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PTEN基因重组腺病毒对人气道平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制
引用本文:陈丽丽,罗雅玲,赖文岩,徐健,钟浩海,张达成,叶涵.PTEN基因重组腺病毒对人气道平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制[J].南方医科大学学报,2009,29(6):1102.
作者姓名:陈丽丽  罗雅玲  赖文岩  徐健  钟浩海  张达成  叶涵
作者单位:1. 南方医科大学南方医院呼吸内科,广东,广州,510515
2. 南方医科大学南方医院心内科实验室,广东,广州,510515
3. 南方医科大学南方医院肾移植科,广东,广州,510515
摘    要:目的 观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染人气道平滑肌细胞(HASMC)后的表达,研究其对HASMC增殖的影响,并对其作用机制作初步的探讨.方法 利用pAdxsi载体系统构建携带PTEN基因的腺病毒载体,体外转染HASMC,荧光显微镜观察Ad-PTEN的转染效率.RT-PCR及Western blotting检测PTEN在HASMC中的表达.采用MTS/PMS法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期分布.Western blotting检测Akt及p-Akt的表达,RT-PCR检测P2lmRNA的表达.结果 外源性野生型PTEN基冈经腺病毒介导成功转入HASMC,当感染复数MOI为100时,体外转染效率高达98%以上.Ad-PTEN感染HASMC后,能有效地引起细胞内过度表达PEEN.上调PTEN表达能显著提高G0/G1期细胞的比例,抑制细胞的增殖.上调PTEN表达能显著降低p-Akt及提高P21的表达水平.结论 成功构建了过度表达PTEN的原代培养HASMC模型,该模型能有效地引起细胞内过度表达PTEN.上调PTEN表达能有效抑制HASMC的增殖,可能是通过对P13K/AKt信号通路的抑制及上调P21的表达而起作用的.

关 键 词:哮喘  气道平滑肌细胞  细胞增殖

Effect of recombinant adenovirus carrying PTEN gene on the proliferation of human airway smooth muscle cells in vitro and the mechanisms
CHEN Li-li,LUO Ya-ling,LAI Wen-yan,XU Jian,ZHONG Hao-hai,ZHANG Da-cheng,YE Han.Effect of recombinant adenovirus carrying PTEN gene on the proliferation of human airway smooth muscle cells in vitro and the mechanisms[J].Journal of Southern Medical University,2009,29(6):1102.
Authors:CHEN Li-li  LUO Ya-ling  LAI Wen-yan  XU Jian  ZHONG Hao-hai  ZHANG Da-cheng  YE Han
Institution:CHEN Li-li1,LUO Ya-ling1,LAI Wen-yan2,XU Jian3,ZHONG Hao-hai1,ZHANG Da-cheng1,YE Han1 1Department of Respiratory Diseases,2Laboratory of Cardiovascular Diseases,3Department of Kidney Transplantation,Nanfang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:Objective To observe the effect of exogenous phophatase and tensin homolog deleted on chromosone 10 (PTEN) gene transfer via recombinant adenoviruses on the proliferation of human airway smooth muscle cells (HASMCs) in vitro and investigate the possible mechanisms. Methods With a recombinant adenovirus vector containing PTEN (Ad-PTEN) constructed using the pAdxsi system, PTEN gene was transiently transfected into HASMCs and the transfection efficiency was determined by fluorescence microscope. RT-PCR and We...
Keywords:PTEN  AKT
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