神经酰胺在辐射诱导的秀丽隐杆线虫生殖细胞旁效应中的机制研究

目的 利用秀丽隐杆线虫为研究对象,以单粒子束为辐射源,从活体水平探究神经酰胺在辐射旁效应中的作用。方法 以野生型N2和突变体L4期线虫的后食道球为辐射部位,分别给予2 000个质子的辐照剂量,检测和分析成虫的生殖腺凋亡细胞以及基因表达水平。结果 定点辐射N2的后食道球可显著诱导线虫旁区生殖腺细胞凋亡的增加（t=9.007,P<0.05）,但在神经酰胺合酶基因突变体中未表现出这一现象（P>0.05）。实时定量PCR结果显示,辐射诱导N2和神经酰胺合酶基因突变体lagr-1（gk327）;hyl-1（ok976）线虫中凋亡核心通路基因egl-1和ced-13表达量的上升,但两品系线虫间的差异无统计学意义（P>0.05）;辐射可诱导N2和DNA损伤检验点突变体hus-1（op241）中hyl-1和lagr-1表达量的上升,且两品系间的差异无统计学意义（P>0.05）。非受体络氨酸激酶abl-1突变可显著增加辐射诱导的旁区细胞凋亡（t=13.241,P<0.05）,而当神经酰胺合酶基因与abl-1同时突变时,凋亡增加的现象被抑制（t=13.462,P<0.05）。结论 神经酰胺参与线虫体内辐射引起的旁区凋亡过程,且可能与凋亡核心通路中的促凋亡蛋白egl-1和ced-13以及DNA损伤响应通路中的HUS-1协同发挥作用。抑凋亡基因abl-1与神经酰胺合酶在凋亡过程中表现出拮抗关系。     

99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（tricine）的制备及对胰腺癌荷瘤鼠显像研究

目的制备99Tcm-（联肼尼克酰胺-蛙皮素类似肽）（N-三羟甲基甘氨酸）（三苯基膦三间磺酸钠盐）[（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）]三重配位化合物,评价其在正常小鼠及胰腺癌荷瘤裸小鼠的生物分布。方法双功能螯合剂HYNIC与[Lys3]-BBS偶联（pH值9．0）,以SnCl2为还原剂,tricine和TPPTS为协同配体,进行99Tcm-标记,合成三重配位化合物99Tcm-（HYNIC-[Lys。]-BBS）（tricine）（TPPTS）。用Sep-PakC18cartridge和HPLC对其纯化和分析,测定其标记率和放化纯,研究其在人血清中的稳定性,并进行正常小鼠体内的生物分布研究以及胰腺癌荷瘤裸小鼠活体显像。结果99Tcm-（HYNIC_[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）标记率为（90±2）％,放化纯〉95％,在人血清中放置4h其放化纯仍大于85％。正常小鼠体内分布结果表明,99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）血液清除迅速,2h血液中放射性为（0．07±0．01）％ID／g,主要经。肾排泄,肝、胃肠道摄取较少,2h时肝放射性为（0．27±0．03）％ID／g,胃为（0．06±0．03）％ID／g,肠为（0．04±0．00）％ID／g。胰腺癌荷瘤裸小鼠吖显像可见肿瘤部位有放射性浓聚影,2h后肿瘤与对侧正常肌肉的T／NT比值最高达3．71±0．57。结论99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）三重配位化合物制备成功,所用标记方法可行,标记物稳定性较好,标记率和放化纯较高,生物分布特性良好,有望用于胰腺癌的显像研究。     

应用PCR-反向点杂交法检测β-地中海贫血基因点突变

目的对疑似β-地中海贫血的4例患者进行基因诊断。方法针对β-珠蛋白基因上17个位点突变,使用特异性带有生物素标记的引物进行PCR扩增,扩增产物与固定在膜条上的寡核苷酸探针进行杂交,并通过一系列显色反应,明确检测样品在17个位点是否发生了突变,以及是否为突变纯合子或杂合子。结果 1号和2号患者均为CD17M（A→T）/N,βEM（GAG→AAG）/N双重杂合子;D3号患者为IVS-Ⅱ-654M（C→T）/N杂合子;D4号患者为IVS-Ⅱ-654M/IVS-Ⅱ-654M（C→T）纯合子。结论利用PCR-反向点杂交法技术,能对β-地中海贫血患者进行基因诊断,对其产前诊断、临床治疗以及携带者检出具有重要意义。     

年龄因素对大鼠多巴胺转运蛋白影响的实验研究

多巴胺（DA）转运蛋白（DAT）是摄取DA,调控突触间隙DA水平,维系突触前DA合成和储存的关键因素。DAT对帕金森病（PD）的研究有重要价值。^99Tc^m-2β-[N,N′-双（2-巯乙基）乙撑二胺基]甲基-3β-（4-氯苯基）托烷（TRODAT-1）可与DAT特异性结合,是研究DA能神经元功能较好的手段。已有利用^125I-13-甲基-3D-（4-碘苯基）托烷-2β-羧酸盐（CIT）研究大鼠纹状体中DAT水平随年龄变化的报道。本研究采用^99Tc^m-TRODAT-1研究大鼠纹状体中DAT水平随年龄的变化,现报道如下。     

肺咯血支气管动脉栓塞术（BAE）后 复发原因分析

目的探讨BAE术后肺咯血复发原因。方法50例肺咯血患者行BAE止血。栓塞剂采用明胶海绵（GS）条13例,GS颗粒29例,无水乙醇加GS颗粒8例。结果7例BAE术后复发,再次行BAE术。用GS条栓塞复发4例（4/13）,用GS颗粒复发2例（2/29）,用无水乙醇加GS颗粒复发1例（1/8）。病因方面支气管扩张复发4例（4/30）,肺结核复发2例（2/6）,隐源性复发1例（1/11）。结论用GS条栓塞复发率最高,用GS颗粒栓塞复发率低且较安全,无水乙醇加GS颗粒效果良好,但受到一定的限制。肺结核咯血复发率最高,支气管扩张咯血复发率较低,而隐源性咯血治愈率最高。     

两种HIV-1耐药准种分析方法的比较

目的比较两种HIV-1耐药准种分析方法 ---克隆PCR产物测序法和单基因扩增法（单基因组测序法,single-genome sequencing,SGS）。方法以本室贮存的某接受高效抗逆转录病毒治疗（highly active antiretroviraltherapy,HAART）的艾滋病患者的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）为样本,分别用克隆PCR产物序列测定法和SGS方法得到HIV-1pol区准种序列,对准种序列进行离散率、耐药相关突变组合构成比等分析。结果克隆方法得到19条pol区序列,SGS方法得到18条pol区序列。对两种方法的核苷酸和蛋白质序列的平均离散率进行成对样本均值分析,采用t检验,P值（单尾）为0.311,差异没有显著性意义;两种方法检测出各种突变组合构成比的2检验结果 ,P〉0.25,差异也没有显著性意义。但是,准种中占较少比例的突变模式在两种方法检测的结果不一致,如T215Y/K103N/Y181C/H221Y以及M41L/F116L/T215Y/K103N/Y181C/H221Y两种突变组合模式只在克隆方法中检测到,而携带M41L/A62V/T69Si/T215Y/A98G/K103N/Y181C以及K103N突变的两种毒株仅在SGS方法中出现。结论两种分析HIV-1耐药突变准种方法检测该例样本的核苷酸序列和蛋白质准种序列无显著性差异,检出的主要突变组合的构成比也无显著性差异,对优势准种的检测中两种方法差异不大,但在劣势准种的检测中两种方法有一定差异。     

体素内不相干运动（IVIM）和血氧水平依赖（BOLD）评估兔肝热缺血再灌注损伤：与CT灌注成像（CTPI）对照研究

【摘要】目的:探讨体素内不相干运动（IVIM）和血氧水平依赖（BOLD）反映兔肝热缺血再灌注损伤（WIRI）时微循环变化的敏感性及准确性。方法:30只新西兰健康成年雄兔随机分为G0组（对照组）、G1组和G2组（热缺血时间分别为40min、60min），行IVIM、BOLD和CTPI检查。取静脉血和冻存肝组织检测实验室指标，新鲜肝组织行病理学检查。采用单因素方差分析、相关分析和受试者工作特性曲线(ROC)进行统计学分析。结果：多组间各参数差异均有统计学意义（P<0.05）；且随着热缺血时间延长，灌注相关扩散系数（Dfast）、灌注分数（PF）降低，表观自旋-自旋弛豫率（R2*）、肝动脉灌注指数（PI）升高，肝动脉灌注量（HAP）、肝门静脉灌注量（HPP）先升高再降低。相关性分析显示Dfast与PI，PF与PI、HAP均呈负相关（P均<0.05）；Dfast、PF、R2*、HAP、PI均与谷丙转氨酶（ALT)、谷草转氨酶（AST）相关（P<0.05）。评价有无WIRI以及WIRI程度时，IVIM的诊断效能均高于BOLD，且与CTPI无统计学差异（P>0.05）。结论：IVIM无电离辐射、无需对比剂即可较好地反映肝WIRI时组织微循环变化情况。     

一种新式防撕裂（rip-stop）的距腓前韧带修复技术：生物力学和临床研究

目的：从生物力学及临床研究方面评估一种新式的防撕裂的距腓前韧带修复技术。方法：生物力学研究方面,采用12例新鲜冷冻尸体标本随机分为2组,分别实施传统的外侧距腓前韧带（ATFL）修复技术（Brostr?m repair,BR）（对照组）和新型防撕裂修复技术（实验组）,然后对样本进行生物力学测试,评估并比较两组间在最终失效载荷和刚度方面有无差异。临床研究方面,将连续收治的30名慢性踝关节不稳患者纳入本研究,按照随机数字表将30例患者随机分为防撕裂修复组（实验组,15例）和传统修复组（对照组,15例）,于术后2年采用美国足踝协会（AOFAS）评分、Karlsson足踝评分、Tegner评分及重返运动时间等来评估临床疗效。结果：在生物力学方面,相比于对照组,实验组显示出更高的最终失效载荷（50±11 N vs. 28±4 N;P=0.001）和刚度（4±1 N/mm vs. 2±2 N/mm;P=0.04）,差异具有统计学意义。临床随访方面,实验组与对照组在AOFAS评分（92±5分vs. 90±4分;P=0.19）、Karlsson评分（94±7分vs. 93±6分;P=0.67）、Tegn...     

歼击机飞行员腰椎峡部裂60例影像学分析（摘要）

目的探讨歼击机飞行员腰椎峡部裂影像学诊断。方法收集改装体检的歼击机飞行员腰椎峡部裂60例（62块病变腰椎）影像学资料,分析X线和部分CT、MRI表现以及其中20例6个月～7年随访复查的影像学变化。结果60例站立位x线腰椎正侧位和双斜位平片均显示峡部裂征象;仅3例x线显示单侧峡部裂,而CT证实为双侧。腰5椎峡部裂51／62块（82．26％）,其次为腰4椎峡部裂5／62块（8．06％）,腰3椎峡部裂3／62块）4．84％）,腰6椎（骶椎腰化）峡部裂2／62块（3．23％）,腰2椎峡部裂1／62块（1．61％）。60例中双侧峡部裂50块,其中伴有前滑脱者31块,     

人感染甲型 H7N9禽流感肺炎1例

患者男，57岁。1周前受凉后出现高热达39．4℃，伴肌肉酸痛，咳嗽、咳痰；外院检查血常规示白细胞偏低（具体数值不详），发病第5天正位胸片示双肺纹理粗（图1），甲型流感病毒检测阴性，考虑为病毒性感冒，给予清热解毒、退热对症治疗，病情未见好转遂来我院。查体：体温39．3℃，双肺呼吸音粗，未闻及明显干湿啰音、胸膜摩擦音及哮鸣音。血常规WBC2．04×10^9／L ，N86．3％，PLT91×10^9／L。血气分析：PO256mmHg ，PCO231．1mmHg。患者否认结核等传染病及其接触史，无食物及药物过敏及家族遗传病史，否认家族中有同类病史。     

我国两株登革2型病毒分离株结构蛋白C，PrM（M），E和非结构蛋白NS1基因变化的研究

对我国两株登革２型病毒分离株的结构蛋白Ｃ，ＰｒＭ（Ｍ），Ｅ和非结构公白ＮＳ１基目的核苷酸及相应的氯基酸序列进行分析，并与国外登革２型毒株的核苷酸序列同源性、碱基组成、糖基化位点、半胱氨酸残基、蛋白裂解位点和疏水剖面图等进行了比较分析。结果发现Ｄ２－４３和Ｄ２－０４株Ｃ—ＮＳ１基因的读码柜架基本相同，均由３３８１个核苷酸组成，编码氧基酸总为为１１２７，糖基化位点和保守的半胱氯酸残基的数目和位置均相同，但也发现两株之间存在一定的差异，它们的核苷酸序列同源性只有９３名％，氨基酸列的类似性为９１．３％。进一步对两个毒株各个蛋白的基囚分别进行比较，发现Ｃ和Ｅ基因同源性为９５％—９７％，ＮＳ１基因同源性为９２．２％，唯有ＰｒＭ（Ｍ）基目差异较大，同源性只有８６．７％。两株之间的主要差别在于ＰｒＭ（Ｍ）基目的变化。当与国外其他登革２型毒株比较时，发现存在两个可变序列，其中１５１—２９４位恰好是ＰｒＭ（Ｍ）区，与两株之间比较的结果一致。     

产紫青霉G59的超声诱变活性突变株新产抗肿瘤活性产物

目的阐明无活性真菌野生株产紫青霉G59的超声诱变活性突变株N3001d1-1新产抗肿瘤活性产物。方法采用活性跟踪与高效硅胶薄层检测分析相结合的实验方法,组合利用各种色谱技术,通过将突变株样品与原始菌直接比对分离纯化突变株新产活性产物。根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。用MTT法测试抗肿瘤活性。结果从突变株N3001d1-1发酵物中分离鉴定了2个突变株新产抗肿瘤活性产物,即橘霉素（citrinin）（1）和fructigenine A（2）。化合物1和2对K562细胞均呈抗肿瘤活性,抑制K562细胞的IC50分别为50.6μg/ml和69.1μg/ml。结论化合物1和2均为原始真菌产紫青霉G59所不生产的突变株N3001d1-1新产抗肿瘤活性次级代谢产物。研究结果表明,超声诱变技术可用于改造真菌无活性野生株的次级代谢功能并从中筛选获取活性突变株,从而拓展真菌药源活性新菌株资源。     

弗氏志贺菌ΔlysA突变株的构建及SILAC技术的应用尝试

目的构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记（SILAC）技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础。方法采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本的表型测评和毒力评价,并利用双向电泳技术比较二者在全菌蛋白表达谱上的差异,最后将突变株分别在含有12C6-赖氨酸和13C6-赖氨酸的培养基中培养,根据双向电泳胶图取对应蛋白点进行胶内酶切及MALDI-TOF/TOF分析。结果成功构建了301 lysA基因缺失突变株,蛋白鉴定结果显示所取对应蛋白点为同一蛋白,在质谱图上轻重同位素峰位移为6 amu。结论本研究所构建的赖氨酸营养缺陷型突变株适合进行SILAC分析。     

Allele frequencies of nine STR systems in the Flemish population and application in parentage testing

In order to apply a set of nine STR loci in parentage testing, we performed a population genetic study on a sample of the Flemish population. Genotypes for HUMHPRTB, HUMFABP, HUMCD4, HUMCSF1PO, HUMTH01, HUMPLA2A, HUMPLA2A1, HUMF13A01, HUMCYAR04 and HUMLIPOL were determined using three triplex PCR reactions and silver staining. Allele frequencies showed no deviation from Hardy-Weinberg equilibrium. The frequency distribution agreed well with other Caucasian populations but three intermediate fragments, not previously found in Caucasians, were observed. We then resolved a series of 151 parentage disputes of which 103 were exclusions. In six cases, evidence for exclusion was obtained by only one informative STR locus out of eight for male children or out of nine for female children. These exclusions were confirmed with additional polymorphic markers. In one case of inclusion, a paternal allele expanded with one repeat unit of HUMHPRTB. This observation illustrates that STRs do not differ from other genetic systems in the fact that more than one excluding locus is required before exclusion is demonstrated.     

Perilesional hyperintense rim of malignant hepatic tumors on ferumoxide-enhanced T1-weighted gradient-echo MR images: correlation between MR imaging and histopathologic findings

PURPOSE: To correlate the perilesional hyperintense rim of malignant hepatic tumors seen on ferumoxide-enhanced T1-weighted gradient-echo (GE) MR images with histopathologic findings. MATERIALS AND METHODS: In 13 tumors in 12 patients, T1-weighted GE images (TE of 1.4 msec, flip angle of 90 degrees) obtained after IV administration of ferumoxide were evaluated. MR imaging was initiated within one hour of the completion of ferumoxide administration. Surgical resection for tumors was performed within an interval of two weeks of the MR imaging. Resected specimens were histopathologically examined for peritumoral sinusoidal congestion, desmoplastic reaction, compressed hepatic parenchyma, lymphocytic infiltration, and vascular proliferation. RESULTS: In twelve tumors (92%), prominently (N = 2), moderately (N = 5), and mildly to minimally (N = 5), a perilesional hyperintense rim was observed. Among histopathologic findings, the degree of peritumoral sinusoidal congestion correlated (R =.75, P <.04) with the degree of perilesional hyperintense rim. The thickness of the perilesional hyperintense rim showed a moderate positive correlation (R =.65, P <.02) with the thickness of peritumoral area with sinusoidal congestion. CONCLUSION: Perilesional hyperintense rim of malignant hepatic tumors on ferumoxide-enhanced T1-weighted GE images may correlate with sinusoidal congestion surrounding malignant hepatic tumors.     

我国登革2型病毒43株包膜E蛋白基因的特征

对我国1987年流行的登革2型病毒43株包膜E蛋白基因的核苷酸序列进行了分析。结果表明登革2型病毒43株包膜E蛋白基因核苷酸序列含1485个核苷酸，编码495个氨基酸，并就其核苷酸序列及其相应的氨基酸序列与其它的登革2型病毒株进行了比较，发现核苷酸序列与我国1985年分离的登革2型病毒04株，新几内亚C株（NGC），牙买加株1409（JAM）和马来西亚当地流行株M1（登革出血热）、血2（登革休克综合征）、M3（登革热）同源性分别是95.8%、94.6%、97.5%、925%、92.7%和939%，氨基酸序列的同源性分别是94.3%、94.3%、96.0%、93.7%、93.7%和91.5%，推断出的氨基酸序列显示出12个保守的半胱氨酸残基和两个潜在的糖基化位点，分别位于Asn-67和Asn-153位。     

Submaximal exercise quantified as percent of normoxic and hyperoxic maximum oxygen uptakes

Maximum oxygen uptake (VO2max) was measured in six college-aged males under normoxic (NVO2max) and hyperoxic (HVO2max; 70% oxygen) conditions. Subjects then randomly performed the following three 20-min submaximal exercise bouts: 75% normoxic VO2max under normoxia (NVO2N), 75% normoxic VO2max under hyperoxia (NVO2H), and 75% hyperoxic VO2max under hyperoxia (HVO2H). Metabolic parameters were obtained at 5-min intervals. Hyperoxia resulted in a 13% increase (P less than 0.01) in VO2max (NVO2max = 3.54 l X min-1 vs HVO2max = 4.00 l X min-1). Significant (P less than 0.05) decreases were observed in VE (ventilation) (13%), epinephrine (37%), norepinephrine (26%), and blood lactate (28%), with no change in oxygen uptake (VO2), carbon dioxide production (VCO2), or respiratory exchange ratio (R) during hyperoxia at the same absolute power output (NVO2N vs NVO2H). However, at the same relative power outputs (NVO2N vs HVO2H) no significant changes in VE, epinephrine, norepinephrine, or blood lactate were observed when hyperoxia and normoxia were compared.     

Al18F-NOTA-FAPI-04的自动化合成与体内显像

目的:自动化合成Al¹⁸F-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)-成纤维细胞激活蛋白抑制剂(FAPI)-04,并进行体内显像,评估其诊断肿瘤的效能。方法:利用All-in-one型自动合成模块合成Al¹⁸F-NOTA-FAPI-04,并进行质量分析;取3只正常BALB/c小鼠和3只4T1小鼠乳腺癌荷瘤小鼠进行PET/CT显像,观察体内Al¹⁸F-NOTA-FAPI-04分布情况;对1例肝细胞肝癌患者(男,51岁)进行Al¹⁸F-NOTA-FAPI-04和18F-FDG PET/CT显像,评估其对肝癌的诊断效能。结果:自动化合成Al¹⁸F-NOTA-FAPI-04的时间约为35 min,合成产率约为(25.2±1.9)%(衰减校正后,n=3),产品为无色透明溶液,pH值为7.0~7.5,其比活度为(46.11±3.07)GBq/μmol(衰减校正后,n=3),放化纯大于99.0%,室温放置6 h后放化纯仍大于98.0%。小鼠体内显像示Al¹⁸F-NOTA-FAPI-04的生理性摄取主要在胆道系统和膀胱中,且高度浓聚于肿瘤病灶区域;肝细胞肝癌患者PET/CT显像示Al¹⁸F-NOTA-FAPI-04和18F-FDG PET/CT在胸骨旁淋巴结、膈上前组淋巴结、肝门区淋巴结、胰十二指肠韧带区淋巴结、腹主动脉旁淋巴结的靶本比值(TBR)分别为4.1、8.9、5.4、4.8、2.2和1.0、2.8、5.0、2.1、1.1。结论:基于All-in-one型自动合成模块合成Al¹⁸F-NOTA-FAPI-04,合成时间较短、产率高、稳定性好,高度浓聚于病灶区域,其PET图像对比度高,诊断性能优异。     

Cardiorespiratory strain of a five day jogging relay.

The heart rates of 14 voluntary subjects (seven male and seven females) participating in a 5 d jogging relay were recorded. The jogging speed was controlled at 3.0 m.s-1 on average. The heart rate measurements were related to cardiorespiratory responses obtained during VO2max test on a treadmill. The mean (s.d.) VO2max values were 53(2) and 48(2) ml.kg-1.min-1 and the anaerobic threshold was 42(1) and 38(2) ml.kg-1.min-1 for male and female subjects respectively. During the relay the mean(s.d) heart rate values of male and female subjects were 150(1), and 167(3) beats.min-1 (P < 0.001), corresponding to 68(1) and 76(2)% VO2max (P < 0.01) as calculated from the individual HR/VO2 regression equations. The jogging time above anaerobic threshold heart rate level was 9(3)% for the males and 43(7)% for the females (P < 0.001) of the total jogging time. The results indicate that even in a leisure oriented jogging event, cardiorespiratory strain can be rather high and that the strain can be significantly higher for female than for male subjects. The determination of the anaerobic threshold as well as VO2max is important when quantifying the level of cardiorespiratory strain of exercise.