伤的抑制作用及机制。 材料与方法：运用热水浸提法提取姬松茸菌丝体多糖,每天以10和20 mg/kg 2个剂量对雄性小鼠进行灌胃,连续15 d。于第14 d 各组小鼠腹腔注射环磷酰胺,24 h 后重复注射1次。运用流式细胞术（Flow cytometric method, FCM）,研究Ab-Mp对受损肝细胞的细胞周期比例的影响;观察骨髓细胞染色体畸变率、骨髓细胞嗜多染红细胞的微核率。检测肝细胞匀浆液中MDA和SOD含量。 结果：Ab-Mp影响受损肝细胞各细胞周期所占的比例与阳性对照组比较,Ab-Mp可以降低肝细胞匀浆液中MDA含量（P<0.01）,并提高SOD活性 （P<0.01）。Ab-Mp 可以降低骨髓细胞的染色体畸变率和嗜多染红细胞核率 (P<0.01)。 结论：Ab-Mp可以明显提高机体抗氧化能力,拮抗环磷酰胺诱发的损伤。     

益母草对小鼠遗传物质损伤的影响

目的:观察中草药益母草对醋酸铅引起的小鼠遗传物质损伤的影响。方法：采用小鼠骨髓微核试验和小鼠精子畸形试验。结果：益母草本身不能诱发小鼠骨髓微核和小鼠精子畸形,但在与醋酸铅一同给药时,可使醋酸铅所诱发的小鼠骨髓微核和小鼠精子畸形频率明显降低。结论：益母草对小鼠遗传物质具有保护作用,即抗诱变作用。