| 烯脂酰辅酶A水解酶单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 刘蓉,鞠艳芳,杨金菊,杜雪梅,陈勇,刘莹,高建恩,孙启鸿.烯脂酰辅酶A水解酶单克隆抗体的制备与鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2008,24(4):387-389. |
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| 作者姓名： | 刘蓉 鞠艳芳 杨金菊 杜雪梅 陈勇 刘莹 高建恩 孙启鸿 |
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| 作者单位： | 蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,102206 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的:制备小鼠抗人烯脂酰辅酶A水解酶(enoyl CoA hydratase,ECHS1)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定.方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA、Western blot、免疫沉淀、免疫组化和间接免疫荧光等方法对mAb进行特异性鉴定,通过Uni-ZAP XR正常成人肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗原.结果:获得1株可稳定分泌抗人ECHS1 mAb 的杂交瘤细胞株BGB095.该mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),可用于ELISA检测、Western blot、免疫沉淀、免疫组化等实验.结论:成功制备了抗人ECHS1的mAb,为代谢疾病和肿瘤的研究提供了有力的工具.
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| 关 键 词： | ECHS1 单克隆抗体 线粒体 脂酰辅酶 水解酶 单克隆抗体 研究 肿瘤 代谢疾病 实验 检测 杂交瘤细胞株 抗人 稳定 结果 抗原 筛选鉴定 表达文库 人肝脏 特异性鉴定 间接免疫荧光 免疫组化 免疫沉淀 |
| 文章编号： | 1007-8738(2008)04-0387-03 |
| 修稿时间： | 2007年12月24 |
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