Purα对匹罗卡品致痫大鼠海马DNA损伤的保护作用 |
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引用本文: | 刘强,孙涛,杨征,宋祖耀,和祯泉,王峰,牛建国,崔建奇.Purα对匹罗卡品致痫大鼠海马DNA损伤的保护作用[J].中华医学杂志,2015,95(27). |
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作者姓名: | 刘强 孙涛 杨征 宋祖耀 和祯泉 王峰 牛建国 崔建奇 |
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作者单位: | 1. 宁夏医科大学总医院神经外科, 银川,750004 2. 宁夏颅脑疾病重点实验室 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划)前期研究专项课题,国家自然科学基金 |
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摘 要: | 目的 探讨Purα蛋白对匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马所致DNA损伤的保护作用,以及Purα蛋白在DNA损伤修复中的作用.方法 将Purα蛋白过表达的慢病毒和Purα siRNA慢病毒在立体定位仪指导下注入大鼠海马组织.注入后14 d通过荧光切片和免疫印迹证实病毒已经在海马组织表达,然后用匹罗卡品腹腔注射诱导癫痫发作.癫痫发作1h后处死动物,分别取样进行免疫组织化学和免疫印迹检测与DNA损伤和修复.结果 免疫组织化学结果表明,DNA损伤标志性蛋白γH2AX在大鼠CA1区的表达,各组选20张相同背景色的海马CA1区通过图像分析软件iPP6.0测定阳性细胞的平均光密度值;与空载组(0.40 ±0.11)和对照组(0.42±0.05)相比,Purα过表达组(0.15±0.10)免疫着色阳性细胞数目明显减少(P<0.01);而在Purα沉默组(0.68±0.06)明显增高(P<0.01).免疫印迹结果表明,在DNA损伤修复相关蛋白Parp-1的表达上:与空载组(0.93±0.11)和对照组(1.00±0.00)相比,Purα过表达组(0.17±0.09)的表达明显降低(P <0.01);Purα沉默组的表达明显增高(P<0.01).结论 癫痫发作早期可引起明显的DNA损伤,Purα蛋白对癫痫引起的DNA损伤有明显的保护作用.
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关 键 词: | 癫痫 人转录因子活性蛋白α 匹罗卡品 |
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