豚鼠脊髓腹角神经元线状溶酶体酶细胞化学研究及其电子探针X射线能谱分析

为探讨豚鼠脊髓腹角神经元是否存在线状溶酶体及其酶细胞化学活性分布特点，用偏磷酸酶（Ｍｅｔａｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＭＰａｓｅ）和酸性磷酸酶（Ａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＡＣＰａｓｅ）电镜细胞化学方法和电子探针Ｘ射线能谱分析技术，证实豚鼠脊髓腹角神经元存在线状溶酶体（Ｎｅｍａｔｏｌｙｓｏｓｏｍｅ，ＮＬＹ），同时于原位测定ＮＬＹ内的铅含量以反映酶活性强弱。ＭＰａｓｅ和ＡＣＰａｓｅ反应产物分布于圆形溶酶体和ＮＬＹ，同时在高尔基复合体的部分扁囊也有酶活性，表明该酶是在高尔基复合体上加工后输送至溶酶体。在神经元胞体、突起及突触前成分中均有呈ＭＰａｓｅ阳性和ＡＣＰａｓｅ阳性的ＮＬＹ的分布，并和线粒体紧密相贴，提示酶是由线粒体提供能量的ＮＬＹ从胞体输送到神经终末，可能参与神经递质的降解及神经元代谢物质的处理。电子探针Ｘ射线能谱分析测定结果，ＭＰａｓｅ活性强于ＡＣＰａｓｅ活性，提示ＭＰａｓｅ是比ＡＣ－Ｐａｓｅ更为敏感的溶酶体标志酶     

大鼠精子发生和形成过程中溶酶体超微结构和CMPase的细胞化学变化

通过超微结构及胞嘧啶单核苷酸酶（ｃｙｔｉｄｉｎｅ ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＣＭＰａｓｅ）细胞化学方法研究大鼠精子发生和形成过程中溶酶体的动态变化。结果表明：精原细胞中只有极少的溶酶体，精母细胞中溶酶体明显增多；高尔基期精子细胞中出现前顶体泡，高密度多泡体和其他形态的溶酶体，它们呈现ＣＭＰａｓｅ阳性。头帽期时精子细胞顶体系统不断扩大，高密度多泡体等溶酶体已转移至形成中的精子尾附近，并一直停留     

血行感染脑膜炎双球菌后家兔心肌细胞膜性结构和溶酶体变化

目的：了解脑膜炎双球菌（ＭＣ）感染家兔后心肌损伤的发病过程。方法：采用ＭＣ－Ａ群菌液（１×１０１１菌体／ｋｇ）级清醒家兔静脉内注射（模型组，ｎ＝６），制成动物模型；生理盐水为对照（对照组，ｎ＝６）。给药前，给药后６０ｍｉｎ和１２０ｍｉｎ抽动脉血查血气。１２０ｍｉｎ处死动物，取心脏标本采用铅离子捕获法做超微结构碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）及酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）组织化学检查。结果：对照组动物ＡＣＰａｓｅ活性存在于肌膜、肌浆网、线粒体上；血管内皮有粗颗粒状ＡＬＰａｓｅ反应物。ＡＣＰａｓｅ活性位于溶酶体。模型组肌膜上ＡＬＰａｓｅ活性消失，病变肌浆网上有少许酶反应物。两组动物溶酶体结构完好。两组家兔ＰａＯ２ＰａＣＯ２ＳＢＥ都有一些变化。模型组ｐＨ低于正常值，但两组之间相比差别无显著性。结论：家兔经血行感染ＭＣ，发病早期即可引起心肌膜结构损伤，但其细胞器损伤不是由溶酶体破坏所致     

铈法取代铅法显示ACP酶的电镜细胞化学探讨

铈法取代铅法显示ＡＣＰ酶的电镜细胞化学探讨祝素文，王占友，石玉秀（中国医科大学组胚教研室沈阳１１０００１）显示酸性磷酸酶（ＡｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅＡＣＰ）的电镜酶细胞化学方法常用硝酸铅法（ＧＯｒｍｏｒｉ’ｓ）［１］。铅法有其缺点：①电镜下酶反应...     

γ射线照射大鼠肝细胞线粒体降解过程的酶细胞化学观察

γ射线照射大鼠肝细胞线粒体降解过程的酶细胞化学观察乔东访朴英杰黄行许（第一军医大学中心实验室）雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，体重１８０～２３０ｇ，６０Ｃｏ全身照射后９ｄ取材，进行酶细胞化学（ＡｃＰａｓｅ）和常规透射电镜观察，以探讨细胞内受损线粒体等成分的自噬...     

抗碱性磷酸酶复合物加保护剂冻干保存的探讨

碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓ－ｐｈａｔａｓｅａｎｔｉ－ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＡＰＡＡＰ）免疫组化技术以其特异性强、敏感性高、不易受内源性酶干扰等优点，广泛应用于细胞表面标记，肿瘤抗原、微生物抗原等的研究［１］。...     

高压氧对小鼠肺毛细血管Na~＋－K~＋－ATPase影响的图像分析

采用Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋－ＡＴＰａｓｅ电镜细胞化学方法，观察在高压氧（０．２５ＭＰａ）和高压氧中毒情况下（０．５２ＭＰａ）小鼠肺毛细血管Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋－ＡＴＰａｓｅ活性的分布、活性强度与超微结构改变之间的联系，并用计算机图像定量分析方法对酶活性进行了１４个参数的定量分析，这些定量参数表明，高压氧条件下。肺毛细血管Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋－ＡＴＰａｓｅ活性升高，在高压氧中毒（０．５２ＭＰａ）条件下，肺毛细血管Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋－ＡＴＰａｓｃ活性减弱。     

培养的肝癌细胞中G6Pase显示方法的探讨

葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ６Ｐａｓｅ）是内质网膜的标志酶。近年来有关Ｇ６Ｐａｓｅ的细胞化学显示的报导已有不少，但在显示肿瘤细胞中Ｇ６Ｐａｓｅ的细胞化学分布地效果并不十分理想。我们对传统的Ｇ６Ｐａｓｅ细胞化学染色方法做了改进，在培养的肝癌细胞中清晰地显示出内质网上的Ｇ６Ｐａｓｅ。     

大鼠延髓内神经激肽B受体神经元对腹膜伤害性刺激的Fos表达——免疫组织化学双重染色研究

为探讨神经激肽Ｂ受体（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎｂｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＮＫＲ）神经元在大鼠延髓的定位及其在腹膜伤害性传入信息整合中的作用。应用免疫组织化学双重染色方法，显示ＮＫＲ神经元的分布并观察它们对腹膜化学伤害性刺激的Ｆｏｓ表达。结果表明：ＮＫＲ样免疫反应（ＮＫＲ－ＬＩ）神经元主要分布在孤束核（Ｓｏｌ）、延髓腹外侧区（ＶＬＭ）、三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｓｐ５Ｃ）浅层和三叉旁核（Ｐａ５）。腹膜伤害性刺激激诱导的Ｆｏｓ表达神经元多数分布在Ｓｏｌ、ＶＬＭ、Ｐａ５和最后区。Ｓｏｌ、ＶＬＭ和Ｐａ５中约３０．１％的ＮＫＲ－ＬＩ神经元同时呈Ｆｏｓ样免疫反应。本研究提示：延髓内上述核团ＮＫＲ－ＬＩ神经元与腹膜伤害性初级传入信息的整合有关，可能参与内脏伤害性刺激的抗伤害性感受（ａｎｔｉ－ｎｏｃｅｃｉｐｔｉｏｎ）过程。     

毁损Meynert基底核造成皮层及海马的乙酰胆硷酯酶减少行为学和形态学研究(英文)

本研究通过毁损Ｍ ｅｙｎｅｒｔ基底核（ｎｂＭ ）建立Ａｌｚｈｅｉｍ ｅｒ氏病（ＡＤ）动物模型。用乙酰胆硷酯酶（ＡＣｈＥ）细胞化学方法对模型动物大脑皮层及海马进行反应，评价ＡＣｈＥ 与ＡＤ 之间可能存在的关系。将４８ 只大鼠分成对照组及实验组，用Ｍｏｒｒｉｓ 水迷宫（ＭＷ Ｍ ）测定行为学变化。在实验组，以局部注射海人藻酸的方法毁损ｎｂＭ 。术后７ ｄ，再次检测其行为学变化。存活不同时间后，用ＡＣｈＥ 酶细胞化学技术染色脑切片，用图象分析系统测算海马层ＡＣｈＥ阳性神经元及纤维的体积密度。结果显示，毁损ｎｂＭ 鼠皮质及海马的ＡＣｈＥ阳性神经元纤维明显减少，其特征为片层结构缺失。这些变化在毁损ｎｂＭ 鼠３～４ 个月及９～１０ 个月组间无显著差异。本研究证明，毁损ｎｂＭ 出现的ＡＣｈＥ减少与ＡＤ 的发生关系密切，且与同一动物模型β 淀粉样蛋白及τ蛋白过度表达在时间上一致，后者是ＡＤ 病人的特征。     

巨噬细胞对A549肺泡细胞癌细胞作用的定量酶细胞化学研究

为研究巨噬细胞（ＭΦ）抑制、杀伤肿瘤细胞的机理，我们应用酶细胞化学及形态定量技术观察比较正常及活化ＭΦ分别与Ａ５４９肺泡细胞癌细胞作用后，癌细胞内细胞色素氧化酶（ＣＯ），琥珀酸脱氢酶（ＳＤ），乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性的变化。结果见活化ＭΦ（Ｅ）与癌细胞（Ｔ）比值为１０：１时，癌细胞线粒体的ＣＯ，ＳＤ，及ＬＤＨ活性降低，Ｅ／Ｔ＝２０：１时溶酶体的ＡＣＰ活性增加。提示Ｅ／Ｔ适当时，活化ＭΦ可引起癌细胞线粒体及溶酶体的损伤，影响其酶活性引起细胞呼吸和氧化磷酸化等代谢改变，可能是活化ＭΦ抑制、杀伤癌细胞的机理之一。     

大鼠胃肌间神经丛神经元NLY的电镜观察

目的：研究大鼠胃肌间神经丛神经元中线状溶酶体及其生物学特性。材料与方法：用电镜酶细胞化学方法对大鼠胃肌间神经丛神经元进行超微结构观察。结果：显示大鼠胃肌间神经丛神经元中存在线状溶酶体其酶活性与圆形溶酶体类似。结论：本次研究结果为研究人的消化管肌间神经丛神经元中线状溶体的存在及其生物学特性提供了依据。     

丝裂原活化蛋白激酶介导人胚肺成纤维细胞增生的观察

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎａｃｔｉｖｉｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）在６０Ｃｏγ射线照射后人胚肺成纤维细胞（ｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｌｕｎｇｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ，ＨＥＬＦ）增生中的作用及其与血管紧张素Ⅱ（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ，ＡⅡ）的关系。方法对培养的ＨＥＬＦ进行１～５戈瑞（Ｇｙ）的６０Ｃｏγ－射线照射，用酶标方法检测细胞增生，用免疫细胞化学结合图像分析检测ＡⅡ、ＭＡＰＫ和Ⅰ型前胶原合成以及硝普钠抑制ＡⅡ的作用。结果１～５Ｇｙ照射能促进细胞增生及Ⅰ型前胶原合成，受照射细胞ＡⅡ和ＭＡＰＫ合成增加，外源性ＡⅡ能促进细胞增生而硝普钠则能抑制ＡⅡ的作用。结论６０Ｃｏγ－射线照射促进ＨＥＬＦ增生是一种链锁反应过程，ＡⅡ和ＭＡＰＫ介导了这一反应，ＭＡＰＫ在细胞增生信号传导中可能起着限制性阀门的作用。     

人肺癌细胞中蛋白激酶C亚类与cAMP-PKA系统相关性的研究

为了探讨蛋白激酶Ｃａ及其与环腺苷酸－蛋白激酶Ａ信号系统的相关性，用六甲撑双乙酰胺（ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｂｉｓａｃｅｔａｍｉｄｅ，ＨＭＢＡ）和ＰＫＣ抑制剂ＣａｌｐｈｏｓｔｉｎＣ分别处理人肺癌细胞ＬＴＥＰａ－２，统计细胞生长百分类，测定ｃＡＭＰ水平。用斑点杂交方法检测ＰＫＣａ基因表达，并测定表达反义ＰＫＣａ的人肺癌ＬＴＥＰａ－２细胞中ＰＫＣ与ＰＫＡ激酶活性，结果显示：５μｍｏｌ／ＬＨＭＢＡ处     

通过受体介导法将核酶特异导入肝细胞以阻断HBV蛋白表达的初步研究

应用半乳糖末端糖蛋白受体（ＡＳＧＰ－Ｒ）介导的内吞作用，将外源基因导入真核细胞，与脂质体介导的转染和细胞表面转铁蛋白受体（Ｔｆ－Ｒ）介导的内吞作用相比，虽然三种方式均能有效介导外源基因的转移，但ＡＳＧＰ－Ｒ法具有肝细胞特异性，而脂质体法和Ｔｆ－Ｒ法不具此特性。将克隆于真核表达载体的针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ｍＲＮＡＰｒｅＣ／Ｃ区的核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ特异性导入肝细胞并发挥作用，通过酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测细胞培养液中的乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ），评价核酶在细胞水平对ＨＢＶ抗原表达的阻断作用。结果表明当核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ与ＨＢＶ抗原表达质粒ｐＵＣ－２ＨＢＶ共转染ＨｅｐＧ２细胞时，核酶对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ表达的抑制率分别为５５．２９％和６８．７３％。     

高压氧对大鼠血管平滑肌Ca~(2 )-ATP酶活力的影响

探讨Ｃａ２＋ＡＴＰ酶在高压氧条件下对微血管作用的机理。方法：实验用Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠,雌雄均用,实验动物随机被分为：正常对照组、常压纯氧组、０．２５ ＭＰａ高压氧组和０．４ ＭＰａ高压氧组。用定磷法测定大鼠血管平滑肌Ｃａ~２＋－ＡＴＰ酶活力。结果：０．１ＭＰａ纯氧和０．２５ ＭＰａ高压氧作用后,Ｃａ~２＋ＡＴＰ酶活力增加,与正常对照组相比,０．１ＭＰａ纯氧组无显著性改变（Ｐ＞０．０５）,而０．２５ＭＰａ高压氧组有非常显著的上升（Ｐ＜０．０１）;但０．４ ＭＰａ高压氧组血管平滑肌Ｃａ~２＋－ＡＴＰ酶活力下降,与正常对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：血管平滑肌细胞Ｃａ~２＋－ＡＴＰ酶活力受高压氧作用的影响,在０．１ＭＰａ纯氧和０．２５ＭＰａ高压氧下可使酶活力增加,但过高压力的高压氧则降低其活力。     

毁损Meynert基底核造成皮层及海马的乙酰胆硷酯酶减少：行为学 …

本研究通过毁损Ｍｅｙｎｅｒｔ基底核（ｎｂＭ）建立Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ氏病（ＡＤ）动物模型。用乙酰胆硷酯酶（ＡＣｈＥ）细胞化学方法对模型动物大脑皮层及海马进行反应,评价ＡｃｈＥ与ＡＤ之间可能存在的关系,将４８只大鼠分成对照组及实验组,用Ｍｏｒｒｉｓ水宫（ＭＷＭ）测定行为学变化,在实验组,以局部注射海人藻酸的方法毁损ｎｂＭ。术后７ｄ,再次检测其行为学变化,存活不同时间后,用ＡＣｈＥ酶细胞化学技术染色脑切     

晚期糖化终产物对糖尿病大鼠主动脉平滑肌细胞的影响

目的 探讨血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）在糖尿病早期的改变及其与晚期糖化终产物（ＡＧＥｓ）的关系。方法 应用荧光分光光度法、免疫组织化学、计算机图像分析和透射电镜等技术,研究链脲佐菌素诱导的糖尿病（ＤＭ）大鼠血浆和腹主动脉晚期糖化终产物（ＡＧＥｓ）的含量以及腹主动脉ＶＳＭＣ的变化。结果 从４周起,ＤＭ大鼠血浆和腹主动脉的ＡＧＥｓ显著增多;腹主动脉α－ＳＭ－肌动蛋白的相对面积减小,ＣＳＭＣ的细胞核密度     

不同程度减压低氧对大鼠心功能及心肌Ca~（2＋）·Mg~（2＋）－ATPase

不同程度减压低氧对大鼠心功能及心肌Ｃａ￣（２＋）·Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｅ的影响孙希武，叶益新，邓希贤（中国医学科学院基础医学研究所，北京１００００５）本文从整体、器官及细胞水平对不同程度减压低氧对大鼠心功能及心肌Ｃａ２＋·Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ...     

冠心病人血浆可溶性细胞粘附分子和白细胞CD18表达的动态变化

探讨细胞粘附分子动态变化与冠心病发病的关系。方法采用酶联免疫吸附法,检测９０例冠心病人外周血白细胞ＣＤ１８表达、血浆可溶性细胞间粘分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）和可溶性血管细胞间粘附分子－１（ｓＶＣＡＭ－１）浓度的动态变化。结果冠心病人白细胞ＣＤ１８表达、ｓＩＣＡＭ－１和ｓＶＣＭＡ－１浓度均明显增高,与对照组比较有极显著差异性（ｔ＝７．６９２－１１．４５８,Ｐ〈０．００１）,ｓＩＣＡＭ－１和ｓＶＣＡＭ