14-3-3σ在中波紫外线诱导的HaCaT细胞增殖和周期中的作用 |
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引用本文: | 黄海波,周良,王同帅,周美娟.14-3-3σ在中波紫外线诱导的HaCaT细胞增殖和周期中的作用[J].中华放射医学与防护杂志,2016,36(4):246-251. |
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作者姓名: | 黄海波 周良 王同帅 周美娟 |
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作者单位: | 510515 广州, 南方医科大学公共卫生与热带医学学院放射医学系 广东省热带病研究重点实验室,510515 广州, 南方医科大学公共卫生与热带医学学院放射医学系 广东省热带病研究重点实验室,510515 广州, 南方医科大学公共卫生与热带医学学院放射医学系 广东省热带病研究重点实验室,510515 广州, 南方医科大学公共卫生与热带医学学院放射医学系 广东省热带病研究重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81202152,81472922) |
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摘 要: | 目的 初步研究14-3-3σ在中波紫外线(UVB)照射诱导的HaCaT细胞增殖和周期阻滞中的作用。方法 不同剂量UVB(0、10、20、30、40、50、60和80 mJ/cm2)照射HaCaT细胞和14-3-3σ稳定干扰细胞系(HaCaTKD14-3-3σ,以下简称HaCaTKD)。照后48 h,结晶紫染色法观察细胞生长密度。30 mJ/cm2UVB照射后,CCK-8法检测HaCaT和HaCaTKD细胞的增殖变化,流式细胞术分析细胞G2/M期细胞比例的变化,Western blot检测UVB照射后两种细胞的14-3-3σ、Cdc2、Cdc25c和Cyclin B1蛋白表达水平。结果 UVB照后48 h,两种细胞存活率均呈剂量依赖性下降,且HaCaTKD在10 mJ/cm2即可出现明显下降(t=8.83~49.63,P<0.05)。HaCaTKD细胞的增殖能力显著低于HaCaT细胞(F=32.89,P<0.05);30 mJ/cm2的UVB照射后,HaCaT细胞在24 h后恢复增殖能力,但HaCaTKD细胞在72 h仍未见增殖变化。HaCaTKD细胞在各观察点G2/M期细胞比例均未改变(P>0.05);30 mJ/cm2UVB照射后,HaCaT细胞在6~18 h发生G2/M期阻滞(t=7.41、9.22、9.16,P<0.05),HaCaTKD细胞G2/M期细胞比例未发生改变(P>0.05)。UVB照后6、12、18、24 h和照前相比,HaCaT细胞中14-3-3σ表达量上调(t=5.42~9.57,P<0.05);HaCaT和HaCaTKD两种细胞中的Cdc25c和Cyclin B1的表达水平在照后均下调(t=3.95~11.21,P<0.05);Cdc2在HaCaT细胞中下调(t=4.93~5.37,P<0.05),在HaCaTKD细胞中无变化(P>0.05)。结论 UVB照射或不照射,14-3-3σ的表达情况均能影响HaCaT细胞的增殖变化和细胞周期,UVB照射能诱导HaCaT细胞发生G2/M期阻滞,这种阻滞可能是由14-3-3σ的表达所介导,进而引起周期相关蛋白Cdc2、Cdc25c和Cyclin B1的表达改变而引发的。
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关 键 词: | 14-3-3σ 中波紫外线 增殖 细胞周期 |
收稿时间: | 2015/10/26 0:00:00 |
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